羅婉逸 韓居熺 周學(xué)東,2 彭顯,2 鄭欣,2

1.口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國(guó)家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院 成都 610041；2.口腔疾病研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國(guó)家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心四川大學(xué)華西口腔醫(yī)院牙體牙髓病科 成都 610041

具核梭桿菌（Fusobacterium nucleatum，F(xiàn).nucleatum）是革蘭陰性厭氧菌，廣泛定植于人體口腔和腸道等器官，與牙周病的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系[1-2]。作為一種機(jī)會(huì)致病菌，F(xiàn).nucleatum還被發(fā)現(xiàn)與全身系統(tǒng)性疾病相關(guān)，如心血管疾病[3]、骨關(guān)節(jié)炎[4]、妊娠不良事件[5]及各系統(tǒng)腫瘤[6-9]等。近年來(lái)，F(xiàn).nucleatum被發(fā)現(xiàn)與結(jié)直腸癌（colorectal cancer）的生物學(xué)行為改變有直接的密切關(guān)系，二者的關(guān)系得到了廣泛的研究。本文就F.nucleatum黏附、定植、遷移以及對(duì)結(jié)直腸癌的影響與作用機(jī)制進(jìn)行綜述，為進(jìn)一步研究F. nucleatum與結(jié)直腸癌之間的相互作用提供依據(jù)。

1 牙周炎與結(jié)直腸癌相關(guān)性的研究

目前流行病學(xué)的研究結(jié)果并不支持牙周炎與結(jié)直腸癌之間有明確的關(guān)聯(lián)性[10]。Michaud等[11]通過(guò)隨訪調(diào)查發(fā)現(xiàn)：在排除已知風(fēng)險(xiǎn)因素（包括吸煙史和飲食因素）的影響后，患結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)與自我報(bào)告的牙周炎（風(fēng)險(xiǎn)比為1.05，95%置信區(qū)間為0.90~1.23）或牙齒缺失（風(fēng)險(xiǎn)比為1.10，95%置信區(qū)間為0.87~1.37）并沒(méi)有顯著聯(lián)系。在一項(xiàng)針對(duì)日本成年人的病例對(duì)照研究[12]中，研究者采用牙齒脫落數(shù)量作為牙周炎的代替指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與余留牙齒在21顆以上的群體相比，不同程度的牙齒缺失（剩余0、1~8和9~20 顆牙齒）和患結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)之間沒(méi)有顯著關(guān)聯(lián)。Ren等[13]進(jìn)行了一項(xiàng)嵌套病例對(duì)照研究，該研究基于3個(gè)隊(duì)列，在分析結(jié)果時(shí)將其中2個(gè)中國(guó)隊(duì)列合并，為上海男性和上海女性（病例組n=825，對(duì)照組n=3 298），第3個(gè)是美國(guó)南方社區(qū)隊(duì)列（病例組n=238，對(duì)照組n=2 258）。在上海男性/上海女性或美國(guó)南方社區(qū)隊(duì)列研究中，結(jié)果均發(fā)現(xiàn)不同的牙齒脫落數(shù)量與結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)之間沒(méi)有關(guān)聯(lián)。還有研究[14-15]將患者自我報(bào)告作為牙周炎的代替指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在絕經(jīng)期婦女[14]和從不吸煙[15]的婦女中，牙周炎和患結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)沒(méi)有相關(guān)性。

