張 悅，李 安，潘立剛,*，趙 杰,*

（1.北京市農(nóng)林科學(xué)院質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，北京 100097；2.北京農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，北京 102206）

菠菜（Spinacia oleraceaL.）又稱波斯菜、赤根菜，是最受歡迎和營養(yǎng)豐富的綠葉蔬菜之一。菠菜不僅含有大量的葉酸、類胡蘿卜素、多酚、抗壞血酸、β-胡蘿卜素以及礦物質(zhì)，同時(shí)還具有抗氧化、抗炎、抗癌和降脂等功能特性[1-2]。菠菜葉片氣孔分布密集，極易受到腐敗菌的侵染，且其葉片表面積大，采后仍有較強(qiáng)的呼吸速率和蒸騰作用，在常溫貯運(yùn)過程中極易失水、活性氧代謝失衡、萎蔫軟化，腐爛黃化率高，嚴(yán)重影響其商用價(jià)值。目前菠菜主要通過低溫冷藏進(jìn)行保鮮[3]。而使用氣調(diào)貯藏的方法對(duì)氣密性的要求高，所需設(shè)備的一次性投資大且運(yùn)行費(fèi)用高，增加了貯藏成本。因此，開發(fā)有效、經(jīng)濟(jì)、綠色、易于產(chǎn)地化保鮮的菠菜采后保鮮劑貯藏技術(shù)對(duì)于降低菠菜的采后損失以及延長其貨架期具有重要意義。

1-甲基環(huán)丙烯（1-methylcyclopropene，1-MCP）作為一種環(huán)丙烯類的化合物，安全無毒，本質(zhì)上是一種有效的乙烯拮抗化合物，它的雙鍵張力和化合能均高于乙烯，因此能與乙烯受體蛋白的金屬離子進(jìn)行強(qiáng)烈結(jié)合[4]，與乙烯競(jìng)爭(zhēng)受體，使得乙烯失去與受體結(jié)合的機(jī)會(huì)，從而延緩果蔬成熟衰老的進(jìn)程。Hu Huali等[5]研究表明1-MCP處理有效抑制了采后甘藍(lán)的乙烯釋放量及呼吸速率，維持了甘藍(lán)中的葉綠素含量、酚類物質(zhì)含量和抗氧化能力。Kanwal等[6]研究表明1-MCP處理和氣調(diào)包裝（modified atmosphere packaging，MAP）均能有效抑制秋葵的軟化腐爛、產(chǎn)品色澤降低、質(zhì)量損失率下降，且1-MCP＋MAP聯(lián)合處理能使秋葵在7 ℃條件下保持20 d。李振等[7]研究發(fā)現(xiàn)1-MCP和茶多酚聯(lián)合處理可有效延緩蕨菜質(zhì)量損失率和粗纖維質(zhì)量分?jǐn)?shù)的上升，減少可溶性蛋白、可滴定酸和可溶性糖的分解和轉(zhuǎn)化，維持較高水平的過氧化物酶（peroxidase，POD）活力。植酸（phytic acid，PA）是提取自米糠或小麥麩皮中的一種食品抗氧化劑，天然無毒，它可以抑制果蔬的氣體交換，減緩呼吸速率，降低水分的蒸發(fā)，阻止氧化作用，防止微生物的大量生長繁殖[8]。韓夢(mèng)凡等[9]對(duì)水果甘藍(lán)使用臭氧與PA聯(lián)合處理后提高了其總酚含量，顯著抑制了水果甘藍(lán)中微生物在貯藏過程中的生長。任邦來等[10]研究表明PA溶液處理能夠推遲番茄呼吸躍變時(shí)呼吸高峰的出現(xiàn)時(shí)間，維持了番茄的硬度、可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)（soluble solids content，SSC）和可滴定酸含量。

