吳宗豪

(貴州省三穗縣農業(yè)農村局，貴州 三穗 556500)

0 引言

反芻動物是超過200種特殊的陸生植食性動物的統(tǒng)稱，特點是有4個胃，分別為瘤胃用于消化纖維素、網胃用于過濾食物中的雜質、瓣胃用于過濾未完全消化食物、皺胃(也稱真胃)用于吸收食物中的主要營養(yǎng)物質。反芻動物的瘤胃是一個由細菌、原蟲、真菌組成的微生物生態(tài)系統(tǒng)，如同一個發(fā)酵罐。反芻動物對營養(yǎng)物質的消化吸收情況受瘤胃微生物種類和不同微生物數(shù)量關系的影響，而瘤胃微生物的數(shù)量影響營養(yǎng)物質的降解率以及纖維素酶活性。

反芻動物包括常見的經濟價值較高的家畜，如牛、羊等，可以通過反芻作用將植物轉化為優(yōu)質的蛋白質和脂肪。羊肉和牛肉具有很高的市場價值，牛羊養(yǎng)殖業(yè)行情保持穩(wěn)定增長態(tài)勢，有著較高的養(yǎng)殖利潤。我國主要飼養(yǎng)奶牛、肉牛、山羊和綿羊。近年來，隨著我國奶牛和肉羊養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，存欄量也不斷增加，牛羊肉也保持著較高的市場價格優(yōu)勢。

養(yǎng)羊的周期比較短，一般來說10月齡的母羊可以進行配種，產出新的羊羔，帶來不錯的經濟效益。而養(yǎng)牛根據(jù)環(huán)境區(qū)域的不同可以進行自繁自養(yǎng)，大概需要2年時間，母牛養(yǎng)殖至少1年以上才可以繁殖配種，因此牛的養(yǎng)殖周期高于羊，但牛群容易管理，牛的抗病力要強于羊。

布氏桿菌是威脅牛和羊養(yǎng)殖業(yè)的重要病原，潛伏期較長，傳播速度極快，一旦出現(xiàn)1例感染則可在全群中迅速傳播開來，并且引起較高的感染率，嚴重影響牛和羊的生殖機能，造成機體繁殖障礙。

1 布氏桿菌病癥狀

布氏桿菌病是人獸共患的一種傳染病，以生殖系統(tǒng)侵害為特征。反芻動物感染后主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、淋巴結炎、關節(jié)炎、流產以及不孕不育等特征[1]。反芻動物布氏桿菌大多呈隱性感染，少數(shù)表現(xiàn)臨床癥狀。臨床上布氏桿菌感染后的母牛和母羊多在懷孕2個月左右發(fā)生流產，流產時的癥狀為陰唇和陰道黏膜紅腫，陰道內流出淡褐色或灰綠色分泌物，出現(xiàn)流產胎兒常有組織自溶、水腫及皮下出血等特點。流產后的雌性反芻動物常以慢性子宮內膜炎癥狀出現(xiàn)，往往屢配不孕。部分雌性反芻動物懷孕后并不發(fā)生流產，在懷孕早期胎兒死亡，被母體吸收。雄性感染布氏桿菌后，出現(xiàn)睪丸炎、副睪炎、前列腺炎、包皮炎等癥狀。

另外有研究發(fā)現(xiàn)，布氏桿菌屬的菌均可以入侵到巨噬細胞和胚胎層細胞等，可在細胞內存活和繁殖。布氏桿菌最易侵襲乳腺，并可以在多種器官如子宮、陰道、肝、上咽骨、乳腺、淋巴結、鄰近的淋巴網狀組織、胃與精囊和睪丸等組織中增殖。反芻動物感染布氏桿菌后不僅會引起生殖系統(tǒng)炎癥，還會引發(fā)關節(jié)炎、腱鞘炎，運動時出現(xiàn)跛行等癥狀。

反芻動物感染布氏桿菌后會引起機體免疫抑制。反芻動物的免疫抑制是一種急性感染狀態(tài)，免疫抑制不僅危害機體的免疫系統(tǒng)，抑制免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用，也易引起其他病原的繼發(fā)感染，從而誘發(fā)機體產生菌血癥。當雌性反芻動物持續(xù)性感染時引起繁殖障礙，經垂直傳播，常發(fā)生流產、死胎和畸形胎兒，若產下胎兒則會出現(xiàn)免疫抑制和繼續(xù)性感染，且不易被發(fā)現(xiàn)，使之成為威脅最為嚴重的傳染源。而且隱形感染和免疫抑制對母牛的繁殖機能會產生巨大影響，比如生殖失敗，出現(xiàn)受孕困難，死胎、流產、畸形胎和持續(xù)性感染胎牛等癥狀。母牛孕期通過胎盤傳播布氏桿菌病是布氏桿菌重要的流行特征。布氏桿菌病是一種慢性疾病，通常情況下病程較長，可以持續(xù)半年，沒有明顯的典型癥狀，飼養(yǎng)者很難發(fā)現(xiàn)。布氏桿菌病感染后一方面表現(xiàn)為病牛采食量減少，機體逐漸消瘦；另一方面造成免疫抑制和病原體的繼發(fā)感染。

