楊侃侃

（遼寧省農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)校，遼寧錦州 121000）

隨著集約化和規(guī)模化養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展進(jìn)程的不斷加快，仔豬早期斷奶綜合征的發(fā)生率呈逐漸升高的趨勢，給養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。微生態(tài)制劑作為一種安全、環(huán)保的綠色飼料添加劑，可有效預(yù)防仔豬早期斷奶綜合征，調(diào)節(jié)仔豬腸道系統(tǒng)微生態(tài)平衡，降低斷奶仔豬發(fā)病率，促進(jìn)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。益生菌和益生素類物質(zhì)按適當(dāng)比例配合成合生元，可最大限度地發(fā)揮其促生長、調(diào)控畜禽消化道微生態(tài)環(huán)境等作用?？莶菅挎邨U菌作為一種重要的益生菌制劑，不僅能提高動物生長性能，增強(qiáng)免疫力，同時能調(diào)節(jié)腸道菌群平衡。菊糖是一種天然果聚糖，能調(diào)節(jié)動物消化道微生物區(qū)系的平衡。本試驗(yàn)在斷奶仔豬日糧中添加菊糖-枯草芽孢桿菌合生元，比較分析其對仔豬糞便微生物菌群及糞便pH 的影響，為斷奶仔豬飼料中添加合生元奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

自制菊糖培養(yǎng)基，菊糖含量為4.0mg/mL。試驗(yàn)用枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基、菊糖-枯草芽孢桿菌合生元培養(yǎng)基均為實(shí)驗(yàn)室自制，其中確定含菌量為1.35×108CFU/mL?；A(chǔ)飼糧由錦州展鴻牧業(yè)有限公司參照NRC（1998）仔豬營養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)配置提供，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）單位：%

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采用半開放式豬舍，通風(fēng)、光照、溫度、濕度等環(huán)境條件控制良好。豬只自由飲水和采食，按照分組每天在飼糧中添加不同培養(yǎng)基。試驗(yàn)前按豬場常規(guī)管理程序?qū)嗄套胸i進(jìn)行免疫防疫和驅(qū)蟲。試驗(yàn)為期14d。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取120 頭“杜洛克×長白×大白” 三元雜交仔豬，斷奶日齡為（23±2）d，平均體重為（6.76±0.56）kg。將仔豬隨機(jī)分為4 組，分別為處理A 組（基礎(chǔ)日糧）、處理B 組（基礎(chǔ)日糧+菊糖）、處理C組（基礎(chǔ)日糧+枯草芽孢桿菌）、處理D 組[基礎(chǔ)日糧+（菊糖-枯草芽孢桿菌合生元）]，每組5 個重復(fù)，每個重復(fù)6 頭豬。各組培養(yǎng)基喂量為15mL/d。

1.4 測定指標(biāo)及方法

（1）糞便收集：在試驗(yàn)第15 天早上收集各處理組每個重復(fù)3 頭健康仔豬排出的新鮮糞便（不低于1g）于無菌自封袋封裝，保存于冰盒中。

（2）計(jì)數(shù)：采用平板涂布法進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。整個操作過程在無菌操作臺上進(jìn)行，首先將1g 糞便與9mL 滅菌生理鹽水混勻稀釋成10-1，然后取1mL 稀釋液再次與9mL 的生理鹽水混勻稀釋成10-2，按此法逐級進(jìn)行，稀釋至10-7。每個菌種選擇10-4、10-5、10-63個梯度，每個梯度2 個重復(fù)。分別取50μL 不同濃度稀釋液滴入相應(yīng)培養(yǎng)基，在37℃條件下分別培養(yǎng)大腸桿菌24h、乳酸桿菌48h（厭氧）、雙歧桿菌48h（厭氧）。結(jié)果以CFU 的常用對數(shù)值lg（CFU/g）表示。

（3）糞便pH：在試驗(yàn)第15 天早上，各處理組每個重復(fù)隨即選擇3 頭健康仔豬，收集新鮮糞便10g 放入燒杯中，用pH 儀測定pH。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0 對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan's 法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差” 表示，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 斷奶仔豬糞中菌群