盡管目前1-MCP在蔬菜貯藏保鮮中的研究已有報(bào)道[11]，但缺乏其在菠菜貯藏保鮮中應(yīng)用適宜濃度以及對(duì)貯藏期內(nèi)菠菜生理品質(zhì)影響的系統(tǒng)研究，有關(guān)PA處理菠菜的研究也很少，而對(duì)于1-MCP與PA復(fù)合處理保鮮菠菜的研究以及抗氧化能力的研究更是鮮見報(bào)道。本研究通過使用1-MCP與PA單獨(dú)及復(fù)合搭配對(duì)菠菜進(jìn)行保鮮處理，提出適合菠菜貯藏最佳復(fù)合保鮮劑用量，探索復(fù)合保鮮劑對(duì)菠菜采后生理及貯藏品質(zhì)的影響，以期為菠菜貯藏保鮮提供技術(shù)參考和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

菠菜于2021年9月采摘于北京天安農(nóng)業(yè)尚義農(nóng)場(chǎng)，采后立即運(yùn)回北京天安農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，選擇無機(jī)械損傷、無病蟲害且色澤長度均一的樣品于（4f 1）℃預(yù)冷處理24 h。

1-MCP（有效質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.018%） 咸陽西秦生物科技有限公司；PA 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；POD測(cè)定試劑盒、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力測(cè)試盒 南京建成生物工程研究所；本實(shí)驗(yàn)中分析理化和品質(zhì)指標(biāo)的常用化學(xué)試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

AL204-IC型電子天平 瑞士Mettler Toledo有限公司；DK-98-IIA電熱恒溫水浴鍋 天津泰斯特儀器有限公司；PAL-1型折光儀 日本Atago公司；TYS-A型葉綠素測(cè)定儀 北京中科維禾科技發(fā)展有限公司；SKY6000-C2H4便攜泵吸式乙烯檢測(cè)儀 深圳元特科技有限公司；MY-10手持式組織研磨器 上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司；MiniSpin plus高速離心機(jī) 德國Eppendorf有限公司；Tu-1810D紫外-可見分光光度計(jì)、GWAUN3-F20超純水器 北京普析通用儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 菠菜預(yù)處理

分別采用1-MCP熏蒸和PA噴涂處理菠菜，參照孫希生[12]和祝美云[8]等的方法略作修改，1-MCP劑量設(shè)定為0、1、2、4 μL/L，PA質(zhì)量分?jǐn)?shù)設(shè)定為0、0.1%、0.2%、0.4%。處理后菠菜于（20f 1）℃條件下貯藏8 d，貯藏期間每2 d取樣測(cè)定相關(guān)指標(biāo)（感官評(píng)價(jià)、腐爛指數(shù)、質(zhì)量損失率、葉綠素相對(duì)含量）。確定1-MCP熏蒸處理的最佳劑量和PA噴涂處理的最佳質(zhì)量分?jǐn)?shù)。之后設(shè)定兩種劑量的1-MCP（1.0、1.5 μL/L）和兩種質(zhì)量分?jǐn)?shù)的PA（0.05%、0.1%）進(jìn)行全因子復(fù)合處理實(shí)驗(yàn)，確定復(fù)合處理最適宜的含量組合。后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇最適宜的處理劑量及組合分別單獨(dú)和復(fù)合處理采后菠菜。具體處理流程如下。

將挑選好的新鮮菠菜隨機(jī)分成4 組，每組40 株，分別進(jìn)行以下處理：1）對(duì)照組（CK）：未做1-MCP和PA處理；2）1-MCP（劑量1.0 μL/L）處理組：使用電子天平精確稱取0.916 g 1-MCP于培養(yǎng)皿中，按1∶5（m/V）加入40 ℃溫水，立即蓋上培養(yǎng)皿蓋，置于容積為73.6 L、裝有菠菜的密閉封箱內(nèi)后打開培養(yǎng)皿蓋，在（20f 1）℃條件下熏蒸24 h后打開密閉箱蓋通風(fēng)30 min；3）PA（質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%）處理組：使用配制好的0.1% PA溶液噴涂菠菜后于通風(fēng)處自然晾干；4）1-MCP＋PA處理組：先對(duì)菠菜進(jìn)行1.0 μL/L 1-MCP熏蒸處理，再進(jìn)行0.1% PA噴涂處理。將以上處理好的菠菜裝入帶孔聚乙烯防霧袋中（袋打直徑1 cm圓形孔4 個(gè)，袋厚0.03 mm），包裝但不封口，之后放置于室溫（20f 1）℃，相對(duì)濕度80%～90%條件下貯藏8 d，每2 d從中取樣測(cè)定指標(biāo)，每個(gè)指標(biāo)重復(fù)測(cè)定3 次。

