孫 賀，王國(guó)巖，崔真愛(ài)，莊寶策，費(fèi)維超

1.永吉縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林永吉 132200；2.永吉縣農(nóng)村社會(huì)事業(yè)服務(wù)中心，吉林永吉 132200；3.永吉縣岔路河鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，吉林永吉 132200

縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在我國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防與控制體系中有著重要作用，是我國(guó)開(kāi)展動(dòng)物疫情監(jiān)控管理的基礎(chǔ)平臺(tái)。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室不但能為動(dòng)物疫情監(jiān)測(cè)提供科學(xué)精準(zhǔn)的技術(shù)支撐，還能夠?yàn)樗鶎賲^(qū)域的動(dòng)物流行病調(diào)查，動(dòng)物疫病診斷等工作開(kāi)展提供檢驗(yàn)檢測(cè)支持，讓動(dòng)物疫病預(yù)防控制更有效精準(zhǔn)。筆者從事獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物疫病檢測(cè)檢驗(yàn)工作，結(jié)合工作中的經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室常用的設(shè)備儀器使用方法及注意事項(xiàng)，為同行提供參考。

1 紫外線消毒燈使用方法及注意事項(xiàng)

紫外線消毒燈的消毒作用來(lái)源于兩個(gè)方面。一是物理消毒，原理是紫外線燈發(fā)出的紫外線可以使細(xì)菌病毒等微生物的脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)破壞或者使其發(fā)生改變，這樣微生物立即失去活性，達(dá)到消毒的作用；二是間接化學(xué)消毒，原理是185 nm的紫外線能夠使空氣中的氧氣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成臭氧，臭氧能氧化分解細(xì)菌內(nèi)部葡萄屬糖所需的酶，使細(xì)菌滅活死亡。形成的臭氧能夠直接與細(xì)菌、病毒作用，破壞它們的細(xì)胞器和DNA、RNA，使細(xì)菌的新陳代謝受到破壞，導(dǎo)致細(xì)菌死亡。紫外線消毒燈使用方便，幾乎對(duì)所有的微生物都有消殺作用，是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室必備的消毒裝置。

安裝了紫外線消毒燈的實(shí)驗(yàn)室，紫外線照射消毒5 min左右就可以將衣服等物品上的細(xì)菌和病毒殺死，照射30 min可以將空氣中的細(xì)菌殺死。要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的面積及舉架高低合理設(shè)置紫外線消毒燈布置和數(shù)量，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前50 min或?qū)嶒?yàn)間隔的等待時(shí)間可作為紫外燈照射時(shí)間，注意每次照射時(shí)間不應(yīng)小于30 min，并且在人員進(jìn)入前10 min關(guān)閉，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要再次確認(rèn)紫外線燈是否關(guān)閉，以免對(duì)身體和眼睛造成傷害。紫外線消毒燈管要定期清潔以保證消毒效果，不要用手直接觸摸燈管，可以用不易掉毛的毛巾或無(wú)紡布噴施酒精之后擦拭。這里需要注意，雖然紫外線消毒方便易操作，但是只能作輔助性滅菌工具，必須按照實(shí)驗(yàn)室消毒規(guī)定定期消毒。

2 高速冷凍離心機(jī)使用方法及注意事項(xiàng)

離心機(jī)通過(guò)轉(zhuǎn)頭高速轉(zhuǎn)動(dòng)使需要分離的包含不同組分的混合物品發(fā)生分離的一種離心設(shè)備。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中離心機(jī)多用于畜禽血清分離，制備紅細(xì)胞溶液，核酸提取等實(shí)驗(yàn)操作中。

離心機(jī)要水平放置，檢查離心機(jī)每個(gè)腳座是否都牢靠放置于操作臺(tái)上。在使用離心機(jī)分離血清等操作時(shí)，要對(duì)稱(chēng)放置待離心樣品，若樣品不能呈中心對(duì)稱(chēng)放置時(shí)候，可以利用清水配置一個(gè)相似的樣品以滿(mǎn)足配平的要求。在進(jìn)行核酸提取的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要使用高速冷凍離心機(jī)，使用前必須要提前開(kāi)機(jī)設(shè)定要求溫度，關(guān)閉離心機(jī)蓋進(jìn)行預(yù)冷。冷凍離心使用結(jié)束后要把轉(zhuǎn)頭拆下倒放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上?？捎酶稍锏臒o(wú)紡布或者廚房用紙擦干離心機(jī)腔內(nèi)的冷凝水，建議對(duì)于冷凍離心機(jī)用后要保持機(jī)蓋打開(kāi)狀態(tài)用以使其內(nèi)部得到干燥，防止生銹腐蝕機(jī)器。離心機(jī)轉(zhuǎn)頭蓋不能浮放在轉(zhuǎn)頭上，因?yàn)橐坏╁e(cuò)誤啟動(dòng)，轉(zhuǎn)頭蓋有可能飛出，使轉(zhuǎn)頭蓋或者離心機(jī)內(nèi)腔破損。在離心機(jī)運(yùn)行時(shí)如果發(fā)現(xiàn)離心機(jī)異常抖動(dòng)或者發(fā)出其他非正常聲音，不能關(guān)閉按電源（POWER）鍵或者直接拔出插頭，要迅速按停止（STOP）鍵，停止鍵有類(lèi)似“剎車(chē)”的效果，可以使轉(zhuǎn)頭迅速停止。在放置樣品的時(shí)候要認(rèn)真檢查待離心樣品的試管否有破裂、老化或者裂紋的情況，以免高速離心時(shí)試管破裂污染離心機(jī)。

