張 云,許玉丹,蔣志健

(南陽市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南 南陽 473000)

復(fù)雜性膽石癥是臨床常見胃腸道疾病,Calot三角區(qū)會有明顯充血現(xiàn)象,臨床手術(shù)治療時(shí)極易發(fā)生出血,會增加醫(yī)源性膽道損傷發(fā)生率[1]。因此臨床應(yīng)采取有效手段對單純性、復(fù)雜性膽石癥進(jìn)行準(zhǔn)確判斷。近年來,血清學(xué)指標(biāo)在臨床應(yīng)用廣泛,其中微小RNA-122(miR-122)在肝細(xì)胞中表達(dá),能調(diào)節(jié)脂肪酸及膽固醇代謝,從而參與膽結(jié)石發(fā)生發(fā)展[2];高遷移率族蛋白1(HMGB 1)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶裂解角蛋白-18(CCK-18)均為免疫細(xì)胞、壞死細(xì)胞釋放的核結(jié)合蛋白,是肝上皮細(xì)胞的標(biāo)志物[3]。本研究選取本院復(fù)雜性膽石癥52例,旨在探討血清檢測在復(fù)雜性膽石癥患者中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019-01～2021-01本院復(fù)雜性膽石癥52例及同期單純性膽石癥52例。單純性膽石癥患者男26例,女26例;年齡39～71(52.23±6.53)歲;膽石癥類型:膽色素型16例,膽固醇型19例,混合型17例。復(fù)雜性膽石癥患者男27例,女25例;年齡38～72(52.45±6.62)歲;膽石癥類型:膽色素型17例,膽固醇型18例,混合型17例。兩者基線資料均衡可比(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn):均經(jīng)CT、超聲檢查診斷為膽石癥;復(fù)雜性膽石癥標(biāo)準(zhǔn):膽囊嚴(yán)重萎縮或炎癥水腫、膽囊前后三角區(qū)界限不清;均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):腸梗阻性黃疸;急性膽道感染;曾接受過外科治療。

1.2 方法

血清miR-122水平檢測:采用RT-PCT法檢測,采集患者3mL靜脈血,利用Trizol試劑提取血清總DNA,并進(jìn)行質(zhì)量鑒定,包括濃度與純度;在一定反應(yīng)條件及反應(yīng)體系下合成cDNA,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量測定miR-122水平。血清HMGB 1、CCK-18水平檢測:采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定經(jīng)離心15min后的空腹靜脈血血清HMGB 1、CCK-18水平,試劑盒購自日本同仁化學(xué)有限公司。復(fù)雜性膽石癥診斷標(biāo)準(zhǔn):miR-122>5.3、HMGB 1>2.5ng/mL、CCK-18>138.7U/L診斷為復(fù)雜性膽石癥;聯(lián)合檢測標(biāo)準(zhǔn)以單一檢測任一惡性為惡性。

1.3 觀察指標(biāo)

單純性、復(fù)雜性膽石癥血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平;發(fā)生復(fù)雜性膽石癥的危險(xiǎn)因素分析;血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平聯(lián)合檢測復(fù)雜性膽石癥的診斷結(jié)果;血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平聯(lián)合檢測復(fù)雜性膽石癥的診斷效能(靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平

復(fù)雜性膽石癥血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平較單純性膽石癥患者高(P<0.05),見表1。

表1 兩組血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平

2.2 發(fā)生復(fù)雜性膽石癥的多因素分析

經(jīng)Logistic回歸分析顯示,血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平升高均為發(fā)生復(fù)雜性膽石癥的危險(xiǎn)因素(P<0.05),見表2。

表2 發(fā)生復(fù)雜性膽石癥的多因素分析

2.3 診斷結(jié)果

miR-122檢測復(fù)雜性膽石癥47例,單純性膽石癥57例;HMGB 1檢測復(fù)雜性膽石癥40例,單純性膽石癥64例;CCK-18檢測復(fù)雜性膽石癥52例,單純性膽石癥52例;聯(lián)合檢測復(fù)雜性膽石癥61例,單純性膽石癥43例,見表3。

表3 檢測診斷結(jié)果

2.4 診斷效能

聯(lián)合檢測靈敏度高于miR-122檢測、HMGB 1檢測、CCK-18檢測(P<0.05);聯(lián)合檢測、miR-122檢測、HMGB 1檢測、CCK-18檢測的特異度、準(zhǔn)確度比較(P>0.05),見表4。

表4 診斷效能

3 討論

手術(shù)治療復(fù)雜性膽石癥過程中極易引發(fā)出血,影響預(yù)后效果[4]。臨床應(yīng)積極尋找敏感性、準(zhǔn)確性較高標(biāo)志物,明確診斷膽石癥病情程度。張毅等[5]學(xué)者研究中膽管炎癥反應(yīng)中血清HMGB 1會顯著升高。本研究結(jié)果表明復(fù)雜性膽結(jié)石血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平高于單純性膽結(jié)石,且經(jīng)Logistic回歸分析顯示,血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平升高均為發(fā)生復(fù)雜性膽石癥的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。其中miR-122能抑制膽固醇及脂肪酸代謝,多在肝臟中特異性表達(dá),占總miRNA的70%,會導(dǎo)致膽囊膽固醇積聚,從而形成膽結(jié)石。CCK-18及HMGB 1均為機(jī)體促炎蛋白,屬于細(xì)胞炎癥標(biāo)志物[6];CCK-18能調(diào)節(jié)膽囊運(yùn)動,其水平升高,會減少胰腺消化酶的分泌,加重膽結(jié)石病情;HMGB 1是炎癥介質(zhì),能放大并維持炎癥反應(yīng),且與腫瘤壞死因子等形成協(xié)調(diào)作用。隨著膽囊損傷加重,血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平均呈逐漸上升趨勢,復(fù)雜性膽石癥水平高于單純性患者,表明血清學(xué)指標(biāo)能作為判斷膽結(jié)石病情的生物學(xué)指標(biāo),是復(fù)雜性膽石癥發(fā)生的危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果還顯示,聯(lián)合檢測靈敏度高于miR-122、HMGB 1、CCK-18(P<0.05),表明血清因子聯(lián)合檢測能顯著提高診斷靈敏度,最大程度避免對單純性、復(fù)雜性膽石癥的誤診漏診。綜上,復(fù)雜性膽石癥患者血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平顯著升高,且為其危險(xiǎn)因素,聯(lián)合檢測能提高診斷靈敏度,為臨床早期治療提供科學(xué)性依據(jù)。