蔡嘉洛，李曉屏，朱貽霖，夏新華，易剛強，鄧桂明，童巧珍，朱鎮(zhèn)華

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南長沙410000；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南長沙 410208）

黃精芡實湯始載于《中醫(yī)內(nèi)科臨床治療學(xué)》[1]，由冷柏枝所錄，由黃精、芡實、太子參、山藥、大棗、白芍、佩蘭等7味中藥組成。方中：黃精補脾陰、填精髓，芡實補脾陰而縮泉，太子參補脾氣、生津液，三味為本方主藥；山藥、白芍、大棗皆為補脾之品，養(yǎng)陰兼益氣；佩蘭醒脾，令全方補而不滯。本方為補脾陰之平穩(wěn)劑，是治療脾陰不足中消證的代表方，其主要功效為平補脾氣、益陰填精。在現(xiàn)代臨床中，主要治療氣陰不足引起的中消之證，如糖尿病前期、2型糖尿病等疾病。本課題組前期研究表明，黃精芡實湯君藥黃精中的黃精多糖能夠改善3T3-L1脂肪細(xì)胞的胰島素抵抗[2]；采用黃精芡實湯治療糖尿病前期人群，可有效改善患者空腹高血糖狀態(tài)，臨床效果顯著[3]。黃精芡實湯因良好的療效在臨床中廣泛使用，但其質(zhì)量控制方法目前仍然處于空白?；瘜W(xué)模式識別法是化學(xué)計量學(xué)的重要內(nèi)容，可使具有“完整性”和“模糊性”特點的指紋圖譜的海量化學(xué)信號相互融合，以綜合分析和評價中藥質(zhì)量[4-6]。因此，本研究對15個不同批次的黃精芡實湯進(jìn)行分析，構(gòu)建高效液相色譜（HPLC）指紋圖譜及含量測定方法，并根據(jù)化學(xué)模式識別技術(shù)對其指紋圖譜數(shù)據(jù)加以解析，以期為其質(zhì)量控制及藥效研究提供參考，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 材料

1.1 儀器Vanquish Core高效液相色譜儀（包括在線脫氣機、四元梯度洗脫泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱、2695溶劑管理系統(tǒng)），2998型二極管陣列檢測器，Empower色譜工作站（美國賽默飛公司）。

1.2 試劑芍藥苷（paeoniflorin）對照品、芍藥內(nèi)酯苷（albiflorin）對照品、沒食子酸（gallic acid）對照品（純度≥99.0%，西安金萃坊植物技術(shù)開發(fā)有限公司生產(chǎn)），均由湖南中藥大學(xué)中藥鑒定實驗室提供。甲醇（色譜純，佛山市鑫洋化工科技有限公司生產(chǎn)，批號：20200112）；甲酸（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號：20201011）。

1.3 藥材黃精芡實湯中黃精、芡實、太子參、山藥、白芍、大棗、佩蘭單味藥飲片各15批，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院張志國教授鑒定，黃精為百合科植物多花黃精Polygonatum cyrtonemaHua的干燥根莖，芡實為睡蓮科植物芡Euryale feroxSalisb.的干燥成熟種仁，太子參為石竹科植物孩兒參Pseudostellaria heterophylla（Miq.）PaxexPaxetHoffm.的干燥塊根，山藥為薯蕷科植物薯蕷Dioscorea oppositaThunb.的干燥根莖，白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactifloraPall.的干燥根，大棗為鼠李科棗屬植物棗Ziziphus jujubaMill.var.inermis（Bunge）Rehd.的干燥成熟果實，佩蘭為菊科植物佩蘭Eupatorium fortuneiTurcz.的干燥地上部分。將各飲片隨機組合得15批黃精芡實湯樣品（編號S1～S15），各單味藥飲片來源及組合見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件色譜柱：Thermo Hypersil GOLD C18柱（2.1 mm×100 mm，1.9 μm）；流動相：甲醇-0.1%甲酸水，梯度見表2；體積流量：0.3 mL/min；柱溫：30℃；波長：280 nm；進(jìn)樣量：10 μL。

