劉曉萌,王壽南,張 濤,張曉琳,申海云
(1.中糧營養(yǎng)健康研究院有限公司,北京市畜產(chǎn)品質(zhì)量安全源頭控制工程技術(shù)研究中心,營養(yǎng)健康與食品安全北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 102209;2.南京財(cái)經(jīng)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院/江蘇省現(xiàn)代糧食流通與安全協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇南京210023;3.河南福榮達(dá)機(jī)械設(shè)備有限公司,河南商丘 476000)
真菌毒素是由絲狀真菌產(chǎn)生的一類有毒有害的次級(jí)代謝產(chǎn)物,廣泛存在于谷物及其副產(chǎn)物中。據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,F(xiàn)AO)統(tǒng)計(jì),全球每年約有25%農(nóng)作物受到真菌毒素的污染,約有2%農(nóng)作物因污染嚴(yán)重而失去營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1]。小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌或串珠鐮刀菌等真菌引起的病害,在世界范圍內(nèi)均有發(fā)生。我國的小麥赤霉病主要發(fā)生在長(zhǎng)江中下游地區(qū),但由于氣候復(fù)雜多變,在大西北、華北小麥產(chǎn)區(qū)也時(shí)有發(fā)生[2]。尤其在溫暖濕潤(rùn)的氣候下,小麥從揚(yáng)花期到蠟熟初期極易受到真菌的侵染[3]。赤霉病不但會(huì)造成小麥減產(chǎn)、降低籽粒品質(zhì)和價(jià)值,還可能會(huì)污染真菌毒素,引起食品安全問題。脫氧雪腐鐮刀菌烯酮(Deoxynivalenol,DON),又名嘔吐毒素,是赤霉病小麥中廣泛存在的一類真菌毒素[4]。據(jù)報(bào)道稱,2020 年由于赤霉病的大肆流行,遭到封存的赤霉病小麥達(dá)280 萬t,約占小麥總產(chǎn)量的2%[5]。隨著主食精細(xì)化進(jìn)程的推進(jìn),消費(fèi)者對(duì)小麥粉及其制品的要求日漸提高。如何在生產(chǎn)環(huán)節(jié)有效控制小麥及其制品中真菌毒素污染,提高產(chǎn)品品質(zhì),已成為當(dāng)今糧食加工領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。
研究表明,真菌毒素在小麥正常籽粒和不完善籽粒中均有可能存在,真菌毒素在不完善粒中的含量明顯高于正常籽粒,真菌毒素大部分是附著在小麥表面,籽粒外層真菌毒素含量高于內(nèi)層[6-7]。傳統(tǒng)的清理設(shè)備只能清除一般雜質(zhì),無法高效清除小麥中真菌毒素的污染。小麥柔性刮擦機(jī)的工作原理是在不影響麩皮完整的情況下,利用一種能夠自動(dòng)調(diào)整間隙和壓力的彈性合金刮刀對(duì)小麥表面進(jìn)行柔性打擊、刮擦、磨削,以及與麥粒和篩網(wǎng)之間的摩擦,將小麥顆粒表面及腹溝的污物、麥毛、易碎外表皮等除去,在清理小麥時(shí)幾乎零破損且不傷及小麥糊粉層。本研究通過中試試驗(yàn),探究小麥經(jīng)柔性刮擦機(jī)處理后真菌毒素的變化規(guī)律,研究柔性刮擦機(jī)對(duì)小麥中真菌毒素的消減作用,以期為真菌毒素污染小麥的加工提供參考,為保障小麥制品安全提供一定的技術(shù)支撐。
試驗(yàn)選用3 批次真菌毒素污染程度不同的小麥,經(jīng)篩選器進(jìn)行初步清潔,編號(hào)樣品Ⅰ(低毒素污染水平)、樣品Ⅱ(中度污染水平)、樣品Ⅲ(高度污染水平)。
嘔吐毒素固體標(biāo)準(zhǔn)品10 mg,購自青島普瑞邦生物工程有限公司;嘔吐毒素免疫親和柱:美國RomerLabs 公司;乙腈(色譜純)、甲醇(色譜純):上海安譜公司;微孔過濾膜(13 mm,0.22 μm,PTFE):北京迪科馬科技有限公司。