1.3.2 指標(biāo)測(cè)定

1.3.2.1 感官評(píng)價(jià)

參照李振等[7]的方法有所改動(dòng)，由6 名具有專業(yè)知識(shí)的評(píng)審員組成感官評(píng)價(jià)小組，分別從外觀、形態(tài)、氣味3 個(gè)方面對(duì)各處理組菠菜進(jìn)行感官評(píng)價(jià)，按照百分制分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定，根據(jù)評(píng)分劃為5 個(gè)等級(jí)結(jié)果取平均值，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如表1所示。

表1 菠菜感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Criteria for sensory evaluation of spinach

1.3.2.2 腐爛指數(shù)測(cè)定

參考王福建等[13]的方法略作改動(dòng)，根據(jù)以下分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)確定腐爛級(jí)別，并計(jì)算每級(jí)腐爛菠菜占所分析處理株數(shù)的比例，表征腐爛指數(shù)。菠菜腐爛程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)：菠菜葉片鮮綠無腐爛；1級(jí)：最外層葉片腐爛、變軟；2級(jí)：葉片第二層開始腐爛、變軟；3級(jí)：葉片內(nèi)層腐爛、變軟；4級(jí)：整株葉片腐爛、變軟。腐爛指數(shù)計(jì)算如公式（1）所示。

1.3.2.3 質(zhì)量損失率測(cè)定

質(zhì)量損失率測(cè)定采用稱質(zhì)量法[14]，質(zhì)量損失率計(jì)算如公式（2）所示。

1.3.2.4 葉綠素相對(duì)含量測(cè)定

參考周君等[15]的方法并略作改動(dòng)，采用葉綠素測(cè)定儀通過土壤與作物分析開發(fā)（soil and plant analyze development，SPAD）方法測(cè)定葉綠素相對(duì)含量，均在葉片中間部位進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)處理測(cè)定10 次，取其平均值。重復(fù)3 次。測(cè)定的SPAD值表征葉綠素相對(duì)含量。SPAD值越高表明葉綠素含量越高[16]。

1.3.2.5 SSC測(cè)定

SSC測(cè)定參考Cai Hongfang等[17]的方法使用折光儀。

1.3.2.6 乙烯釋放量測(cè)定

參考安容慧等[18]的方法略有改動(dòng)。每組取9 株菠菜，其中每個(gè)平行3 株，稱質(zhì)量后置于密封箱中，于（20f 1）℃條件下密閉2 h后使用便攜泵吸式乙烯檢測(cè)儀探頭伸入測(cè)定。以每小時(shí)每千克菠菜釋放的乙烯體積表征乙烯釋放量，計(jì)算如公式（3）所示。

式中：c為乙烯含量/（μL/L）；V為密封容器容積/mL；m為蔬菜質(zhì)量/kg；t為測(cè)定時(shí)間/h。

1.3.2.7 POD活力測(cè)定

參照愈創(chuàng)木酚法[19]進(jìn)行測(cè)定。在37 ℃條件下，以每克鮮質(zhì)量組織每分鐘催化1 μg底物的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。

1.3.2.8 DPPH自由基清除率測(cè)定

DPPH自由基清除率測(cè)定參考Wootton-Beard等[20]的方法。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

使用Excel 2019軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)初步處理，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS Statistics 26軟件，通過單因素方差分析進(jìn)行Duncan多重檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異顯著，并利用Origin Pro 2021軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間感官品質(zhì)的影響

