宋耀峰,張林森,趙紫嫣,陳楓楠,劉 宇,趙先飛,于國(guó)康,王林林

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 園藝學(xué)院,陜西楊凌 712100)

在中國(guó)蘋果栽培地區(qū),‘富士’占總蘋果栽培面積比例較大。但‘富士’幼樹枝條易旺長(zhǎng),花芽難形成,大小年現(xiàn)象嚴(yán)重。果樹枝條生長(zhǎng)過旺時(shí),會(huì)打破營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和生殖生長(zhǎng)之間的平衡關(guān)系,不利于果樹花芽分化。目前,生產(chǎn)上雖然通過許多農(nóng)藝措施如扭枝、環(huán)割、拉枝等技術(shù)措施來控制果樹的過旺生長(zhǎng)[1],但其人工費(fèi)用高,也有采用一些化學(xué)方法,如噴施多效唑等會(huì)造成大量農(nóng)藥殘留,影響果實(shí)品質(zhì)和環(huán)境安全。因此,在果樹生產(chǎn)中使用一些高效安全、綠色環(huán)保的措施來調(diào)節(jié)果樹花芽分化,對(duì)提高蘋果產(chǎn)量及經(jīng)濟(jì)效益具有重要 意義。

花芽分化受到多種因素的影響,果樹花芽分化的基礎(chǔ)是營(yíng)養(yǎng),關(guān)鍵過程是花芽中內(nèi)源激素的動(dòng)態(tài)平衡,其需要的途徑是花芽分化過程中的基因表達(dá)[2],在這些條件下果樹花芽分化才可以順利進(jìn)行。植物的花芽分化主要分為花芽生理分化期和花芽形態(tài)分化期[3]。成花誘導(dǎo)階段是花芽生理分化期的重要階段[4],主要發(fā)生在花后的3～6周[5],蘋果花芽形態(tài)分化期一般發(fā)生在花后12周。果樹的花芽孕育與枝條停止生長(zhǎng)有關(guān)[3],對(duì)花芽分化影響的諸多因素中蘋果枝條的停長(zhǎng)是花芽分化開始的先決條件之一。因此,控制枝條旺長(zhǎng)形成花芽也是獲得高產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)之一。植物激素在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中具有重要作用,參與了花芽分化的過程,影響植物的成花,激素平衡與否,將決定著芽是向花芽還是葉芽的方向轉(zhuǎn)變。植物激素如細(xì)胞分裂素(CTK)、脫落酸(ABA)、生長(zhǎng)素(IAA)和赤霉素(GA),通過多種開花途徑調(diào)節(jié)開花[6-9],各激素之間通過相互影響和協(xié)調(diào)來調(diào)控植物的開花。蘋果成花的分子機(jī)理一直是人們研究的重點(diǎn),目前在調(diào)控蘋果成花的分子機(jī)理上已形成多種調(diào)控途徑,各途徑之間相互影響并匯聚到整合因子上,誘導(dǎo)花分生組織的基因表達(dá),使植物最終開花[10-12]。