結(jié)直腸癌患者病灶處的F.nucleatum與口腔中的具有同源性。Komiya等[16]通過(guò)隨機(jī)引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（arbitrarily primed-polymerase chain reaction，AP-PCR）技術(shù)比對(duì)了結(jié)直腸癌患者腫瘤病灶處與唾液中的F. nucleatum，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：超過(guò)40%的患者結(jié)直腸癌腫瘤處與口腔中具有相同的F.nucleatum菌株，提示腸道F.nucleatum主要起源于口腔。F.nucleatum在何種情況下可以從口腔位移到結(jié)直腸并對(duì)結(jié)直腸癌的進(jìn)展產(chǎn)生影響？Kitamoto等[17]的研究發(fā)現(xiàn)：口腔病原菌只有在同時(shí)滿足腸道炎癥及牙周炎癥兩個(gè)狀態(tài)時(shí)，才能在腸道異位定植，并進(jìn)一步通過(guò)炎癥因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1β及致病性T細(xì)胞加劇腸道炎癥，腸道炎癥的加劇會(huì)導(dǎo)致結(jié)直腸癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的增加，促進(jìn)炎癥向結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)變[18-20]。腸道炎癥狀態(tài)下的腸道菌群缺乏定植抗性，同時(shí)牙周炎增加了口腔病原體的豐度并增加了口腔病原體成功通過(guò)胃中酸性環(huán)境的可能性，使得攝入的病原體達(dá)到一定的閾值，得以在腸道成功定植。由此可見(jiàn)，單純患有牙周炎的患者，腸道菌群存在定植抗性，口腔來(lái)源的病原菌難以異位定植；而對(duì)于本身存在腸道炎癥這一狀態(tài)的患者而言，牙周炎或許會(huì)成為一個(gè)促進(jìn)炎癥向癌癥轉(zhuǎn)變的風(fēng)險(xiǎn)因素。

2 具核梭桿菌的遷移機(jī)制

基于以上研究結(jié)果，F(xiàn).nucleatum需要從口腔遷移到腸道才能進(jìn)一步發(fā)揮作用，而F.nucleatum的遷移機(jī)制尚未完全明晰。目前學(xué)者們[21-23]提出了具有較高可能性的兩條途徑：一是自口腔通過(guò)消化道到達(dá)腸道[22]；二是從口腔進(jìn)入血液，通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)到達(dá)腸道[23]。目前已有大量相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究用于佐證以上兩個(gè)觀點(diǎn)。

2.1 通過(guò)消化道遷移

臨床研究[24-26]發(fā)現(xiàn)：在結(jié)直腸癌患者中，F(xiàn).nucleatum在腫瘤病灶中的檢出率從直腸（2%）向盲腸（11%）逐漸富集，所有子位點(diǎn)之間呈線性上升（P<0.000 1），腫瘤位置靠近上端的結(jié)直腸癌患者中F. nucleatum豐度較高，盲腸癌的F. nucleatum檢出率最高?；谶@些研究結(jié)果，Nakajima等[22]提出了F.nucleatum可自口腔吞入，經(jīng)過(guò)消化道（食管、胃、小腸）到達(dá)結(jié)直腸，并通過(guò)特定的黏附機(jī)制定植于腫瘤病灶處的觀點(diǎn)。在Apc-Min/+小鼠模型中，經(jīng)口飼喂F.nucleatum可以促進(jìn)小鼠結(jié)直腸腫瘤的發(fā)展，提示F.nucleatum是從口腔進(jìn)入胃腸道[27]。