表2 HPLC梯度洗脫條件Table 2 HPLC gradient elution conditions

2.2 黃精芡實湯HPLC指紋圖譜研究

2.2.1 供試品溶液的制備取黃精15 g，芡實30 g，太子參30 g，山藥15 g，白芍15 g，大棗7枚，佩蘭6 g。加水1 000 mL，武火加熱至沸騰后文火煎煮30 min，400目紗布趁熱過濾，得藥液300 mL，冷凍干燥72 h，得凍干粉。按表1制備15批黃精芡實湯凍干粉（S1～S15），即得黃精芡實湯樣品[7-8]。精密稱取上述黃精芡實湯樣品1.0 g，放入具塞的杯內(nèi)，精密注入沸水50 mL，重新稱定質(zhì)量，以超聲萃取30 min，再置于室溫條件后重新稱定質(zhì)量。在4℃條件避光儲存。使用時0.22 μm針式過濾器清洗，取續(xù)用篩液，即得。

表1 15批黃精芡實湯中各單味藥飲片來源Table 1 Sources of medicine materical crude slices of each single herbal in 15 batches of Huangjing Qianshi Decoction

2.2.2 缺味陰性對照溶液的制備按《中醫(yī)內(nèi)科臨床治療學(xué)》的黃精芡實湯比例，以3 g為處方總量，分別配制不含黃精、芡實、山藥、白芍、大棗、太子參或佩蘭的缺味陰性樣品處方。按“2.2.1”項方法處理，得缺味陰性對照溶液。

2.2.3 對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、沒食子酸對照品適量，精密稱定，放置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成質(zhì)量濃度分別為0.5、0.311、0.697 mg·mL-1的混合對照品溶液，即得。

2.2.4 精密度試驗黃精芡實湯（S1）試樣，按“2.2.1”項下方法配制供試品溶液，按“2.1”項下的色譜方法要求連續(xù)進(jìn)樣6次，并記錄色譜圖。以芍藥苷色譜峰（其色譜峰較穩(wěn)定、分離度較好且保持時限、峰面積適中）為參考峰（S），計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均小于2.11%，相對峰面積的RSD均小于2.79%，表明所用儀器精密度良好。

2.2.5 重復(fù)性試驗取黃精芡實湯（S1）樣試樣，按“2.2.1”項下方法共制成6份供試品溶液。按“2.1”項色譜條件，以芍藥苷色譜峰為基準(zhǔn)峰（S），計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時間的RSD均小于2.00%，相對峰面積的RSD均小于3.00%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗取黃精芡實湯（S1）的試樣少許，按“2.2.1”項下方法配制供試品溶液，室溫下依次置于0、3、6、9、12、24、48 h。再按“2.1”項色譜條件，以芍藥苷色譜峰為基準(zhǔn)峰（S），計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對保留時間的RSD均小于2.00%，相對峰面積的RSD均小于3.00%，表明供試品溶液于室溫下放置48 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.7 指紋圖譜的建立及相似度評價取S1～S15批次黃精芡實湯藥粉，按“2.2.1”項下方法配制供試品溶液，按“2.1”項色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖。將所得的15批黃精芡實湯色譜圖像數(shù)據(jù)，分別輸入“中醫(yī)色譜指紋圖譜相似度評價體系（2012版）”，以S1圖譜為參考指紋圖譜，采取平均數(shù)法（時間窗長度=0.10）得到對照指紋圖譜，再通過多點校對后實現(xiàn)自動配對，結(jié)果見圖1。結(jié)果表明，各共有峰相對保留時間的平均RSD值均低于1.0%。以15批黃精芡實湯樣本HPLC色譜圖和對照指紋圖譜進(jìn)行一致性研究，結(jié)果顯示S1～S15號樣本與對照指紋圖譜的相似度均高于0.85，見表3，表明不同批次黃精芡實湯樣品化學(xué)成分組成基本相同，差異較小。

表3 15批黃精芡實湯相似度Table 3 Similarity of 15 batches of Huangjing Qianshi Decoction

圖1 15批黃精芡實湯樣品HPLC指紋圖譜Figure 1 HPLC fingerprints of 15 batches of Huangjing Qianshi Decoction samples