復(fù)硝酚鉀是1997年經(jīng)美國(guó)國(guó)家環(huán)保局批準(zhǔn),進(jìn)入美國(guó)綠色食品工程唯一人工合成植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,復(fù)硝酚鉀及其制劑被國(guó)際糧農(nóng)組織(FAO)指定為綠色食品工程推薦的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,目前在文心蘭上的研究認(rèn)為,復(fù)硝酚鉀對(duì)文心蘭幼苗的生長(zhǎng)有一定的正效應(yīng),濃度越高,抑制效應(yīng)越明顯[13]。目前在國(guó)外,亞磷酸鉀在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用主要是作為一種殺菌劑在防疫病害和植物營(yíng)養(yǎng)的功能性肥料方面,亞磷酸鹽被稱為肥料和殺菌劑[14-16]。亞磷酸鹽作為一種功能性的肥料在國(guó)外已廣泛應(yīng)用,而在我國(guó)研究的較少,亞磷酸態(tài)的3價(jià)磷具有雙向運(yùn)輸?shù)墓δ?可同時(shí)在作物木質(zhì)部和韌皮部進(jìn)行運(yùn)輸,能夠加快植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的吸收和利用,它可以促進(jìn)草莓、馬鈴薯等植物的開花,提高產(chǎn)量[17]。本試驗(yàn)在‘富士’蘋果生長(zhǎng)季從生理和分子的角度揭示噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀影響‘富士’成花的機(jī)制,為生產(chǎn)上人工調(diào)控蘋果成花,緩解‘富士’大小年問題提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)點(diǎn)位于陜西省寶雞市千陽縣南寨鎮(zhèn)西北農(nóng)林科技大學(xué)千陽蘋果試驗(yàn)示范站,試驗(yàn)區(qū)經(jīng)度107°59′48.5″,緯度34°7′22.5″。該地區(qū)屬暖溫帶半大陸性氣候,年均氣溫10.9 ℃,年降水量653 mm。以‘長(zhǎng)富2號(hào)’/‘M26’/‘新疆野蘋果’為試驗(yàn)材料,樹齡為8 a,果園株行距為3.5 m×1 m。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在2020年預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,2021年生長(zhǎng)季共設(shè)4個(gè)處理,分別為清水對(duì)照CK、T1(復(fù)硝酚鉀1 mg·L-1)、T2(亞磷酸鉀3 340 mg·L-1)、T3(復(fù)硝酚鉀1 mg·L-1+ 亞磷酸鉀 3 340 mg·L-1)。試驗(yàn)采取隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),每個(gè)處理1株,有9個(gè)重復(fù),每個(gè)處理之間有1棵防護(hù)樹,在5月20日、6月20和7月20日分別進(jìn)行噴施,所選試驗(yàn)樹樹干周長(zhǎng)一致,果園其他管理措施基本一致。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1 枝條生長(zhǎng)量測(cè)定 從處理的試驗(yàn)樹上東西南北方向隨機(jī)選擇20個(gè)當(dāng)年生新梢,用植物標(biāo)簽做好標(biāo)記,測(cè)定時(shí)間從噴施的時(shí)間開始到生長(zhǎng)季結(jié)束,測(cè)定的時(shí)間為每?jī)芍?次直至生長(zhǎng)季節(jié)結(jié)束,最后計(jì)算當(dāng)年生枝條長(zhǎng)度的平均生長(zhǎng)量。

1.3.2 短枝頂芽?jī)?nèi)源激素含量測(cè)定 分別于3次噴施處理后第10天時(shí)采集4個(gè)處理短枝上的花芽,共采3次,芽采集完成后要迅速用錫箔紙包好,立即放入液氮后帶回實(shí)驗(yàn)室存放-80 ℃冰箱保存,用于測(cè)定花芽?jī)?nèi)源激素含量。內(nèi)源激素在提取和測(cè)定之前,將樣品從-80 ℃冰箱取出放入液氮中研磨好后稱取0.3 g,每個(gè)處理有3個(gè)生物學(xué)重復(fù),將研磨好的不同處理的樣品放入經(jīng)過滅菌的10 mL的離心管中(離心管在放樣之前要在液氮中進(jìn)行預(yù)冷),然后立即放入提前在試劑公司預(yù)定好的20 kg的干冰中,隔熱密封好后,快遞郵寄至中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物激素研究所,并由該研究所通過間接酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法進(jìn)行IAA(生長(zhǎng)素)、ABA(脫落酸)、GA3(赤霉素)、ZR(玉米素核苷)等內(nèi)源激素含量的測(cè)定。

1.3.3 短枝頂芽相關(guān)成花基因表達(dá)量測(cè)定 在初次噴施之日后,采集噴施復(fù)硝酚鉀、亞磷酸鉀、復(fù)硝酚鉀+亞磷酸鉀以及對(duì)照4個(gè)處理的短枝頂芽,每隔15 d采集1次,共采集4次,采集完成后要立即將所有樣品用錫箔紙包好并做標(biāo)記好后放置液氮中保存,帶回實(shí)驗(yàn)室放置于-80 ℃低溫冰箱內(nèi)保存,用于測(cè)定芽?jī)?nèi)相關(guān)成花基因的表達(dá)量。

