李慶鑫 尹卿 關瑛琦 邵春紅

自身免疫性肝病(AILD)是由針對自身細胞的機體免疫過度激活引起的一類肝病,包括AIH、PBC以及PSC[1-3]。有研究表明,AILD與微生物感染、生物異源物質、營養(yǎng)不良以及環(huán)境因素等關系密切[4]。Hp感染除與胃腸系統(tǒng)疾病相關外,尚有不少研究試圖分析其與其他器官的關聯(lián)[5-6]。本研究Hp感染對探討AILD發(fā)生、發(fā)展的影響。

資料與方法

一、研究對象

回顧2015年9月—2022年2月期間于聊城市中醫(yī)醫(yī)院首診AILD患者74例,其中男性43例、女性31例,年齡(58.2±12.5)歲。AIH、PBC及PSC診斷符合標準[7-8]。排除標準:①合并其他慢性肝病、梗阻性膽道疾病;②惡性腫瘤史;③近期抗生素、抑酸劑、X線鋇劑及免疫抑制劑使用;④組織活檢禁忌者。

二、Hp檢測

使用HTY101 np測試儀(海得威生物科技有限公司,深圳)施行14C-UBT試驗,評價標準:測試值100 dpm為Hp陽性。另有部分病例經胃鏡(GIF-XQ-260型,Olympus Corporation,日本)下在胃竇部鉗取適量組織,隨即快速尿速酶試驗(北京康美天鴻生物科技有限公司)并作病理組織學觀察,當黏膜組織由黃色轉為紅色時為Hp陽性。

三、研究方法

記錄病歷資料。使用7180型生化分析儀(Hitachi公司,日本)檢測肝功能;使用抗肝抗原自身抗體試劑(EUROIMMUN,德國)按照檢測自身抗體;使用Simulset TM IMK免疫熒光試劑盒(BD公司,USA)經FACSCalibur流式細胞儀(BD公司,USA)按照ELISA法檢測淋巴細胞亞群。入院后進行肝活檢,固定、石蠟包埋隨后連續(xù)切片染色,使用METAVIR評分系統(tǒng)評價肝組織纖維化分期及炎癥活動分級[9]。

四、統(tǒng)計學方法

使用SPSS 24.0處理數據。根據資料類型,采用t檢驗或卡方檢驗比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

一、肝功能、自身抗體比較

74例AILD患者中AIH、PBC及PSC分別為34例(45.9%)、33例(44.6%)及7例(9.5%),依據14C-UBT結果分為Hp陽性組(44例,59.5%)、Hp陰性組(30例,40.5%)。如表1所示,自身抗體分析:與Hp陰性組相比,Hp陽性組ANA、AMA、SMA、ANCA、AMA-M2及LKM-1陽性比例明顯增加(P<0.05)。

表1 Hp陽性組、Hp陰性組肝功能、自身抗體[%,M(P25,P75)]比較

二、淋巴細胞亞群比較

由表2可知,兩組CD3+CD4+T細胞、CD4+/CD8+、CD3-CD19+B細胞、CD3+CD8+T細胞及CD3-CD16+CD56+NK細胞差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 Hp陽性組、Hp陰性組淋巴細胞亞群(%)比較

三、肝組織肝纖維化分期、炎癥活動分級比較

Hp陽性組≥F3期、≥G3級比例顯著高于Hp陰性組(P<0.05,見表3)。

表3 Hp陽性組、Hp陰性組肝臟組織學特征(%)比較

討 論

眾所周知,肝功能水平與肝細胞受損情況關系緊密。不過作為常規(guī)檢驗指標,臨床特異性一般。如本研究所示,Hp陽性、陰性組AILD患者各項肝功能指標被發(fā)現均不存在明顯差異,因此需要結合其他項目來對不同分層AILD患者肝臟狀態(tài)進行了解剖析。一方面,CD4+T細胞輔助T細胞轉化成目標效應細胞,還賦予活化巨噬細胞等相關細胞功能。另一方面,CD8+T細胞抑制殺傷T細胞、阻礙B細胞抗體形成,對宿主細胞體液免疫形成抑制效應。隨著CD4+/CD8+比例失調,因此造成的免疫功能紊亂形勢更為緊迫。與此同時,NK細胞也可借助于細胞因子的大量釋放來調控機體免疫功能,包括但不限于抑制B細胞分化、增殖。研究表明,Hp感染能夠下調特異性1型輔助性T淋巴細胞因子以及T淋巴細胞抑制效應,參與介導體內肝組織實質損傷機制形成[10]。結合上述論點,本研究發(fā)現,Hp陽性組CD3+CD4+T細胞、CD4+/CD8+比例及CD3-CD19+B細胞升高,但CD3+CD8+T細胞及CD3-CD16+CD56+NK細胞呈現下降態(tài)勢。既往兩項研究(Utiyama等[11]、Vuerich等[12])得出類似結論:Hp陽性ALD病例T淋巴細胞亞群改變及NK細胞頻率下降,致使自身免疫耐受機制缺失、B淋巴細胞活化增加,循環(huán)血液中自身抗體形成增加,隨即對肝組織形成損害。

先前有研究報道,CHB患者感染Hp后并不會對肝臟組織學狀態(tài)產生顯著改變,關聯(lián)性不顯著,得出Hp感染并不能作為評價CHB肝組織病理改變程度的指標[13]。不過我們的研究發(fā)現與Hp陰性組相比,Hp感染AILD患者肝組織纖維化分期、炎癥活動分級均顯著提高,提示肝損傷程度增加。既往研究表明,Hp感染可增加肝細胞壞死風險,再與自身抗體結合后加重肝損傷,加速肝纖維化甚或是肝硬化病情演變[14-15]。

綜上所述,超半數AILD患者存在Hp,與多種自身抗體增加和淋巴細胞亞群紊亂密切相關,可導致肝組織纖維化分期、炎癥活動分級增加。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。