2.2.8 指紋圖譜共有峰的指認(rèn)與歸屬取“2.2.1”項和“2.2.3”項下制備的黃精芡實湯供試品溶液和混合對照品溶液，按“2.1”項色譜條件進(jìn)樣，根據(jù)保留時間和圖譜對照分析。確定8號峰為沒食子酸，18號峰為芍藥內(nèi)酯苷，19號峰為芍藥苷，混合對照品和黃精芡實湯樣品的HPLC色譜圖見圖2。分別按“2.2.1”“2.2.2”項方法獲得黃精芡實湯整方溶液、缺味陰性對照溶液，按“2.1”項色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖，如圖3所示。對缺味陰性對照、黃精芡實湯全方HPLC譜圖比較，結(jié)果顯示：峰1和峰18歸屬于佩蘭；峰2和峰11歸屬于白芍和佩蘭；峰5歸屬于白芍，佩蘭和山藥；峰6和峰8歸屬于山藥；峰7歸屬于黃精；峰10歸屬于佩蘭和山藥；峰15和峰19歸屬于白芍。

圖2 混合對照品（A）和黃精芡實湯樣品（B）的HPLC圖譜Figure 2 HPLC diagram of mixed reference substance（A）and Huangjing Qianshi Decoction sample（B）

圖3 缺味陰性對照（S1～S7）和黃精芡實湯樣品（S8）HPLC圖譜Figure 3 HPLC diagram of herbal medicine-lacking hegative control profiles（S1 to S7）and Huangjing Qianshi Decoction samples（S8）

2.3 黃精芡實湯中3種主要成分的含量測定經(jīng)黃精芡實湯指紋圖譜色譜峰及對照品指認(rèn)，黃精芡實湯HPLC指紋圖譜中的8、18和19號色譜峰分別為沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷，且經(jīng)正交偏最小二乘法判別分析結(jié)果表明，此3類物質(zhì)貢獻(xiàn)度為前5位，其余2類未能識別。因此，選擇沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷成分進(jìn)行含量測定。

2.3.1 色譜條件及供試品溶液制備色譜條件同“2.1”項，供試品溶液按“2.2.1”項下方法制備。

2.3.2 線性關(guān)系考察精密稱取芍藥苷5.00 mg、芍藥內(nèi)酯苷3.11 mg、沒食子酸6.97 mg，加70%甲醇溶液，制成芍藥苷質(zhì)量濃度分別為0.050 0、0.100 0、0.250 0、0.500 0、1.000 0 mg·mL-1，芍藥內(nèi)脂苷分別為0.031 1、0.062 2、0.155 5、0.311 0、0.622 0 mg·mL-1，沒食子酸分別為0.069 7、0.139 4、0.348 5、0.697 0、1.394 0 mg·mL-1的混合溶液，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)行測定。以沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（X，mg）、以峰面積為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程：芍藥苷的回歸方程為y=90 716 904.99x-6 750.791 8，R2=0.999 9；芍藥內(nèi)酯苷的回歸方程為y=90 716 904.99x-6 750.791 8，R2=0.999 7；沒食子酸的回歸方程為y=2 725 712 543x-322 861.385 7，R2=0.999 131 197。結(jié)果表明，3種成分在相應(yīng)的質(zhì)量范圍內(nèi)與峰面積的線性關(guān)系良好。

2.3.3 精密度試驗精密稱定黃精芡實湯藥材粉末（S1）5 g，以“2.2.1”項方法制備供試品溶液，按“2.1”項色譜條件6次進(jìn)樣，記錄色譜峰面積。結(jié)果顯示，沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷峰面積的RSD分別為0.92%、0.99%、0.87%，表明儀器精密度良好。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗精密稱定黃精芡實湯藥材粉末（S1）5 g，以“2.2.1”項方法制備供試品溶液，供試品溶液放置0、3、6、9、12、24 h后，按“2.1”項色譜條件進(jìn)樣，色譜峰面積作為參考。結(jié)果顯示，沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷各成分峰面積的RSD分別為1.10%、0.99%、0.97%，表明24 h內(nèi)供試品溶液的穩(wěn)定性良好。