短枝頂芽RNA的提取采用天根RNA試劑盒進(jìn)行提取,提取完成后用2%瓊脂糖凝膠電泳對(duì)其完整性進(jìn)行驗(yàn)證,cDNA的合成使用的是塔克拉反轉(zhuǎn)錄試劑盒(TaKaRa Bio,Japan),使用NCBI設(shè)計(jì)成花相關(guān)基因的引物序列(表1),qRT-PCR步驟按照塔克拉熒光定量預(yù)混試劑盒說明書進(jìn)行,MdActin作為內(nèi)參基因,計(jì)算基因的表達(dá)量采用2-ΔΔCt法進(jìn)行。

表1 成花相關(guān)基因定量PCR引物序列Table 1 Primers designed for flower related genes

1.3.4 次年成花率調(diào)查 調(diào)查次年蘋果樹露紅期花簇?cái)?shù)量,計(jì)算花密度。

花密度=花簇?cái)?shù)量/樹干橫截面積

樹干橫截面積測(cè)定是樹干從地面往上10 cm左右的垂直距離時(shí)測(cè)量的周長(zhǎng),然后計(jì)算半徑并求出橫截面積。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)的處理和文圖的制作采用Excel 2019,數(shù)據(jù)的顯著性方差分析采用SPSS 11.5 (SPSS,Chicago,IL,USA)(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 噴施復(fù)硝酚鉀與亞磷酸鉀對(duì)‘富士’蘋果新梢生長(zhǎng)的影響

由表2所示,在盛花期后1個(gè)月的時(shí)間里新梢迅速增長(zhǎng),各處理間無顯著差異。在5月中旬噴施處理后,與對(duì)照相比,噴施T1(復(fù)硝酚鉀)、T2(亞磷酸鉀)和T3(復(fù)硝酚鉀+亞磷酸鉀)處理下春梢長(zhǎng)度分別為34.6 cm、31.6 cm、30.8 cm,而對(duì)照為43.4 cm,T2和T3比對(duì)照顯著地減少27.19%、29.03%。在7月中旬時(shí),與對(duì)照相比,T2和T3顯著地降低了枝條的生長(zhǎng)量,分別減少29.25%和28.26%。在蘋果整個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)結(jié)束時(shí),枝條經(jīng)噴施處理后,都有一定的控制效果,其中T1、T2和T3處理下秋梢上長(zhǎng)約2 cm,而對(duì)照噴清水上長(zhǎng)10 cm左右。綜上所述,說明在噴施復(fù)硝酚鉀、亞磷酸鉀處理3次時(shí),可以顯著地抑制枝條后期的生長(zhǎng)。

表2 噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀對(duì)不同時(shí)間‘富士’蘋果枝條平均長(zhǎng)度的影響Table 2 Effects of compound potassium nitrophenolate and potassium phosphite application on mean shoot length in‘Fuji’apple tree cm

2.2 噴施亞磷酸鉀和復(fù)硝酚鉀對(duì)‘富士’蘋果花芽?jī)?nèi)激素含量的影響

由圖1可知,‘富士’樹經(jīng)噴施處理后,隨著噴施次數(shù)的增加,IAA的含量呈下降趨勢(shì),噴施第2次和第3次時(shí),T3(復(fù)硝酚鉀+亞磷酸鉀)處理下IAA的含量與對(duì)照相比差異顯著(圖1-A)。ZR的含量隨著噴施次數(shù)的增加呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì),噴施第2次和第3次時(shí),各處理間與對(duì)照相比, T3(復(fù)硝酚鉀+亞磷酸鉀)處理下ZR的含量顯著提高且高于其他處理,且差異顯著(圖1-B)。GA3的含量和IAA的含量整體趨勢(shì)一致,在整個(gè)測(cè)定時(shí)期內(nèi),GA3的含量隨著噴施次數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì),噴施第1次時(shí)其他各處理和對(duì)照相比較差異顯著。噴施第3次時(shí)GA3的含量明顯降低,且差異顯著(圖1-C),與對(duì)照組相比,各處理對(duì)ABA的含量影響較小,ABA噴施第1次時(shí)含量較高,其他處理時(shí)期含量都比較低,且只在第3次噴施時(shí)有比較明顯的差異(圖1-D)。

