周立遠，葉玉祥，林 琳，王東陽

（中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九〇〇醫(yī)院倉山院區(qū)普通胸泌外科，福州 350002）

食管癌位居癌死亡第六位，大多患者發(fā)現(xiàn)時已出現(xiàn)淋巴結轉移，其行手術切除患者術后復發(fā)率較高，五年生存率僅為5%～15%[1-2]。因此，研究食管癌發(fā)生發(fā)展的分子機制，尋找有效的分子靶標對食管癌的治療具有重要意義。研究報道，腫瘤微環(huán)境中免疫狀態(tài)失衡會限制T 細胞的抗腫瘤活性，促進腫瘤進展[3]。CD8+T 細胞是重要的T 淋巴細胞亞群，研究證實其與腫瘤細胞免疫及抗腫瘤效應相關，由效應體CD8+T 細胞介導的腫瘤相關抗原識別和細胞毒性殺傷在控制癌癥發(fā)展中發(fā)揮重要作用[4]。CD8+T 細胞凋亡通常可導致腫瘤微環(huán)境中細胞數(shù)量減少，抑制腫瘤活性降低，與癌癥進展有關[5]。研究發(fā)現(xiàn)，長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNAs）廣泛參與腫瘤微環(huán)境的各種免疫應答過程，同時還可募集多種免疫抑制因子，影響腫瘤微環(huán)境，促進腫瘤細胞免疫逃逸[6]。腫瘤細胞來源的miRNAs 可通過多種途徑參與調控免疫抑制性微環(huán)境的形成[7]。結腸癌相關轉錄本1(colon cancerassociated transcript-1，CCAT1)是近年研究發(fā)現(xiàn)與多種癌癥的發(fā)生發(fā)展及腫瘤細胞免疫逃逸有關的LncRNA[8]。miR-155 不僅是重要的腫瘤基因，還是免疫系統(tǒng)和T 淋巴細胞功能的調節(jié)因子[9]，其通過增強CD8+T 細胞對穩(wěn)態(tài)細胞因子的響應，可增強其抗腫瘤活性[10]?；诖?，本研究探究了食管癌中LncRNA CCAT1 和miR-155 對CD8+T 細胞凋亡和抗腫瘤活性的影響及分子機制，以期為食管癌的研究及免疫治療提供更多參考。

1 材料和方法

1.1 研究對象 收集2021年12月～2022年12月于中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九〇〇醫(yī)院倉山院區(qū)胸外科就診的食管癌患者(n=30)和健康受試者(n=30)外周血。食管癌患者經(jīng)病理學確診，研究前未接受任何放化療治療，經(jīng)過患者知情同意，無其它腫瘤疾病史。本研究經(jīng)過本院倫理委員會批準。人食管癌細胞（Eca-109 細胞）來自中國科學院上海細胞庫，在含10 mmol/ml FBS 的DMEM 培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

1.2 儀器與試劑 Lipofectamine2000（美國Invitrogen 公司）；RIPA 緩沖液（中國Beyotime）；SuperScript 逆轉錄試劑盒（美國Invitrogen）；Annexin V-FITC/ PI 細胞凋亡檢測試劑盒（美國Sigma）；7500 Fast RT-PCR System 儀，SYBR Green Master Mix（美國Applied Biosystems）；流式細胞儀（BD Biosciences 公司）；靶向CCAT1 (si-CCAT1)或其陰性對照(si-control)的小干擾RNA，miR-155模擬物和抑制劑（中國上海GenePharma 有限公司）；增強化學發(fā)光系統(tǒng)（Thermo Fisher）；磁性珠細胞分選陰性選擇試劑盒（Miltenyi Biotech 公司）。

1.3 方法

1.3.1 收集外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)：采集研究對象新鮮外周血標本2 ml，加入Ficoll-Paque，密度梯度離心，2 500 r/min，15 min 后棄上清，收集PBMCs，以檢測食管癌患者和健康受試者PBMCs 中相關蛋白及mRNA 表達。

