范永勝, 程相杰, 董彥琪, 馬華平, 蔣志凱

(河南省新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 河南 新鄉(xiāng) 453003)

半胱氨酸(Cystatin,Cys)蛋白酶抑制劑是廣泛存在于各種動(dòng)植物體內(nèi)的一類蛋白[1]。Cys的主要功能是通過直接與半胱氨酸蛋白酶(Cysteine proteinase,CP)活性位點(diǎn)結(jié)合來發(fā)揮抑制CP活性的作用,一般情況下這個(gè)過程是可逆的[2]。在植物中的半胱氨酸蛋白酶抑制劑被命名為PhyCys(Phytocystatins),大多數(shù)PhyCys已被證明其主要抑制C 1 A家族CP的水解活性[3]。PhyCys屬于小分子蛋白,其分子量一般在11～16 kD之間,除此之外一部分PhyCys的分子量在23～30 kD之間,這是因?yàn)樗鼈僀端較長,有研究表明這類PhyCys不僅能抑制C 1 A類CP的活性,還可以抑制C 13類CP的活性[4]。

PhyCys在植物中發(fā)揮的功能是多樣的,如參與植物生長的調(diào)控[5]、參與生物脅迫防御反應(yīng)[6]、響應(yīng)非生物脅迫[7-8]等。PhyCys在模式植物擬南芥中進(jìn)行了較為深入的研究,在擬南芥發(fā)生超敏反應(yīng)(Hypersensitivity,HR)時(shí)AtCYS1的表達(dá)量迅速上升,在煙草中異位過表達(dá)AtCYS1時(shí),可以明顯發(fā)現(xiàn)壞死斑面積的減少,說明AtCYS1的表達(dá)可以有效抑制HR的發(fā)生[9];ABA處理萌發(fā)過程中的擬南芥種子后,AtCYS6的表達(dá)量顯著增加,導(dǎo)致擬南芥種子萌發(fā)延遲,AtCYS6缺失突變體和過表達(dá)植株則分別表現(xiàn)為萌發(fā)提前與萌發(fā)延遲,種子萌發(fā)快慢與AtCYS6的表達(dá)量負(fù)相關(guān)[10]。大白菜Cys基因在擬南芥中進(jìn)行異位過表達(dá)后同樣表現(xiàn)出種子延遲萌發(fā)的表型[11]。AtCYS除了參與擬南芥生長發(fā)育與防御的調(diào)控外,還參與響應(yīng)非生物脅迫的過程,AtCYSa與AtCYSb的過表達(dá)植株對冷、干旱、高鹽環(huán)境的抵抗力顯著增強(qiáng)[12]。在玉米中,玉米瘤黑粉病侵染植株后半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因CC9高度表達(dá),CC9通過抑制半胱氨酸蛋白酶的活性來抑制水楊酸(SA)介導(dǎo)的防御通路從而影響HR的產(chǎn)生,CC9基因沉默植株對瘤黑粉病抗病性大幅提高[13]。在水稻中,將水稻半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因OC-I在煙草中異位表達(dá)后,顯著提高植株對煙草蝕紋病毒與馬鈴薯病毒的抗性[14]。對從楊樹品種河北楊中克隆的半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因進(jìn)行體外表達(dá)后,發(fā)現(xiàn)其能夠有效抑制天牛的生長發(fā)育,抑制程度與半胱氨酸蛋白酶抑制劑的濃度呈正相關(guān)[15]。以上研究結(jié)果表明,PhyCys在植物的生長發(fā)育、參與生物脅迫的防御反應(yīng)、響應(yīng)非生物脅迫發(fā)揮著舉足輕重的作用。

PhyCys被證實(shí)已在多種植物中發(fā)揮著重要的作用[16],但尚未見到有關(guān)小麥TaCys家族相關(guān)基因深入的研究。本研究在小麥全基因組水平上,對TaCys的基因結(jié)構(gòu)、染色體定位、啟動(dòng)子順式作用元件及在生物與非生物脅迫下的基因表達(dá)進(jìn)行了詳細(xì)的探討,為現(xiàn)代生物技術(shù)改良小麥品種與創(chuàng)新種質(zhì)提供理論基礎(chǔ),對提高小麥產(chǎn)量與抵抗病蟲害能力具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 小麥TaCys基因家族的鑒定