在采后菠菜貯藏保鮮中，感官評(píng)分是最為直觀的一項(xiàng)指標(biāo)。菠菜的感官評(píng)分在整個(gè)貯藏期間整體呈下降趨勢(shì)（圖1），在貯藏過程中逐漸發(fā)生感官品質(zhì)的劣變及腐爛變質(zhì)。貯藏初期，各組菠菜的色澤翠綠、葉片飽滿、形態(tài)較優(yōu)，具有菠菜的固有清香。CK組菠菜的感官評(píng)分在0～6 d快速下降并在6 d時(shí)達(dá)到感官拒絕點(diǎn)（＜60 分），喪失了商品價(jià)值。而在貯藏6 d后，1-MCP＋PA處理組菠菜的感官評(píng)分為80.6 分，感官評(píng)分下降緩慢。在貯藏初期0～4 d，PA處理組的感官評(píng)分高于1-MCP處理組，貯藏中后期1-MCP處理組感官評(píng)分高于PA處理組。貯藏8 d后，CK組菠菜葉片嚴(yán)重軟化褐變，并有嚴(yán)重腐敗異味；處理組仍具有商品價(jià)值，其中1-MCP＋PA處理組菠菜的感官品質(zhì)相較于單獨(dú)處理組保持較好，復(fù)合處理組感官評(píng)分高于單獨(dú)處理組，這說明1-MCP＋PA復(fù)合處理更能保持采后菠菜的外觀、形態(tài)和氣味等品質(zhì)，提高菠菜的商品價(jià)值。

圖1 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理菠菜感官評(píng)分Fig.1 Sensory evaluation of spinach treated with 1-MCP and/or PA

2.2 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間腐爛指數(shù)的影響

腐爛指數(shù)是用來判斷果蔬貯藏效果的主要表觀指標(biāo)，在整個(gè)貯藏期間，菠菜的腐爛指數(shù)在明顯上升且在貯藏后期隨著腐爛速率加快，腐爛指數(shù)也在快速上升。如圖2所示，CK組菠菜在第2天就開始腐爛，且在整個(gè)貯藏期間CK組的腐爛指數(shù)均顯著高于其他處理組（P＜0.05）。貯藏至4 d時(shí)，各處理組之間的腐爛指數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。單獨(dú)使用1-MCP處理的菠菜腐爛指數(shù)在貯藏6 d后顯著低于單獨(dú)使用PA處理組（P＜0.05）。貯藏6 d時(shí)，1-MCP處理組的腐爛指數(shù)略高于1-MCP＋PA處理組，但無顯著差異（P＞0.05）。結(jié)果表明，1-MCP和PA處理均能抑制菠菜腐爛指數(shù)的上升，而1-MCP＋PA處理作用效果更佳，在貯藏8 d時(shí)，復(fù)合處理組相較于CK組顯著降低了菠菜的腐爛指數(shù)（P＜0.05），延長了菠菜的保質(zhì)期。

圖2 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間腐爛指數(shù)的影響Fig.2 Effects of 1-MCP,PA and their combination on decay index of spinach during storage

2.3 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間質(zhì)量損失率的影響

果蔬在貯藏期間的質(zhì)量損失主要是由于蒸騰作用和呼吸作用造成的水分流失，質(zhì)量損失率是果蔬重要的品質(zhì)評(píng)價(jià)指標(biāo)，其越大表明果蔬中的水分和營養(yǎng)成分損失越嚴(yán)重[21]。隨著貯藏時(shí)間的延長，采后菠菜的質(zhì)量損失率不斷增大（圖3）。CK組質(zhì)量損失率總體呈快速上升趨勢(shì)；貯藏4 d后，各處理組的質(zhì)量損失率顯著低于CK組（P＜0.05），1-MCP單獨(dú)處理的菠菜質(zhì)量損失率低于PA單獨(dú)處理，但差異不顯著（P＞0.05），復(fù)合處理組的質(zhì)量損失率顯著低于PA處理組（P＜0.05）。貯藏8 d時(shí)，CK組的質(zhì)量損失率達(dá)18.68%，1-MCP處理組和1-MCP＋PA處理組質(zhì)量損失率較低，分別為6.84%和5.89%，但兩者之間差異不顯著（P＞0.05）。這說明1-MCP＋PA處理可以有效保持采后菠菜的水分和營養(yǎng)成分，減少貯藏期間的質(zhì)量損失，提升采后保鮮性能。