1.3.2 食管癌患者和健康受試者PBMCs 中Cleaved Caspase 3 蛋白檢測：用含有蛋白酶和磷酸酶抑制劑的RIPA 緩沖液對食管癌患者和健康受試者PBMCs進行Western blot 處理，離心獲得含Cleaved Caspase 3 的蛋白處理液。使用BCA 蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，并轉移到PVDF膜上，蛋白在室溫下被封閉過夜，與特異性Cleaved Caspase 3-抗孵育過夜，PVDF 膜用常規(guī) TBST 溶液洗滌，室溫下與辣根過氧化物酶結合的二抗孵育2h。使用增強化學發(fā)光系統(tǒng)對膜進行可視化分析，以比較食管癌患者和健康受試者PBMCs 中Cleaved Caspase 3 蛋白的表達差異。

1.3.3 食管癌患者和健康受試者PBMCs 中CCAT1 mRNA，miR-155 mRNA，IL-2 mRNA 和IFN-γ mRNA 檢測：使用RNA 提取試劑盒從PBMCs 中提取總RNA，用分光光度法檢測其濃度和純度；使用SuperScript 逆轉錄試劑盒進行cDNA 合成逆反應，使用SYBR Green Master Mix 在7500 Fast RT-PCR 儀上進行RT-qPCR 檢測。由生工生物技術(中國上海)完成特定基因的寡核苷酸引物的設計和合成，見表1。反應體系為20μl：2xSYBR Green Master Mix 10 μl，上、下引物各0.5 μl，模板1 μl，H2O 8 μl。分析Ct值，并使用2-ΔΔCt方法計算相對定量，對比食管癌患者和健康受試者PBMCs 中CCAT1 mRNA，miR-155，IL-2 mRNA和IFN-γ mRNA 表達差異。

表1 PBMCs 中CCAT1 mRNA，miR-155 mRNA，IL-2 mRNA 和IFN-γ mRNA 引物序列

表1 CCAT1 與miR-155 共同作用對CD8+T 細胞凋亡、細胞殺傷活性及Cleaved Caspase 3 蛋白和IL-2 mRNA，IFN-γmRNA 表達的影響（±s）

表1 CCAT1 與miR-155 共同作用對CD8+T 細胞凋亡、細胞殺傷活性及Cleaved Caspase 3 蛋白和IL-2 mRNA，IFN-γmRNA 表達的影響（±s）

類別pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組pcDNA-CCAT1+mimics NC 組pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組pcDNA-CCAT1+miR-155 mimics 組FP CD8+T 細胞凋亡率（%）17.86±2.3425.87±1.236.58±0.1516.87±1.9217.98＜0.01 CD8+T 細胞的細胞殺傷活性（%）0.45±0.070.35±0.070.82±0.080.58±0.0721.37＜0.01 Cleaved Caspase 3 蛋白表達0.86±0.151.47±0.120.23±0.061.02±0.1819.65＜0.01 IL-2 mRNA 表達1.56±0.160.53±0.352.68±0.141.43±0.0820.48＜0.01 IFN-γ mRNA 表達1.52±0.290.68±0.322.37±0.481.32±0.4317.98＜0.01

1.3.4 CD8+T 細胞分離、培養(yǎng)和轉染分組：使用磁性珠細胞分選陰性選擇試劑盒從兩名健康供者的PBMCs 中分離出CD8+T 細胞，用anti-CD3(2μg/ml，BD Biosciences) 和anti-CD28 (1μg/ml，BD Biosciences)在添加了重組人白細胞介素-2（recombinant human interleukin-2，rhIL-2）(120 IU/ml，Chiron)的RPMI-1640 培養(yǎng)液中激活24 h。細胞分為三組：第一組分別轉染：①下調CCAT1 的siRNA 序列（si-CCAT1 組）；②下調陰性對照序列（si-control 組）。第二組分別轉染：①miR-155抑制物（miR-155 inhibitor 組）；②抑制陰性對照（inhibitor control 組）。第三組分別轉染：①過表達對照質粒（pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組）；②CCAT1 過表達質粒+miR-155 過表達陰性對照（pcDNA-CCAT1+mimics NC 組）；③CCAT1 過表達對照質粒+miR-155 過表達模擬物[pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組]；④CCAT1 過表達質粒和miR-155 過表達模擬物（pcDNA-CCAT1+miR-155 mimics 組）。使用Lipofectamine2000 按照說明書將以上質粒轉染到CD8+T 細胞中，用于分析CD8+T細胞凋亡率，CD8+T 細胞殺傷活性，Eca-109 細胞增殖活力，Eca-109 細胞劃痕愈合率，Cleaved Caspase 3 蛋白及IFN-γ 和IL-2 表達。