3 電熱恒溫箱使用方法及注意事項(xiàng)

電熱恒溫箱主要用于細(xì)菌、細(xì)胞、微生物等物質(zhì)的培養(yǎng)或者實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)反應(yīng)板的溫育，是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室必備儀器之一。恒溫箱多用于獸醫(yī)檢測(cè)中的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的酶標(biāo)板的溫育，或者平衡樣品溫度時(shí)使用。

在使用恒溫箱時(shí)，要有提前預(yù)熱的概念，比如要開(kāi)展豬口蹄疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)步驟中要求置于37 ℃溫育60 min，若沒(méi)有進(jìn)行預(yù)熱，就需要等待溫度提高到要求溫度，導(dǎo)致檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，或檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，所以每次需要使用恒溫箱的實(shí)驗(yàn)要記得提前開(kāi)機(jī)預(yù)熱。要按取出時(shí)間先后順序依次將所要溫育的反應(yīng)板擺放在擱板上，各反應(yīng)板擺放位置要均勻，確保每個(gè)需要溫育的反應(yīng)板的溫度一致。

恒溫箱周?chē)豢煞胖靡兹?、易爆物品。每次使用完畢要關(guān)閉電源，待恢復(fù)室溫以后，斷開(kāi)電源，用對(duì)金屬無(wú)腐蝕性的酒精消毒。待酒精完全揮發(fā)干燥以后關(guān)閉恒溫箱門(mén)，恒溫箱應(yīng)放在干燥的室內(nèi)以免加熱和控制元件潮濕而影響正常使用。

4 高壓蒸汽滅菌器的使用方法及注意事項(xiàng)

高壓蒸汽滅菌器原理同我們生活中使用的高壓鍋類(lèi)似，通過(guò)電能使水加熱，產(chǎn)生水蒸氣，在密閉的空間內(nèi)，壓力提高，水溫提高，最終滅菌器內(nèi)溫度可達(dá)到121 ℃，在高溫高壓的作用下能使細(xì)菌或者病毒的有機(jī)物質(zhì)迅速發(fā)生不可逆的損壞變性，實(shí)現(xiàn)滅菌效果。高壓蒸汽滅菌器是保證實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作和實(shí)現(xiàn)生物安全的基本設(shè)備。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中常用于實(shí)驗(yàn)室廢棄物消毒處理，如離心管、移液槍頭等實(shí)驗(yàn)耗材的消毒處理。

利用高壓蒸汽滅菌進(jìn)行廢棄實(shí)驗(yàn)耗材滅菌時(shí)，開(kāi)啟高壓滅菌器電源后，必須先檢查水位是否在限定范圍內(nèi)，若水位過(guò)低應(yīng)及時(shí)補(bǔ)足水量到合適范圍，方可使用。需要滅菌的物品放置不宜過(guò)于密集，要確保蒸汽能夠流通。使用該設(shè)備滅菌后，不能立即進(jìn)行排氣泄壓，若違規(guī)泄壓會(huì)導(dǎo)致壓力沸點(diǎn)降低，這樣封閉的容器內(nèi)有可能發(fā)生劇烈的沸騰，使密封的離心管或其他密封性容器發(fā)生爆炸。使用后要等待溫度壓力降低以后，觀察儀器設(shè)備儀表或者指示燈，明確提示可以打開(kāi)方可以開(kāi)蓋。在進(jìn)行高壓滅菌時(shí)，操作員不應(yīng)離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)，隨時(shí)觀察設(shè)備消毒運(yùn)行情況，發(fā)現(xiàn)異常情況隨時(shí)處理。為了確保滅菌效果，操作員可以采購(gòu)3M等品牌的專(zhuān)用溫度指示膠帶，消毒以后如果膠紙上的指示劑變色，如3M的溫度指示膠帶會(huì)出現(xiàn)黑色橫紋，則說(shuō)明滅菌效果是可靠的。高壓蒸汽滅菌器產(chǎn)生的高溫蒸汽溫度可達(dá)121.3 ℃，操作人員一定要嚴(yán)格按照使用要求操作，在使用過(guò)程中可戴隔熱手套以免燙傷。

5 生物安全柜使用方法和注意事項(xiàng)

生物安全柜是生物實(shí)驗(yàn)室必備的實(shí)驗(yàn)儀器，是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展如非洲豬瘟病毒PCR檢測(cè)等涉及核酸提取操作的必備實(shí)驗(yàn)設(shè)備，使用生物安全柜能夠有效地保護(hù)實(shí)驗(yàn)操作者的生物安全。