在Ensembl plant (http://plants.ensembl.org/index.html)網(wǎng)站下載小麥基因組序列文件(Triticum_aestivum.IWGSC.dna.toplevel.fa)、GFF 3文件(Triticum_aestivum.IWGSC.49.gff 3),蛋白序列文件 (Triticum_aestivum.IWGSC.pep.all.fa)。通過Pfam蛋白家族數(shù)據(jù)庫(http://pfam.xfam.org/)獲取Cys基因家族隱馬氏模型文件(PF 00031),利用Hummer search軟件在小麥全基因組水平上鑒定獲得TaCys基因家族候選基因(E-value<1×10-5)。以水稻半胱氨酸蛋白酶抑制劑(OC)蛋白序列為參考序列,利用TBTools的Blastp功能在小麥全基因組水平上鑒定TaCys候選基因。將Hummer search與Blastp獲取的候選基因去除冗余后,在NCBI-CDD(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/bwrpsb/bwrpsb.cgi)與SMART(http://smart.embl.de/smart/batch.pl)網(wǎng)站手動(dòng)鑒定Cys結(jié)構(gòu)域的完整性,最終獲得TaCys家族基因。將小麥TaCys蛋白序列上傳到Expasy(https://web.expasy.org/protparam/)預(yù)測小麥TaCys蛋白的等電點(diǎn)與分子量,在Cell-PLoc 2.0(http://www.csbio.sjtu.edu.cn/bioinf/Cell-PLoc-2/)預(yù)測小麥TaCys基因的亞細(xì)胞定位。

1.2 小麥TaCys蛋白的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹分析

在Ricedate(https://www.ricedata.cn/gene/)網(wǎng)站獲得水稻OC家族的蛋白序列文件,利用MAGA 7.0軟件中的Clustal W工具,將水稻OC蛋白序列與新鑒定的小麥TaCys蛋白序列進(jìn)行比對,采用鄰接法(Neighbor-joining,NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(參數(shù)Bootstrap為1000),并利用iTOL在線工具(https://itol.embl.de/)對進(jìn)化樹進(jìn)行美化。

1.3 小麥TaCys基因結(jié)構(gòu)與保守motif分析

將小麥TaCys蛋白序列上傳到meme (http://meme-suite.org/),對TaCys蛋白的保守基序進(jìn)行鑒定(默認(rèn)參數(shù))。利用小麥gff 3文件通過TBtools軟件對小麥TaCys基因結(jié)構(gòu)可視化。

1.4 小麥TaCys染色體定位

從IWGSC RefSeq V 1.0數(shù)據(jù)庫(https://urgi.versailles.inra.fr/)獲得TaCys基因的物理和染色體位置。根據(jù)各基因的起始位置和染色體長度,利用TBTools軟件繪制染色體定位圖譜。

1.5 小麥TaCys基因啟動(dòng)子順式作用元件分析

利用PlantCARE(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)網(wǎng)站對小麥TaCys基因ATG上游2 000 bp的序列進(jìn)行分析,對獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行整理后利用TBTools軟件可視化。

1.6 小麥TaCys基因在不同小麥組織中的表達(dá)預(yù)測

利用小麥表達(dá)數(shù)據(jù)庫expVIP(http://www.wheat-expression.com/),獲得了TaCys家族基因在小麥植物根、葉、穗粒組織中的表達(dá)模式,預(yù)測了TaCys基因在不同階段的表達(dá)情況。利用Tbtools軟件繪制TaCys基因表達(dá)的熱圖。

1.7 小麥TaCys基因在生物與非生物脅迫下的表達(dá)預(yù)測

利用Genevestigator(https://genevestigator.com/)軟件獲取本研究所利用的生物與非生物脅迫下的小麥轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),本地分析后進(jìn)行可視化。