F.nucleatum作為口腔常見(jiàn)的條件致病菌，是長(zhǎng)期存在于正常人體的革蘭陰性桿菌，可伴隨攝食飲水等日常活動(dòng)進(jìn)入胃腸道。除此以外，F(xiàn).nucleatum還可隨分泌的唾液進(jìn)入消化道下段。健康成人1 d分泌的唾液量為0.5~1.5 L[28]，通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）對(duì)健康成人唾液中的F.nucleatum進(jìn)行定量，數(shù)量可達(dá)（6.35±0.78） log10copies·mL-1，在結(jié)直腸癌患者體內(nèi)更是高達(dá) （6.89±1.07） log10copies·mL-1[29]，每天均有大量的F. nucleatum持續(xù)地被吞入胃中。F.nucleatum進(jìn)入胃內(nèi)后，胃酸會(huì)對(duì)不能抵抗酸性環(huán)境的細(xì)菌起到殺滅作用[30]。雖然F. nucleatum的抗酸機(jī)制還未得到具體闡明，但在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[31-32]中，無(wú)菌小鼠體內(nèi)F.nucleatum具有克服小鼠胃內(nèi)物理屏障，定植到腸道內(nèi)的能力。研究[32]表明：F.nucleatum可在無(wú)菌小鼠的腸道內(nèi)定植并占據(jù)優(yōu)勢(shì)，但在接種腸道菌群后，F(xiàn).nucleatum豐度顯著下降；健康個(gè)體的腸道菌群對(duì)F.nucleatum有顯著的抵抗作用，F(xiàn).nucleatum難以突破微生物屏障。但在結(jié)直腸癌患者體內(nèi)，腸道菌群發(fā)生改變[33]，有助于維持腸道生態(tài)穩(wěn)定的有益菌數(shù)量減少[34]，可引起炎癥或代謝性疾病的條件致病菌增多，微生物屏障的抵抗作用減弱，F(xiàn).nucleatum得以成功定植。

2.2 通過(guò)血液循環(huán)系統(tǒng)遷移

除了消化道遷移外，血液循環(huán)是另一種口腔細(xì)菌定植腸道的途徑[35]。研究[35]發(fā)現(xiàn)，采取尾靜脈注射的方式向小鼠給予F. nucleatum，發(fā)現(xiàn)F. nucleatum大量定植于小鼠結(jié)直腸腫瘤組織處，且腫瘤組織中F. nucleatum的豐度明顯高于鄰近正常組織。

所有的日?；顒?dòng)，包括刷牙、咀嚼、吞咽等都有可能導(dǎo)致F.nucleatum從齦溝或口腔內(nèi)的細(xì)小傷口進(jìn)入血液[36-37]。牙周炎發(fā)生時(shí)，F(xiàn).nucleatum數(shù)量顯著增加，牙周炎患者刷牙后15 min，血液中的細(xì)菌密度可達(dá)每毫升104個(gè)，同時(shí)牙齦內(nèi)血管因炎癥擴(kuò)張，大量F.nucleatum得以進(jìn)入人體血液循環(huán)[35,38]。除此之外，F(xiàn). nucleatum可通過(guò)黏附素FadA與血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣黏連蛋白（VE-cadherin）結(jié)合，破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的細(xì)胞結(jié)合，使得血管通透性增加，F(xiàn).nucleatum得以通過(guò)疏松的細(xì)胞間連接進(jìn)入血管內(nèi)，進(jìn)而通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)全身各處組織中[39]。

進(jìn)入血液循環(huán)后，F(xiàn).nucleatum面臨著宿主免疫系統(tǒng)的威脅，為逃避宿主體內(nèi)免疫系統(tǒng)的吞噬作用，細(xì)菌會(huì)入侵并寄生于宿主細(xì)胞內(nèi)[40]。F.nucleatum是一種兼性胞內(nèi)寄生菌，可入侵宿主的巨噬細(xì)胞，并通過(guò)表達(dá)吲哚胺2,3-二氧化酶（indoleamine 2,3-dioxygenase，IDO）抑制外周淋巴細(xì)胞活性，使得被感染的巨噬細(xì)胞免于被清除[41]。

3 F. nucleatum 在結(jié)直腸癌組織中黏附定植的機(jī)制

F.nucleatum到達(dá)腸道后，在腫瘤病灶處富集，正常腸黏膜處F. nucleatum的豐度明顯低于病灶處[42]。F. nucleatum在腫瘤病灶處高度聚集的可能原因有兩個(gè)：一是F.nucleatum與結(jié)直腸癌細(xì)胞之間存在特異性結(jié)合，二是F.nucleatum對(duì)腫瘤內(nèi)部的微環(huán)境有較強(qiáng)的適應(yīng)能力。

