安麗欣，張倩，李昆，劉耔序，石蕊

作者單位：秦皇島市第一醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，河北 秦皇島066000

痛風(fēng)是由嘌呤代謝異常導(dǎo)致的反復(fù)發(fā)作性疾?。?］。有研究指出，40 歲以上男性人群是痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的高發(fā)人群［2］。目前臨床中在對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人進(jìn)行治療時采用的傳統(tǒng)藥物多具有多種不同不良反應(yīng)，因此亟待尋找不良反應(yīng)少、新型、自源頭有效阻斷痛風(fēng)發(fā)生藥物［3］。研究結(jié)果表明，在急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人體內(nèi)包括白細(xì)胞介素（IL）-1等炎性細(xì)胞因子起到重要作用，且IL-1 阻斷劑已逐漸成為對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人的選擇之一，因此雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔聯(lián)合應(yīng)用已逐漸成為重要的臨床治療方案，但其作用機(jī)制仍未見報道［4］。有研究認(rèn)為，微RNA（miR）-22-3p 簇具有調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的作用［5］。因此本研究擬選擇痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人作為研究對象，基于miR-22-3p分析雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2021 年3—9 月秦皇島市第一醫(yī)院收治的80例痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人作為研究對象，并依照隨機(jī)信封法分為觀察組和對照組，每組40例。觀察組中男34 例，女6 例，年齡（48.92±5.19）歲，體質(zhì)量指數(shù)（BMI）（25.49±0.74）kg∕m2，對照組中男35 例，女5 例，年齡（49.18±5.23）歲，BMI（25.37±0.68）kg∕m2，同期選擇50 例高尿酸血癥病人作為高尿酸組，其中男42 例，女8 例，年齡（48.39±6.02）歲，BMI（25.34±0.72）kg∕m2，三組性別、年齡及BMI 等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)秦皇島市第一醫(yī)院倫理委員會審議并批準(zhǔn)（院字〔2020〕13號）。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1納入標(biāo)準(zhǔn)（1）符合美國風(fēng)濕病協(xié)會痛風(fēng)診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）納入前3 個月內(nèi)未使用過激素類藥物者；（3）納入前接受痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎藥物治療；（4）臨床資料完整，知情并簽署知情同意書。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn)（1）精神障礙等疾病者；（2）伴有肝、腎、心、腦和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者；（3）無法合作者；（4）伴有嚴(yán)重肝腎功能不全者；（5）病人及家屬未簽署知情同意書者。

1.3 治療方法對照組給予依托考昔進(jìn)行治療，每天一次口服120 mg 依托考昔，持續(xù)治療一周。觀察組在對照組基礎(chǔ)上給予每天一次口服50 mg 雙醋瑞因。高尿酸組病人每天口服50 mg 苯溴馬隆進(jìn)行排尿酸治療。病人治療期間足量飲水，避免關(guān)節(jié)損傷，避免高嘌呤食物，嚴(yán)格戒酒，避免情緒緊張、過度勞累、久處濕冷環(huán)境。