2 結(jié)果與分析

2.1 TaCys基因家族的鑒定及分類

將Hummer search與BlastP search 兩種方法獲取的候選蛋白序列進(jìn)行比對后,去除冗余的序列,通過NCBI-CDD數(shù)據(jù)庫對Cys結(jié)構(gòu)域的完整性進(jìn)行手動(dòng)確認(rèn),最終獲得了70個(gè)含有完整Cys結(jié)構(gòu)域的小麥半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因TaCys,分別將其命名為TaCys1-A～TaCys42-D(表1)。對TaCys基因家族蛋白的理化性質(zhì)分析后發(fā)現(xiàn):TaCys基因家族蛋白的氨基酸長度區(qū)間在113～248 aa;其蛋白分子量在Expasy進(jìn)行計(jì)算后發(fā)現(xiàn),大部分TaCys的蛋白分子量在11～19 kD之間,只有TaCys10-A、TaCys 10-B、TaCys 10-D的分子量達(dá)到了26 kD左右,這是因?yàn)樗鼈冇休^長C端[4];蛋白質(zhì)等電點(diǎn)在4.72～10.16之間;亞細(xì)胞定位預(yù)測所有的TaCys蛋白都定位于細(xì)胞質(zhì)中。

表1 TaCys基因家族的特性Table 1 The characteristics of TaCys gene family

小麥與水稻都是禾本科單子葉作物。本研究對70個(gè)小麥、8個(gè)水稻的Cys家族蛋白序列進(jìn)行了比對,構(gòu)建了系統(tǒng)進(jìn)化樹。根據(jù)前人對水稻半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因的研究結(jié)果,TaCys可以被分為三大類:Group A、GroupB、Group C。Group C含有最多的成員,包含42個(gè)基因,Group A與Group B則含有相同的成員數(shù),都包含14個(gè)基因(圖1)。

圖1 小麥、水稻Cys家族系統(tǒng)進(jìn)化樹分析Fig.1 The phylogenetic tree of the Cys family of wheat and rice

2.2 保守基序(motif)與基因結(jié)構(gòu)分析

本研究利用在線網(wǎng)站MEME對TaCys的motif進(jìn)行預(yù)測,結(jié)果如圖2所示。同一組且進(jìn)化關(guān)系較近的基因的基序結(jié)構(gòu)基本相似,motif基本按照9-7-3-1-2-6-4-5-10的順序分布。motif 1、motif 4、motif 5極其保守,幾乎出現(xiàn)在所有的TaCys中。為深入探究TaCys的基因結(jié)構(gòu)特征,利用TBtools軟件對70個(gè)TaCys的基因結(jié)構(gòu)進(jìn)行可視化(圖2)。同一組內(nèi)基因的外顯子和內(nèi)含子數(shù)量基本相同,TaCys基因包含0～3個(gè)內(nèi)含子和1～4個(gè)外顯子。A組中TaCys基因所含內(nèi)含子與外顯子的數(shù)量總體最多,其中TaCys10-A、TaCys10-B、TaCys10-D均含有3個(gè)內(nèi)含子和4個(gè)外顯子,在所有已鑒定到的TaCys中數(shù)量最多。TaCys9-A、TaCys9-B、TaCys9-D的數(shù)量則次之,含有2個(gè)內(nèi)含子和3個(gè)外顯子。B組與C組中除了TaCys21-B與TaCys4-D含有2個(gè)內(nèi)含子外,其他TaCys只有1個(gè)外顯子。內(nèi)含子的數(shù)目與長度決定了小麥半胱氨酸蛋白酶抑制劑基因的大小。

圖2 TaCys基因家族的保守motif與基因結(jié)構(gòu)Fig.2 Conservation motifs and gene structure of TaCys gene family

