劉雯雯 胡連清 黃 菊 周萬海* 馮瑞章* 魏 琴 黃義芬 黃 奇

（1．宜賓學院 四川省油樟工程技術研究中心，四川 宜賓 644007；2．宜賓學院農林與食品工程學部，四川 宜賓 644007）

“糧改飼”政策的出臺，加快了草牧業(yè)的發(fā)展，其中油菜的利用開發(fā)成為重要的研究方向[1]。飼用油菜又名雙低油菜，其在我國的種植面積約占世界的25%，推動油菜的飼用性能研究有利于解決冬季青貯飼料缺乏的問題。油菜中蛋白、脂肪含量高，纖維含量低且生長迅速[2]，可鮮用或青貯。利用青貯技術更利于保持油菜營養(yǎng)價值，提高適口性，油菜青貯的氣味酸香，可促進家畜腸道蠕動和養(yǎng)分消化吸收，利于長期保存[3]。研究表明，新鮮飼用油菜水分含量較高，單獨青貯效果不好[4]。目前，已有飼料油菜與玉米秸稈混合青貯的相關報道[5-6]。油菜青貯可用于肉羊、肉牛的育肥試驗中[7-8]。

酒糟是在釀酒蒸餾過程中產生的加工副產物[9]，粗蛋白、微量元素、維生素等含量較高，可作為牛、羊等對粗纖維飼料要求不高的家畜，但酒糟的吸收效果差，極易腐敗并滋生細菌，較高的酒精度也易引起家畜酒精中毒。因此酒糟可通過發(fā)酵、青貯等生產方式提高其利用率[10]。張照喜等[11]通過酒糟和玉米秸稈青貯，改善了玉米秸稈的適口性，提升了哺乳期山羊的產奶量。陳冬梅等[12]發(fā)現(xiàn)，利用巨菌草與無糠殼白酒糟青貯可以提高水溶性碳水化合物和乳酸含量，降低了蛋白質的分解。本研究探討飼用油菜中添加不同比例的濃香型酒糟進行混合固態(tài)發(fā)酵，通過特性互補提高青貯飼料品質，為冬閑田和白酒糟綜合利用奠定基礎，為調制品質優(yōu)良的飼用油菜青貯飼料提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

飼用油菜采自四川省宜賓市翠屏區(qū)宜賓學院農場基地，3月中下旬在盛花末期進行刈割。酒糟粉取自宜賓五糧液濃香型白酒核心產區(qū)。青貯原料營養(yǎng)水平見表1。

表1 青貯原料營養(yǎng)水平（干物質基礎） 單位：%

青貯發(fā)酵菌劑包括乳酸菌、酵母菌等益生菌，活菌總數(shù)≥200億/g，購自鄭州樂貝豐生物科技有限公司。

1.2 試驗設計

將刈割的油菜用錘片式揉搓機破碎，長度約2～3 cm，分別按油菜干物質量添加濃香型酒糟。設置R 組（對照組，不添加濃香型酒糟）、RS-10 組（添加10%酒糟）RS-20組（添加20%濃香型酒糟）、RS-30組（添加30%濃香型酒糟），同時按總重量的0.1%添加青貯發(fā)酵菌劑，混合均勻，每組3個重復，每袋樣品1 kg。裝入聚乙烯袋（24 cm × 40 cm），抽真空密封，無氧避光貯藏60 d。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 樣品采集

采用標準取樣法隨機取青貯樣品80 g，混勻。取20 g 待測樣品，加180 mL 蒸餾水攪拌均勻，4 ℃冰箱靜置24 h，4 層紗布過濾后取濾液測定pH 值、有機酸、氨態(tài)氮（NH3/N）含量，剩余樣品65 ℃烘干，粉碎，進行其他指標分析。

1.3.2 感官評定

感官評定參照德國農業(yè)協(xié)會（DLG）青貯感官評分標準[13]，從氣味、色澤和結構進行評分?？偡止矂澐譃?個等級：一級優(yōu)良（16～20分）、二級尚好（10～15分）、三級中等（5～9分）、四級腐?。?～4分）。

1.3.3 營養(yǎng)成分

參照GB/T 6435—1986 測定干物質（DM）含量，參照GB/T 6432—2018 測定粗蛋白（CP）含量，利用3,5-二硝基水楊酸比色法測定水溶性碳水化合物（WSC）[14]，參照GB/T 6438—2007 測定粗灰分（Ash）含量，按照Van Soest[15]的方法測定中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）含量。

1.3.4 相對飼喂價值、粗飼料分級指數(shù)

粗飼料分級標準見表2[16-18]。

表2 粗飼料分級標準

式中：BW為肉牛體重600 kg。

1.3.5 礦物質含量

參照GB/T 13885—2017 測定鈣（Ca）、銅（Cu）、鐵（Fe）、鎂（Mg）、錳（Mn）、鉀（K）、鈉（Na）和鋅（Zn）的含量，參照GB/T 6437—2002 測定磷（P）含量。

