劉揚，簡生龍，王國杰，李柯懋，苗世玉，毛亞琪，朱博

（1.青海大學(xué)，青海 西寧 810012；2.青海省漁業(yè)技術(shù)推廣中心，青海 西寧 810012；3.青海省凱特威德生態(tài)漁業(yè)有限公司，青海 西寧 810012）

白鮭屬魚類（Coregonus）隸屬于鮭科（Salmonidae）、白鮭亞科（Coregoninae），世界上約有30 余種，廣泛分布于北半球寒冷地區(qū)的淡水水域，絕大多數(shù)集中于俄羅斯，少數(shù)分布于加拿大和美國等國家[1-3]。該屬魚類以浮游動物或底棲動物為食，性情溫和，適應(yīng)能力強(qiáng)，生長速度快，生長期長，適宜大水面的增養(yǎng)殖，經(jīng)濟(jì)價值很高[4]。中國黑龍江境內(nèi)也有分布，如烏蘇里白鮭（Coregonus ussuriensis）和卡達(dá)白鮭（短頜白鮭）（C.chadary）[1]。青海省地處青藏高原，氣候冷涼，天然水體終年水溫20℃以下，具有發(fā)展白鮭魚養(yǎng)殖得天獨厚的條件。從1999 年起青海省先后引進(jìn)高白鮭（C.peled，俄羅斯）、齊爾白鮭（寬鼻白鮭）（C.nasus，俄羅斯）、目筍白鮭（穆松白鮭）（C.muksum，俄羅斯）、凹目白鮭（貝加爾秋白鮭）（C.autumnalis，俄羅斯）、圖岡白鮭（C.tugun，俄羅斯）和歐白鮭（C.albula，芬蘭）等6 種白鮭屬魚類發(fā)眼卵近8 000 萬粒，孵化培育出魚種進(jìn)行水庫大水面增殖和網(wǎng)箱養(yǎng)殖[4-11]。

魚類在長期的自然選擇過程中形成了與其生存環(huán)境條件相適應(yīng)的繁殖特性，包括生殖洄游、聚群、親體護(hù)幼、產(chǎn)卵類型等，以保證魚類及其后代能夠獲得最大的存活率[12,13]。魚類的個體繁殖力是指1尾雌魚產(chǎn)出的具有受精和發(fā)育能力的卵子數(shù)，包括個體絕對繁殖力和個體相對繁殖力，其大小是維持種族延續(xù)而對外界環(huán)境長期適應(yīng)的結(jié)果[12]。研究魚類的繁殖生物學(xué)特征，如性比、性腺發(fā)育、初次性成熟規(guī)格、繁殖周期和時間、繁殖力等對魚類全人工繁殖、資源保護(hù)和漁業(yè)生產(chǎn)具有十分重要的意義。

歐白鮭主要分布于歐洲南部的淡水湖和河水中，以浮游生物為食，在多石和沙礫的區(qū)域產(chǎn)卵[14]。我國僅見在青海省內(nèi)有引種。目前，在中文文獻(xiàn)中尚未見歐白鮭研究的報道。研究歐白鮭繁殖生物學(xué)對在我國高寒地區(qū)歐白鮭人工養(yǎng)殖和大水面增殖具有重要的意義。

本文首次報道了歐白鮭在我國青藏高原東北部黃河上游拉西瓦水庫的繁殖生物學(xué)特征，分析了歐白鮭親魚形態(tài)特征、個體繁殖力特征及其與生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性，為歐白鮭在我國高原高寒水庫的人工養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗魚

研究所采用的歐白鮭僅在青海省拉西瓦水庫少量養(yǎng)殖，在自然界中無法自然繁殖。2012 年3 月，青海首次從芬蘭引進(jìn)歐白鮭發(fā)眼卵40 萬粒，共孵出仔魚29 萬尾，培育出平均體質(zhì)量2.0 g/尾的魚種20 萬尾，運至黃河上游水庫養(yǎng)殖場進(jìn)行網(wǎng)箱養(yǎng)殖試驗。養(yǎng)殖3 個月歐洲白鮭平均體質(zhì)量5.8 g，15 個月平均體質(zhì)量65 g，到2018 年，網(wǎng)箱養(yǎng)殖歐白鮭平均體質(zhì)量達(dá)3 kg 以上（圖1）。2019 年2 月進(jìn)行實驗，捕撈52 尾，其中雌魚41 尾，雄魚11 尾。其中11 尾雌魚處于I、II 期，無法使用；其余27 尾性腺發(fā)育至Ⅳ、Ⅴ期。雄魚中5 尾精液較多，其余4 尾精液較少。捕撈的雌魚體長40～54 cm，體質(zhì)量1.8～4.1 Kg；雄魚體長45～58cm，體質(zhì)量1.4～3.1 Kg。實驗中使用的親魚遠(yuǎn)大于俄羅斯自然水體中采集到的歐白鮭（19.5 cm）[15]。

圖1 實驗地點及歐白鮭（Coregonus albula）Fig.1 Experiment site and vendace Coregonus albula

1.2 試驗地點及條件

親魚培育在青海省拉西瓦水庫網(wǎng)箱內(nèi)進(jìn)行。拉西瓦水庫位于龍羊峽水庫下游，正常蓄水位2 452 m，水庫總面積13.94 km2，總庫容10.79 億m3，進(jìn)水量4 359 萬m3，出水量4 200 萬m3，年內(nèi)交換19.9次，多年平均流量659 m3·s-1，年徑流量為208 億m3。拉西瓦庫區(qū)常年水溫3～18℃，終年不結(jié)冰。黃河水水質(zhì)清澈，pH6.8～7.1，溶解氧含量8 mg·L-1以上。

1.3 方法

1.3.1 親魚培育與捕撈

網(wǎng)箱養(yǎng)殖的親魚投喂鮭鱒魚人工配合飼料，蛋白含量≥40%，脂肪含量≥30%。早晚各喂食一次，日投餌量1.5%。歐白鮭一般4 齡以上性成熟。待水庫水溫在3～4℃時，選擇4 齡以上、身體健壯、體表無傷親魚，檢查成熟度，擇機(jī)開始人工授精。性成熟雄魚生殖孔凹陷，輕壓腹部有少量乳白色精液流出；雌魚體型豐滿，腹部圓潤，后期生殖孔外凸。歐白鮭在黃河上游自然條件下能達(dá)性成熟，繁育時不使用催產(chǎn)藥物。歐白鮭起水較易死亡，人工繁育期間死亡率較高。

1.3.2 采卵

擠壓采卵、干法受精，每次擠出少量精液。1 萬粒卵中加入3～5 mL 精液。攪拌均勻，加入少量清水靜止2 min 后，清水沖洗2～3 次，除去過量的精液、卵皮和血塊，直到水清澈透明為止，加水靜置20～30 min，待卵吸水膨脹，用體積法計數(shù)后放入孵化槽中。

1.3.3 生物學(xué)指標(biāo)測量及繁殖力計算

歐白鮭生物學(xué)指標(biāo)的測定方法參照《內(nèi)陸水域漁業(yè)資源調(diào)查手冊》[16]。捕撈的歐白鮭鑒定性別后，直尺測量全長（L1）、體長（L）、體高（L2）、頭長（L3）、眼間距（L4）；電子天平測量體質(zhì)量（W）、和卵巢重（W1）等生物學(xué)指標(biāo)。卵巢取出后，用濾紙吸干卵巢表面的水分后，稱重。隨機(jī)取6 條魚卵子進(jìn)行稱量和計卵數(shù)，取平均值作為歐白鮭性腺單位重量含卵數(shù)，再乘以性腺全重求得該魚的絕對懷卵量。相對懷卵量計數(shù)采用重量法[17]。用直尺測量卵徑。

分別計算歐白鮭的成熟系數(shù)、成熟度、個體絕對繁殖力（F）、個體體長相對繁殖力（FL）、個體體質(zhì)量相對繁殖力（FW）、個體體高相對繁殖力（F2）、個體頭長相對繁殖力（F3）、個體眼間距相對繁殖力（F4）、性腺成熟系數(shù)（GSI）和肥滿度（K）[12]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，用Excel 整理。用Origin 作圖，并擬合歐白鮭親魚繁殖力參數(shù)與各形態(tài)學(xué)指標(biāo)之間的回歸方程，以相關(guān)系數(shù)R2最大者作為最佳回歸方程。用Rstudio 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)與相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)特征