2.3 TaCys基因在小麥染色體上的分布

TaCys基因分布在小麥的19條染色體上(圖3),其物理位置如表1所示。70個(gè)TaCys基因在染色體上呈現(xiàn)出不均勻分布的情況,絕大部分分布在染色體的兩端,只有TaCys11-A、TaCys11-D分布在染色體的著絲粒處。其中1 A、6 B、7 B、6 D染色體上有1個(gè)基因成員;4 A、7 A、1 B、7 D染色體上有2個(gè)基因成員;3 A、5 A、4 B上有3個(gè)基因成員。TaCys基因在2 A、3 B、3 D、3 D、4 D、5 D染色體中的分布相對平衡,在2 B染色體上含有最多的基因成員達(dá)到13個(gè)?；虻拇?lián)重復(fù)是基因家族增大的機(jī)制之一[17],本研究鑒定到9組串聯(lián)重復(fù)基因簇,分別是TaCys3-A/TaCys7-A/TaCys8-A/TaCys19-A;TaCys15-A/TaCys17-A;TaCys27-B/TaCys28-B/TaCys29-B/TaCys30-B/TaCys31-B/TaCys32-B/;TaCys8-B/TaCys7-B/TaCys3-B/TaCys24-B/TaCys25-B/;TaCys23-B/TaCys21-B/TaCys21-B/TaCys22-B/;TaCys38-D/TaCys3-D/TaCys7-D/TaCys8-D;TaCys35-D/TaCys36-D/TaCys37-D;TaCys39-D/TaCys40-D/TaCys5-D;TaCys15-D/TaCys17-D/TaCys33-D/TaCys12-D,這可能是TaCys基因家族成員數(shù)量多于其他植物Cys基因家族的原因。

圖3 TaCys基因家族在小麥染色體上的分布Fig.3 Distribution of TaCys gene family on chromosomes

2.4 TaCys的啟動(dòng)子順式作用元件分析

植物通常通過調(diào)控自身的轉(zhuǎn)錄速率來適應(yīng)脅迫[18]。基因的順式作用元件是激活或抑制轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)[19],一些啟動(dòng)子順式作用元件是許多基因所共有的,比如光響應(yīng)作用元件。本研究發(fā)現(xiàn),每個(gè)TaCys都含有大量的光響應(yīng)元件(圖4),其中,TaCys10-B、TaCys24-B、TaCys25-B、TaCys37-D、TaCys2-D、TaCys4-D、TaCys19-A含有20個(gè)以上的光響應(yīng)元件,說明這些基因可能在光響應(yīng)通路發(fā)揮著關(guān)鍵作用。TaCys還含有大量的激素相關(guān)作用元件,ABA可以抑制種子的萌發(fā),AtCys6上含有大量的ABA相關(guān)的順式作用元件,ABA處理過的種子,種子萌發(fā)延遲,AtCys6的表達(dá)量上調(diào),半胱氨酸蛋白酶活性降低[10]。TaCys10-B、TaCys10-D、TaCys24-B、TaCys4-D都含有10個(gè)以上的ABA響應(yīng)通路相關(guān)作用元件,它們可能發(fā)揮與AtCys6相似的功能,與小麥種子的萌發(fā)有關(guān)。外施MeJA能夠誘導(dǎo)植物中半胱氨酸蛋白酶抑制劑的分泌且誘導(dǎo)植物防御基因的表達(dá),表現(xiàn)出對病害的抗性作用[20-21]。TaCys10-A、TaCys10-B、TaCys10-D、TaCys15-D、TaCys21-B、TaCys22-B、TaCys34-D、TaCys37-D、TaCys4-D、TaCys8-A、TaCys10-B、TaCys16-B、TaCys26-B含有10個(gè)以上的MeJA通路相關(guān)的作用元件,它們可能在小麥面對生物脅迫時(shí)發(fā)揮重要作用。TaCys除含有光響應(yīng)作用元件與激素相關(guān)作用元件外,還含有植物生長發(fā)育與非生物脅迫相關(guān)的作用元件,說明TaCys在小麥中發(fā)揮的功能可能是多樣的。

圖4 TaCys基因家族啟動(dòng)子區(qū)順式作用元件分析Fig.4 Analysis of cis-acting elements in promoter region of TaCys gene family