3.1 F.nucleatum與結(jié)直腸癌細(xì)胞的特異性結(jié)合

Rubinstein等[43]通過(guò)共免疫沉淀檢測(cè)方法檢測(cè)到，結(jié)直腸癌病灶處，F(xiàn).nucleatum表面的黏附素FadA可以與結(jié)直腸癌表面的上皮細(xì)胞鈣黏蛋白E-cadherin特異性結(jié)合，介導(dǎo)F. nucleatum黏附侵襲。黏附素FadA是F.nucleatum的一種毒力因子，起到黏附侵襲上皮細(xì)胞的作用。E-cadherin是一類(lèi)鈣依賴的細(xì)胞黏附糖蛋白，每個(gè)蛋白由5個(gè)胞外重復(fù)結(jié)構(gòu)域（EC1—EC5）、一個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域及一個(gè)結(jié)合p120連環(huán)素和β-連環(huán)素的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成。FadA與E-cadherin的結(jié)構(gòu)域EC3結(jié)合，進(jìn)一步通過(guò)激活E-cadherin介導(dǎo)的信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。糖類(lèi)腫瘤標(biāo)記物gal-GalNac作為結(jié)直腸癌的生物標(biāo)記物，在結(jié)直腸癌細(xì)胞表面大量表達(dá)，可被F.nucleatum表面的黏附素Fap2識(shí)別，并在特異性結(jié)合后完成定植。在小鼠結(jié)直腸癌模型中，相比于野生型的F.nucleatum，天然缺乏Fap2的菌株或滅活Fap2的突變株與表達(dá)gal-GalNAc的結(jié)直腸癌細(xì)胞結(jié)合率明顯下降，再次證明Fap2可介導(dǎo)F. nucleatum與 gal-GalNAc結(jié)合[23]。

3.2 F.nucleatum對(duì)腫瘤內(nèi)部微環(huán)境的適應(yīng)能力

為了滿足腫瘤快速發(fā)展的需求，腫瘤采用了與人體普通細(xì)胞不同的代謝機(jī)制。這種特殊的代謝方式導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部微環(huán)境呈酸性，乏氧，和/或缺乏免疫細(xì)胞所需關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的狀態(tài)[32]。無(wú)氧環(huán)境中，F(xiàn).nucleatum具有相對(duì)較高的活性與繁殖力，同時(shí)缺乏免疫細(xì)胞的環(huán)境使得F.nucleatum的數(shù)量得以迅速增加，使F.nucleatum定植并快速繁殖[44-45]。結(jié)直腸癌細(xì)胞攝入葡萄糖能力較強(qiáng)，腫瘤微環(huán)境中乏糖，F(xiàn).nucleatum可利用葡萄糖以外的碳源作為營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，F(xiàn).nucleatum可以通過(guò)氨基酸的發(fā)酵獲得能量，對(duì)腫瘤微環(huán)境有較強(qiáng)的適應(yīng)能力[46-47]。F.nucleatum通過(guò)作用于調(diào)控糖酵解的關(guān)鍵酶alpha-Enolase的長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA enolase1-intronic transcript 1， lncRNA ENO1-IT1）促進(jìn)結(jié)直腸癌進(jìn)行糖酵解，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)[48]。F.nucleatum通過(guò)上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子SP1（specific protein 1）與lncRNA ENO1-IT1啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合率來(lái)激活lncRNA ENO1-IT1的轉(zhuǎn)錄。升高的ENO1-IT1作為組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶的編碼基因 （lysine acetyltransferase 7，KAT7） 的導(dǎo)向模塊，指定其靶基因（包括ENO1）上的組蛋白修飾模式，改變結(jié)直腸癌的生物學(xué)功能。本課題組[49]研究發(fā)現(xiàn)：F.nucleatum通過(guò)促進(jìn)組蛋白乙?；揎梺?lái)上調(diào)人血管生成素樣蛋白4（angiopoietin-like 4，ANGPTL4）表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞攝入葡萄糖及增強(qiáng)糖酵解水平。F.nucleatum在腫瘤組織內(nèi)的定植與生存依賴于腫瘤細(xì)胞高水平的糖酵解活性，提示兩者可在腫瘤微環(huán)境中形成互利共生關(guān)系。