圖3 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間質(zhì)量損失率的影響Fig.3 Effects of 1-MCP,PA and their combination on mass loss percentage of spinach during storage

2.4 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間葉綠素相對(duì)含量的影響

葉綠素是葉片組織中的主要色素，在碳水化合物的合成過程中有著重要的作用[22]。葉綠素含量的高低會(huì)直接對(duì)采后菠菜的外觀品質(zhì)有所影響。SPAD值是衡量植物中葉綠素相對(duì)含量的一個(gè)參數(shù)，SPAD值越大代表植物綠色程度越高[23]。采后菠菜在貯藏期內(nèi)，其SPAD值呈逐漸下降趨勢(shì)（圖4）。采后菠菜貯藏4 d后，處理組菠菜的SPAD值均顯著高于CK組（P＜0.05），說明使用保鮮劑處理菠菜起到了一定的護(hù)色效果。貯藏過程中，1-MCP處理組的SPAD值始終高于PA處理組，且在6 d后差異顯著（P＜0.05），這說明1-MCP處理菠菜的護(hù)綠效果要優(yōu)于PA處理。采后菠菜貯藏8 d時(shí)，1-MCP＋PA處理組SPAD值（38.8%）高于1-MCP處理組（38.2%），差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于CK組（P＜0.05），這說明使用1-MCP＋PA處理可以延緩采后菠菜的黃化，并減緩葉綠素相對(duì)含量的降低。

圖4 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間葉綠素相對(duì)含量的影響Fig.4 Effects of 1-MCP,PA and their combination on the relative content of chlorophyll in spinach during storage

2.5 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間SSC的影響

菠菜中的可溶性固形物包括糖類、水溶性維生素、微量元素等物質(zhì)，它能夠反映出采后菠菜營養(yǎng)成分的變化，是衡量菠菜中營養(yǎng)成分的重要指標(biāo)[24]。如圖5所示，所有組的SSC在貯藏初期呈上升的趨勢(shì)，這是由于高分子碳水化合物的水解作用促使還原糖含量上升，從而導(dǎo)致SSC升高[22]。貯藏期間CK組的SSC在第2天就已經(jīng)達(dá)到最大值，1-MCP＋PA處理組的菠菜SSC最大值出現(xiàn)在貯藏第4天，隨后各組菠菜的SSC均快速下降，這是由于采后菠菜在貯藏過程中的呼吸作用會(huì)使得低分子糖不斷消耗，從而使SSC降低[25]。在整個(gè)貯藏中后期，處理組SSC均高于CK組，且1-MCP＋PA組與CK組差異顯著（P＜0.05），表明1-MCP和PA單獨(dú)處理均能夠抑制采后菠菜SCC的降低，延緩其后熟衰老過程，其中1-MCP＋PA復(fù)合處理組能更好地減緩菠菜營養(yǎng)流失。

圖5 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間SSC的影響Fig.5 Effects of 1-MCP,PA and their combination on SSC in spinach during storage

