駱豫江
(廣東精博生物技術(shù)有限公司,廣東 廣州 510385)
諾卡氏菌屬于革蘭氏陽(yáng)性菌,為絲狀?,F(xiàn)今從魚(yú)分出4種諾卡氏菌:殺鮭諾卡氏菌、粗形諾卡氏菌、星狀諾卡氏菌和魚(yú)諾卡氏菌。其中魚(yú)諾卡氏菌是主要致病原,可感染42種海、淡水魚(yú),自從1969年第一例在日本報(bào)道以來(lái),已經(jīng)嚴(yán)重危害到很多地區(qū)特別是亞洲的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),主要危害的經(jīng)濟(jì)魚(yú)有大黃魚(yú),烏鱧,四指馬鲅,紅鯛魚(yú)等。
諾卡氏菌病的流行季節(jié)較長(zhǎng),全年可發(fā)病,潛伏期長(zhǎng)。水溫在15~32℃時(shí)都可流行,以水溫在25~28℃時(shí)發(fā)病最為嚴(yán)重,最適pH 為6.5~7.0。在珠三角地區(qū),有兩個(gè)主要發(fā)病高溫期:①清明節(jié)前后水溫上升到25℃時(shí),帶有諾卡氏菌的舊魚(yú)往往會(huì)暴發(fā)諾卡氏菌病而導(dǎo)致大量死亡。②中秋過(guò)后水溫下降到28℃或以下,感染諾卡氏菌的新魚(yú)出現(xiàn)死亡,如果這個(gè)階段反復(fù)降溫,死亡量會(huì)更大。該病發(fā)病病程較長(zhǎng),發(fā)病程度不呈急性型,水溫低于23℃也可發(fā)病。
諾卡氏菌病又叫“結(jié)節(jié)病”。感染在苗期和初期通常是隱形的,感染和發(fā)病過(guò)程極其漫長(zhǎng),只有在成魚(yú)階段才出現(xiàn)典型狀況和顯著危害。發(fā)病初期食欲下降,病魚(yú)反應(yīng)遲鈍、漂浮于水面、離群獨(dú)游。在大多數(shù)魚(yú)中會(huì)觀察到皮膚病變、壞死和潰瘍的不同癥狀,特別是在鰭基部多見(jiàn)。皮膚的真皮層在整個(gè)過(guò)程中表現(xiàn)出急性炎癥。形成結(jié)節(jié)直徑為0.1~0.5厘米,分別存在于所有器官如肝臟、脾臟、心臟、腎臟、鰓和鰾中。在最近的研究中發(fā)現(xiàn),諾卡氏菌病癥狀還包括嗜睡、胸出血或局灶性真皮潰瘍、眼球突出、壞死變性、脫屑、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和腹脹等。
1.魚(yú)種質(zhì)量差 魚(yú)種質(zhì)量如果一開(kāi)始就不好,帶有病毒或過(guò)多致病菌,會(huì)使魚(yú)的抵抗力非常差,易感染,易發(fā)病。
2.放養(yǎng)密度高 放養(yǎng)密度高也會(huì)使養(yǎng)殖環(huán)境惡劣,如果技術(shù)水平和管理工作跟不上,會(huì)造成魚(yú)的大小和體質(zhì)出現(xiàn)差異。而且高密度也增加了個(gè)體接觸的機(jī)會(huì)和傳染的風(fēng)險(xiǎn)。
3.養(yǎng)殖環(huán)境差 保持養(yǎng)殖環(huán)境優(yōu)良也是保證魚(yú)體健康的重要因素,氧氣不足、亞硝酸鹽過(guò)高、pH過(guò)高或過(guò)低都能讓病菌加快繁殖。
1.分離和培養(yǎng) 在病情嚴(yán)重時(shí),感染諾卡氏菌的魚(yú)的外部和解剖癥狀都較明顯,諾卡氏菌可用選擇性培養(yǎng)基分離培養(yǎng),根據(jù)臨床癥狀、組織病理及病原菌形態(tài)等特征,從病魚(yú)結(jié)節(jié)處取少許膿汁制成涂片,進(jìn)行革蘭氏染色,鏡檢發(fā)現(xiàn)有陽(yáng)性的分枝狀菌,基本可以確診。
2.基于血清和抗體的檢測(cè)方法 在有抗體的基礎(chǔ)上,可以用免疫組化(IHC)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、免疫印跡(Westernblot)等檢測(cè)方法來(lái)檢測(cè)諾卡氏菌。
3.PCR 法 相對(duì)于傳統(tǒng)的檢測(cè)方法,PCR 法具有靈敏、準(zhǔn)確和快速的優(yōu)勢(shì)。每種不同的細(xì)菌含有獨(dú)特的16S序列,PCR法可以在1~2小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增出諾卡氏菌的16S序列用于鑒定和檢測(cè),又可以分為普通PCR和熒光定量PCR法。
對(duì)抗魚(yú)的致病性疾病,許多疫苗已被證明有效,疫苗接種是最有力的預(yù)防策略之一。科學(xué)家們已經(jīng)研發(fā)了一系列的DNA 疫苗,如基于pAg85L、FHA、PspA或TerD的DNA疫苗,將會(huì)有廣闊的應(yīng)用前景。
選擇健康苗種。最好選擇經(jīng)過(guò)病害檢測(cè)后的苗種,以保證苗種健康。養(yǎng)殖密度高、受寄生蟲(chóng)感染的魚(yú)更易患此病,且致死率更高。因此,養(yǎng)殖生產(chǎn)中可通過(guò)降低放養(yǎng)密度或合理配置增氧設(shè)備、避免魚(yú)體損傷、做好寄生蟲(chóng)預(yù)防工作等措施預(yù)防此病。
水質(zhì)較差是造成諾卡氏菌大量繁殖的第一要素。日常做好水質(zhì)調(diào)控和改底工作,定期使用改底產(chǎn)品,優(yōu)化塘底,調(diào)節(jié)水質(zhì)pH,控制好亞硝酸鹽含量。避免過(guò)度投喂,從而減輕魚(yú)肝臟、腸道負(fù)擔(dān)。定期補(bǔ)充多維等內(nèi)服產(chǎn)品,增強(qiáng)抵抗力。
可以用檢測(cè)試劑盒定期對(duì)養(yǎng)殖魚(yú)進(jìn)行諾卡氏菌的檢測(cè),及早發(fā)現(xiàn),及早治療,及早避免更大的損失。
諾卡氏菌發(fā)病呈慢性型,慢病必須慢治,現(xiàn)今治療諾卡氏菌病還沒(méi)有特效藥。諾卡氏菌對(duì)很多抗生素都有抗藥性,但土霉素、林可霉素和紅霉素是對(duì)諾卡氏菌比較有效的抗生素。
了解病原體的來(lái)源、傳播和抗微生物藥物敏感性潛力,以及遺傳多樣性、致病性和抗藥性潛力和種群結(jié)構(gòu)可改善養(yǎng)殖管理措施。雖然已經(jīng)開(kāi)發(fā)了抗生素和疫苗預(yù)防該病,養(yǎng)魚(yú)場(chǎng)中這種病原體的存在還需要不斷監(jiān)測(cè),研究人員仍然需要探索噬菌體、藥用植物、益生菌和免疫刺激劑作為潛在的預(yù)防體系。