趙建新，蘇 政，陸宗偉，李宗方

（1.第九師一六八團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，新疆塔城 834608；2.四川砥瀘動(dòng)物科技有限公司，四川瀘州 646000）

近年來(lái)，我國(guó)牛肉產(chǎn)量已供不應(yīng)求，據(jù)國(guó)家統(tǒng)計(jì)局和中國(guó)海關(guān)統(tǒng)計(jì)，2021 年我國(guó)牛肉消費(fèi)量達(dá)930 萬(wàn)t，牛肉產(chǎn)量約698 萬(wàn)t，進(jìn)口量為233 萬(wàn)t，一躍成為世界牛肉第一大進(jìn)口國(guó)[1]。由于供需缺口快速擴(kuò)大，牛肉需求整體呈現(xiàn)增長(zhǎng)加速的態(tài)勢(shì)。國(guó)內(nèi)牛肉價(jià)格和全球價(jià)格走勢(shì)相關(guān)性增強(qiáng)，預(yù)計(jì)國(guó)內(nèi)牛肉價(jià)格將會(huì)逐步增長(zhǎng)，目前牛肉零售價(jià)格已從年初的65 元/kg 增長(zhǎng)到75 元/kg，漲幅13%。

畜牧業(yè)要發(fā)展，良種要先行。在第九師“強(qiáng)牧”政策的推動(dòng)下，為保障良種能繁母?；鶖?shù)與犢牛供應(yīng)，促進(jìn)肉牛育肥產(chǎn)業(yè)發(fā)展，畜牧主管部門(mén)出臺(tái)了外購(gòu)畜補(bǔ)貼、能繁母畜補(bǔ)貼、購(gòu)畜貸款貼息等系列政策促進(jìn)種牛資源的引進(jìn)和純繁。各團(tuán)場(chǎng)養(yǎng)殖合作社和職工養(yǎng)殖肉牛的積極性高漲，品種改良意識(shí)較強(qiáng)，紛紛從伊犁、阿勒泰、呼圖壁等地購(gòu)置種牛，但周邊的種牛并不能完全達(dá)到相應(yīng)品種標(biāo)準(zhǔn)，價(jià)格虛高，同時(shí)無(wú)管理的流通容易造成近親退化和動(dòng)物疫病傳播。隨著國(guó)家活畜禽流通政策和疫情控制，活體牛很難進(jìn)入我?guī)熭爡^(qū)，國(guó)外活體牛更難進(jìn)入。雖然人工授精技術(shù)、良種肉牛凍精等繁育技術(shù)能進(jìn)行品種改良和雜交，但是改良后代并不能一步到位躋身于純種肉牛生產(chǎn)性能前列[2-4]。通過(guò)使用胚胎移植技術(shù)將優(yōu)秀純種胚胎移植到我?guī)熌概Ｈ后w中，可以作為一種低成本引進(jìn)優(yōu)秀種牛資源的方式[5]。同時(shí)能夠充分挖掘優(yōu)良母畜的繁殖潛力，增強(qiáng)相應(yīng)品種對(duì)當(dāng)?shù)刈匀毁Y源的適應(yīng)性，縮短育種世代間隔，及早進(jìn)行后裔測(cè)定，防止疾病傳播，促進(jìn)肉牛產(chǎn)業(yè)繁育科技水平的發(fā)展[6-8]。因此，該文探討了在規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場(chǎng)中應(yīng)用胚胎移植技術(shù)進(jìn)行優(yōu)秀胚胎引種和移植的可行性和經(jīng)濟(jì)性，以期為該技術(shù)在新疆地區(qū)的推廣提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供體牛來(lái)源

胚胎由新疆某畜牧公司提供，母本是該公司西門(mén)塔爾牛核心群優(yōu)秀種母牛（德系）；父本是CRV 德國(guó)育種公司進(jìn)口的德系凍精，注冊(cè)號(hào)分別為180595、193705、180946。

1.2 受體牛選擇

受體母牛選擇遺傳品質(zhì)相近的健康牛，并有正常的發(fā)情周期。青年牛應(yīng)達(dá)到參配標(biāo)準(zhǔn)：規(guī)范牛場(chǎng)13～15 月齡，體重350kg 以上，如果是散戶(hù)個(gè)體養(yǎng)殖，月齡要求16～18 月齡；成母牛1～2 胎以?xún)?nèi)，一般優(yōu)先考慮青年牛作為受體牛，做好受體牛發(fā)情觀察記錄。本次移植選擇的受體牛是150 頭余頭當(dāng)?shù)攸S牛和西雜牛（西門(mén)塔爾雜交牛）作為備選母牛，最終篩選100頭作為受體母牛，其中青年待配牛86 頭，一胎后空懷母牛14 頭。

1.3 胚胎移植

1.3.1 受體母牛同期發(fā)情處理

采用GnRH-PG 法，具體過(guò)程見(jiàn)圖1。每頭牛肌注射促性腺激素釋放激素100μg，第7 天每頭牛注射氯前列烯醇（PG）0.4mg，第9 天再注射（GnRH）100μg。