2.3.5 重復(fù)性試驗取黃精芡實湯藥材粉末（S1）6份，每份約5 g，精密稱定，分別按照“2.2.1”項下方法制備6份供試品溶液，按“2.1”項下色譜方法進(jìn)樣，記錄色譜峰面積，并按外標(biāo)一點法計算樣品中3個成分的含量。結(jié)果顯示，芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、沒食子酸的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.119、0.126、0.039 mg/g，RSD分 別 為1.20%、1.90%、2.10%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.6 加樣回收試驗取黃精芡實湯藥材粉末（S1）約1 g，確定對照品含量，樣品量=1∶1，按“2.2.1”項下方法制備供試品溶液，制備6份樣品溶液，按照“2.1”項下色譜條件進(jìn)行測定，記錄峰面積并計算回收率。結(jié)果顯示，沒食子酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷的平均加樣回收率分別為101.0%、101.1%、100.9%，RSD分別為2.10%、3.50%、2.70%，表明該方法準(zhǔn)確度良好。

2.3.7 含量測定分別取15批黃精芡實湯溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，外標(biāo)一點法計算樣品中3個成分的含量，具體結(jié)果見表4。

表4 15批黃精芡實湯芍藥苷、芍藥內(nèi)脂苷、沒食子酸含量測定Table 4 Determination of the content of paeoniflorin，albiflorin and gallic acid

2.4 統(tǒng)計分析

2.4.1 聚類分析（CA）通過聚類分析，可以將所有結(jié)果中具有類似點的樣品歸為一類[9]。以15組黃精芡實湯圖譜的共有峰峰面積為變量，使用SPSS 26.0統(tǒng)計軟件，采用瓦爾德連接方法，進(jìn)行聚類分析。結(jié)果顯示，當(dāng)距離為5時，15組黃精芡實湯可聚 為2類，其 中S3、S5、S12、S13、S4、S6、S11、S8為一類，S1、S2、S7、S9、S10、S14、S15為一類，表明S3、S5、S12、S13、S4、S6、S11、S8組與S1、S2、S7、S9、S10、S14、S15組黃精芡實湯存在差異。結(jié)果見圖4。

圖4 15組黃精芡實湯的聚類分析樹狀圖Figure 4 Cluster analysis dendrogram of 15 groups of Huangjing Qianshi Decoction

2.4.2 主成分分析（PCA）主成分分析是統(tǒng)計分析方法中最常見的數(shù)據(jù)分析方法，即利用各數(shù)據(jù)關(guān)鍵特征描述樣本，根據(jù)數(shù)據(jù)特征進(jìn)行分析[10]。為更好地客觀反映各批次黃精芡實湯之間的差異性，將15批黃精芡實湯樣品的共有峰的峰面積結(jié)果導(dǎo)入SIMCA 14.1軟件，進(jìn)行主成分分析。提取出4個變量，累計方差貢獻(xiàn)率為87.067%，提示該模型的預(yù)測能力較好。提取前2個主成分作15批黃精芡實湯藥材的PCA得分圖，見圖5。結(jié)果表明，15批黃精芡實湯聚為2類，與CA結(jié)果相互印證，S3、S5、S12、S13、S4、S6、S11、S8為一類，S1、S2、S7、S9、S10、S14、S15為一類，可見不同批次的黃精芡實湯之間存在一定的差異。

圖5 15批黃精芡實湯的主成分分析（PCA）得分圖Figure 5 Principal component analysis（PCA）scores of 15 batches of Huangjing Qianshi Decoction