2.5 TaCys在小麥組織中表達(dá)模式分析

本研究利用現(xiàn)有的小麥RNA-seq數(shù)據(jù)庫expVIP,分析了TaCys基因在小麥不同發(fā)育階段(幼苗期-Seedling-S、營養(yǎng)生長期-Vegetative-V、生殖生長期-Reproductive-R)的不同組織(根、葉、穗和粒)中的表達(dá)模式(圖5)。A組中,除TaCys15-A、TaCys15-D、TaCys17-A、TaCys17-D外,有10個(gè)TaCys(TaCys9-A、TaCys9-B、TaCys9-D、TaCys10-A、TaCys10-B、TaCys10-D、TaCys33-D、TaCys34-D、TaCys14-B、TaCys14-D)在小麥不同組織的不同發(fā)育階段中均表現(xiàn)為持續(xù)高表達(dá),表明他們可能在小麥生長發(fā)育的各個(gè)階段都發(fā)揮著功能。B組與C組中,TaCys1-A、TaCys1-D在小麥不同組織的不同發(fā)育階段中表達(dá),TaCys11-A、TaCys11-B、TaCys11-D在根與幼苗期的葉子中表達(dá),26個(gè)TaCys(TaCys18-A、TaCys20-B、TaCys23-B、TaCys35-D、TaCys37-D、TaCys2-D、TaCys3-A、TaCys3-B、TaCys3-D、TaCys6-A、TaCys6-B、TaCys6-D、TaCys7-B、TaCys8-A、TaCys8-B、TaCys8-D、TaCys12-A、TaCys13-A、TaCys13-D、TaCys19-A、TaCys26-B、TaCys27-B、TaCys31-B、TaCys32-B、TaCys39-D、TaCys41-D)只在生殖生長期籽粒中表達(dá),在根、葉、穗中基本不表達(dá),說明這些基因可能與籽粒灌漿有關(guān)。

圖5 TaCys基因在不同發(fā)育階段不同組織中的表達(dá)分析Fig.5 Expression analysis of TaCys genes in different tissues at different developmental stages

2.6 生物與非生物脅迫下TaCys的表達(dá)譜分析

本研究利用公共基因表達(dá)數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)Genevestigator對生物與非生物脅迫下TaCys的表達(dá)譜進(jìn)行了分析,包括6種處理:小麥白粉病病原菌(B.graminis)、小麥赤霉病病原菌(F.graminearum)、激發(fā)子Flg 22與Chitin、干旱、冷、熱(圖6)。在接種小麥白粉病后,14個(gè)TaCys(TaCys9-A、TaCys9-B、TaCys9-D、TaCys10-A、TaCys10-B、TaCys10-D、TaCys33-D、TaCys34-D、TaCys14-B、TaCys14-D、TaCys9-B、TaCys1-A、TaCys1-B、TaCys1-D)的表達(dá)量上調(diào),其中TaCys34-D對小麥白粉病的響應(yīng)最為強(qiáng)烈。在接種小麥赤霉病后,4個(gè)TaCys(TaCys23-B、TaCys35-D、TaCys37-D、TaCys1-D)的表達(dá)量明顯上調(diào),TaCys35-D與TaCys37-D對小麥赤霉病的響應(yīng)最為強(qiáng)烈。激發(fā)子能夠激活植物的免疫反應(yīng)PTI過程(病原相關(guān)分子模式觸發(fā)的免疫)[22],小麥在chitin和flg 22誘導(dǎo)下,5個(gè)TaCys(TaCys23-B、TaCys35-D、TaCys37-D、TaCys1-A、TaCys41-D)持續(xù)高表達(dá),這證明它們可能參與植物免疫中PTI的過程。在非生物脅迫中,6個(gè)TaCys(TaCys9-A、TaCys9-B、TaCys9-D、TaCys17-A、TaCys17-D、TaCys34-D)在冷、熱脅迫下都表現(xiàn)為下調(diào);5個(gè)TaCys(TaCys10-A、TaCys10-B、TaCys10-D、TaCys14-B、TaCys14-D)在冷、干旱脅迫下都表現(xiàn)為上調(diào);4個(gè)TaCys(TaCys11-A、TaCys11-B、TaCys11-D、TaCys41-D)在干旱脅迫下表現(xiàn)為持續(xù)下調(diào)。這些數(shù)據(jù)表明,TaCys可能在小麥生長發(fā)育和面對不同脅迫時(shí)都發(fā)揮著重要作用。

圖6 不同脅迫處理下TaCys的表達(dá)水平Fig.6 Expression level of TaCys under different stress treatments

3 討論與結(jié)論

了解TaCys基因的生物學(xué)功能及其對生物與非生物脅迫響應(yīng)的分子機(jī)制,有助于培育多抗高產(chǎn)小麥新品種。Cys基因在許多物種中都有報(bào)道,然而,由于小麥基因組的復(fù)雜性,對小麥Cys基因家族的研究還不夠深入。