2.6 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間乙烯釋放量的影響

果蔬貯藏過程中的呼吸作用受到乙烯影響，乙烯是調(diào)控果蔬成熟與衰老的關(guān)鍵因子，能夠刺激和協(xié)調(diào)果蔬成熟過程中發(fā)生的生理變化，加速果蔬成熟衰老進(jìn)程[26]。由圖6可以看出，采后菠菜的乙烯釋放量隨貯藏時(shí)間的延長整體呈逐漸上升的趨勢(shì)。貯藏4 d后，CK組乙烯釋放量快速上升，1-MCP和PA單獨(dú)及復(fù)合處理組與CK組相比顯著抑制了乙烯釋放量的上升（P＜0.05）。貯藏過程中，1-MCP單獨(dú)處理抑制乙烯釋放量的作用效果優(yōu)于PA單獨(dú)處理，貯藏0～6 d時(shí)，1-MCP＋PA復(fù)合處理組菠菜乙烯釋放量低于1-MCP處理組，但無顯著差異（P＞0.05），而在貯藏末期8 d時(shí)，1-MCP＋PA處理組和1-MCP處理組的乙烯釋放量差異顯著（P＜0.05），這可能是由于1-MCP雖然能和乙烯受體進(jìn)行不可逆結(jié)合，阻止乙烯的信號(hào)傳導(dǎo)和生理效應(yīng)，但隨著貯藏時(shí)間的延長，新的乙烯受體蛋白不斷合成，1-MCP處理效果會(huì)逐漸減退[27]。

圖6 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間乙烯釋放量的影響Fig.6 Effects of 1-MCP,PA and their combination on ethylene release from spinach during storage

2.7 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間POD活力的影響

POD是一種與植物代謝相關(guān)的重要氧化還原酶，它在維持活性氧系統(tǒng)的代謝平衡中起著重要的作用，POD活力上升有利于清除植物體內(nèi)活性氧自由基[28]。由圖7可知，采后菠菜在貯藏期內(nèi)的POD活力整體呈下降趨勢(shì)，處理組相較于CK組顯著提高了采后菠菜的POD活力（P＜0.05）。貯藏2～4 d，各組POD活力小幅度上升，貯藏第4天時(shí)，各處理組之間POD活力無顯著差異（P＞0.05），1-MCP＋PA復(fù)合處理組POD活力最高且顯著高于CK組的POD活力（P＜0.05）。貯藏至8 d時(shí)，1-MCP＋PA處理組的POD活力顯著高于1-MCP處理組和PA處理組（P＜0.05），1-MCP處理組和PA處理組之間差異不顯著（P＞0.05）。由此可見，1-MCP＋PA復(fù)合處理組顯著提高了采后菠菜的POD活力，在一定程度上防止了H2O2積累引發(fā)的生理毒害，降低了自由基的積累，增強(qiáng)了菠菜的抗氧化能力，從而能夠延長采后菠菜的貯藏期。

圖7 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間POD活力的影響Fig.7 Effects of 1-MCP,PA and their combination on POD activity of spinach during storage

2.8 不同處理對(duì)菠菜貯藏期間DPPH自由基清除率的影響

DPPH自由基清除率能反映果蔬的抗氧化能力。由圖8可知，采后菠菜在貯藏期間DPPH自由基清除率總體呈下降趨勢(shì)，CK組在貯藏初期DPPH自由基清除率就迅速下降，而處理組的DPPH自由基清除率下降緩慢，在貯藏4 d時(shí)顯著高于CK組（P＜0.05）。PA處理采后菠菜的DPPH自由基清除率高于1-MCP處理組，但兩個(gè)處理組之間差異不顯著（P＞0.05）。貯藏至6 d時(shí)，1-MCP＋PA處理組的DPPH自由基清除率顯著高于1-MCP處理組和PA處理組（P＜0.05）。貯藏8 d時(shí)，1-MCP＋PA處理組的DPPH自由基清除率為62.2%，比CK組顯著提高了29.3%（P＜0.05），1-MCP＋PA處理組的DPPH自由基清除率高于PA處理組，無顯著差異（P＞0.05）。DPPH自由基清除率越高，菠菜的抗氧化能力就越強(qiáng)，這說明1-MCP＋PA處理能夠顯著提升采后菠菜的抗氧化能力，延緩品質(zhì)劣變，從而能夠延長采后菠菜貯藏期和提升采后菠菜貯藏品質(zhì)。