2.4.3 正交偏最小二乘法-判別分析（OPLSDA）OPLS-DA技術(shù)采取了監(jiān)督的模式識別方法，即通過該技術(shù)找出導(dǎo)致樣本間不同的因素。因此在PCA研究的基礎(chǔ)上，為研究不同來源黃精芡實湯樣品間的區(qū)別，以15批黃精芡實湯藥材指紋圖譜的19個共有峰峰面積為變量，選擇SIMCA 14.1開展OPLS-DA研究，OPLS-DA模擬數(shù)據(jù)R2X為0.751，R2Y為0.984，Q2為0.921，說明該模型可靠性好[11-12]。進(jìn)一步檢驗該模型的有效性，使用SIMCA 14.1對其進(jìn)行置換試驗，見圖6，結(jié)果顯示，Q2均在R2之下，Q2的回歸直線與y軸交點在負(fù)半軸，即該模型有效。由OPLS-DA分析可知，15批黃精芡實湯劃為2類，見圖7[13]。OPLS-DA載荷圖見圖8，結(jié)果顯示，第一主成分影響較大的有峰2、峰7、峰9、峰10、峰11、峰13、峰14、峰16、峰19，對第二主成分影響較大的有峰1、峰3、峰4、峰5、峰8、峰12。利用變量投影重要性（VIP）法篩選檢測了使黃精芡實湯有差異的標(biāo)志性成分，結(jié)果見圖9，以VIP＞1.4為篩選標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)記出5個貢獻(xiàn)較大的成分，依次為8、4、19、18、5號色譜峰。經(jīng)對照品比對指認(rèn)出其中的8號峰為沒食子酸，18號峰為芍藥內(nèi)酯苷，19號峰為芍藥苷，并對這3個主要成分進(jìn)行了含量測定，化學(xué)計量學(xué)分析結(jié)果表明這3個測定指標(biāo)的選擇是合理的。

圖6 OPLS-DA模型的置換檢驗結(jié)果（n=200）Figure 6 Displacement test results for the OPLS-DA model（n=200）

圖7 15批黃精芡實湯的OPLS-DA得分圖Figure 7 OPLS-DA score plots of 15 batches of Huangjing Qianshi Decoction

圖8 19個共有峰的主成分分析（PCA）載荷圖Figure 8 Principal component analysis（PCA）loading plots for the 19 common peaks

圖9 19個共有峰的OPLS-DA變量投影重要性（VIP）值圖Figure 9 OPLS-DA VIP values of 19 common peaks

3 討論

目前，在阻止糖尿病前期進(jìn)展方面，西藥治療尚無專藥，多數(shù)仍會發(fā)展為2型糖尿病，失去關(guān)鍵的“治未病”階段[14-15]。而根據(jù)中醫(yī)臨床特征，本課題組經(jīng)過長期臨床研究，認(rèn)為糖尿病前期病機應(yīng)為營陰受損，陰虛則燥熱內(nèi)生，久則耗氣傷陰，出現(xiàn)氣陰兩虛證[16-17]。治則立滋陰益氣之法，以黃精芡實湯（出自《中醫(yī)內(nèi)科臨床治療學(xué)》）調(diào)治，重治“中消”并防“下消”，旨在標(biāo)本兼治、防其傳變。建立綜合有效地控制黃精芡實湯質(zhì)量的方法，對確保臨床療效具有重要的研究意義。本研究采用HPLC結(jié)合化學(xué)模式識別方法，取得了良好效果，總結(jié)經(jīng)驗如下。

3.1 提取條件考察本研究考察了不同體積分?jǐn)?shù)甲乙醇（20%、60%、90%）及水對黃精芡實湯指紋圖譜色譜峰的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用水萃取的黃精芡實湯樣品指紋圖譜中色譜峰數(shù)量最多且峰面積最高，故選用水作為萃取介質(zhì)。另外，本研究還考察了熱回流提取和超聲波萃取等2個途徑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，超聲波萃取峰面積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于熱回流提取，故選用超聲波提取。此外，還考察了10、30、60 min等3個不同萃取時間，試驗結(jié)果表明30 min萃取的效果最高。因此，選擇水為主要介質(zhì)，超聲提取時間為30 min。