1.4 觀察指標(biāo)治療后參照《中藥新藥臨床指導(dǎo)原則》中標(biāo)準(zhǔn)對病人治療臨床療效進(jìn)行判斷，共分為治愈、顯效、有效、無效。治愈：病人關(guān)節(jié)活動正常，紅腫、疼痛等癥狀消失，癥候積分減少95%以上；顯效：病人關(guān)節(jié)活動不受限制，紅腫、疼痛癥狀消失，癥候積分減少70%～94%；有效：病人關(guān)節(jié)活動受輕度限制，關(guān)節(jié)紅腫、疼痛癥狀基本消失，癥候積分減少30%～69%；無效：病人關(guān)節(jié)活動情況無明顯改善，病人關(guān)節(jié)紅腫、疼痛情況未見好轉(zhuǎn)，癥候積分減少30%以下。治療前及治療后采用數(shù)字等級量表（NRS-11）對病人關(guān)節(jié)疼痛進(jìn)行調(diào)查，滿分11 分，分?jǐn)?shù)越高疼痛越嚴(yán)重。同時對病人癥狀體征積分進(jìn)行評估，共包括三個維度分別為關(guān)節(jié)壓痛、關(guān)節(jié)急性紅腫及關(guān)節(jié)活動障礙情況，采用三級評分法，分?jǐn)?shù)越高臨床癥狀越嚴(yán)重。治療前后采集受試者空腹靜脈血，行實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢查包括C 反應(yīng)蛋白（CRP）、血沉、肌酐、尿酸，并行ELISA 檢測受試者血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-1、IL-6、IL-8 水平；采用密度梯度離心法分離外周血中單個核細(xì)胞（PBMCs），提取外周血PBMCs 中總RNA 水平，后采用實(shí)時熒光定量PCR 法進(jìn)行檢測其中miR-22-3p 及U6 基因水平，并以2-ΔΔCt對基因相對表達(dá)水平進(jìn)行計算。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果數(shù)據(jù)近似正態(tài)分布以描述，組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間兩兩比較采用單因素的方差分析，采用Spearman 相關(guān)性檢驗(yàn)分析miR-22-3p 探討雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎療效相關(guān)性，采用線性回歸模型分析miR-22-3p 與尿酸水平關(guān)系。計數(shù)資料（臨床療效）以例（%）表示，行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較研究結(jié)果顯示，觀察組病人治療臨床總有效率為97.50%，顯著高于對照組的90.00%（P＜0.05），見表1。

表1 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例臨床療效比較∕例（%）

2.2 兩組病人NRS-11 及癥狀體征積分比較研究結(jié)果顯示，治療前兩組病人NRS-11及癥狀體征積分差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），治療后兩組病人NRS-11 及癥狀體征積分均顯著低于治療前（P＜0.05），觀察組病人治療后NRS-11 及癥狀體征積分均顯著低于對照組（P＜0.05）。見表2。

表2 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例數(shù)字等級量表（NRS-11）及癥狀體征積分比較∕（分，）

表2 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例數(shù)字等級量表（NRS-11）及癥狀體征積分比較∕（分，）

2.3 兩組病人血中實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較治療前兩組病人血中CRP、血沉、肌酐、尿酸差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），治療后兩組病人CRP、血沉、肌酐、尿酸均明顯低于治療前（P＜0.05），且治療后觀察組均顯著低于對照組（P＜0.05）。見表3。

表3 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例血中實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較∕

表3 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例血中實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較∕

注：CRP為C反應(yīng)蛋白。

2.4 兩組病人治療前后炎性因子水平比較治療前兩組病人血中IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），治療后兩組病人IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α 均顯著低于治療前（P＜0.05），且治療后觀察組均顯著低于對照組（P＜0.05），見表4。

表4 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例治療前后炎性因子水平比較∕（ng∕L，）

表4 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例治療前后炎性因子水平比較∕（ng∕L，）

注：IL-1為白細(xì)胞介素-1，IL-6為白細(xì)胞介素-6，IL-8為白細(xì)胞介素-8，TNF-α為腫瘤壞死因子。

2.5 三組病人治療前后miR-22-3p 水平比較治療前觀察組和對照組病人血中miR-22-3p 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），治療后兩組病人miR-22-3p水平顯著高于治療前（P＜0.05），觀察組高于對照組，（P＜0.05）；治療前高尿酸組病人血中miR-22-3p 水平均明顯高于觀察組和對照組（P＜0.05）。見表5。

表5 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例和高尿酸血癥50例治療前后miR-22-3p水平比較∕

表5 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎80例和高尿酸血癥50例治療前后miR-22-3p水平比較∕

2.6 治療后觀察組病人血中miR-22-3p 與尿酸的關(guān)系本組研究結(jié)果顯示，治療后觀察組病人血中miR-22-3p 與尿酸水平呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，其相關(guān)性模型為Y=-119.58X+488.87，R2=0.914 3。

2.7 治療后觀察組病人血中miR-22-3p 與治療療效的關(guān)系研究結(jié)果顯示，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人血中miR-22-3p 與雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔治療臨床療效呈顯著性負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.64，P＜0.05）。