2 布氏桿菌流行特點

反芻動物布氏桿菌病在全世界均有分布，一年四季中均可感染。反芻動物布氏桿菌病的傳染途徑為水平傳播、垂直傳播、口腔傳播和母胎傳播。水平傳播的特點為傳播范圍廣，波及較大，而母胎傳播是危害最嚴重的傳播方式。值得注意的是，受感染的牛奶、羊奶中也攜帶布氏桿菌，因此布氏桿菌且對人也存在潛在威脅。布氏桿菌在羊群中可以持續(xù)存在并廣泛傳播。尤其在一些牲畜有流動的區(qū)域，布氏桿菌不僅可以耐受干燥還可以在低溫和潮濕的環(huán)境中生存數(shù)月，而且可以在低溫天氣下的流產胎兒、糞便、干草、灰塵、設備和衣物中長期存活。布氏桿菌不耐受高溫，對于布氏桿菌的消殺可以通過巴斯德消毒法、蒸煮處理，大部分含氯和含碘消毒劑也可將其殺滅。

布氏桿菌病為慢性疾病，潛伏期較長，隱性傳播，病程較長，傳播性極強，任何時期的反芻動物都易感，均可成為主要傳染源，病畜可以通過流產胎兒、糞便、尿液等體液將布氏桿菌排泄到外界環(huán)境中，然后污染料槽、飲水器或日常用具，最后引起飼料和飲水污染，導致布氏桿菌病的快速傳播。疫區(qū)多為隱形慢性發(fā)病。有數(shù)據(jù)表明，在哺乳期，反芻動物可以通過犬、貓、野生食肉動物的母奶垂直傳播。在布氏桿菌病暴發(fā)時，90%的雌性和雄性反芻動物的生殖系統(tǒng)會被感染，這也是感染后引起不孕不育的的主要原因。

3 布氏桿菌病診斷技術

3.1 直接診斷方法

3.1.1 布氏桿菌的分離和培養(yǎng)鑒定

將采集的樣品比如陰道拭子、胎盤、流產胎兒、奶、精子以及胃內容物在實驗中進行革蘭氏染色后觀察并鑒定布氏桿菌，但此方法缺少特異性并存在直接接觸的風險。另外，可在實驗室中，將采集的疑似患病組織器官經過基礎培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)后進行鑒定和分離，一般實驗室可利用Farrell’s和Thayer-Martin’s培養(yǎng)基進行分離鑒定，通常布氏桿菌會在5 d內長出菌落。以上操作必須在布氏桿菌病標準參考實驗室中進行。分離培養(yǎng)鑒定是診斷布氏桿菌病最可靠的方法，只要從病羊體內或排出物中發(fā)現(xiàn)病原體即可確診。

3.1.2 PCR聚合酶鏈式反應

PCR是一種用于病原基因檢測的診斷方法。提取疑似患布氏桿菌病機體組織，建議采取生殖器官，經過一系列處理后提取核酸，并利用基因設計工具設計出特異性引物，并經過聚合酶鏈式反應后分析和判定。但是，由于布氏桿菌是一種細菌病，所以臨床上對于布氏桿菌的PCR方法的敏感性不如分離培養(yǎng)。

3.2 間接診斷方法

3.2.1 血清凝集試驗

布氏桿菌血清凝集試驗是利用標準的脂多糖(LPS)抗原檢測病畜體內脂多糖的抗體水平，臨床上判定標準為凝集效價1：50為可疑，1：100以上為陽性。若檢測出血清效價有4倍或以上增長，則提示此病畜存在布氏桿菌感染，這也需要結合PCR診斷方法進行進一步診斷[2]。

3.2.2 ELISA酶聯(lián)免疫吸附實驗

ELISA的檢測方法可以廣泛應用于群體動物的檢測和疫病的診斷。ELISA檢測具有較高的敏感性和特異性，根據(jù)檢測需求不同，ELISA還可分為間接型、競爭型和阻斷型。

3.2.3 補體結合試驗

布氏桿菌補體結合試驗是利用羊的溶血素作為指示劑，布氏桿菌抗原與其抗體結合后形成抗原抗體復合物，再結合補體進行實驗。參與補體結合反應的抗原是透明的溶液，故補體結合現(xiàn)象不能被肉眼看出來，必須借助溶血素作為指示劑，用于判定媒質中有無游離的補體，再進一步判定抗原抗體是否進行特異性結合。布氏桿菌補體結合試驗具有較高的敏感性和特異性，常用于診斷布氏桿菌病。