1.3.6 發(fā)酵品質

使用pH 計在濾液過濾后立即測定pH 值[19]，采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定NH3-N 含量[20]，采用對羥基聯(lián)苯法測定乳酸（LA）含量[21]。乙酸（AA）、丁酸（BA）使用Agilent-7890A氣相色譜儀測定[22]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

數(shù)據(jù)采用Excel 和SPSS 17.0 進行單因素方差分析，Duncan's 法進行多重比較，結果以“平均值±標準誤”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 酒糟對飼用油菜青貯飼料感官評價的影響（見表3）

表3 酒糟對飼用油菜青貯飼料感官評價的影響

由表3可知，發(fā)酵60 d后，4組青貯飼料感官評價均為二級及以上。RS-10 組的青貯飼料結構保持良好，但略帶酒精味，等級優(yōu)良。RS-30組的青貯帶濃郁酒精味，顏色呈現(xiàn)黑褐色，品質下降，等級尚好。RS-20 組的青貯莖葉結構保持良好，伴有濃郁復合酸香味，等級達到優(yōu)良。綜合評價分析，添加20%酒糟青貯感官品質較好。

2.2 酒糟對飼用油菜青貯飼料營養(yǎng)成分的影響（見表4）

表4 酒糟對飼用油菜青貯飼料營養(yǎng)成分的影響 單位：%

由表4可知，隨著酒糟添加比例的提高，青貯飼料中DM、CP、WSC含量呈上升趨勢，而ADF含量逐漸下降。其中酒糟添加組CP和WSC含量顯著高于R組（P＜0.05），RS-30組Ash含量顯著高于其他組（P＜0.05），RS-20組和RS-30組ADF含量顯著低于R組和RS-10組（P＜0.05）。

2.3 酒糟對飼用油菜青貯飼用價值的影響（見表5）

由表5 可知，RS-20 組和RS-30 組混合青貯DDM、NEL、RFV、GI2001及RFQ 數(shù)值均顯著高于其他組（P＜0.05）。

2.4 酒糟對飼用油菜青貯飼料礦物質含量的影響（見表6）

表6 酒糟對飼用油菜青貯飼料礦物質含量的影響

由表6 可知，隨著酒糟添加比例的增加，Ca、K 和Na元素含量呈緩慢下降趨勢，Mn含量逐漸升高。其中，RS-30 組K 含量顯著低于其他組（P＜0.05），但Mn 含量顯著高于其他試驗組（P＜0.05）。RS-20 組的Fe、Zn 和Cu元素含量最高。

2.5 酒糟對飼用油菜青貯飼料發(fā)酵指標的影響（見表7）

表7 酒糟對飼用油菜青貯飼料發(fā)酵指標的影響

由表7 可知，各試驗組青貯飼料發(fā)酵后pH 值均低于4.2，符合優(yōu)質青貯飼料標準。酒糟添加組青貯飼料的pH值顯著低于R組（P＜0.05）。

RS-20 組青貯飼料NH3-N 和AA 含量均顯著低于其他組（P＜0.05）。各組青貯飼料LA 含量隨著酒糟添加量的增多呈現(xiàn)先升高后降低趨勢，其中RS-10 組最高。各試驗組未檢測到BA。

3 討論

3.1 酒糟對飼用油菜青貯飼料感官品質的影響

青貯飼料感官品質與飼糧成分、處理方式、添加劑種類和含量等因素密切相關[23]。優(yōu)質青貯的色澤應接近新鮮原料顏色或表現(xiàn)為黃綠色，有適宜的酸香味，且莖葉結構清晰可見、質地松散不粘手[24]。本研究中，RS-10組和RS-20 組青貯飼料色澤黃褐，質地較好且不粘手，氣味酸香味適宜，均為一級優(yōu)良，但酒糟添加量為30%時，氣味、色澤和結構均表現(xiàn)出不良趨勢，且酒精味濃郁。因此添加適宜比例的酒糟混貯可以提高飼用油菜青貯的感官品質，以20%添加比例最佳。