本研究共鑒定了70個(gè)TaCys基因,并將其分為3組。C組是小麥家族中最大的群體,占家族成員總數(shù)的50%,且C組成員的基因結(jié)構(gòu)中都含有多個(gè)內(nèi)含子,B組與C組中幾乎所有成員只含有1個(gè)內(nèi)含子,這與擬南芥[9]、水稻[1]等物種中Cys基因家族中的結(jié)果一致,說明Cys在不同物種進(jìn)化中具有保守性,不同物種的Cys同源基因在植物生長發(fā)育調(diào)控和面對脅迫響應(yīng)時(shí)可能發(fā)揮著相同的作用?；虼?lián)復(fù)制事件被認(rèn)為是增加基因家族多樣性的關(guān)鍵機(jī)制[17]。本研究將TaCys基因的染色體定位進(jìn)行了可視化,70個(gè)TaCys被定位到19條小麥的染色體上。在植物進(jìn)化過程中,基因串聯(lián)復(fù)制事件經(jīng)常發(fā)生,導(dǎo)致基因家族的擴(kuò)展。如果一個(gè)200 kb以內(nèi)的染色體區(qū)域包含2個(gè)或2個(gè)以上的基因,則該區(qū)域的基因被認(rèn)為是串聯(lián)重復(fù)事件的結(jié)果[23]。9個(gè)串聯(lián)重復(fù)事件共包含35個(gè)TaCys基因,結(jié)果表明,TaCys基因家族的擴(kuò)增是進(jìn)化過程中基因串聯(lián)復(fù)制事件發(fā)生的結(jié)果。

基因表達(dá)受到許多順式作用元件的調(diào)節(jié),先前的研究已經(jīng)證實(shí),PhyCys基因?qū)Σ煌恼T導(dǎo)都有響應(yīng),如寒冷、ABA、干旱和光照誘導(dǎo)[8,12,24],然而,對TaCys基因啟動(dòng)子順式作用元件的研究很少。對TaCys基因的啟動(dòng)子分析揭示了各種應(yīng)激響應(yīng)元件的存在,如ABA、干旱響應(yīng)、防御和應(yīng)激響應(yīng)以及厭氧誘導(dǎo)元件等。結(jié)合本研究中對TaCys在非生物脅迫下表達(dá)譜分析的結(jié)果,TaCys10-A、TaCys10-D、TaCys14-B可能在植物冷與干旱逆境脅迫下發(fā)揮著重要的作用。

病原菌在侵染植物時(shí)能引起PhyCys基因表達(dá)上調(diào),暗示PhyCys與植物抗病防御有關(guān)[25]。植物半胱氨酸蛋白酶抑制劑通過抑制菌絲生長起到抗病的作用,其機(jī)理可能是抑制真菌半胱氨酸蛋白酶的活性[26]。本研究中對TaCys響應(yīng)小麥白粉病(活體營養(yǎng)型病原菌)與赤霉病(死體營養(yǎng)性致病菌)的表達(dá)情況進(jìn)行了分析(圖5),TaCys在病原真菌侵染后,可通過抑制病原真菌體內(nèi)的半胱氨酸蛋白酶活性來達(dá)到抗病的作用,14個(gè)TaCys只在接種白粉病后表達(dá)上調(diào),4個(gè)TaCys只在接種赤霉病后表達(dá)上調(diào),說明TaCys在防御不同營養(yǎng)型病原菌入侵時(shí)具有特異性。TaCys35-D、TaCys37-D不僅在赤霉病誘導(dǎo)下表達(dá)上調(diào),flg 22與chitin也能誘導(dǎo)它們的表達(dá),這可能是小麥感染赤霉病后TaCys35-D、TaCys37-D能激活PTI反應(yīng),增強(qiáng)小麥的抗病性。

TaCys在小麥中發(fā)揮不同生物學(xué)功能的機(jī)制尚不清楚,深入研究并揭示其潛在機(jī)制能夠更加全面地認(rèn)識(shí)小麥生長發(fā)育與抗病害的機(jī)制。因此,明晰TaCys在植物中的表達(dá)調(diào)控機(jī)制,有助于后期利用分子育種等手段創(chuàng)新種質(zhì)與培育高產(chǎn)高抗小麥品種。