圖8 1-MCP、PA單獨(dú)及復(fù)合處理對(duì)菠菜貯藏期間DPPH自由基清除率的影響Fig.8 Effects of 1-MCP,PA and their combination on DPPH radical scavenging capacity of spinach during storage

3 討論

有研究表明，1-MCP通過干擾與乙烯合成過程相關(guān)的1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸（1-amino-cyclopropane-1-carboxylate，ACC）合成酶和ACC氧化酶的基因表達(dá)進(jìn)而影響乙烯合成，延緩了蔬菜的成熟衰老[29]。本研究結(jié)果也證實(shí)經(jīng)1-MCP＋PA處理后顯著降低了貯藏期內(nèi)菠菜的乙烯釋放量。菠菜屬于呼吸躍變型蔬菜，1-MCP能夠減緩呼吸躍變型果蔬的呼吸速率及其成熟過程中的乙烯釋放量，從而能夠延緩其衰老進(jìn)程。Acuna等[30]使用1-MCP熏蒸處理巴特梨，發(fā)現(xiàn)在20 ℃條件下熏蒸24 h效果要優(yōu)于0 ℃熏蒸處理24 h。這可能是因?yàn)榈蜏匾环矫鏈p緩了與1-MCP作用相關(guān)酶的代謝；另一方面降低了1-MCP與乙烯受體的親和力以及其在細(xì)胞質(zhì)中的溶解度[31]。另外，目前1-MCP商品化試劑是固載于類環(huán)糊精上的絡(luò)合物，低溫會(huì)減緩其由固載相轉(zhuǎn)化為可在植物組織中移動(dòng)且能與乙烯受體相互作用的氣態(tài)的過程，且低溫下高濃度1-MCP處理會(huì)加重果蔬冷害[32]。綜上，本研究采用1 μL/L 1-MCP在（20f 1）℃環(huán)境溫度下熏蒸處理菠菜24 h。

Cai Hongfang等[17]發(fā)現(xiàn)經(jīng)1-MCP處理后的油桃香氣成分如烷烴類、酯類含量有所減少。Mattheis等[33]研究表明1-MCP會(huì)降低呼吸躍變型果實(shí)中酯類化合物的產(chǎn)量。李楊昕等[34]研究表明ACC氧化酶與脂氧合酶共同調(diào)控乙烯的合成，進(jìn)而調(diào)節(jié)香氣的釋放，影響果蔬的風(fēng)味。這說明在貯藏初期1-MCP處理可能對(duì)果蔬的感官品質(zhì)有一定的影響。因此，關(guān)于1-MCP＋PA復(fù)合處理對(duì)菠菜風(fēng)味成分的影響還需要進(jìn)一步使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行探究。

本研究中在貯藏期前4 d，PA單獨(dú)處理的菠菜感官評(píng)分高于1-MCP單獨(dú)處理的菠菜，前者的外觀和氣味保持較好，表明在貯藏前期PA對(duì)果蔬的感官品質(zhì)有一定的維持作用。PA處理也有很好的護(hù)色效果，其在鮮切紫甘藍(lán)[35]的保鮮中起到了維持葉綠素含量、減少菜體中色素流失的作用。但在貯藏末期1-MCP單獨(dú)處理的感官評(píng)分高于PA單獨(dú)處理組，這說明1-MCP處理在貯藏中后期效果更顯著，這可能與1-MCP抑制了乙烯釋放有關(guān)。

已有研究表明，兩種及以上保鮮劑的復(fù)合使用往往會(huì)起到協(xié)同增效的結(jié)果[8,36]。本實(shí)驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)，1-MCP＋PA復(fù)合處理較二者單獨(dú)處理在降低菠菜腐爛指數(shù)和質(zhì)量損失率及保持貯藏期內(nèi)菠菜的感官品質(zhì)方面作用更加明顯，而且在減緩SSC下降、提高POD活力及DPPH自由基清除率方面效果也更好?？扇苄怨绦挝飳?duì)果蔬的風(fēng)味、糖酸比、貯藏性和加工性質(zhì)都具有重要的作用。本研究中單獨(dú)使用PA處理菠菜的SCC在貯藏第2天就達(dá)到了峰值，而1-MCP＋PA處理組比PA處理組達(dá)到峰值的時(shí)間晚2 d，且在貯藏中后期復(fù)合處理組的菠菜SSC高于1-MCP處理組和PA處理組，這說明1-MCP＋PA復(fù)合處理比單獨(dú)使用這兩種保鮮劑都具有更好的保鮮效果。

