范俊鋒 周 艷 吳雪茹 嚴春霞

（廣州中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院藥學部，廣東 廣州 510378）

凝膠貼膏系指原料藥物與適宜的親水性基質混勻后涂布于背襯材料上制成的貼膏劑[1]。與傳統(tǒng)糊劑、橡膠膏劑相比，具有載藥量大、使用方便、刺激性小、安全性高、保濕性好、透皮吸收率高及用藥依從性高等顯著優(yōu)點[2-4]。它能防止肝臟首過效應，降低胃腸刺激，減少給藥次數(shù)，提高患者的依從性，可以作為傳統(tǒng)橡皮膏、黑膏藥的替代品，成為近年來的研究熱點和焦點[5]。通絡止痛貼膏是廣州中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院治療痛癥的臨床經(jīng)驗方，主要由三棱、莪術、姜黃、琥珀、乳香、沒藥、薄荷腦、薄荷油、冰片、松節(jié)油等組成，具有活血通絡、破氣止痛、化瘀散結的功效，臨床上用于治療癌癥等引起的身痛、骨痛、關節(jié)痛等痛癥，效果顯著，深受患者喜愛。該方以往以傳統(tǒng)中藥貼敷制劑應用于臨床，在使用過程中有不易控制劑量、易污染衣物、不便儲存等缺點[6]，故將其研制成凝膠貼膏。為控制通絡止痛貼膏的質量，本文采用薄層色譜法（TLC）對方中三棱、姜黃、琥珀和冰片進行鑒別，并對其進行穩(wěn)定性考察。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 KS-150EI 型超聲波清洗機（寧波海曙科生超聲波設備有限公司）；WFH-203B 三用紫外分光儀（上海精科實業(yè)有限公司）；MSE125P-OCE-DU 分析天平[賽多利斯科學儀器（北京）有限公司]；LHS-150SC 型恒溫恒濕培養(yǎng)箱（上海一恒科學儀器有限公司）；MTC-250 藥品穩(wěn)定性試驗箱（上海三騰儀器有限公司）；CZY-G 初粘性測試儀（濟南蘭光機電技術有限公司）；DHG-9140 型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；LRH-70 生化培養(yǎng)箱（上海一恒科學儀器有限公司）；MIR-150A 霉菌培養(yǎng)箱（上海三騰儀器有限公司）；BOS-150 干熱滅菌器（上海三騰儀器有限公司）；持粘力測試裝置（自制）；剝離強度測試裝置（自制）。

1.2 試藥 通絡止痛傷貼膏（批號：220201、220202、220203）由廣州中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院制劑室提供；三棱、莪術、姜黃、琥珀、乳香、沒藥等中藥飲片購自嶺南中藥飲片有限公司，由廣州中醫(yī)藥大學吳雪茹教授鑒定均為正品；冰片對照品（批號：110743-200504）由中國食品藥品檢定研究院提供；所用試劑均為分析純；硅膠G 薄層板由實驗室自制。

2 方法與結果

2.1 通絡止痛貼膏的質量標準研究

2.1.1 三棱的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，加乙酸乙酯40 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取三棱對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。參照2020版《中華人民共和國藥典》四部0502 通則[1]下薄層色譜法試驗，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾。見圖1。

圖1 三棱TLC 鑒別圖譜

2.1.2 姜黃的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇40 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液[7]。另取姜黃對照藥材0.2 g，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇20 mL，同法制成對照藥材溶液。參照2020 版《中華人民共和國藥典》四部0502通則[1]下薄層色譜法試驗，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以二氯甲烷-無水乙醇-濃氨試液（30∶2∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾。見圖2。

圖2 姜黃TLC 鑒別圖譜

2.1.3 琥珀的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，置具塞錐形瓶中，加乙酸乙酯40 mL，超聲提取30 min，過濾，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1 mL 作為供試品溶液[8]。另取琥珀對照藥材1 g，加乙酸乙酯10 mL 同法制成對照藥材溶液。參照2020 版《中華人民共和國藥典》四部0502 通則[1]下薄層色譜法試驗，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液顯色，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。結果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。見圖3。

