何 芳，曲 英

(大連市普蘭店區(qū)生態(tài)環(huán)境事務(wù)服務(wù)中心，遼寧 大連 116200)

1 引言

松材線蟲病又稱松樹萎蔫病(Pine wilt disease)，是由松材線蟲寄生在松樹體內(nèi)引起的一種毀滅性森林病害。該病具有致死率高、極難防治等特點(diǎn)，被列為國際Ⅰ級檢疫對象[1],給我國林業(yè)生態(tài)系統(tǒng)造成嚴(yán)重危害[2]。由于松材線蟲病的傳播速度非常迅速，危害性極高，松樹感染松材線蟲病后難以治愈，病死率極高，因此又被稱之為 “松樹癌癥”[15]。松材線蟲病適生范圍廣、傳播速度快、寄主種類多、感病松樹死亡率高、防治困難[16]。在熱帶、亞熱帶地區(qū)蔓延較為迅速、危害嚴(yán)重，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)損失[17]。而我國是遭受松材線蟲病危害最嚴(yán)重的國家之一，目前約有17個(gè)省區(qū)仍受松材線蟲病影響[3]。2016年松材線蟲病在遼寧首次發(fā)現(xiàn)后，迅速擴(kuò)散蔓延，目前已在沈陽、大連、丹東、鐵嶺等7市20個(gè)縣(區(qū))發(fā)生[4]。

松材線蟲的不同生長階段(蟲卵期、幼蟲期、成蟲期)的生長特性有所不同，具有不同的危害程度[5]。該病害早期疾病癥狀不明顯，很難被發(fā)現(xiàn)[6]。主要依靠松褐天牛攜帶傳播，其生活史主要發(fā)生在松樹或松褐天牛體內(nèi)，而松褐天牛的幼蟲主要在松樹體內(nèi)活動(dòng)[7]。松材線蟲進(jìn)入松樹木質(zhì)部的途徑為天牛取食樹皮時(shí)的傷口，通過取食寄主植物的上皮細(xì)胞或樹脂道，從而大量繁殖逐漸擴(kuò)散至全株[8]，也可通過在衰弱木傷口上產(chǎn)卵進(jìn)行傳播[9]。由于該疫病在我國出現(xiàn)較晚，相關(guān)技術(shù)人員對松材線蟲病的認(rèn)識不夠深入，因此對我國的森林資源造成巨大威脅，并因此浪費(fèi)了大量的人力、物力[10]。和普通的植物病害相比，松材線蟲病具有較為復(fù)雜的發(fā)病條件，寄主作物、媒介昆蟲、松材線蟲以及發(fā)病環(huán)境等共同導(dǎo)致了松材線蟲病的發(fā)生與流行[11]。

松材線蟲屬于線形動(dòng)物門，是目前我國危害最嚴(yán)重的入侵物種之一[12]。該蟲病源于北美洲等地，松樹感染松材線蟲后致病率為100%，且防治極為困難[13]。松樹如果患病，將在6周左右死亡，防控如果不及時(shí)，松樹林可在幾年內(nèi)大面積毀滅殆盡[14]。

遼寧地區(qū)森林資源豐富，林產(chǎn)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)，具有大型林業(yè)產(chǎn)業(yè)基地和木材集散地，交通網(wǎng)絡(luò)發(fā)達(dá)。自2016年大連市出現(xiàn)松樹線蟲病害后，病害發(fā)生區(qū)已經(jīng)向北推移超400 km[18]。2018年遼寧省被國家林業(yè)和草原局正式列為松材線蟲病新發(fā)生區(qū)，疫情發(fā)生面積3400 hm2，由松材線蟲造成的經(jīng)濟(jì)損失和生態(tài)損失難以估量，疫情防控形勢極為嚴(yán)峻[19]。研究發(fā)現(xiàn)，注干施藥技術(shù)是將有效成分注入樹體，發(fā)揮藥效主要依靠樹木蒸騰作用傳導(dǎo)分布藥劑，藥劑實(shí)施精準(zhǔn)、防治效率高，適合對我國松材線蟲病的主動(dòng)預(yù)防[20]。本研究選用目前大連普蘭店地區(qū)市售的4種殺線蟲劑，利用藥劑浸漬法對松材線蟲分別進(jìn)行了毒力測定，以期為當(dāng)?shù)厮删€蟲病害的防治提供參考。

2 試驗(yàn)方法

2.1 試驗(yàn)藥劑

30%克線磷乳油(山東百士威農(nóng)藥有限公司)、3%克百威顆粒劑(汝州市試劑廠)、30%阿維菌素乳油(威海韓孚生化藥業(yè)有限公司)、5%高效氯氰菊酯乳油(紹興天諾農(nóng)化有限公司)。