POD是植物清除活性氧的關(guān)鍵酶，其活力是評(píng)價(jià)果蔬衰老的一個(gè)重要指標(biāo)。自由基傷害學(xué)說認(rèn)為，逆境脅迫使植物活性氧自由基產(chǎn)生和清除的平衡系統(tǒng)遭到破壞，自由基的積累導(dǎo)致代謝障礙，活性氧如過氧化氫（H2O2）和超氧陰離子的積累引起的氧化損傷參與了果蔬老化形成[37]。POD能將H2O2分解為H2O和O2[38]，能有效地阻止高濃度氧的積累。本研究顯示1-MCP＋PA復(fù)合處理相較于單獨(dú)使用1-MCP、PA處理顯著提升了貯藏期內(nèi)菠菜的POD活力。這與L-Jingyi等[39]使用1-MCP對(duì)生姜進(jìn)行貯藏保鮮和Jiang Li等[40]使用PA對(duì)紫背天葵進(jìn)行保鮮處理所得結(jié)論一致。DPPH自由基清除率廣泛用于定量測(cè)定物質(zhì)的抗氧化能力。貯藏過程中1-MCP＋PA復(fù)合處理組的DPPH自由基清除率均高于1-MCP處理組和PA處理組，說明1-MCP＋PA復(fù)合處理使菠菜在抗氧化能力方面有所提高，這可能是由于一方面PA通過螯合金屬離子，降低因?yàn)榻饘匐x子所引起的氧自由基以及內(nèi)在的膜脂過氧化作用，另一方面1-MCP和PA起到了協(xié)同增效的作用。

本研究中使用1-MCP和PA作為菠菜的保鮮劑，1-MCP無毒、穩(wěn)定性好、易于合成、使用濃度低，而PA為天然的食品添加劑，生產(chǎn)成本低、原料資源豐富、使用方便、不受氣候和場(chǎng)所限制、所需設(shè)備簡(jiǎn)單、應(yīng)用效果好、不存在毒性及殘留問題。復(fù)合使用兩者之間能夠功能互補(bǔ)、相互協(xié)調(diào)，發(fā)揮出良好的防腐保鮮作用，符合當(dāng)前果蔬保鮮劑“天然、高效、安全”的發(fā)展方向。

4 結(jié)論

本研究采用1 μL/L 1-MCP、0.1% PA及1 μL/L 1-MCP＋0.1% PA對(duì)菠菜進(jìn)行保鮮處理，綜合分析了在（20f 1）℃常溫貯藏期間菠菜的生理生化指標(biāo)、相關(guān)酶活力以及抗氧化能力，結(jié)果表明，1 μL/L 1-MCP、0.1% PA單獨(dú)處理及1 μL/L 1-MCP＋0.1% PA復(fù)合處理都能不同程度地延緩菠菜腐爛，有效維持菠菜質(zhì)量、葉綠素相對(duì)含量、SSC，降低乙烯釋放量，提高菠菜的POD活力以及抗氧化能力。與1 μL/L 1-MCP、0.1% PA單獨(dú)處理相比，1 μL/L 1-MCP＋0.1% PA復(fù)合處理保鮮效果更佳，有效延緩了菠菜采后衰老和品質(zhì)劣變，同時(shí)提高了POD活力及DPPH自由基清除能力，維持了較高的抗氧化能力，從而減少了活性氧對(duì)菠菜組織造成的氧化傷害作用，延長了菠菜的貯藏期。本研究結(jié)果可為菠菜貯藏保鮮提供一定的理論依據(jù)和技術(shù)參考。