李琳楠?王永芳?程艷波?許玉芳?徐衛(wèi)芳?李霞?張成云?冉紹云

【摘要】目的 探討肺炎支原體肺炎（MPP）肺實(shí)變急性期患兒血清中IL-17、核因子-κB （NF-κB）表達(dá)水平及其臨床意義。方法 選取確診為MPP且病程均在急性期的64例患兒，根據(jù)入院時(shí)患兒胸部CT或胸部X線片的影像學(xué)特點(diǎn)分為肺實(shí)變組（32例）和非肺實(shí)變組（32例），檢測(cè)并比較2組MPP患兒血清中IL-17、NF-κB水平，分析IL-17與NF-κB間的關(guān)系，繪制受試者操作特征（ROC）曲線，研究血清中IL-17、NF-κB對(duì)MPP急性期患兒肺實(shí)變的診斷效能。結(jié)果 肺實(shí)變組IL-17、NF-κB高于非肺實(shí)變組（P均< 0.05）。Spearman秩相關(guān)分析顯示，MPP患兒的IL-17與NF-κB水平呈正相關(guān)（rs=0.818，P < 0.05）。當(dāng)血清中IL-17水平為10.45 pg/mL時(shí)，曲線下面積（AUC）為0.806，診斷MPP患兒肺實(shí)變的靈敏度是75.0%，特異度78.1%；當(dāng)血清中NF-κB水平為534.13 pg/mL時(shí)，AUC為0.951，診斷MPP患兒肺實(shí)變的靈敏度為90.6%，特異度為84.4%。結(jié)論 MPP肺實(shí)變患兒急性期血清中IL-17、NF-κB表達(dá)水平升高，早期檢測(cè)血清中IL-17、NF-κB水平對(duì)MPP肺實(shí)變有一定的診斷價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】肺炎支原體肺炎；肺實(shí)變；白介素-17；核因子-κB；診斷

Diagnostic efficacy of serum IL-17 and NF-κB expression levels in early detection of lung consolidation in children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia Li Linnan△， Wang Yongfang， Cheng Yanbo， Xu Yufang， Xu Weifang， Li Xia， Zhang Chengyun， Ran Shaoyun. △Department of Cinical Laboratory， the First People s Hospital of Zhengzhou， Zhengzhou 450004， China Corresponding author， Wang Yongfang， E-mail： wyfwzhwzy2016@126.com

【Abstract】Objective To investigate the expression levels and significance of serum interleukin-17 （IL-17） and nuclear factor-κB （NF-κB） in Mycoplasma pneumoniae pneumonia （MPP） children in acute stage with lung consolidation. Methods Sixty-four children diagnosed with MPP in acute stage were selected. According to the imaging features of chest CT scan or chest X-ray upon admission， all patients were divided into the lung consolidation group （n = 32） and non-lung consolidation group （n = 32）. The serum levels of IL-17 and NF-κB in MPP children were detected and compared between two groups. The relationship between IL-17 and NF-κB was analyzed. The receiver operating characteristic （ROC） curve was drawn. The diagnostic efficacy of serum IL-17 and NF-κB levels for lung consolidation was assessed in MPP children in acute stage. Results The serum levels of IL-17 and NF-κB in the lung consolidation group were higher than those in the non-lung consolidation group （both P < 0.05）. Spearman correlation analysis showed that IL-17 level was positively correlated with NF-κB level in MPP children （rs = 0.818， P < 0.05）. When the serum level of IL-17 was 10.45 pg/mL， the area under the ROC curve （AUC） was 0.806， and the sensitivity and specificity for the diagnosis of lung consolidation in MPP children were 75.0% and 78.1%. When the serum level of NF-κB was 534.13 pg/mL， the AUC was 0.951， and the sensitivity and specificity for the diagnosis of lung consolidation in children with MPP were 90.6% and 84.4%. Conclusions The expression levels of IL-17 and NF-κB are up-regulated in MPP children with lung consolidation in acute stage. Early detection of serum levels of IL-17 and NF-κB has certain diagnostic efficacy for lung consolidation in MPP.