由表2 可知，從大腸桿菌數(shù)量看，與處理A 組相比，其余試驗(yàn)組數(shù)量均有降低趨勢，其中處理C 組和處理D 組仔豬糞便大腸桿菌數(shù)量與處理A 組相比顯著減少（P＜0.05），且這兩組之間無顯著差異（P＞0.05），其中處理D 組大腸桿菌數(shù)量最低；從乳酸桿菌數(shù)量看，處理B 組、處理C 組和處理D 組均高于處理A 組，其中處理D 組乳酸桿菌數(shù)量最高，顯著高于處理A 組和處理B 組（P＜0.05），與處理C 組差異不顯著（P＞0.05）；從雙歧桿菌數(shù)量看，處理D 組顯著高于處理A 組（P＜0.05），而處理B 組、處理C組與處理A 組之間差異不顯著（P＞0.05），4 組中處理D 組雙歧桿菌數(shù)量最高。

表2 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞中菌群的影響 單位：g/L

2.2 斷奶仔豬糞便pH

由表3 可知，處理B 組、處理C 組和處理D 組仔豬糞便pH 值均顯著低于處理A 組（P＜0.05），其中處理D 組糞便pH 最低，處理B 組和處理C 組之間數(shù)量上很接近。

表3 枯草芽孢桿菌-菊糖合生元對斷奶仔豬糞便pH 的影響

3 討論

3.1 斷奶仔豬糞便PH 值

3.1.1 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群中大腸桿菌數(shù)量的影響

倪學(xué)勤等[1]試驗(yàn)表明，仔豬斷奶后添加枯草芽孢桿菌可降低大腸桿菌數(shù)量，對腸道中需氧菌和厭氧菌的比例起到維持作用。郝生宏等[2]發(fā)現(xiàn)，雛雞日糧中添加枯草芽孢桿菌后，糞便中大腸桿菌的數(shù)量明顯減少（P＜0.05），合生元抑制了大腸桿菌的生長繁殖。相關(guān)研究表明合生元不僅可以增加肉雞腸道中乳酸桿菌的數(shù)量，還可以減少大腸桿菌、沙門菌等總需氧菌的數(shù)量。本試驗(yàn)研究表明，枯草芽孢桿菌與合生元均可顯著降低仔豬糞便大腸桿菌數(shù)量（P＜0.05），菊糖組在一定程度上降低了大腸桿菌的數(shù)量（P＞0.05）。本試驗(yàn)基本與前人研究結(jié)果一致。

3.1.2 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群中乳酸桿菌數(shù)量的影響

Guo 等[3]研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，仔豬日糧中添加枯草芽孢桿菌后，糞樣中乳酸桿菌數(shù)量顯著增加。顧憲紅等[4]研究表明，菊粉能促進(jìn)斷奶仔豬盲腸內(nèi)乳酸桿菌生長，增加雙歧桿菌數(shù)量（P＜0.05）。邸靜[5]報道，給肉仔雞飼喂苦豆籽粕-雙歧桿菌合生元后，能提高自身腸道內(nèi)的乳酸桿菌數(shù)量。本試驗(yàn)研究表明，枯草芽孢桿菌與合生元均可顯著提高乳酸桿菌數(shù)量（P＜0.05），菊糖組也可提高乳酸桿菌數(shù)量，但差異不顯著（P＞0.05）。

3.1.3 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便菌群中雙歧桿菌數(shù)量的影響

Jannine 等[6]報道，菊糖增加了雙歧桿菌和乳酸桿菌等有益微生物菌群在各段腸道中的數(shù)量。邸靜[5]研究發(fā)現(xiàn)，苦豆籽粕-雙歧桿菌合生元對肉雞腸道內(nèi)雙歧桿菌的增殖具有促進(jìn)作用。本試驗(yàn)研究表明，合生元組可提高仔豬糞便雙歧桿菌數(shù)量（P＜0.05），菊糖組在一定程度上提高了雙歧桿菌的數(shù)量（P＞0.05），枯草芽孢桿菌組的雙歧桿菌數(shù)量沒有增加趨勢，原因可能是乳酸桿菌產(chǎn)生了一定的競爭抑制作用，從而負(fù)面影響雙歧桿菌的增殖，導(dǎo)致雙歧桿菌數(shù)量下降。