4 反芻動物布氏桿菌病綜合防控措施

4.1 預防措施

規(guī)?；雌c動物養(yǎng)殖場最好采取自繁自養(yǎng)模式，減少從外界引入病毒的風險。如果必須從外界引進反芻動物，需要從無疫區(qū)購買，并且經過嚴格檢疫，在經過隔離飼養(yǎng)后通過檢測確定反芻動物身體健康時，方可引進合群。另外，需要加強免疫接種工作，根據(jù)當?shù)丶膊鞑デ闆r，制定合理的免疫程序。提高飼養(yǎng)管理水平，應及時改善圈舍內的衛(wèi)生和通風狀況，保證圈舍始終干凈干燥、空氣新鮮。需要保持飼養(yǎng)密度合理，減少反芻動物之間互相擁擠和爭搶飼料的風險，如果過度密集就會增加布氏桿菌病傳播的風險。養(yǎng)殖人員需要認真觀察反芻動物群體，一旦發(fā)現(xiàn)異常，需要立即隔離，避免疾病擴散或蔓延。

4.2 治療措施

反芻動物消化植物纖維作用最大的是瘤胃，因此在反芻動物布氏桿菌病治療時，既要規(guī)范對癥用藥，又需要保證瘤胃的微生物發(fā)酵環(huán)境，以維持反芻動物身體機能。

按照中西醫(yī)結合的方法制定合理的治療方案，一方面通過對癥治療來幫助病畜恢復健康，另一方面中西醫(yī)結合的方法溫和有效，不破壞反芻動物的反芻功能。對患病病畜補充營養(yǎng)劑以及易消化的食物，應注意補充復合VB和VC，保持機體機能和水-電解質平衡，避免機體電解質失去平衡。同時，還可以在飼料中添加黃芪多糖來增加病畜的免疫力。

反芻動物的瘤胃內有復雜多樣的微生物，包括瘤胃原蟲、瘤胃細菌和厭氧真菌、少量的噬菌體,不同種類細菌的數(shù)量受日糧結構變化的影響。因此可以在反芻動物飼料中添加微生態(tài)制劑促進反芻動物瘤胃內益生菌的生長繁殖，調控胃腸道微生物菌群，減少動物胃腸道疾病的發(fā)生率。另外，微生態(tài)制劑可在胃腸道內產生多種消化酶，促進動物對營養(yǎng)物質的消化吸收，提高營養(yǎng)物質的利用率。對于布氏桿菌病的治療原則為早期、中西聯(lián)合、足量、足療程用藥，必要時延長療程，以防復發(fā)[3]。

病畜布氏桿菌病發(fā)病初期表現(xiàn)為精神萎靡、體虛盜汗、關節(jié)屈伸不利、惡寒、伴全身肌肉與關節(jié)疼痛、睪丸腫痛、陰道發(fā)炎等癥狀。中醫(yī)上判定屬于濕熱痹阻耗傷臟腑。治療應側重于清熱透邪，利濕通絡且化濁通痹。治療時利用氨基糖甙類比如鏈霉素每日20 mg/(kg體重)、土霉素20 mg/(kg體重)并結合四環(huán)素類藥物拌料服用。同時，可喂服薏米芍參湯中藥湯劑，喂服3次/d，此中藥湯劑的主要成分為生薏米、漢防己、秦艽、桑枝、蒼術、廣地龍、赤芍、丹參、黃芩、生甘草、梔子和木瓜等，用于清熱透邪、利濕化濁、益氣化濕、養(yǎng)血通絡。隨著病程的延長，若病畜表現(xiàn)為病情遷延、面色無華、氣短懶言、肌肉關節(jié)困脹、舌質淡、苔白、脈沉細無力，治療措施可采用抗生素和中藥湯劑結合治療?？股乜蛇x用利福平類藥物或氟喹酮類；中藥湯劑成分為生黃芪、黨參、蒼術、茯苓、山藥、當歸、白芍、威靈仙、雞血藤、生薏米、白術、甘草 、杜仲、川斷和松節(jié)等，喂服3次/d?？股嘏c中藥湯劑治療結合，一方面可快速恢復動物健康，另一方面可減少藥物對反芻動物組織臟器的傷害。

5 結語

對于反芻動物布氏桿菌病的防控可以通過提高個體的免疫力、在飼料中添加微生態(tài)制劑，提高動物的健康水平、免疫機能以及對病原的抵抗力。根據(jù)反芻動物的消化特點，應制定合理的飼料精粗比，使瘤胃真菌和纖維降解菌在發(fā)酵前期建立起相對穩(wěn)定的共生體系，進一步保障反芻動物消化能力。從業(yè)者應當學習反芻動物布氏桿菌病的相關專業(yè)知識，科學地防范反芻動物布氏桿菌病的發(fā)生，如果出現(xiàn)突發(fā)布氏桿菌病疫病的情況，應做到及時隔離病畜、消殺環(huán)境、合理防控，杜絕布氏桿菌的傳播和擴散，做到科學養(yǎng)殖；政府相關部門應向養(yǎng)殖戶普及布氏桿菌病的相關防控技術，減少布氏桿菌帶來的經濟損失。