經(jīng)測定，體長45～58 cm，體質(zhì)量1.4～3.1 kg 的9尾雄魚標(biāo)本和體長40～54 cm、體質(zhì)量1.8～4.1 kg 的38 尾雌性親魚的外部形態(tài)及可量可數(shù)性狀如下，經(jīng)獨立樣本平均值差異顯著性分析（t-test），歐白鮭雌、雄性親魚的所有可量性狀均不顯著（表1）。根據(jù)繁殖期捕撈的47 尾親魚的測定結(jié)果，歐白鮭繁殖期親魚全長L1與體質(zhì)量W 相關(guān)公式為：

W=111.57L1-3291.9（R2=0.46）。

2.2 個體繁殖力

結(jié)果表明，具有繁殖能力的27 尾歐白鮭雌魚的卵巢重在0.4～2.0 kg 之間，平均值（1.0±0.4）kg。吸水前卵重69.0～125.0 eggs·g-1之間，平均（94.7±28.3）eggs·g-1；吸水后，卵重40.3～51.2 eggs·g-1，平均（60.2±10.7）eggs·g-1。吸水前后卵粒直徑均為2.5 mm，卵和受精卵均呈不規(guī)則多棱形。歐白鮭個體絕對繁殖力（F）平均77 600 粒，個體體長相對繁殖力（FL）平均1 564 eggs·cm-1，體質(zhì)量相對繁殖力（FW）平均25.2 eggs·g-1。性腺成熟系數(shù)（GSI）在14.8%～52.6%之間，平均為32.4%。肥滿度（K）為0.019～0.032 g·cm-3之間，平均為0.025 g·cm-3。

2.3 個體繁殖力與生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)分析

歐白鮭個體繁殖力與生物學(xué)指標(biāo)的Pearson 相關(guān)性分析顯示，歐白鮭親魚卵巢重（W1）與體質(zhì)量（W）（P＜0.001）、體長（L）（P＜0.01）和體高（L2）（P＜0.001）呈極顯著的正相關(guān)性（圖2、圖3）。歐白鮭的個體繁殖力與卵巢重（W1）（P＜0.001）、體質(zhì)量（W）（P＜0.001）、體長（L）（P＜0.01）和體高（L2）（P＜0.001）呈極顯著的相關(guān)性（圖2、圖3）。GSI（P＜0.01）、肥滿度（K）（P＜0.01）與體高（L2）呈極顯著的相關(guān)性（圖2、圖3）。歐白鮭親魚體高與其個體繁殖力具有很好的相關(guān)性，在指示個體繁殖能力方面具有重要意義。

圖2 歐白鮭個體繁殖力與各生物學(xué)指標(biāo)間的Pearson 相關(guān)性分析Fig.2 Pearson correlation between fecundity of vendace Coregonus albula and various biological indices

圖3 歐白鮭個體繁殖力與各生物學(xué)指標(biāo)間的網(wǎng)絡(luò)分析圖Fig.3 Network analysis diagram between individual fecundity of vendace Coregonus albula and various biological indicators

歐白鮭的卵巢重（W1）與體長（L）、體高（L2）、眼間距（L4）、體質(zhì)量（W）和性腺成熟系數(shù)（GSI）成正相關(guān)（圖4），其中卵巢重（W1）與眼間距（L4）、體質(zhì)量（W）呈現(xiàn)冪函數(shù)關(guān)系（圖4）。歐白鮭絕對繁殖力（F）、體長相對繁殖力FL和體質(zhì)量相對繁殖力（FW）也表現(xiàn)出類似的趨勢（圖4）。

圖4 歐白鮭個體繁殖力參數(shù)與形態(tài)學(xué)特征的最佳擬合方程Fig.4 The best-fitting equations of individual fertility parameters and morphological characteristics of vendace Coregonus albula