4 F.nucleatum影響結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)制

4.1 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)

研究[40,43,50]表明：F. nucleatum表達(dá)的黏附素FadA與結(jié)直腸癌細(xì)胞的E-cadherin特異性結(jié)合后可通過(guò)多種機(jī)制激活并上調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)調(diào)節(jié)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。Rubinstein等[50]發(fā)現(xiàn)：通過(guò)FadA與結(jié)直腸癌細(xì)胞的E-cadherin特異性結(jié)合，F(xiàn).nucleatum能促進(jìn)表達(dá)E-cadherin的結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖，但對(duì)不表達(dá)E-cadherin的結(jié)直腸癌細(xì)胞無(wú)明顯促進(jìn)作用。E-cadherin是一種通過(guò)β-鏈蛋白（β-catenin）發(fā)揮作用的腫瘤抑制因子[51-52]，正常情況下可抑制F.nucleatum導(dǎo)致的腫瘤生長(zhǎng)與炎癥反應(yīng)，但FadA與E-cadherin結(jié)合后，激活了Wnt/β-catenin信號(hào)通路，導(dǎo)致原癌基因過(guò)表達(dá)，上調(diào)相應(yīng)蛋白G1/S-特異性周期蛋白-D1的編碼Cyclin D1的過(guò)表達(dá)，促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。除此之外，F(xiàn)adA與E-cadherin結(jié)合后，還可以上調(diào)信號(hào)蛋白ANXA1（Annexin A1） 的表達(dá)。在Rubinstein等[50]的研究中發(fā)現(xiàn)：Annexin A1 是一種Wnt/βcatenin信號(hào)調(diào)節(jié)器，在腫瘤細(xì)胞中特異性表達(dá)，是Wnt/β-catenin信號(hào)通路激活所必需的。同時(shí)，F(xiàn)adA與Annexin A1陽(yáng)性的癌細(xì)胞之間存在正反饋循環(huán)，可以促進(jìn)癌細(xì)胞迅速增殖。

F.nucleatum可通過(guò)RAS蛋白/絲裂原活化蛋白激酶通路（Ras-Raf-MEK-ERK mitogen activated protein kinase，RAS/MAPK）促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。F.nucleatum表 面 的 脂 多 糖 （lipopolysaccharide，LPS）與結(jié)直腸癌細(xì)胞表面的Toll樣受體4（Tolllike receptor 4，TLR4）受體結(jié)合，激活TLR4與髓樣分化因子 （myeloid differentiation factor 88，MyD88）結(jié)合，使信號(hào)向下游轉(zhuǎn)導(dǎo)，進(jìn)而激活核因子-κB （nuclear factor kappa B，NF-κB），上調(diào)非編碼單鏈RNA的表達(dá)。非編碼單鏈RNA可以通過(guò)影響腫瘤組織中T細(xì)胞與髓樣細(xì)胞的浸潤(rùn)，上調(diào)腫 瘤 壞 死 因 子 -α （tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、IL-6、IL-17A、IL-21等因子在組織中的表達(dá)，影響上皮細(xì)胞增殖[53]。同時(shí)在過(guò)度表達(dá)miR21的細(xì)胞中，RASA1持續(xù)下調(diào)。RASA1作為RAS功能的抑制因子，增強(qiáng)RAS蛋白內(nèi)在微弱的G蛋白活性，使得RAS 進(jìn)入失活的二磷酸鳥(niǎo)苷（guanosine diphosphate，GDP）結(jié)合態(tài)，從而抑制細(xì)胞增殖和分化。隨著RASA1表達(dá)的下調(diào)，結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖逐漸失去控制[54]。