3 討論

痛風(fēng)臨床中共表現(xiàn)3 個階段即急性痛風(fēng)發(fā)作期、高尿酸血癥、慢性痛風(fēng)［6］。有研究指出，痛風(fēng)病程遷延難愈，臨床中主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)畸形、痛風(fēng)石、尿酸性尿路結(jié)石、慢性間質(zhì)性腎炎等［7］。單鈉尿酸鹽結(jié)晶是目前公認(rèn)的痛風(fēng)致病因子，一般情況下關(guān)節(jié)軟骨淺層是尿酸鹽結(jié)晶主要形成部位。痛風(fēng)病人臨床中主要表現(xiàn)為痛風(fēng)石性痛風(fēng)、反復(fù)發(fā)作性急性關(guān)節(jié)炎、尿酸性腎病、尿酸性尿路結(jié)石、關(guān)節(jié)殘疾畸形、腎功能不全［8-9］。

近年來流行病學(xué)研究結(jié)果表明，全球范圍內(nèi)痛風(fēng)的臨床發(fā)病率和患病率均呈現(xiàn)明顯逐年上市趨勢［10］，且也伴隨出現(xiàn)一定的年輕化趨勢。治療藥物是目前痛風(fēng)治療的主要手段，并具有較高的臨床療效，但采用藥物方案治療過程中均可能導(dǎo)致病人出現(xiàn)不同程度不良反應(yīng)［11］。有學(xué)者通過表觀遺傳學(xué)研究顯示，在痛風(fēng)的治療過程中遺傳因素在其中扮演重要角色，且表觀遺傳學(xué)的可逆性也提示其可稱為對痛風(fēng)進(jìn)行靶向治療和早期診斷的方案之一［12］。本組研究結(jié)果顯示，治療后觀察組病人NRS-11及癥狀體征積分均明顯低于對照組，治療后觀察組病人CRP、血沉、肌酐、尿酸、IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α均明顯低于對照組。分析認(rèn)為，采用雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎后可有效提高病人治療臨床療效，降低病人體內(nèi)炎性因子及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，改善病人臨床癥狀。

作為體內(nèi)基因重要的表達(dá)調(diào)控因子，miRNA 在多種細(xì)胞的分化、生長、發(fā)育、凋亡過程中扮演重要的角色，且miRNA 表達(dá)失調(diào)可能導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)不同程度的炎癥性疾病、免疫功能紊亂、自身免疫性疾病，但miRNA 在痛風(fēng)發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制仍鮮有報 道［13-14］。miR-22-3p 是 體內(nèi)中的高度保守miRNAs，并在體內(nèi)炎癥調(diào)節(jié)、免疫應(yīng)答等方面扮演重要角色。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人滑膜組織、PBMC 中smiR-22-3p 呈明顯的高表達(dá)狀態(tài)，與TNF-α、IL-1 等炎性因子關(guān)系密切，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人PBMCs 中miR-22-3p 表達(dá)則顯著降低［15-16］。研究發(fā)現(xiàn)，相較于健康者或間歇期痛風(fēng)病人，在原發(fā)性急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人體內(nèi)miR-22-3p 呈現(xiàn)明顯的低表達(dá)狀態(tài)［17-18］。本研究顯示觀察組病人治療后miR-22-3p水平明顯高于對照組，分析病人各指標(biāo)與尿酸水平關(guān)系結(jié)果顯示，治療后觀察組病人血中miR-22-3p與尿酸水平呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，其相關(guān)性模型為Y=-119.58X+488.87。進(jìn)一步分析miR-22-3p 與病人治療療效關(guān)系顯示，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎病人血中miR-22-3p 與雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔治療臨床療效呈顯著性負(fù)相關(guān)關(guān)系。分析認(rèn)為，采用雙醋瑞因聯(lián)合依托考昔治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎后可有效調(diào)控病人體內(nèi)miR-22-3p 水平，進(jìn)而有效調(diào)控病人體內(nèi)尿酸水平，改善病人治療療效。

但本研究臨床樣本數(shù)較少，且并未對病人體內(nèi)miR-22-3p 的動態(tài)變化水平進(jìn)行監(jiān)測，有待后續(xù)持續(xù)研究和追蹤。