生物安全柜過(guò)濾裝置是消耗品，一旦出現(xiàn)過(guò)濾器壽命終結(jié)的提示，應(yīng)盡快停止使用，同時(shí)檢測(cè)機(jī)器是否存在其他異常。通知廠家專(zhuān)業(yè)人員對(duì)該設(shè)備進(jìn)行過(guò)濾器完整性和氣流流速的檢測(cè)，若不能滿(mǎn)足要求，則禁止使用并立即通知相關(guān)人員更換空氣過(guò)濾器。在生物安全柜的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)控制動(dòng)作幅度，特別是需要手臂移出的時(shí)候動(dòng)作一定要慢、要穩(wěn)，以免過(guò)快過(guò)大的動(dòng)作擾亂氣流，使病原微生物外溢。實(shí)驗(yàn)所需要的物品盡量放置在正前方，避免經(jīng)常扭動(dòng)頸部。在安全柜工作區(qū)域中合理擺放物品，減少操作距離。移動(dòng)物品時(shí)使用整個(gè)肩膀和胳膊而不要只使用手腕。建議每持續(xù)2 h，休息5～10 min舒展和調(diào)節(jié)肢體，減少疲勞。使用生物安全柜時(shí)需做好個(gè)人生物安全保護(hù)措施，如戴好口罩、面罩等。

在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要清理生物安全柜的臺(tái)面，避免造成污垢殘留。對(duì)于生物安全柜消毒的常規(guī)方法可以使用75%濃度的酒精，配合不掉屑的紗布清理為最佳。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)人員多年經(jīng)驗(yàn)，不建議使用脫脂棉類(lèi)的產(chǎn)品擦拭臺(tái)面，因?yàn)闀?huì)造成細(xì)微棉絮掛在臺(tái)面上，長(zhǎng)時(shí)間易滋生細(xì)菌。不建議使用含氯的清潔劑，如新吉爾滅等進(jìn)行擦拭，含氯的清潔劑長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)不銹鋼臺(tái)面造成一定的腐蝕。

如果安全柜發(fā)生報(bào)警，且常規(guī)檢查不能解決，那么就要聯(lián)系專(zhuān)業(yè)的維護(hù)工程師詢(xún)問(wèn)如何解決，由工程師電話或現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)，進(jìn)行設(shè)備維護(hù)等工作。針對(duì)過(guò)濾器使用壽命到期，需要專(zhuān)業(yè)的工程師來(lái)進(jìn)行熏蒸消毒后拆除更換，替換下來(lái)的過(guò)濾器要作為實(shí)驗(yàn)廢物做專(zhuān)門(mén)處理，不可當(dāng)作生活垃圾處理。

6 超純水機(jī)使用注意事項(xiàng)

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中主要使用超純水機(jī)用于制備超純水，用來(lái)以配制PBS磷酸緩沖液，洗板機(jī)用后清洗管路等作用。

通過(guò)超純水取水時(shí)，要先放掉20～50 mL的水，為了避免混入空氣，可以讓純水沿容器壁流入，這樣就可以有效避免濺起水花混入空氣。能有效降低空氣帶來(lái)的污染；超純水機(jī)的最終端濾器后請(qǐng)不要連接軟管，直接取水才能獲得更高純度的超純水。不要使用長(zhǎng)期儲(chǔ)存在儲(chǔ)水桶中的超純水，因?yàn)樵陂L(zhǎng)期儲(chǔ)存過(guò)程中，會(huì)有雜質(zhì)、微生物污染水質(zhì)，有可能會(huì)影響最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。超純水機(jī)中的過(guò)濾裝置需要定期更換或清洗，因?yàn)闉V芯無(wú)法自動(dòng)清洗、排除過(guò)濾出的雜質(zhì)，在雜質(zhì)長(zhǎng)期積累后就會(huì)導(dǎo)致出水純度受到影響。

若是實(shí)驗(yàn)室純水儀出現(xiàn)問(wèn)題，或者濾芯需要更換而未能及時(shí)更換的間期，此時(shí)實(shí)驗(yàn)室若需使用純水，最簡(jiǎn)單的方式就是購(gòu)買(mǎi)市面上的“娃哈哈”純凈水，該純凈水完全滿(mǎn)足獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室所需要純凈水的標(biāo)準(zhǔn)要求。筆者多次使用“娃哈哈”純凈水配制PBS緩沖液，未見(jiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響。

縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室擔(dān)負(fù)著我國(guó)基層動(dòng)物疫病檢驗(yàn)化驗(yàn)等動(dòng)物疫情防控任務(wù)，正確科學(xué)地使用獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備是影響檢驗(yàn)結(jié)果的重要因素。基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)化驗(yàn)人員要不斷學(xué)習(xí)和總結(jié)實(shí)驗(yàn)設(shè)備儀器的使用方法和注意事項(xiàng)，進(jìn)而提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力，提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確率，為我國(guó)的縣鄉(xiāng)動(dòng)物防疫工作的開(kāi)展提供精確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支撐。