同一噴施次數(shù)之間不同小寫字母表示顯著性差異水平(P<0.05)。下同

2.3 噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀對(duì)相關(guān)成花基因表達(dá)的影響

圖2結(jié)果顯示,MdSOC1在花后45 d時(shí)一直處于低表達(dá),但在花后60 d后表達(dá)量上調(diào),其中在花后60～75 d時(shí)表達(dá)量增加,與對(duì)照相比,T3處理都高于對(duì)照且差異顯著。MdFT和MdSOC1的趨勢(shì)基本一致,在花后45 d時(shí)低表達(dá)差異不明顯,在花后45 d以后,芽?jī)?nèi)MdFT的表達(dá)水平顯著上升,在花后60 d時(shí),MdFT各處理的表達(dá)量都高于對(duì)照,且差異顯著。在花后45 d和60 d對(duì)MdLFY的表達(dá)水平顯著提高,在花后 60 d時(shí),T3處理的表達(dá)顯著高于其他處理,且差異顯著。在花后45 d后,MdFD的表達(dá)量逐漸增加,在60 d、75 d、105 d,MdFD的表達(dá)水平上調(diào),在花后60～75 d時(shí),各處理間的表達(dá)水平都高于對(duì)照且差異比較顯著。MdTFL-1的表達(dá)水平在花后45 d開始被顯著下調(diào),在花后45 d時(shí),與對(duì)照相比,各處理之間的表達(dá)量都低于對(duì)照,且T3處理下差異比較顯著。MdGA20ox的表達(dá)量出現(xiàn)先降低后升高的趨勢(shì),在花后45 d ～60 d,MdGA20ox的表達(dá)顯著被下調(diào),在花后45 d時(shí),各處理都低于對(duì)照且差異顯著,在花后60 d時(shí),與對(duì)照相比,亞磷酸鉀處理下的MdGA20ox差異顯著,在花后105 d時(shí),MdGA20ox的表達(dá)量雖然升高,但與對(duì)照相比降低且差異顯著。

圖2 不同處理下短枝頂芽?jī)?nèi)相關(guān)成花基因的表達(dá)Fig.2 Expression of related flowering genes in short shoot buds under different treatments

2.4 噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀對(duì)‘富士’蘋果成花的影響

如表3所示,對(duì)次年成花率而言,與對(duì)照相比,各處理開花數(shù)量上高于對(duì)照,T1(復(fù)硝酚鉀)和T2(亞磷酸鉀)處理后差異不顯著,T3(復(fù)硝酚鉀+亞磷酸鉀)處理下開花數(shù)量顯著提高了 63.14%,在花序密度上各處理高于對(duì)照,但差異不顯著。

表3 噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀對(duì)‘富士’蘋果次年成花的影響Table 3 Effects of compound potassium nitrophenolate and potassium phosphite on flowering of‘Fuji’apple in next year

3 討 論

在影響花芽分化的諸多因素中,蘋果枝條的停長(zhǎng)是花芽分化開始的先決條件之一。在對(duì)文心蘭幼苗的生長(zhǎng)研究中發(fā)現(xiàn),高濃度的復(fù)硝酚鉀能顯著抑制幼苗的生長(zhǎng)[13]。亞磷酸鉀作為一種高磷高鉀的肥料,可以調(diào)節(jié)葉片氣孔關(guān)閉,促進(jìn)新梢老熟[18]。在番茄上,高濃度的亞磷酸鉀會(huì)抑制植株的生長(zhǎng)[19],在對(duì)沃柑的研究中也發(fā)現(xiàn),春梢期噴施亞磷酸鉀可以對(duì)新梢轉(zhuǎn)綠老熟速度有明顯的促進(jìn)作用[20]。本研究結(jié)果表明,‘富士’蘋果在噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀后,與對(duì)照相比,T2和T3顯著降低了29.03%～31.64% 和27.18%～ 30.33%,這與前人在文心蘭、番茄和沃柑上研究的高濃度噴施處理情況下能抑制生長(zhǎng)的結(jié)論相一致。從本試驗(yàn)結(jié)果可以看出,‘富士’枝條被顯著地抑制是在枝條生長(zhǎng)季節(jié)多次噴施3次后,可使春梢提前停長(zhǎng),防止秋梢旺盛生長(zhǎng),平衡營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與生殖生長(zhǎng)的關(guān)系,從而在花芽分化的進(jìn)程中使芽的頂端向有利于花芽形態(tài)的方向轉(zhuǎn)變,促進(jìn)蘋果成花。