圖3 琥珀TLC 鑒別圖譜

2.1.4 冰片的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，置具塞錐形瓶中，加甲基叔丁基醚40 mL，振搖10 min，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取冰片對照品，加甲醇制成每1 mL 含2 mg 的溶液，作為對照品溶液。參照2020 版《中華人民共和國藥典》四部0502 通則[1]下薄層色譜法試驗，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（5∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。結果供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。見圖4。

圖4 冰片TLC 鑒別圖譜

2.2 通絡止痛貼膏的穩(wěn)定性考察

2.2.1 加速試驗 根據(jù)2020 版《中華人民共和國藥典》四部9000 通則[1]指導原則中的原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗指導原則，將3 批通絡止痛貼膏分別于恒溫恒濕條件下進行考察，溫度（40±2）℃、相對濕度（75±5）%，分別于第1 個月、2 個月、3 個月、6 個月末各考察1 次，按照制劑穩(wěn)定性重點考察項目（包括性狀、鑒別、檢查、微生物限度）進行檢查，結果樣品各項指標均無明顯變化，質量穩(wěn)定。見表1。

表1 3 批通絡止痛貼膏加速試驗結果

2.2.2 綜合評價 取通絡止痛貼膏置于加速試驗條件下，溫度（40±2）℃、相對濕度（75±5）%，分別于第0個月、1 個月、2 個月、3 個月、6 個月各取樣1 次，以初黏力、持黏力、綜合感官、剝離強度等為評價指標進行綜合評分[9]，結果顯示，綜合評分總分優(yōu)良。見表2。

表2 3 批通絡止痛貼膏綜合評價結果

由表1 的結果可知，通絡止痛貼膏在加速試驗中外觀均為棕色至棕褐色的凝膠貼膏，氣香，符合標準規(guī)定；各個時間點取樣的三棱、姜黃、琥珀和冰片的薄層鑒別均呈正反應，符合標準規(guī)定；含膏量、黏附力和賦形性等各項檢查項也均符合標準規(guī)定；各個時間點的微生物限度均符合規(guī)定。說明通絡止痛貼膏質量穩(wěn)定且可靠。由表2 的結果可知，在各個試驗階段中通絡止痛貼膏的初黏力、持黏力、綜合感官、剝離強度的總分都在90 分（滿分100 分）以上，符合制劑的質量要求。

3 討論

本課題采用薄層色譜法（TLC）對通絡止痛貼膏處方中的各個藥味進行薄層鑒別研究，結果處方中的三棱、姜黃、琥珀和冰片等藥味的色譜斑點清晰，特征明顯，分離度好，且陰性對照溶液無干擾，說明該方法專屬性高、重現(xiàn)性好，可作為通絡止痛貼膏的質量控制方法。

通過加速試驗[溫度（40±2）℃、相對濕度（75±5）%]對3 批通絡止痛貼膏進行了初步穩(wěn)定性考察，結果顯示，通絡止痛貼膏的性狀外觀均無變化，三棱、姜黃、琥珀和冰片的鑒別均呈正反應，微生物限度均符合規(guī)定，表明通絡止痛貼膏的質量穩(wěn)定可控。

制劑質量的穩(wěn)定是制劑在研發(fā)、注冊管理中非常重要的因素，直接影響到制劑質量，進而影響制劑的臨床使用安全性，故需對其進行穩(wěn)定性考察。本研究參照《中華人民共和國藥典》，通過加速試驗，對通絡止痛貼膏的初步穩(wěn)定性進行了考察，結果顯示其質量穩(wěn)定可靠，為通絡止痛貼膏的醫(yī)院制劑有效期的制定提供了科學依據(jù)。