1.3.5 下調CCAT1，miR-155 表達對CD8+T 細胞凋亡的影響：使用Annexin V-FITC/ PI 細胞凋亡檢測試劑盒檢測CD8+T 細胞凋亡，然后行流式細胞儀分析。將上述不同質料轉染的CD8+T 細胞(1×106/孔)分別接種于6 孔板，用200 μl Annexin V-FITC 和10 μl PI 染色，用流式細胞儀和flow Jo V10 軟件進行流式細胞分析，比較下調CCAT1 和miR-155 表達對CD8+T 細胞凋亡的影響。

1.3.6 CCAT1，miR-155 質粒轉染CD8+T 細胞對Eca-109 細胞的殺傷作用：細胞殺傷實驗以Eca-109 細胞為靶細胞。轉染①si-CCAT1，si-control；②inhibitor control，miR-155 inhibitor；③pcDNA-3.1(+)+mimics NC，pcDNA-CCAT1+mimics NC，pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics，pcDNACCAT1+miR-155 mimics 后的CD8+T 細胞與Eca-109 細胞混合在96 孔培養(yǎng)板中孵育過夜。避光后每孔細胞分別加入20 μl MTS，2h 后在酶標儀490 nm 下檢測細胞的吸光度（A值），重復三次。殺傷率（%）=[A靶細胞對照-（A實驗孔-A效應細胞對照）]/A靶細胞對照×100%。分析CCAT1 和miR-155 質粒轉染CD8+T 細胞對Eca-109 細胞的殺傷作用。

1.3.7 CCAT1 野生型、突變型對miR-155 的調節(jié)作用：miRcode 軟件預測CCAT1 靶基因，將CCAT1 序列插入到psi-CHECKTM-2 載體下游，構建CCAT1 wt 表達載體，再利用點突變試劑盒構建CCAT1 mut 表達載體。將CCAT1 wt+mimics NC，CCAT1 wt+miR-155 mimics，CCAT1 mut+mimics NC，CCAT1 mut+miR-155 mimics 分別轉染至Eca-109 細胞中，48h 后采用雙熒光素酶試驗分別檢測相應Eca-109 細胞熒光素酶活性，以了解CCAT1野生型、突變型對miR-155 的調節(jié)作用。

1.3.8 CCAT1 與miR-155 質粒共轉染對Eca-109 細胞增殖活力的影響：采用CCK-8 法檢測Eca-109 細胞的增殖活力。取對數(shù)生長期Eca-109 細胞轉染成功后以5×105細胞/孔的密度接種于96 孔板，如前所述將70%匯合的細胞轉染重組質粒，48h 后在細胞中加入CCK-8 溶液，孵育4h 后應用酶標儀在450 nm 處測量每個孔的A值，分析CCAT1 與miR-155 共同作用對Eca-109 細胞增殖活力的影響。

1.3.9 CCAT1 與miR-155 質粒共轉染對Eca-109 細胞遷移的影響：采用細胞劃痕實驗檢測Eca-109 細胞遷移能力。取對數(shù)生長期Eca-109 細胞轉染成功后以5×105細胞/孔的密度接種于6 孔板，在37 ℃，5%（v/v）CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，用無菌吸管尖刮單層細胞中心，用PBS 沖洗2 次，形成寬度恒定的直線無細胞區(qū)(間隙)，37 ℃，5%（v/v） CO2放置0h 和48h，采用倒置顯微鏡觀察創(chuàng)面閉合情況并拍照，圖像采用ImageJ 軟件進行分析。在顯微鏡視野中隨機采集6 個部位，測量間隙之間的距離，并計算細胞劃痕愈合率，分析CCAT1 與miR-155共同作用對Eca-109 細胞遷移的影響。

