王會敏，王洪濤，張洪軍，王娟，尹利利，張建軍，陳瑞蘭，劉佳興，于洪浩，趙曉光，劉國臣，張秀麗

（1.河北省圍場縣動物疫病預防控制中心，河北 承德 068450；2.河北省承德市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局科技教育工作站，河北 承德 067000；3.四合永畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務中心站，河北 承德 068451）

羊梭菌性疾病由梭狀芽胞桿菌屬中的微生物所引起的一類傳染性疾病，包括羊快疫、羊腸毒血癥、羊猝疽、羊黑疫、羔羊痢疾等病。此病的特點是發(fā)病快、病程短、病死率高，對養(yǎng)羊業(yè)危害極大。預防此病除了加強飼養(yǎng)管理，疫苗免疫是最有效的手段。本次試驗通過對試驗羊只注射三聯(lián)四防疫苗后，定期采集血清檢測抗體，對疫苗免疫效果進行評估。通過本次試驗找到最佳的免疫時間，能有效控制本地區(qū)的羊梭菌病的發(fā)生。

1 試驗材料

在本地4 個試驗場選取200 只未感染梭菌病的羊（后經(jīng)試驗驗證），每個試驗場選取50 只羊。

2 試驗藥品

羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥四聯(lián)干粉滅活疫苗 （廠家：哈藥集團生物疫苗有限公司）。山羊魏氏梭菌?。╟p）ELISA 檢測試劑盒（廠家：上?？瓢┥铮┊a(chǎn)氣莢膜梭菌病核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）（廠家：廣州達安生物科技有限公司）。

3 試驗方法

免疫前對羊只進行耳標標號，并用紅色自噴漆進行標記，在每次采血時用另外顏色進行噴記，標記后對200 只羊進行疫苗注射，每只羊按說明書要求劑量進行免疫，每只羊注射1 毫升，并于免疫后10 天、20 天、30 天、180 天、240 天、360 天、420 天靜脈采血≥5 毫升，常溫放置析出血清后，通過酶聯(lián)免疫吸附實驗進行抗體效力檢樣，觀察免疫效力維持的時間。

4 健康羊確定及注射疫苗后的狀態(tài)

在未注射前采集血液，進行梭菌病病原學檢測，經(jīng)過PCR 病原學及Elisa 病原學檢測后，確定本次試驗羊只為未感染梭菌病的羊只。

免疫后對羊只日常情況進行觀察，發(fā)現(xiàn)個別羊只精神萎靡、采食下降、飲水偏少等癥狀，但此癥狀多在1 天內(nèi)消失，絕大多數(shù)羊只在免疫后無不良反應。

5 血清采集及酶聯(lián)免疫吸附（ELisa）實驗

已經(jīng)進行初免的羊只于免疫后10 天、20天、30 天、60 天、90 天、120 天、180 天、240 天、360 天、420 天靜脈采血收集血清后，常溫放置析出血清后，通過酶聯(lián)免疫吸附實驗進行抗體效力檢樣，觀察免疫效力維持的時間。具體實驗結(jié)果見表1。

6 結(jié)果

從表1、圖1 中可以看出，用疫苗免疫后10天開始已經(jīng)有抗體產(chǎn)生，在20 天時產(chǎn)生完全保護抗體，此抗體保護一直持續(xù)至240 天，360 天時抗體逐漸減弱，至420 天后所有抗體水平均消失。此試驗結(jié)果與李勇生、張登基等的試驗結(jié)果基本一致，與魏曉云、霍子東等在所做的對比試驗中的試驗結(jié)果也基本符合。為了使梭菌疫苗處于保護期內(nèi)，建議在每年的4 月份與10 月份進行免疫，2 次/年，可有效防止梭菌病的發(fā)生。

表1 Elisa 抗體檢測結(jié)果

圖1 梭菌病抗體合格率

再次對200 只產(chǎn)生免疫抗體的羊只進行PCR 病原學檢測，檢測結(jié)果如下表2。

表2 PCR 病原學檢測結(jié)果

通過此次檢驗結(jié)果可知：有極少數(shù)量的羊只在注射疫苗免疫后，仍能感染梭菌病，成為隱藏的攜帶者，本次實驗達到4%，這4%在日常生產(chǎn)管理中不到位的情況下，會把病毒傳播到整個羊群，危害養(yǎng)殖戶安全?？梢娨呙缑庖卟荒芡耆鸬奖Ｗo作用，若要健康養(yǎng)殖，還應該在日常中加強飼養(yǎng)管理。

7 討論

對于養(yǎng)殖戶來說僅僅通過注射疫苗防治疫病是遠遠不夠的。為了有效防治羊梭菌病發(fā)生，還要在平時加強飼養(yǎng)管理。在農(nóng)區(qū)或者牧區(qū)春夏之際少搶青、搶茬；秋季避免吃過量的結(jié)籽飼草，精料、粗料、青料搭配合理。在常發(fā)地區(qū)，應定期注射“羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥四聯(lián)苗”或者“羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥、羊黑疫五聯(lián)苗”。若遇到發(fā)病群，有條件應立即搬圈，避免在低洼潮濕地方，轉(zhuǎn)移到相對高燥的地方放牧。發(fā)病羊一般病程較短，往往來不及救治，病程稍長的除了用中藥治療外，亦可用西藥抗生素、磺胺類藥物共同治療。對于體質(zhì)瘦弱及羔羊要單獨飼喂，增加營養(yǎng)，提高抵抗力。對圈舍和經(jīng)?；顒訄鏊ㄆ谙荆\草料、糞便等運輸車輛定期消毒。飼草飼料嚴格管理，防治霉變。