3 討論

3.1 歐白鮭與鮭科其他魚類的繁殖力比較

歐白鮭在黃河上游拉西瓦水域性腺發(fā)育良好，能自然達(dá)到性成熟。水溫是歐白鮭性腺發(fā)育程度和質(zhì)量的最主要因素。在黃河上游拉西瓦水庫歐白鮭的性成熟季節(jié)一般在2 月份，最適宜溫度為3℃，當(dāng)水溫超過5℃時，歐白鮭性腺發(fā)育質(zhì)量不佳。歐白鮭個體絕對繁殖力（F）平均77 600 粒，個體體長相對繁殖力（FL）平均1 564 eggs·cm-1，體質(zhì)量相對繁殖力（FW）平均25.2 eggs·g-1。歐白鮭的絕對懷卵量（F）和體質(zhì)量相對懷卵量（FW）與白鮭屬內(nèi)的其他白鮭魚相比基本處于同一量級，但是白鮭屬內(nèi)不同種類之間絕對懷卵量（F）仍存在較大的區(qū)別（表1）。即使同種白鮭屬魚類，不同文獻(xiàn)中絕對懷卵量（F）也不相同（表1）。這可能與白鮭屬雌親魚年齡、個體大小、水域溫度、營養(yǎng)狀況等因素有關(guān)[12]。本研究中歐白鮭卵巢重（W1）和性腺成熟系數(shù)（GSI）要高于文獻(xiàn)中其他白鮭屬魚類，這可能與本研究中給歐白鮭投喂人工顆粒飼料有關(guān)。白鮭屬魚類的絕對懷卵量（F）明顯高于同為鮭科的紅點鮭屬、細(xì)鱗鮭屬、哲羅魚屬和大麻哈魚屬（表1）。白鮭屬魚類的卵重和卵徑要明顯低于鮭科的其他屬；在白鮭屬內(nèi)，歐白鮭未受精卵重和卵徑明顯大于其他白鮭屬魚類（表1）。歐白鮭絕對繁殖力（F）大，胚胎發(fā)育時間較長，是其物種自身遺傳性決定和長期適應(yīng)環(huán)境的結(jié)果。

3.2 白鮭屬魚類繁殖力與生物學(xué)指標(biāo)的關(guān)系

魚類個體繁殖力除與環(huán)境因子、營養(yǎng)狀況、種群密度、魚類種類等因素相關(guān)外，與生物學(xué)指標(biāo)（如體長、體質(zhì)量）也存在顯著的相關(guān)性，但魚類的個體繁殖力與魚體生物學(xué)指標(biāo)的關(guān)系在不同種類的魚類中常表現(xiàn)出不同的形式（表1）[12]。目前對白鮭屬魚類個體絕對繁殖力（F）與體長、體質(zhì)量等生物學(xué)指標(biāo)相關(guān)性的研究相對較少。吐爾遜等[18]發(fā)現(xiàn)，賽里木湖高白鮭隨年齡的增長，高白鮭平均絕對懷卵量（F）、平均相對懷卵量、卵徑呈明顯上升趨勢，且高白鮭絕對懷卵量（F）與體長（L）成冪函數(shù)關(guān)系，體質(zhì)量（W）和絕對懷卵量（F）呈直線關(guān)系。李培倫等[12]研究發(fā)現(xiàn)，烏蘇里白鮭絕對繁殖力（F）與卵巢重、叉長和性成熟系數(shù)顯著相關(guān)，而體長相對繁殖力（FL）和體質(zhì)量相對繁殖力（FW）均受卵巢重和性成熟系數(shù)的顯著影響。本文的研究顯示，歐白鮭的個體絕對繁殖力與卵巢重（W1）、體質(zhì)量（W）、體長（L）和體高（L2）成極顯著的相關(guān)性，絕對繁殖力（F）隨體長、體質(zhì)量（W）和體高（L2）的增大而增大（圖4）。歐白鮭親魚體高（L2）與性腺成熟指數(shù)（GSI）、肥滿度（K）呈極顯著的相關(guān)性，可以用親魚體高（L2）與絕對繁殖力（F）之間的關(guān)系來估算歐白鮭個體繁殖能力。