1.4 統(tǒng)計學分析 使用GraphPad Prism7.0 進行分析，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組間差異比較采用t檢驗，多組間差異比較采用單因素方差分析，LSD 檢驗行多組間兩兩差異比較；不符合正態(tài)分布采用非參數(shù)檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 CCAT1 及miR 155 在食管癌患者外周血細胞中的差異表達 qRT-PCR 檢測結果表明：食管癌患者PBMCs 中CCAT1 表達（2.58±0.28）高于健康受試者（1.35±0.34），miR-155 表達（0.53±0.09）低于健康受試者（1.54±0.29），組間比較差異具有統(tǒng)計學意義（t=12.04，21.05，均P＜0.05）。

2.2 下調CCAT1 對CD8+T 細胞凋亡、細胞殺傷活性及Cleaved Caspase 3 蛋白及IL-2 mRNA，IFN-γ mRNA 表達的影響 qRT-PCR 結果顯示，si-CCAT1組細胞內CCAT1 mRNA（0.47±0.08）表達明顯低于si-control 組（1.17±0.27），差異具有統(tǒng)計學意義（t=23.12，P＜0.05），提示下調CCAT1 表達細胞系構建成功。流式細胞術檢測顯示：下調CCAT1 后CD8+T 細胞凋亡率（12.05%±0.28%） 明顯低于 si-control 組（19.86%±0.45%），CD8+T 細胞（0.49%±0.05%）的細胞殺傷活性明顯高于si-control 組（0.34%±0.02%），差異具有統(tǒng)計學意義（t=9.82，-17.54，均P＜0.05）。Western blot 和qRT-PCR檢測結果顯示，si-CCAT1 組細胞內Cleaved Caspase 3 蛋白（0.32±0.09）表達低于si-control 組（1.37±0.72），IL-2 mRNA（2.38±0.47）和IFN-γm RNA（3.28±0.26）表達高于si-control 組（1.12±0.23，1.28±0.37），差異具有統(tǒng)計學意義（t=-20.05，-18.29，-19.86，均P＜0.05）。

2.3 CCAT1 野生型、突變型對miR-155 的調節(jié)作用見圖1。生物信息學分析顯示，CCAT1 和miR-155之間存在互補堿基對（圖1A）。雙熒光素酶實驗檢測CCAT1 與miR-155 的相互作用，結果顯示：CCAT1 野生型和miR-155 模擬物共轉染后miR-155 mimics 組細胞熒光素酶活性（0.41±0.08）顯著低于對照組（1.24±0.18），差異具有統(tǒng)計學意義（t=17.92，P＜0.01，圖1B），而CCAT1 突變型和miR-155 模擬物共轉染后熒光素酶活性與對照組比較無明顯差異。

圖1 CCAT1 與miR-155 的相互作用

2.4 下調miR 155 對CD8+T 細胞凋亡、細胞殺傷活性、Cleaved Caspase 3 蛋白、IL-2 mRNA 與IFNγmRNA 表達的影響 見表1。qRT-PCR 結果顯示，miR-155 inhibitor 組細胞內miR-155 mRNA(0.73±0.18)表達明顯低于inhibitor control 組(1.52±0.17)，差異具有統(tǒng)計學意義（t=19.25，P＜0.05），提示下調miR-155 表達細胞系構建成功。流式細胞術檢測顯示：下調miR-155 后CD8+T(24.87%±0.95%)細胞凋亡率明顯高于inhibitor control 組(18.24%±1.25%)，CD8+T 細胞(0.26%±0.06%)的細胞殺傷活性明顯低于inhibitor control 組(0.43%±0.05%)，差異具有統(tǒng)計學意義（t=10.03，20.06,均P＜0.01）。Western blot 和qRT-PCR 檢測結果顯示，miR-155 inhibitor 組細胞內Cleaved Caspase 3 蛋白(1.07±0.23)表達高于inhibitor control 組(0.42±0.02)，IL-2 mRNA(0.73±0.26)和IFN-γ mRNA(0.54±0.18)表達低于inhibitor control 組(1.39±0.08，1.16±0.24)，差異均具有統(tǒng)計學意義（t=18.75，19.27，18.35，均P＜0.01）。