3.2 酒糟對飼用油菜青貯飼料營養(yǎng)成分的影響

DM、CP 和WSC 是青貯飼料發(fā)酵的營養(yǎng)成分基礎，其中DM 是影響發(fā)酵品質的關鍵指標之一[25]；CP 包含飼料中所有含氮物質，主要評價飼料的飼用品質，即CP含量越高，表明營養(yǎng)價值越高[26]。本研究顯示，添加酒糟組青貯飼料的DM和CP含量均比對照組高，且隨著酒糟添加含量的提高，各試驗組DM、CP和WSC含量也逐漸升高，與李茂雅等[27]、陳冬梅等[12]結果一致。DM含量增加可能因為酒糟自身的DM 含量較高引起，CP 增高可能與添加組pH值和乳酸含量有關，酒糟中殘留的乙醇可促進乳酸發(fā)酵，使pH值下降，抑制蛋白酶的活性，降低蛋白質分解[28]。WSC 升高與李茂雅等[27]、陳冬梅等[12]、Burken 等[29]研究結果一致，表明在巨菌草、皇竹草和香草中添加不同產地和品種的酒糟均能增加WSC含量，可能是酒糟中乙醇抑制了好氧微生物對飼料中營養(yǎng)物質的利用[30]。本試驗中，各試驗組Ash 含量呈現(xiàn)無規(guī)律性變化，可能與飼料油菜與酒糟混合均勻度有關。NDF 和ADF也是評價飼料品質優(yōu)良的重要指標，ADF含量越低，飼料的飼用價值越高[31]。本研究中，隨著酒糟添加量比例的提高，各處理組青貯飼料NDF和ADF含量呈下降趨勢，其中RS-20 組ADF 含量下降最多，與孫安琪[25]和任海偉等[32]結果一致。有研究表明，若NDF和ADF較高可適當添加纖維素酶[33]。當酒糟添加比例為30%時，NDF和ADF含量逐漸升高，表明酒糟添加比例不易過高。

RFV 是NDF 和ADF 的綜合體現(xiàn)，同時在品質評定中，還應評價動物飼料采食性[34]。本試驗中，RS-20 組和RS-30 組品質均優(yōu)于R 組、RS-10 組，以RFV、GI 及粗飼料分級作為參考標準，認為添20%和30%的濃香型酒糟可提升青貯飼料品質，改善動物采食性，與張玉雯等[35]添加植物乳桿菌對辣木莖葉青貯結果相似。

3.3 酒糟對飼用油菜青貯飼料礦物質含量的影響

Ca和P是構成牙齒和骨骼的主要成分，Na和K可維持體液滲透壓和酸堿的平衡；Mg 和Na 等可維持肌肉和神經的正常電信號傳遞等。如果機體缺少礦物質元素，動物會出現(xiàn)一些病變[36]。本研究中，隨著酒糟添加比例的提高，Ca、K和Na含量呈下降趨勢，而Fe、Mn和Cu含量逐漸增加，其他微量元素變化趨勢無規(guī)律。目前關于青貯飼料發(fā)酵后微量元素變化的研究相對較少，具體機制需進行深入研究。Ca 和Mg 元素含量與乳熟后期燕麥青貯中的含量接近[37]。

3.4 酒糟對飼用油菜青貯發(fā)酵指標的影響

pH值是評價飼料發(fā)酵品質的重要指標，pH值越低代表青貯飼料越易保存且品質越好，通常pH 值在3.8～4.2間的青貯品質歸為優(yōu)等，4.2～4.5 為良好，4.6～5.0 為一般，pH值大于5.0為劣等[5]。有報道顯示，青貯原料干物質含量較高時，pH 值未低于4.2，也能具有優(yōu)等的品質[38]。本研究中，各試驗組pH 值均低于4.2，且酒糟組pH 值顯著性低于對照組，與陳冬梅等[12]研究報告一致，表明酒糟的添加為乳酸菌發(fā)酵提供了足夠的底物，也可能是酒糟中乙醇抑制了好氧微生物對碳水化合物的分解[38]。本研究RS-10組乳酸含量最高，且pH值最低，利于長期貯存。青貯飼料中NH3-N值是體現(xiàn)蛋白質和氨基酸降解程度的指標，比值越高，表明發(fā)酵過程中微生物活動分解的蛋白質和氨基酸量越多，動物可吸收利用的蛋白質越少，青貯品質越差。一般該比值低于10%為優(yōu)質飼料。本研究中各組NH3-N隨著酒糟添加的增加而降低，乳酸菌的繁殖降低了蛋白質和氨基酸的消耗，減少NH3的生產[39]。

乳酸菌可利用原料中WSC 為底物發(fā)酵生成LA，LA具有促進發(fā)酵的作用，通常與青貯品質呈正相關。研究顯示，優(yōu)良的青貯飼料LA含量通常占干物質3%以上[40]。本研究中，LA含量均在3%以上。飼料中的AA能夠抑制酵母菌和霉菌的活性，提高飼料儲存期。研究表明，LA分為同型LA和異型LA，前者主要產生LA，后者能夠將葡萄糖轉化為LA 和AA，其中的LA 又會再次轉化為AA[41]。研究發(fā)現(xiàn)，添加酒糟降低了混合青貯中AA含量，RS-20組最低，可能因為增加了同型LA發(fā)酵有關，其他組以異型LA 發(fā)酵為主。梭酸菌發(fā)酵過程中會產生BA，與青貯品質呈負相關[42]，但本研究中各試驗組未檢測到BA，可能因乳酸菌的大量生長繁殖或殘留的乙醇限制了梭酸菌的增長[43]，與李茂雅等[27]結果相同，表明酒糟與飼用油菜的青貯有利于飼料營養(yǎng)成分的保存。

4 結論

飼用油菜青貯過程中添加20%、30%的濃香型酒糟可以改善青貯飼料品質，當添加量為20%時青貯飼料品質最佳。