4.2 抗化學(xué)治療作用

臨床研究[55]發(fā)現(xiàn)：病灶處F.nucleatum豐度高的結(jié)直腸癌患者往往預(yù)后不佳，且化學(xué)治療（簡(jiǎn)稱(chēng)化療）后腫瘤復(fù)發(fā)的結(jié)直腸癌患者腫瘤樣本中豐度明顯高于未復(fù)發(fā)者，由此可見(jiàn)F.nucleatum可增強(qiáng)結(jié)直腸癌的化療耐藥性。Yu等[56]發(fā)現(xiàn)：F.nucleatum通過(guò)表面LPS與TLR4結(jié)合，激活TLR4，使之與髓樣分化因子MyD88結(jié)合并激活信號(hào)通路NF-κB，下調(diào)細(xì)胞內(nèi)miRNA-18a*（*示表達(dá)水平較低）和miRNA-4802的表達(dá)，使得自噬相關(guān)元件ULK1 蛋白 （unc-51 like autophagy activating kinase 1，ULK1） 和ATG7蛋白 （autophagy related 7，ATG7）的表達(dá)上調(diào)，進(jìn)而啟動(dòng)自噬，而自噬作為一種保護(hù)機(jī)制可以起到對(duì)化療藥物（5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑）的抵抗作用。此外，通過(guò)信號(hào)通路NF-κB，還可以通過(guò)上調(diào)自噬相關(guān)基因BIRC3（baculoviral IAP repeat containing 3）的表達(dá)來(lái)降低結(jié)直腸癌細(xì)胞對(duì)5-氟尿嘧啶的敏感性[57-59]。

4.3 促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移

據(jù)統(tǒng)計(jì)，伴有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌患者5年生存率不足10%[60]，但結(jié)直腸癌發(fā)生轉(zhuǎn)移的機(jī)制尚未完全明晰。Li等[61]通過(guò)對(duì)101個(gè)結(jié)直腸癌患者的腫瘤組織與癌旁正常組織進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的患者F.nucleatum豐度明顯高于未轉(zhuǎn)移組，提示F.nucleatum的感染與腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

F.nucleatum感染結(jié)直腸癌細(xì)胞通過(guò)激活NF-κB通路上調(diào)蛋白KRT7-as （keratin7-antisense）/角蛋白KRT7（keratin7）的表達(dá)，促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞體外轉(zhuǎn)移和體內(nèi)肺轉(zhuǎn)移。在清除KRT7-as后，F(xiàn).nucleatum導(dǎo)致的結(jié)直腸癌體內(nèi)肺轉(zhuǎn)移受到抑制[62]。KRT7-as上調(diào)KRT7的表達(dá)，KRT7屬于Ⅱ型細(xì)胞角蛋白，是細(xì)胞骨架和上皮中間絲的組成部分，還可以促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)[63-65]。臨床研究發(fā)現(xiàn)：KRT7在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者體內(nèi)表達(dá)更活躍，且高豐度的F.nucleatum與更高的腫瘤出芽分級(jí)程度明顯相關(guān)[66-67]。通過(guò)NF-κB通路，F(xiàn).nucleatum還可以上調(diào)CARD3（caspase activation and recruitment domain 3）蛋白的表達(dá)，促進(jìn)自噬，增加體內(nèi)外的上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)換，促進(jìn)結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移[68]。

F.nucleatum通過(guò)影響結(jié)直腸癌細(xì)胞的外泌體來(lái)促進(jìn)轉(zhuǎn)移的發(fā)生。腫瘤細(xì)胞釋放的外泌體由特定的RNA和蛋白質(zhì)載體組成，在促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的過(guò)程中起到重要的調(diào)節(jié)作用[69]。被F.nucleatum感染后的結(jié)直腸癌細(xì)胞會(huì)釋放富含miR-1246/92b-3p/27a-3p和CXCL16/RhoA/IL-8的外泌體，外泌體miR-1246/92b-3p/27a-3p通過(guò)與糖原合成酶激酶-3（glycogen synthase kinase 3，GSK3）β靶向結(jié)合和激活Wnt/β-catenin通路促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移[70]。

