沈雅萍，韋 薇

（上海市松江區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，上海 201600）

呼吸道感染屬于常見病和多發(fā)病，臨床表現(xiàn)多樣，包括發(fā)熱、咽痛、咳嗽、咳痰、喘息等，可由多種病原體引起。除了由常見的肺炎鏈球菌等細菌引起外，90%以上的呼吸道感染由非典型病原體引起，包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒A型（INFA）、流感病毒B型（INFB）、副流感病毒（PIV）、肺炎支原體（MP）、肺炎衣原體（CPn）及嗜肺軍團菌（LP）[1]等。目前，對于疑似呼吸道感染的患者，進行相應的呼吸道病原體譜抗體檢測已成為臨床診斷的一種常用篩查手段。為探討松江區(qū)呼吸道感染患者的病原體構(gòu)成情況，本研究對2021年3月至2022年2月的2 323例呼吸道病原體譜抗體檢測進行了分析，以期為臨床提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2021年3月至2022年2月上海市松江區(qū)中心醫(yī)院收治的2 323例呼吸道感染患者的呼吸道病原體譜抗體檢測數(shù)據(jù)進行回顧性分析。按季節(jié)發(fā)病特點劃分：春季（3～5月）551例，夏季（6～8月）539例，秋季（9～11月）597例，冬季（12～2月）636例；按患者性別劃分：男性1 410例，女性913例；按患者年齡劃分：0～14歲230例，15～59歲535例，≥60歲1 558例。本研究經(jīng)上海市松江區(qū)中心醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。診斷標準：參照《內(nèi)科學（第9版）》[2]中呼吸系統(tǒng)疾病的診斷標準。納入標準：①呼吸道感染患者；②臨床資料完整。排除標準：①合并惡性腫瘤；②有其他肺基礎(chǔ)疾病。

1.2 檢驗方法抽取患者靜脈血3～5 mL，靜置凝固后，以4 000 r/min離心10 min，分離血清，采用間接免疫熒光法檢測血清中RSV、ADV、INFA、INFB、PIV、MP、CPn及LP等8項呼吸道病原體的免疫球蛋白M（IgM）抗體。具體方法為患者血清與包被有檢測基質(zhì)的載片溫育。如果樣本陽性，特異性IgM抗體可與玻片上的相應的抗原特異性結(jié)合。在第二步溫育時，結(jié)合的抗體與異硫氰酸熒光素（FITC）標記的抗人免疫球蛋白抗體反應。采用熒光顯微鏡（德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司，型號：EUROStarll型）觀察特異的熒光模型，從而檢測血清中病原體抗體。實驗操作時嚴格按照試劑盒中說明書進行，并使用熒光顯微鏡閱片判讀結(jié)果。注意在檢測特異性IgM類抗體前去除患者樣本中的IgG類抗體，如采用免疫吸附等方法去除，這不僅可以防止樣本中的IgM類類風濕因子與特異性結(jié)合的IgG反應而引起的假陽性結(jié)果，還可防止特異性IgG與IgM發(fā)生競爭性結(jié)合而引起的假陰性結(jié)果。標本采集后如不能在6 h內(nèi)檢測，以3 000 r/min離心10 min，置于2～8 ℃冰箱冷藏保存，可儲存14 d。呼吸道病原體譜抗體診斷試劑盒產(chǎn)自德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司。

1.3 觀察指標①比較8項呼吸道病原體IgM抗體檢測的總陽性率。②比較不同季節(jié)感染患者8項呼吸道病原體IgM抗體檢測的陽性率。③比較陽性率最高的3項呼吸道病原體不同季節(jié)感染情況。④比較不同性別患者呼吸道病原體IgM抗體陽性情況。⑤比較不同年齡段患者呼吸道病原體情況。

1.4 統(tǒng)計學分析采用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以[例(%)]表示，多組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道病原體譜IgM抗體陽性情況比較2 323例血清樣本中，陽性標本數(shù)為397例，總陽性率為17.09%。其中INFB陽性率最高（10.42%），INFA（2.11%）與LP（1.68%）分列第二、第三，見表1。

表1 呼吸道病原體譜IgM抗體檢測陽性情況比較

2.2 不同季節(jié)呼吸道病原體IgM抗體陽性情況比較呼吸道病原體譜IgM檢測結(jié)果在不同季節(jié)分布情況：陽性率較高的季節(jié)為夏季（22.26%）和秋季（20.77%），見表2。