不同的植物激素會(huì)對(duì)成花產(chǎn)生不同的生理反應(yīng),在花芽的調(diào)控中發(fā)揮著促進(jìn)或者抑制作用,植物體內(nèi)激素的平衡對(duì)是否形成花芽起著關(guān)鍵作用,激素作為一種重要的因子,不僅在果樹花芽分化中起到重要作用[21],也對(duì)成花途徑中基因的表達(dá)具有重要的影響。前人研究表明,在內(nèi)源激素中,IAA濃度較高不利于花芽分化[22],梁武元等[23]在對(duì)荔枝的研究中也表明,生長(zhǎng)素含量低會(huì)促進(jìn)果樹的花芽分化。本試驗(yàn)中,在噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀后,花芽?jī)?nèi)IAA的含量是下降的,且隨著噴施次數(shù)的增加,T3處理下IAA的含量顯著低于對(duì)照,這與前人研究結(jié)果一致,說明IAA含量低是有利于成花的。而ZR的含量變化情況正好與IAA相反,隨著噴施次數(shù)的增加,T3處理下ZR的含量都顯著高于對(duì)照,這與曹尚銀等[24]所說的ZR能促進(jìn)果樹花芽分化和植物內(nèi)源激素ZR含量隨成花進(jìn)行不斷增加[25]的研究結(jié)果一致,說明高含量的ZR對(duì)促進(jìn)花芽分化具有積極意義。有研究認(rèn)為,IAA和CTK之間具有顯著的動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系,IAA含量的降低,可能會(huì)使ZR含量增加[26],而ZR作為CTK重要的運(yùn)輸形式,與CTK的作用原理相一致。因此,本試驗(yàn)中內(nèi)源激素IAA含量減少,ZR含量增加,在T3處理下差異顯著的原因可能是在多次噴施后且復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀復(fù)配后共同作用下,改變了芽?jī)?nèi)的激素含量的動(dòng)態(tài)變化情況,促進(jìn)了花芽的形成。在中秋脆棗中,內(nèi)源激素GA3的含量與對(duì)照相比,明顯都高于對(duì)照[27]。前人多項(xiàng)研究表明,GA3在果樹花芽分化時(shí)期具有抑制的作用,低含量的GA3有利于果樹的花芽分化。本研究中,GA3的含量和IAA的含量整體趨勢(shì)一致,隨著噴施次數(shù)的增加,GA3的含量呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),且在噴施第3次時(shí)與對(duì)照相比各處理間GA3含量顯著下降,推測(cè)可能的原因是復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀多次噴施且在共同作用下,使芽?jī)?nèi)有利于成花的激素累積增加,不利成花的GA3的含量下降,促進(jìn)了成花。有研究表明,高含量的 ABA 對(duì)樹體營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)起抑制作用,但能促進(jìn)花芽孕育、提高果樹成花率[28]。本試驗(yàn)中噴施處理后ABA的含量在起初較高,但后期各處理組ABA的含量逐漸下降但各處理之間差異不顯著。關(guān)于ABA與成花相關(guān)的理論說法不一,在花芽孕育臨界期,ABA的含量會(huì)上升[29],也有人認(rèn)為,ABA 主要與枝條停長(zhǎng)有關(guān),可能使枝條提前停長(zhǎng)的作用而影響花芽的形成[30]。本試驗(yàn)研究表明,ABA含量只在噴施的初期有顯著的提高,但后期含量確有下降,可能本試驗(yàn)中ABA是通過枝條的停長(zhǎng)來間接地影響花芽分化的。