【Key words】Mycoplasma pnuemoniae pneumonia； Lung consolidation； Interleukin-17； Nuclear factor-κB； Diagnosis

肺炎支原體（MP）是兒童肺炎中常見的病原體，占兒童社區(qū)獲得性肺炎病原的30%～40%［1-2］。肺炎支原體肺炎（MPP）的X線胸片表現(xiàn)可見支氣管肺炎，片狀實(shí)變似大葉性肺炎改變，間質(zhì)性肺炎，胸腔積液、肺不張等。MPP肺實(shí)變可能進(jìn)展為重癥肺炎支原體肺炎（SMPP）、難治性肺炎支原體肺炎（RMPP），嚴(yán)重威脅兒童生命健康。近年研究顯示，免疫因素在MPP的發(fā)病中起重要作用［3-5］。本研究擬探討MPP患兒外周血IL-17、核因子-κB （NF-κB）的表達(dá)水平，以期為臨床早期診治MPP肺實(shí)變提供參考，現(xiàn)報(bào)告如下。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

選取2020年6月至2022年7月在鄭州市第一人民醫(yī)院兒科、河南省人民醫(yī)院兒科二病區(qū)住院治療的64例MPP患兒。根據(jù)入院時(shí)患兒胸部CT或胸部X線片影像學(xué)特點(diǎn)，分為實(shí)變（影像學(xué)檢查結(jié)果示單個(gè)或多個(gè)肺葉大片狀密度增高影）組32例，其中男16例、女16例，年齡（5.63±2.79）歲；非實(shí)變（影像學(xué)檢查結(jié)果僅示小斑片狀密度增高影）組32例，其中男23例、女9例，年齡（4.88±2.71）歲。2組患兒的性別（χ2 = 3.216，P = 0.073）、年齡（t = 1.091，P = 0.280）比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究患兒監(jiān)護(hù)人均知情并簽署同意書，研究方案經(jīng)鄭州市第一人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批件號(hào)：2019-018）。

二、病例納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：入院前病程 ≤7 d，符合MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他病原體感染；繼往有反復(fù)呼吸道感染、支氣管哮喘、支氣管肺發(fā)育不良、慢性阻塞性肺疾病等呼吸系統(tǒng)疾病史者；伴有其他系統(tǒng)原發(fā)疾病者；免疫功能低下者等。

三、研究方法

1. 標(biāo)本采集

患兒于入院當(dāng)日（即急性期）采集外周靜脈血6 mL，分取3 mL立即送檢IL-17水平。另3 mL靜脈血標(biāo)本在6 h內(nèi)以3 000 r/min離心20 min，取上清液置于?80℃ 冰箱保存待檢測(cè)NF-κB水平。

2. 指標(biāo)檢測(cè)

血清IL-17檢測(cè)試劑盒購(gòu)自青島瑞斯凱爾生物科技有限公司，采用流式免疫熒光法檢測(cè)，血清NF-κB試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物有限公司，采用ELISA法檢測(cè)。上述檢測(cè)均嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 26.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布計(jì)量資料用表示，組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布計(jì)量資料用M（P25，P75）表示，組間比較行Mann-Whitney U檢驗(yàn)。指標(biāo)間的相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析。運(yùn)用受試者操作特征（ROC）曲線及曲線下面積（AUC）評(píng)估檢測(cè)指標(biāo)的診斷價(jià)值；AUC組間比較應(yīng)用MedCalc軟件，采用DeLong檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、實(shí)變組與非實(shí)變組MPP患兒血清中IL-17、NF-κB表達(dá)水平比較

2組MPP患兒血清中IL-17、NF-κB水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.001）。見表1。

二、MPP患兒血清中IL-17、NF-κB水平的相關(guān)性分析

Spearman秩相關(guān)分析顯示，MPP患兒的IL-17與NF-κB水平呈正相關(guān)（rs = 0.818，P < 0.05）。

三、血清中IL-17、NF-κB水平對(duì)MPP患兒肺實(shí)變的診斷價(jià)值

為探討血清中IL-17、NF-κB水平對(duì)MPP患兒肺實(shí)變?cè)\斷的價(jià)值，繪制ROC曲線，根據(jù)Youden法確定診斷MPP患兒肺實(shí)變最高靈敏度和特異度的臨界值。當(dāng)血清中IL-17水平為10.45 pg/mL時(shí)，ROC AUC為0.806（95%CI 0.697～0.916），其診斷MPP患兒肺實(shí)變的靈敏度為75.0%、特異度為78.1%。當(dāng)血清中NF-κB水平為456.21 pg/mL時(shí)，ROC AUC為0.951（95%CI 0.905～0.997），其診斷MPP患兒肺實(shí)變的靈敏度為90.6%、特異度為84.4%。AUC組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z = 3.089，P < 0.05）。見表2、圖1。