2.5 CCAT1 與miR 155 共作用對CD8+T 細胞凋亡、細胞殺傷活性及Cleaved Caspase 3 蛋白和IL-2 mRNA，IFN-γ mRNA 表達的影響 見表1。流式細胞術檢測顯示：pcDNA-CCAT1+mimics NC 組CD8+T 細胞凋亡率明顯高于pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組，pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組CD8+T細胞凋亡率明顯低于pcDNA-3.1(+)+mimics NC組，pcDNA-CCAT1+miR-155 mimics 組CD8+T 細胞凋亡率明顯高于pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組；pcDNA-CCAT1+mimics NC 組CD8+T 細胞的細胞殺傷活性明顯低于pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組，pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組CD8+T 細胞的細胞殺傷活性明顯高于pcDNA-3.1(+)+mimics NC組，pcDNA-CCAT1+miR-155 mimics 組CD8+T 細胞的細胞殺傷活性明顯低于pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組，差異具有統(tǒng)計學意義（均P＜0.01）。

Western blot 結果顯示，pcDNA-CCAT1+mimics NC 組Cleaved Caspase 3 蛋白表達明顯高于pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組，pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組Cleaved Caspase 3 蛋白表達明顯低于pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組，pcDNACCAT1+miR-155 mimics 組Cleaved Caspase 3 蛋白表達明顯高于pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組，差異具有統(tǒng)計學意義（均P＜0.01）。qRT-PCR 檢測顯示，pcDNA-CCAT1+mimics NC 組IL-2 和IFNγmRNA 表達明顯低于pcDNA-3.1(+)+mimics NC組，pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組IL-2 和IFNγmRNA 表達明顯高于pcDNA-3.1(+)+mimics NC組，pcDNA-CCAT1+miR-155 mimics 組IL-2 和IFN-γmRNA 表達明顯低于pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.01）。

2.6 CCAT1 與miR 155 共同作用對Eca 109 細胞增殖和遷移的影響 CCK-8 法和細胞劃痕愈合實驗檢測顯示：pcDNA-CCAT1+mimics NC 組細胞增殖活力和細胞劃痕愈合率明顯高于pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組(80.30%±1.98% vs 58.29%±2.18%,75.26%±1.36% vs 52.43%±1.48%)。pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組細胞增殖活力和細胞劃痕愈合率明顯低于pcDNA-3.1(+)+mimics NC 組，pcDNA-CCAT1+miR-155 mimics 組細胞增殖活力和細胞劃痕愈合率明顯高于pcDNA-3.1(+)+miR-155 mimics 組(57.92%±3.24% vs 37.54%±1.23%,50.29%±1.68% vs 31.92%±1.02%)，差異具有統(tǒng)計學意義（F=19.86,20.26,均P＜0.01）。

3 討論

近年研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA CCAT1 具有誘導上皮-間充質細胞轉化和調節(jié)細胞生長、侵襲和遷移的作用，被認為是一種普遍的腫瘤啟動子[11-13]。本研究初步強調了CCAT1對免疫細胞抗腫瘤功能的影響，發(fā)現(xiàn)抑制CCAT1 可通過調節(jié)miR-155 表達抑制CD8+T 細胞凋亡并增強細胞的抗腫瘤活性，這些發(fā)現(xiàn)為食管癌治療提供了一個有效的治療靶點，并為提高免疫治療的結果提供了新的見解。