3.2 色譜條件優(yōu)化本研究考察了甲醇-0.1%甲酸水溶液、甲酸-0.05%甲酸水溶液、甲醇-水、乙腈-水不同流動相體系的分離效果。最終發(fā)現(xiàn)甲醇-0.1%甲酸水溶液流動相體系洗脫時，色譜圖基線平穩(wěn)、分離度良好，即確定甲醇-0.1%甲酸水溶液為流動相。此外，依次還考察了30、35、40℃的柱溫，發(fā)現(xiàn)柱溫為30℃時色譜分析法峰的峰形狀、保留時間效應(yīng)更佳，因此，最后選定柱溫為30℃。對黃精芡實湯樣本進(jìn)行了180～450 nm波段掃描，并根據(jù)以上各項結(jié)果及色譜峰值響應(yīng)值及數(shù)目計算得出，在280 nm波段環(huán)境下，黃精芡實湯HPLC指紋圖譜基線比較穩(wěn)定，共有峰值量最多，且具有最大的響應(yīng)值，因此，選用280 nm作為黃精芡實湯HPLC指紋圖譜的主要監(jiān)測波段。比較了Ascentis Express C18（150 mm×4.6 mm，2.7 μm）、Thermo Hypersil GOLD C18（2.1 mm×100 mm，1.9 μm）、SUPELCOSIL LC-PAH（4.6 mm×250 mm，5 μm）3種色譜柱，結(jié)果表明Thermo Hypersil GOLD C18的分離度最好，且分析時間合適，因此選擇此柱進(jìn)行實驗。

3.3 指紋圖譜研究針對中藥方劑質(zhì)量控制的難題，本試驗在前期研究中依據(jù)劉昌孝等[18]所提出的“中藥質(zhì)量標(biāo)志物”理論，從化學(xué)成分特有性質(zhì)對黃精芡實湯品質(zhì)標(biāo)志物進(jìn)行了檢測分析，并選取與藥材品質(zhì)特征性質(zhì)有關(guān)的標(biāo)記，形成了黃精芡實湯HPLC指紋圖譜，明確了19個共有峰，并對其中成分辨別出沒食子酸、芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷等3個化學(xué)成分。且15批黃精芡實湯各共有峰相對保留時間、峰面積結(jié)果均說明各批次黃精芡實湯化學(xué)組成一致性良好。

經(jīng)與各缺味陰性對照HPLC圖譜比較，山藥、佩蘭、黃精、白芍的色譜峰得以充分展現(xiàn)，但大棗、芡實、太子參并未貢獻(xiàn)色譜峰?？赡苡捎谠诒驹囼灄l件下，主要測得紫外吸收較強物質(zhì)，而大棗、芡實、太子參中主要成分為檸檬苦素型三萜類化合物，該類物質(zhì)在紫外區(qū)，響應(yīng)低、干擾大，很難達(dá)到理想的基線分離[19-21]。因此本研究對黃精芡實湯的質(zhì)量監(jiān)控方法仍存在一定局限，今后我們將嘗試更多的多學(xué)科結(jié)合的方法，形成較為完整的黃精芡實湯指紋圖譜，以不斷完善黃精芡實湯的質(zhì)量控制研究[22-24]。

3.4 化學(xué)模式識別對黃精芡實湯藥材的指紋圖譜共有峰峰面積進(jìn)行CA、PCA和OPLS-DA分析，結(jié)果顯示各批次黃精芡實湯質(zhì)量基本相似。此外，8、4、19、18、5號色譜峰是影響黃精芡實湯成分差異的標(biāo)志性成分，其中，8、18、19號等3類物質(zhì)分別被識別為沒食子酸、芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷，其余2類未能識別。此3類物質(zhì)分別為芡實、山藥、芍藥、佩蘭的主要藥效成分，同時也分別為黃精芡實湯中君藥（芡實）、臣藥（山藥、芍藥）、佐藥（佩蘭）代表成分。金超等[25]研究發(fā)現(xiàn)，芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷可干預(yù)胰島素抵抗進(jìn)程發(fā)展；薛琛等[26]研究發(fā)現(xiàn)，沒食子酸可抑制α-葡萄糖苷酶。可見，這3種化合物現(xiàn)代藥理學(xué)研究均與黃精芡實湯作為消渴病代表方的功效不謀而合。因此，本研究選擇8、18、19號色譜峰進(jìn)行定量測定是合理的，且作為黃精芡實湯的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)也是具有科學(xué)性和實用性的。

綜上所述，本研究建立的黃精芡實湯藥材HPLC指紋圖譜和含量測定方法重復(fù)性好，專屬性強，可用于黃精芡實湯藥材及相關(guān)制劑的質(zhì)量評價。