圖1 受體母牛同期發(fā)情處理示意圖

1.3.2 受體牛黃體判定

受體發(fā)情后7d，檢查黃體（如1 號(hào)發(fā)情，加7d，8 號(hào)檢查黃體），黃體合格（A，B 級(jí)）移植，不合格注射PG，發(fā)情配種。預(yù)留受體可用率：一般情況受體合格率60%～65%。

1.3.3 胚胎移植

黃體合格受體，清除直腸糞便，尾椎硬膜外麻醉（鹽酸利多卡因3～5mL）。同時(shí)，進(jìn)行胚胎解凍，詳細(xì)過(guò)程如下：室溫控制在20～25℃，程序化解凍水溫28～32℃，空氣中輕搖5～8s，余氮揮發(fā)干凈，恒溫水浴鍋10～15s 解凍完成，紙巾吸干胚胎細(xì)管上的水分。最后解凍完成后，進(jìn)行胚胎移植。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同年齡段母牛移植受胎率比較

在受體母牛組成中，86 頭屬于青年牛，14 頭屬于成母牛（見(jiàn)表1）。在86 頭青年牛組中，平均為15月齡，胚胎移植共計(jì)84 頭，其中2 支胚胎爆管，受胎為34 頭，受胎率達(dá)到40.4%，產(chǎn)犢34 頭。在14 頭成母牛組中，平均為29 月齡，胚胎移植共計(jì)14 頭，受胎為4 頭，受胎率達(dá)到28.6%，產(chǎn)犢3 頭（二月齡流產(chǎn)1 頭）。

表1 不同年齡段母牛移植受胎率比較統(tǒng)計(jì)表

2.2 不同受體品種牛移植受胎率比較

在受體母牛選擇中，主要由當(dāng)?shù)攸S牛和西雜牛組成。在青年牛中，本地黃牛44 頭，受胎18 頭，受胎率為40.9%；西雜牛40 頭，受胎16 頭，受胎率為40%。在成母牛中，本地黃牛8 頭，受胎3 頭，受胎率為37.5%；西雜牛6 頭，受胎1 頭，受胎率為16.6%。

2.3 引種成本比較分析

本次胚胎移植共計(jì)100 枚，單價(jià)2300 元，合計(jì)23 萬(wàn)元。處理100 頭受體母牛激素費(fèi)用每頭36 元，合計(jì)0.36 萬(wàn)元。移植費(fèi)每頭600 元（耗材30 元、人工570 元），合計(jì)6 萬(wàn)元。成年牛飼養(yǎng)費(fèi)每頭每天總成本20 元，每月600 元，按照38 頭飼養(yǎng)12 個(gè)月（包含前期準(zhǔn)備期和懷孕期），總成本27.36 萬(wàn)元。37頭犢牛3 個(gè)月斷奶后飼養(yǎng)到10 月齡成本（7 個(gè)月）：37 頭×10×210=7.77 萬(wàn)元。合計(jì)：64.49 萬(wàn)元，獲得37頭犢牛，單頭種牛成本1.74 萬(wàn)元。

歐洲德國(guó)活體西門(mén)塔爾種牛一般不出口，澳洲西門(mén)塔爾種?；铙w引進(jìn)一般全系譜種母牛3 萬(wàn)～4 萬(wàn)元，后備種公牛10 萬(wàn)～15 萬(wàn)元，驗(yàn)證公牛20 萬(wàn)以上。美國(guó)進(jìn)口肉牛胚胎，西門(mén)塔爾一枚1 萬(wàn)元，按照上述移植方式，獲得一頭10 月齡種牛成本為3.8 萬(wàn)元。比較活體引種和胚胎移植獲得種牛，可得到胚胎移植（國(guó)內(nèi)胚胎）從成本上分析是非常有優(yōu)勢(shì)。

3 結(jié)論和討論

隨著胚胎移植技術(shù)的成熟和推廣，在畜牧業(yè)中發(fā)揮著重要作用。通過(guò)胚胎移植，供體母?？梢允∪ズ荛L(zhǎng)的妊娠期，大大縮短了繁殖周期[9]。加上對(duì)供體母牛實(shí)施超數(shù)排卵，充分發(fā)揮了良種母牛的遺傳潛力。同時(shí)，由于母牛成熟卵子數(shù)量有限和胚胎發(fā)育周期較長(zhǎng)，會(huì)造成一頭種用公牛一生中擁有的后代遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于一頭母牛。而胚胎移植就是一種使母牛多產(chǎn)的有效方法，它的運(yùn)用可以大大提高母牛的繁殖力，增加選擇精確度和選擇強(qiáng)度，從而可以加速品種改良的速度[10]。因此，該研究采用了胚胎移植技術(shù)，將優(yōu)秀胚胎移植到第九師能繁母牛群體中，用于改良肉牛群體結(jié)構(gòu)。通過(guò)不同月齡比較發(fā)現(xiàn)，青年牛的受胎率（40.4%）高于成母牛（28.6%）；不同受體品種比較發(fā)現(xiàn)，青年牛和成母牛中當(dāng)?shù)攸S牛均高于西雜牛（見(jiàn)表2），該結(jié)果為后續(xù)良種繁育提供了指導(dǎo)。