表2 不同季節(jié)呼吸道病原體IgM抗體陽性情況比較

2.3 不同發(fā)病季節(jié)患者3種病原體感染情況比較總陽性率前三的病原體INFB、INFA、LP感染情況在不同季節(jié)之間比較，INFB陽性率高于INFA及LP，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05)，見表3。

表3 不同季節(jié)3種病原體感染情況比較[例(%)]

2.4 不同性別患者呼吸道病原體抗體陽性情況比較男性INFA陽性率（2.77%）高于女性（1.10%），差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），不同性別患者其他呼吸道病原體陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表4。

表4 不同性別患者呼吸道病原體IgM抗體陽性情況比較 [例(%)]

2.5 不同年齡段患者呼吸道病原體IgM抗體陽性情況比較0～14歲年齡段以INFB（16.96%）和MP感染（10%）為主，其余兩個年齡段均以INFB為主（15～59歲為11.96%，≥60歲為8.92%）。 0～14歲年齡段INFB及MP感染陽性率高于另外兩個年齡組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同年齡的患者其他6項呼吸道病原體陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表5。

表5 不同年齡段患者呼吸道病原體IgM抗體陽性情況比較 [例(%)]

3 討論

隨著各種抗生素的廣泛應用，呼吸道細菌的感染率有所下降，而非典型病原體，包括MP、CPn、病毒等病原體引起的呼吸道疾病發(fā)病率在不斷升高[3]。

呼吸道病原體的檢測方法主要有微生物培養(yǎng)法、血清學檢測和分子生物學檢測[4-5]。微生物培養(yǎng)法耗時長和檢出率低；分子生物學檢測呼吸道病原體成本高，技術(shù)要求高。使用間接免疫熒光法來檢測血清樣本中呼吸道病原IgM抗體具有高效、簡便等特點，逐漸替代了“金標準”技術(shù)分離培養(yǎng)，并成為一種可靠的方法，適用于臨床篩查。

本研究結(jié)果顯示，2 323例血清樣本中，8項呼吸道病原體IgM抗體檢測的陽性率為17.09%，這與張博文等[6]的報道相對接近，但與楊翌翔等[7]的報道相比則有所降低，這可能與疫情后口罩佩戴情況及空氣質(zhì)量差異有關(guān)[8-9]。感染率最高的3種病原體分別是INFB（10.42%），INFA（2.11%）與LP（1.68%），與鐘秋蓉等[10]報道的以MP，INFB及CPn為主不相符，本研究LP陽性率高于MP、CPn病原體的可能推測是因為疫情期間公眾居家時間大幅增加，空調(diào)使用頻率增加，導致人員更多地暴露于LP定植的環(huán)境[11]。

通過對不同季節(jié)呼吸道病原體感染情況的研究，結(jié)果顯示，感染高峰期為夏秋季。與邱淵等[12]報道的春、夏季感染率較高略有不同，有可能是氣候因素或者地域差異導致，具體有待進一步研究。本研究結(jié)果還顯示，INFB、INFA、LP感染率在不同季節(jié)之間比較，差異有統(tǒng)計學意義，不同季節(jié)INFB陽性率均高于INFA、LP。

通過對不同性別患者呼吸道病原體感染進行分析，發(fā)現(xiàn)男性患者的INFA陽性率（2.77%）高于女性（1.10%），但具體原因尚不明確，有待進一步研究，而其他呼吸道病原體比較，差異無統(tǒng)計學意義。通過對不同年齡段患者呼吸道病原體感染進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)INFB在3個年齡段都易感，陽性率分別為16.96%，11.96%，8.92%。流感是最常見的呼吸道感染性疾病之一。其致病基因突變能力強，因而一次流感病毒感染不會產(chǎn)生終身免疫。對于高危易感人群，可在流感流行季節(jié)開始時接種疫苗進行免疫，減少感染率。0～14歲年齡段人群MP易感，陽性率為10%[15-16]。MP可引起非典型性肺炎和常見的上呼吸道感染。感染可通過汽溶膠引起，人類是該病原體的唯一宿主，急性感染常見于5～15歲的年輕人中[17-18]。本研究結(jié)果顯示，0～14歲年齡段患者INFB和MP感染陽性率高于另外兩個年齡段，其他6項呼吸道病原體陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義。

綜上所述，呼吸道病原體致病性強，傳播速度快，不同季節(jié)、不同性別、不同年齡段的陽性率不盡相同。故對8項呼吸道感染病原體IgM抗體的測定，能夠為臨床診治提供可靠的信息，指導臨床合理用藥。