柔性刮擦機(jī):河南福榮達(dá)機(jī)械設(shè)備有限公司;高效液相色譜儀(配二極管陣列檢測(cè)器SPD-M20A):日本島津;低溫高速離心機(jī):德國Eppendorf 公司;渦旋混合器:北京大龍興創(chuàng)實(shí)驗(yàn)儀器(北京)股份公司;高頻數(shù)控超聲波清洗器:昆山市超聲儀器有限公司。
按照GB 5009.111—2016 第二法免疫親和層析凈化高效液相色譜法測(cè)定,測(cè)定條件如下。流動(dòng)相:甲醇+水=20+80;流速:1.0 mL·min-1;色譜柱:C18,150 mm×4.6 mm×5 μm;柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:50 μL;檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器,218 nm。
柔性刮擦機(jī)脫除真菌毒素的效果通過對(duì)小麥樣品中DON 的脫除率來表示,以脫除率r來定量描述,按照公式(1)計(jì)算脫除率。
式中:C0為小麥中DON 的起始污染水平,μg·kg-1;C1為經(jīng)過柔性刮擦機(jī)處理后小麥中DON 的污染水平,μg·kg-1。
稱取約200 kg 小麥樣品Ⅰ,經(jīng)過柔性刮擦機(jī)處理1 次后,多點(diǎn)隨機(jī)取樣(3 個(gè)平行樣品),測(cè)定處理前后DON 的含量變化。如表1 所示,小麥經(jīng)過柔性刮擦機(jī)的柔性打擊、刮擦、磨削,其DON 含量明顯降低,脫除率高達(dá)69.2%。真菌毒素在小麥籽粒中含量由外到內(nèi)逐步降低,可見通過柔性刮擦處理能夠減少小麥籽粒中真菌毒素的濃度。
表1 處理前后小麥樣品Ⅰ中DON 含量變化
稱取約100 kg 小麥樣品Ⅱ,經(jīng)過柔性刮擦機(jī)處理1 次后,多點(diǎn)隨機(jī)取樣(3 個(gè)平行樣品),測(cè)定處理前后DON 的含量變化。如表2 所示,小麥經(jīng)過柔性刮擦機(jī)的柔性打擊、刮擦、磨削,其DON 含量明顯降低,脫除率高達(dá)66.2%。說明對(duì)于中度污染的小麥,柔性刮擦機(jī)處理仍能夠減少小麥籽粒中真菌毒素的濃度。
表2 處理前后小麥樣品Ⅱ中DON 含量變化
稱取約200 kg 小麥樣品Ⅲ,經(jīng)過柔性刮擦機(jī)處理1 次后,多點(diǎn)隨機(jī)取樣(3 個(gè)平行樣品),測(cè)定處理前后DON 的含量變化。如表3 所示,經(jīng)過柔性刮擦機(jī)的柔性刮擦處理,其DON 含量稍有降低,脫除率僅為12.8%。說明對(duì)于高度污染的小麥,大部分真菌毒素可能分布于小麥的胚芽及糊粉層,僅對(duì)其籽粒表層進(jìn)行柔性刮擦處理,不能有效去除其內(nèi)部污染的真菌毒素。
表3 處理前后小麥樣品Ⅲ中DON 含量變化
致病真菌主要生長(zhǎng)在谷物的外層,隨著感染程度變化,菌絲會(huì)逐漸侵入籽粒內(nèi)部,產(chǎn)生的真菌毒素能夠擴(kuò)散到胚乳及糊粉層中。真菌侵染程度不同,真菌毒素轉(zhuǎn)移至籽粒各個(gè)部位的比例也具有差異。研究表明,各部位嘔吐毒素的含量分布具有規(guī)律性,小麥中嘔吐毒素主要集中在皮層的外層,隨著侵染程度加重,由外向內(nèi),逐步深入[8-10]。清理過程會(huì)降低小麥中嘔吐毒素含量,小麥柔性刮擦機(jī)可以有效清除小麥表層及腹溝中的嘔吐毒素,目前已在國內(nèi)300 多個(gè)小麥加工企業(yè)得到廣泛應(yīng)用,對(duì)穩(wěn)定面粉產(chǎn)品中真菌毒素指標(biāo)起到很好的作用,且逐步被市場(chǎng)認(rèn)同,推廣前景廣闊。由于真菌毒素分布不均勻,針對(duì)嘔吐毒素污染嚴(yán)重的小麥,在小麥加工過程中,可采用光譜智能分級(jí)分選設(shè)備,將污染籽粒剔除;再結(jié)合小麥柔性刮擦機(jī)處理,從而保證小麥制品的品質(zhì)。