表2 不同受體品種牛移植受胎率比較統(tǒng)計(jì)表

研究發(fā)現(xiàn)，受體母牛的整體受胎率較低，可能存在以下幾方面原因：①受體牛的選擇對(duì)移植受胎率的影響。受體牛的月齡，體重，營(yíng)養(yǎng)水平，子宮環(huán)境，發(fā)情周期等因素都會(huì)影響胚胎著床和發(fā)育[11,12]。②受體發(fā)情后移植時(shí)間對(duì)受胎率的影響。主要是發(fā)情鑒定，常規(guī)操作：1 號(hào)上午穩(wěn)定接受爬跨+7d，8 號(hào)上午移植；個(gè)別發(fā)情過(guò)后2～3d 排紅，排紅當(dāng)天+5 天移植[13]。③受體的發(fā)情鑒定對(duì)胚胎移植受胎率的影響。判斷出相對(duì)接近的排卵時(shí)間根據(jù)胚胎發(fā)育階段實(shí)時(shí)移植，可有效提高受胎率；實(shí)驗(yàn)室鑒定可移植胚胎的標(biāo)準(zhǔn)：胚胎發(fā)育至桑葚胚--致密桑葚胚--早期囊胚階段。④氣候條件對(duì)胚胎移植受胎率的影響。環(huán)境溫度過(guò)高或低，對(duì)牛體自身激素水平的影響，孕酮分泌水平影響黃體發(fā)育質(zhì)量，影響胚胎著床和移植后胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育。⑤移植前受體牛黃體質(zhì)量判定對(duì)移植受胎率的影響。正常移植可用黃體為A，B 級(jí)，即黃體大?。ā?.0），質(zhì)地彈性較好，也可根據(jù)B 超圖像進(jìn)行判定[14]。⑥疫苗對(duì)胚胎移植受胎率的影響。受體牛在移植前半月，應(yīng)完成所有免疫計(jì)劃，盡量避免移植后前三個(gè)月免疫，造成胚胎早期死亡。⑦移植操作手法對(duì)移植受胎率的影響。移植人員操作手法必須熟練，可有效避免移植進(jìn)槍時(shí)對(duì)子宮內(nèi)膜的創(chuàng)傷，子宮充血產(chǎn)生對(duì)外排斥反應(yīng)，嚴(yán)重影響胚胎著床[15]。此外，近年來(lái)胚胎移植傾向于且使用陰道孕酮栓（CIDR）同期處理，黃體質(zhì)量相對(duì)一般激素較好，受胎率相對(duì)高，達(dá)到45%左右，該處理方式每頭成本增加100 元左右[16]。因?yàn)楸卷?xiàng)目經(jīng)費(fèi)有限，沒(méi)有使用CIDR 處理方式。因此，在生產(chǎn)過(guò)程中，胚胎移植過(guò)程應(yīng)從受體牛的選擇、移植時(shí)間的把握、氣候條件、操作手法等方面來(lái)提高受體母牛的受胎率。

通過(guò)胚胎移植引種在新疆第九師一六八團(tuán)規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場(chǎng)的研究，獲得37 頭純種德系西門(mén)塔爾牛，其中公犢17 頭、母犢20 頭。首先，在胚胎移植和活體引種的成本比較中，前者（1.74 萬(wàn)元/頭）較后者（3.8 萬(wàn)元/頭）成本節(jié)約在一倍以上。其次，胚胎移植牛從出生以后一直在本地飼養(yǎng)，不存在引種的環(huán)境適應(yīng)性問(wèn)題，對(duì)將來(lái)種牛生產(chǎn)性能也會(huì)有很大幫助，所以本地區(qū)引種采用國(guó)內(nèi)胚胎（國(guó)內(nèi)優(yōu)秀母本、進(jìn)口凍精）移植的方法從經(jīng)濟(jì)上分析是可行的。最后，我們會(huì)對(duì)胚胎牛進(jìn)行適應(yīng)性觀察和規(guī)范化飼養(yǎng)，公犢培育后考慮一部分作為山區(qū)牧區(qū)本交公牛使用；母本飼養(yǎng)到青年牛時(shí)期可以考慮沖1～2 次胚胎，再進(jìn)行移植擴(kuò)繁。本研究通過(guò)胚胎移植方式，受胎率和產(chǎn)犢率基本完成預(yù)期目標(biāo)，填補(bǔ)了新疆第九師一六八團(tuán)地區(qū)純種德系西門(mén)塔爾種牛的空白，為進(jìn)一步觀察該品種在本地區(qū)適應(yīng)性與將來(lái)純種繁育和擴(kuò)繁打下了基礎(chǔ)。