花后的30～80 d是花芽孕育的關(guān)鍵時(shí)期,本試驗(yàn)選取成花調(diào)控途徑中的幾個(gè)關(guān)鍵的成花基因從分子的機(jī)理方面來研究噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀對(duì)‘富士’蘋果成花的影響。有研究報(bào)表明,FT在果樹成花的過程中發(fā)揮著重要作用[31],FT基因編碼的蛋白質(zhì)能夠調(diào)節(jié)成花相關(guān)芽的分生組織,促使其向生殖生長(zhǎng)的方向轉(zhuǎn)變,促進(jìn)成花[32-33],并且FT與FD編碼的蛋白相結(jié)合后,能夠調(diào)節(jié)莖尖與花芽相關(guān)的組織而促進(jìn)基因表達(dá),使植物開花[34]。本研究結(jié)果顯示,‘富士’經(jīng)噴施處理后,MdFT表達(dá)水平被上調(diào),在花后60 d時(shí),T3處理下FT的表達(dá)量都顯著高于對(duì)照,這與王超等研究的在花芽發(fā)育的整個(gè)階段結(jié)果一致,同時(shí),FD基因在花后60 d時(shí)也顯著高于對(duì)照,這與‘富士’蘋果在噴施NAA后FD基因在盛花后60 d時(shí)處理組顯著高于對(duì)照[35]的結(jié)果一致。說明復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀對(duì)MdFT和MdFD的合成產(chǎn)生了重要影響。SOC1在植物開花途徑中參與了多個(gè)途徑的信號(hào)因子的響應(yīng),它整合了多個(gè)開花途徑中的因子,啟動(dòng)調(diào)節(jié)LFY的表達(dá)。本試驗(yàn)中SOC1在花后45 d以后表達(dá)量上升,T3處理下的表達(dá)量最高且差異顯著,同樣在‘富士’經(jīng)葡萄糖處理后也發(fā)現(xiàn)了同樣的結(jié)果[36],說明經(jīng)噴施處理后,促使SOC1整合了其他成花因子,促進(jìn)了開花。LFY在花芽發(fā)育的進(jìn)程中有重要的功能,它在果樹營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)換過程中發(fā)揮著重要的作用。在本研究中,在花后60 d時(shí),各處理間與對(duì)照相比存在顯著差異,這與杜利莎等[37]研究結(jié)果一致。說明在45～60 d時(shí)促進(jìn)了花芽的形成。此外,成花抑制基因MdGA20ox作為赤霉素成花途徑中的重要基因,可能與花芽?jī)?nèi)GA的含量有關(guān),GA20ox作為一種關(guān)鍵的氧化酶,它在GA合成過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[38]。本試驗(yàn)中,GA20ox在花后45 d時(shí)顯著下調(diào),與芽?jī)?nèi)MdGA20ox在成花起始期則開始下調(diào)表達(dá)[39]的觀點(diǎn)一致。TFL1在蘋果和梨的花芽誘導(dǎo)早期表達(dá)量較高,但在轉(zhuǎn)化至起始階段表達(dá)量下降[40-41]。同樣在‘金墜’梨中的表達(dá)量也在下降,說明其抑制成花[42]。本試驗(yàn)中在花后45 d開始后MdTFL-1表達(dá)水平被下調(diào),但只在花后45 d時(shí),T3處理的表達(dá)量顯著低于對(duì)照,這與前人研究中TFL-1基因的下調(diào)表達(dá)相一致。

本試驗(yàn)只是在噴施處理后研究了其內(nèi)源激素具體的動(dòng)態(tài)變化過程,從生理機(jī)制的角度說明了復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀可以通過調(diào)控‘富士’花芽?jī)?nèi)激素的動(dòng)態(tài)變化來促進(jìn)‘富士’的花芽分化。

同時(shí),在分子水平上選取了與成花相關(guān)的幾個(gè)關(guān)鍵基因來揭示噴施復(fù)硝酚鉀和亞磷酸鉀影響‘富士’蘋果成花的機(jī)制,驗(yàn)證了噴施處理后在成花的關(guān)鍵時(shí)期相關(guān)成花基因得到了表達(dá),最終促進(jìn)了形態(tài)上花芽的形成,為研究蘋果成花的途徑提供了新的思路與方法,也為生產(chǎn)上人工調(diào)控蘋果的成花方法提供新的理論依據(jù),但是在花芽?jī)?nèi)部激素和基因表達(dá)上是如何變化和調(diào)控即其作用機(jī)理還需進(jìn)一步研究。