大量證據(jù)表明，LncRNAs 在各種癌癥中普遍存在異常表達，參與了癌癥的發(fā)生進展，這意味著LncRNAs 可能成為一種新的潛在的癌癥生物標志物[14]。此外最新研究表明，LncRNAs 可以作為ceRNA，通過與miRNA 競爭性結合，可調控基因轉錄[4]。在數(shù)百種LncRNAs 中，CCAT1 在細胞周期調控中發(fā)揮作用，通過調控腫瘤細胞凋亡，參與調控腫瘤的惡性發(fā)展進程?，F(xiàn)有研究表明，LncRNA CCAT1 在多種人類癌癥中表達上調，作為致癌基因存在，如HU 等[15]發(fā)現(xiàn)，LncRNA CCAT1/miR-143/PLK1/BUBR1 軸是食管癌增殖和耐藥的生物標志物。Lü 等[16]人也曾指出，LncRNA CCAT1 通過抑制miR-33a 表達促進了黑色素瘤細胞的增殖和侵襲。以上研究均表明LncRNA CCAT1在腫瘤發(fā)展過程中發(fā)揮了至關重要的作用。此外研究證實，LncRNAs 與腫瘤細胞免疫逃逸有關[17]。然而，CCAT1 在食管癌發(fā)生發(fā)展中的作用以及是否和食管癌免疫逃逸之間存在關系尚未被研究報道。

本研究首先檢測了食管癌患者與健康受試者PBMCs 細胞中CCAT1 的表達，結果發(fā)現(xiàn)食管癌患者PBMCs 中CCAT1 表達顯著上調，提示CCAT1的異常表達可能與食管癌的進展有關系。進一步探究發(fā)現(xiàn)，下調CCAT1 表達增強了CD8+T 細胞的抗腫瘤功能，提示CCAT1 具有誘導食管癌細胞免疫逃逸的能力。鑒于CD8+T 細胞在控制癌癥發(fā)展中的普遍作用，CCAT1 可能與許多其他癌癥免疫反應有關，在免疫治療中作為免疫檢查點具有廣闊的前景，因此深入研究CCAT1 的作用機制具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)，CCAT1 通過作用不同的靶點參與了腫瘤的發(fā)展，如LncRNA CCAT1 負向調控miR-181a-5p 促進子宮內膜癌細胞增殖和遷移[18]。LncRNA CCAT1 通過抑制miR-218/ZFX 信號通路促進三陰性乳腺癌進展[19]。LncRNA CCAT1 通過與DDX5 和MIR-28-5P 相互作用促進了前列腺癌細胞的增殖[20]。而本研究經(jīng)生物信息學方法分析發(fā)現(xiàn)，miR-155 是CCAT1 的下游作用靶點，兩者之間存在互補堿基對；雙熒光素酶實驗證實了CCAT1與miR-155 的相互作用。有證據(jù)表明，miR-155 與乳腺癌、直腸癌、肝癌、肺癌和膀胱癌的發(fā)生有關[8,21-22]。miR-155 通過靶向H3F3A 激活CDK2 加速人肝癌細胞的生長[23]。除了參與癌癥，miR-155還是免疫系統(tǒng)和T 淋巴細胞功能的調節(jié)因子[9]。陳倩云等[10,24]研究報道，miR-155 通過增強CD8+T細胞對穩(wěn)態(tài)細胞因子的響應增強其抗腫瘤活性。而本研究證實了食管癌患者PBMCs 細胞中miR-155表達下調，下調miR-155 表達誘導了CD8+T 細胞凋亡，抑制了CD8+T 細胞的抗腫瘤功能，進一步表明其在食管癌中的抗腫瘤作用。本實驗從新的角度揭示了CCAT1 與食管癌細胞免疫逃逸之間的關系，為防控食管癌進展提供了理論基礎，然而本文也存在一定的局限之處，如本文未進行裸鼠成瘤實驗檢測CCAT1 的臨床效果，CCAT1 調控miR-155的具體作用機制還需要進一步深入探討。

綜上所述，LncRNA CCAT1 在食管癌患者中表達顯著上調，敲低CCAT1 通過調節(jié)miR-155 表達抑制CD8+T 細胞凋亡并增強細胞的抗腫瘤活性，為食管癌癌發(fā)病機制的復雜調控網(wǎng)絡提供了新的思路和借鑒。