F.nucleatum在腫瘤細(xì)胞中的定植，在遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移處依舊維持，即在遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了F.nucleatum的感染，證明了原發(fā)性腫瘤和與之配對(duì)的轉(zhuǎn)移灶的微生物組具有穩(wěn)定性。隨結(jié)直腸癌到達(dá)轉(zhuǎn)移灶的F.nucleatum還可以進(jìn)一步促進(jìn)轉(zhuǎn)移灶的增殖與分化[62,68,71]。

4.4 調(diào)控腫瘤免疫微環(huán)境

Kostic等[27]發(fā)現(xiàn)：F.nucleatum感染在ApcMin/+小鼠模型（一種小鼠自發(fā)性結(jié)直腸癌癌前病變模型）中，通過(guò)選擇性地招募浸潤(rùn)腫瘤的髓系細(xì)胞，產(chǎn)生了有利于結(jié)直腸癌進(jìn)展的促炎微環(huán)境。骨髓來(lái)源抑制性細(xì)胞是一類(lèi)免疫抑制細(xì)胞，已被證實(shí)能抑制T細(xì)胞的功能，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)[72-73]。Gur等[74]發(fā)現(xiàn)：在F.nucleatum存在的條件下，自然殺傷細(xì)胞（natural killer cell，NK）對(duì)各種腫瘤的殺傷作用可以被抑制。免疫抑制性受體TIGIT（T cell immunoglobulin and ITIM domain） 是一種存在于所有人類(lèi)NK細(xì)胞和各種T細(xì)胞上的抑制受體，F(xiàn).nucleatum表面的Fap2蛋白可直接與TIGIT相互作用，從而抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞殺傷能力。腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞同樣表達(dá)TIGIT，同樣F.nucleatum可通過(guò)Fap2抑制T細(xì)胞活性。F.nucleatum通過(guò)TLR4依賴性機(jī)制促進(jìn)腫瘤微環(huán)境中巨噬細(xì)胞的M2極化[75]。癌癥微環(huán)境中的巨噬細(xì)胞可分化為M1 表型（阻礙腫瘤進(jìn)展）或M2 表型，M2極化的巨噬細(xì)胞可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、血管生成和轉(zhuǎn)移的能力[76-77]。F.nucleatum感染可能以TLR4依賴性方式激活巨噬細(xì)胞中的IL-6/p-STAT3/c-MYC 信號(hào)通路，從而控制巨噬細(xì)胞向M2型分化[78]。

5 展望

結(jié)直腸癌作為全球發(fā)病率第二的消化道腫瘤，F(xiàn).nucleatum在其中起到的作用一直受到廣泛的關(guān)注。隨著人們對(duì)F.nucleatum在結(jié)直腸癌中可能機(jī)制的研究，F(xiàn).nucleatum逐漸成為診治結(jié)直腸癌及預(yù)后評(píng)估的研究重點(diǎn)。F.nucleatum可激活多個(gè)信號(hào)通路來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體腫瘤基因表達(dá)、蛋白分泌水平、免疫功能，在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的各個(gè)階段起到促進(jìn)作用。高豐度的F.nucleatum不僅可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)分裂，還可以降低腫瘤細(xì)胞的敏感性，促進(jìn)遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移以及調(diào)控免疫環(huán)境，因此F.nucleatum不僅可以作為靶點(diǎn)治療結(jié)直腸癌，還可以用于腫瘤的預(yù)后評(píng)估。F.nucleatum與結(jié)直腸癌之間的相互作用有深入研究的價(jià)值，值得更進(jìn)一步的探索。

利益沖突聲明：作者聲明本文無(wú)利益沖突。