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摘 要：本文依據(jù)GB 31658.5—2021，建立雞肉中氟苯尼考?xì)埩袅繙y定的不確定度評定方法。通過對測量過程中不確定度來源的分析以及對不確定度分量進(jìn)行評定，探討影響測定結(jié)果不確定度的主要因素。結(jié)果表明，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性擬合是影響不確定度的主要因素，在檢測過程中應(yīng)加以控制。雞肉中氟苯尼考的測量結(jié)果為（75.3±6.4） μg·kg^-1（k=2）。

關(guān)鍵詞：不確定度評定；氟苯尼考；雞肉；超高液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Uncertainty Evaluation of Determination of Florfenicol Residues in Chicken by Ultra-High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

SHAN Changhai， LI Xiang， YANG Zhou， LONG Yang， HU Rong， SUN Hui

（National Quality Supervision and Testing Center for Selenium Rich Products， Enshi 445000， China）

Abstract： Based on GB 31658.5—2021， an uncertainty evaluation method for the determination of florfenicol residues in chicken was established. By analyzing the source of uncertainty and evaluating the component of uncertainty， the main factors affecting the uncertainty of measurement results were discussed. The results show that the linear fitting of the standard curve is the main factor affecting the uncertainty， which should be controlled in the testing process. The results of florfenicol in chicken were （75.3±6.4） μg·kg^-1（k=2）.

Keywords： uncertainty evaluation; florfenicol; chicken; ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry

氟苯尼考是一種畜禽動物專用的酰胺醇類的廣譜抗菌藥，治療畜禽動物的細(xì)菌性疾病，尤其對呼吸道系統(tǒng)感染和腸道感染療效顯著[1-2]。氟苯尼考具有一定的毒性，畜牧農(nóng)產(chǎn)品中氟苯尼考累積到一定限量，會對人體造成危害[3-4]?！妒称钒踩珖覙?biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》（GB 31650—2019）規(guī)定，雞肉中氟苯尼考?xì)埩粝蘖啃∮?00 μg·kg-1，是國家對農(nóng)產(chǎn)品重點(diǎn)監(jiān)督項目。《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB 31658.5—2021）自2022年2月1日起開始實(shí)施，是國家農(nóng)產(chǎn)品安全監(jiān)督抽檢指定的唯一檢測方法。在獸藥殘留的分析檢測工作中，由于試劑耗材質(zhì)量等級的不同、檢測設(shè)備的精密度和靈敏度的不同對檢測結(jié)果產(chǎn)生一定的偏差，通過對標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行測量不確定度分析并關(guān)注主要不確定度來源，能夠提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度[5-6]。

本文依據(jù)GB 31658.5—2021、《化學(xué)分析中不確定度的評估指南》（CNAS—GL006：2019），對雞肉中氟苯尼考?xì)埩袅繙y定的不確定度進(jìn)行評定，旨在為采用新標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測時找出關(guān)鍵控制環(huán)節(jié)并加以控制，以降低檢驗(yàn)風(fēng)險。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

雞肉樣品，市場采購。

氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)品（100.0 mg·L^-1，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司，濃度不確定度U=3.0 mg·L^-1）；乙腈、甲酸、正己烷、乙酸乙酯（色譜純，德國CNW公司）；實(shí)驗(yàn)室用水為Milli-Q超純水，雞肉中氟苯尼定量分析質(zhì)控樣（自制）。

Triple Quad 5500三重四級桿液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國ABSCIEX公司）；ST 40R離心機(jī)（美國Thermo Fisher公司）；Vac Elut SPS 24半自動固相萃取儀（美國Agilent Technologies公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 溶液配制以及樣品處理

標(biāo)準(zhǔn)溶液及內(nèi)標(biāo)配制：精密量取1.0 mL氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL容量瓶中，用乙腈定容，得到10 μg·mL^-1氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)工作液；同樣方法制備100 ng·mL^-1內(nèi)標(biāo)工作溶液。按照GB 31658.5—2021中8.3的方法制備得濃度分別為10 ng·mL^-1、50 ng·mL^-1、100 ng·mL^-1、200 ng·mL^-1、500 ng·mL^-1和1 000 ng·mL^-1的校準(zhǔn)工作溶液。

樣品處理按GB 31658.5—2021中8.1、8.2、8.3的方法處理，色譜和質(zhì)譜條件按照8.4的條件設(shè)置。

1.2.2 數(shù)學(xué)模型的建立

根據(jù)測量方法建立雞肉中氟苯尼考?xì)埩袅慷糠治龅臄?shù)學(xué)模型為

X=（c×v）/m（1）

式中：X為雞肉中氟苯尼考含量，μg·kg^-1；c為試樣溶液中氟苯尼考濃度，μg·L^-1；m為供試試料質(zhì)量，g；v為試樣定容體積，mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 不確定度來源的識別

根據(jù)GB 31658.5—2021標(biāo)準(zhǔn)方法的測量過程和測量模型，影響雞肉中氟苯尼考定量分析的不確定度來源有：①樣品稱量引入的不確定度urel（a）；②氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度的準(zhǔn)確性引入的不確定度urel（c）；③校準(zhǔn)曲線擬合引入的不確定度urel（q）；④檢測方法重復(fù)性引入的不確定度urel（r）；⑤檢測方法加標(biāo)回收率引入的不確定度urel（h）。由于檢測方法加標(biāo)回收率引入的不確定度包含了提取凈化過程引入的不確定度，因此在評定過程中忽略了提取凈化過程引入的不確定度。

2.2 不確定度測量

2.2.1 樣品稱量引入的不確定度urel（a）

2.2.2 氟苯尼考標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度的準(zhǔn)確性引入的不確定度urel（c）

2.2.3 校準(zhǔn)曲線擬合引入的不確定度urel（q）

2.2.4 檢測方法重復(fù)性測定引入的不確定度urel（r）

2.2.5 檢測方法回收率引入的不確定度urel（h）

2.2.6 合成不確定度urel

2.2.7 擴(kuò)展不確定度U

3 結(jié)論

本研究依據(jù)GB 31658.5—2021標(biāo)準(zhǔn)，對雞肉中氟苯尼考?xì)埩袅繙y量過程中的不確定度來源進(jìn)行了分析，對測量不確定度分量進(jìn)行評定，發(fā)現(xiàn)對檢測結(jié)果準(zhǔn)確度影響最主要的因素為標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合，而校準(zhǔn)曲線擬合與人員操作檢測熟練程度和儀器性能有關(guān)。因此，在檢測過程中，需要對人員檢測能力和儀器維護(hù)保養(yǎng)進(jìn)行定期監(jiān)控，以降低檢驗(yàn)風(fēng)險。

參考文獻(xiàn)

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