討論

MPP好發(fā)于學(xué)齡前及學(xué)齡期兒童，以支氣管肺炎表現(xiàn)的較多見，癥狀相對(duì)輕。當(dāng)患兒發(fā)生肺不張或肺實(shí)變時(shí)，在免疫系統(tǒng)被激活后，病情嚴(yán)重且進(jìn)展迅速，氣道上皮細(xì)胞受損，清除能力下降，漿液纖維素樣滲出增加，分泌物壅塞，形成胸腔積液、塑型性支氣管炎、閉塞性細(xì)支氣管炎、壞死性肺炎等，從而造成不同程度的肺功能損害，同時(shí)患兒可能合并不同程度的肺外系統(tǒng)損害［7-9］。研究證實(shí)，MPP肺實(shí)變患兒的臨床癥狀更重，治療時(shí)間更長(zhǎng)［10］。早期聯(lián)合肺泡灌洗治療可改善MPP肺實(shí)變患兒的預(yù)后［5，11］。但支原體感染在早期影像學(xué)檢查中可能無明顯提示，臨床上能及早識(shí)別MPP患兒出現(xiàn)肺實(shí)變極為重要。

MP感染后，機(jī)體細(xì)胞膜受損，引起受體識(shí)別位點(diǎn)改變，導(dǎo)致細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞因子水平發(fā)生改變［2］。T淋巴細(xì)胞會(huì)被激活，部分可分化成輔助型T淋巴細(xì)胞17（Th17），Th17可釋放IL-17。IL-17被認(rèn)為參與肺實(shí)變的形成，其能刺激支氣管相關(guān)的組織細(xì)胞（如上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞），致使局部中性粒細(xì)胞過度浸潤(rùn)，引起氣道損傷、氣道滲出增加，黏液蛋白分泌增多，導(dǎo)致黏液栓塞、氣道阻塞等［2，12-14］。另外，IL-17可通過激活NF-κB、絲裂原活化蛋白激酶等途徑，活化多種促炎因子（如IL-1、IL-6、TNF-α），誘導(dǎo)大量免疫細(xì)胞參與炎性級(jí)聯(lián)反應(yīng)，引起氣道上皮凋亡［15-16］。IL-17通過上述途徑使大量炎性分泌物壅堵氣道，參與肺實(shí)變形成。另外，MP感染可激活Toll樣受體4/NF-κB（TLR4/NF-κB）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，活化NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核，參與多種趨化因子及炎癥因子表達(dá)［17-18］。

本研究顯示，肺實(shí)變組MPP患兒血清中IL-17組高于非實(shí)變組MPP患兒，這與相關(guān)報(bào)道指在MPP患兒肺泡灌洗液中IL-17水平與肺實(shí)變相關(guān)的結(jié)果一致［19］。血清中IL-17水平也是早期預(yù)測(cè)RMPP的良好指標(biāo)［14］。本研究中，肺實(shí)變組MPP患兒血清中NF-κB水平高于非實(shí)變組MPP患兒，這與郭冰冰等［20］對(duì)SMPP實(shí)變研究與結(jié)果一致。本研究的相關(guān)性分析顯示，MPP患兒血清中IL-17與NF-κB呈正相關(guān)，提示兩者均可反映MPP患兒病情。進(jìn)而應(yīng)用ROC曲線分析，當(dāng)MPP患兒血清中IL-17水平為10.45 pg/mL時(shí)，診斷肺實(shí)變的靈敏度為75.0%、特異度為78.1%；當(dāng)MPP患兒血清中NF-κB水平為456.21 pg/mL時(shí)，診斷出肺實(shí)變的靈敏度為90.6%、特異度為84.4%。IL-17（AUC=0.806）及NF-κB（AUC=0.951）對(duì)MPP患兒肺實(shí)變均有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。但本研究存在樣本量相對(duì)較少等局限性，今后研究應(yīng)予以完善。近年來，通過調(diào)控IL-17信號(hào)途徑來治療相關(guān)疾病已成為研究熱點(diǎn)［21-22］。因此，期望通過調(diào)控IL-17、NF-κB介導(dǎo)的炎癥以阻止MPP肺實(shí)變的發(fā)生、發(fā)展，以改善MPP肺實(shí)變患兒的預(yù)后。

綜上所述， IL-17、NF-κB可能在MPP肺實(shí)變發(fā)生中起重要作用，檢測(cè)MPP患兒血清IL-17、NF-κB水平可為臨床MPP肺實(shí)變的早期診治提供依據(jù)。

參? 考? 文? 獻(xiàn)

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（收稿日期：2022-12-13）

（本文編輯：林燕薇）