2.2 試驗(yàn)用蟲

松材線蟲：將松材線蟲接種在瓊脂培養(yǎng)基上(灰葡萄孢菌絲體)，在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d，待菌絲體被食用完后放入4 ℃冰箱備用。采用貝曼漏斗分離法收集，使用3% H2O2進(jìn)行表面消毒7 min，然后用ddH2O清洗至少3次后為實(shí)驗(yàn)所用松材線蟲。

2.3 藥劑處理

采用浸漬法測定藥劑對線蟲的毒力。具體步驟如下：吸取2 mL待測藥液于直徑6 cm的凹面皿中，隨后在每皿中挑入100條處理好的松材線蟲，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)12、24、36、48 h；于解剖鏡下利用針刺觸碰法判斷線蟲的死活情況。

計(jì)算死亡率(%)：死亡率=死亡線蟲數(shù)/處理線蟲數(shù)×100%。同一處理重復(fù)3次。

2.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，SPSS26.0計(jì)算EC50值。

3 結(jié)果與討論

3.1 不同藥劑對松材線蟲的毒力效果

不同藥劑對松材線蟲的殺死率情況如表1所示。

由表1可知，不同的藥劑對松材線蟲表現(xiàn)出不同的致死作用，同時(shí)不同濃度的藥劑毒力效果也有所差異。其中毒力效果表現(xiàn)最好的藥劑為30%阿維菌素乳油，毒力隨著藥劑濃度的增加而增強(qiáng)，當(dāng)濃度為10、20、30、40、50 g/L時(shí)，用藥12 h時(shí)松材線蟲的死亡率分別為11.26、23.59、35.12、55.67、63.13%，并隨著時(shí)間的增加毒力持續(xù)升高，當(dāng)時(shí)間達(dá)到48 h，50 g/L濃度藥劑下松材線蟲的死亡率高達(dá)91.86%；30%克線磷乳油毒力效果相對較差，當(dāng)濃度為10、20、30、40、50 g/L時(shí)，用藥12 h時(shí)松材線蟲的死亡率分別為2.35、12.37、23.24、34.51、41.39%，當(dāng)時(shí)間達(dá)到48 h，50 g/L濃度藥劑下松材線蟲的死亡率為61.35%；5%高效氯氰菊酯乳油與3%克百威顆粒劑毒力效果最差，當(dāng)時(shí)間達(dá)到48 h，兩種藥劑濃度為50 g/L時(shí)，松材線蟲的死亡率分別為18.53%、21.35%。

3.2 30%克線磷乳油在不同時(shí)間段對松材線蟲的毒力效果

30%克線磷乳油在不同時(shí)間段毒力效果如表2所示。

由表2可知，30%克線磷乳油在12 h、24 h、36 h、48 h各階段表現(xiàn)出不同的毒力效果，EC50值分別為57.576、55.445、47.240、42.471 g/L，隨著時(shí)間的增長，半數(shù)致死量降低較為緩慢。EC50值越小，說明該藥劑對松材線蟲抑制作用越好。

表1 不同藥劑對松材線蟲的殺死率

3.3 30%阿維菌素乳油在不同時(shí)間段對松材線蟲的毒力效果

30%阿維菌素乳油在不同時(shí)間段毒力效果如表3所示。

表2 30%克線磷乳油在不同時(shí)間段毒力

表3 30%阿維菌素乳油在不同時(shí)間段毒力

由表3可知，30%阿維菌素乳油在12 h、24 h、36 h、48 h各階段表現(xiàn)出不同的毒力效果，EC50值分別為37.794、28.636、22.046、16.433 g/L，與30%克線磷乳油相比，半數(shù)致死量顯著降低，毒力效果較好。在用藥48 h時(shí)，30%阿維菌素乳油的EC50值為16.433 g/L，顯著低于30%克線磷乳油(42.471 g/L)。

4 結(jié)論

本文選用目前大連普蘭店地區(qū)市售的四種殺線蟲劑，即30%克線磷乳油、3%克百威顆粒劑、30%阿維菌素乳油、5%高效氯氰菊酯乳油，利用藥劑浸漬法對松材線蟲分別進(jìn)行了毒力測定。結(jié)果顯示：不同的藥劑對松材線蟲表現(xiàn)出不同的致死作用，同時(shí)不同濃度的藥劑毒力效果也有所差異，毒力隨著藥劑濃度或時(shí)間的增加而增強(qiáng)。毒力效果表現(xiàn)最好的藥劑為30%阿維菌素乳油，當(dāng)用藥時(shí)間達(dá)到48 h，50 g/L濃度藥劑下松材線蟲的死亡率高達(dá)91.86%；其次為30%克線磷乳油，當(dāng)用藥時(shí)間達(dá)到48 h，50 g/L濃度藥劑下松材線蟲的死亡率高達(dá)61.35%；5%高效氯氰菊酯乳油與3%克百威顆粒劑毒力效果最差，當(dāng)時(shí)間達(dá)到48 h，兩種藥劑濃度為50 g/L時(shí)，松材線蟲的死亡率分別為18.53%、21.35%。