菊糖是典型的益生元，大量體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)研究表明，菊糖能增強(qiáng)有益菌生長，如雙歧桿菌和乳酸桿菌在腸道后段會利用菊糖，使有益微生物迅速增加，維持了腸道微生態(tài)平衡，進(jìn)而促進(jìn)動物健康[7]。枯草芽孢桿菌-菊糖合生元進(jìn)入腸道后不僅會增加外源性有益菌，同時合生元中的菊糖成分可以輔助腸道內(nèi)有益菌的恢復(fù)，并且還能抑制有害菌繁殖。此外，腸道有益菌的增加還可以促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，使腸道pH 降低，進(jìn)而抑制有害菌繁殖，兩者結(jié)合可起到雙倍效果。本試驗(yàn)研究表明，以菊糖為益生元與枯草芽孢桿菌配合成的合生元添加劑不僅可以快速促進(jìn)斷奶仔豬腸道菌群的建立及平衡，還可以顯著提高有益菌與有害菌的比值。因此，菊糖和枯草芽孢桿菌具有協(xié)同調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡的作用。

3.2 菊糖-枯草芽孢桿菌合生元對斷奶仔豬糞便pH 的影響

大量研究表明，枯草芽孢桿菌和菊糖均可顯著降低氨氣濃度，改變豬舍環(huán)境。楊鋒[8]研究表明，3%的枯草芽孢桿菌制劑可顯著降低豬舍氨氣濃度（P＜0.05）。孫瑞峰等[9]發(fā)現(xiàn)，菊糖+枯草芽孢桿菌能顯著減少肉雞排泄物中氨氣散發(fā)量。而Aarnink 等[10]研究認(rèn)為，影響氨氣散發(fā)量的關(guān)鍵因素是糞便pH，兩者成正相關(guān)，降低糞便pH 可顯著減少氨氣散發(fā)量。由于試驗(yàn)條件的限制，無法測得氨氣揮發(fā)量，進(jìn)而用仔豬糞便pH 來反應(yīng)豬舍氨氣濃度。楊鋒[8]試驗(yàn)報道，隨著枯草芽孢桿菌制劑添加量的增加，仔豬糞便pH 降低。顧憲紅等[4]研究表明，1%菊粉能顯著降低斷奶仔豬直腸后端內(nèi)容物pH（P＜0.05）。本試驗(yàn)研究表明，菊糖組、枯草芽孢桿菌組和合生元組均能降低糞便pH，合生元組尤其明顯，與前人報道一致。

菊糖到達(dá)腸道后端被微生物發(fā)酵，可產(chǎn)生乙酸、丙酸、丁酸等短鏈脂肪酸和乳酸、丙酮酸、琥珀酸等有機(jī)酸，菊糖與枯草芽孢桿菌兩者結(jié)合，更能顯示出兩者的共同作用，顯著降低糞便pH，進(jìn)而降低氨氣等惡臭氣體的散發(fā)。糞便pH 不僅能顯示腸道內(nèi)環(huán)境，也可表明合生元等微生態(tài)制劑可以減少豬舍內(nèi)有害氣體含量，改善豬舍空氣質(zhì)量。

4 結(jié)論

（1）菊糖-枯草芽孢桿菌合生元不但能有效減少斷奶仔豬糞便中大腸桿菌的數(shù)量，而且能顯著提高乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量，從而有利于維持仔豬腸道微生態(tài)平衡和仔豬健康。

（2）菊糖-枯草芽孢桿菌合生元可顯著降低斷奶仔豬糞便pH，減少豬舍內(nèi)氨氣濃度，從而改善豬舍空氣質(zhì)量。