李金龍，郭海霞，申雪梅，王呂，姜華，單貴蓮,2，段新慧*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650000；2.云南省高原特色農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)研究院，云南 昆明 650000)

青貯玉米具有良好的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，是目前主要應(yīng)用于飼料生產(chǎn)的玉米品種。青貯玉米的種植可以有效推動(dòng)我國(guó)糧改飼政策的實(shí)施，提高種養(yǎng)經(jīng)濟(jì)效益，促進(jìn)我國(guó)草食畜牧業(yè)科學(xué)發(fā)展[1]。青貯玉米的生物產(chǎn)量高，粗纖維含量相對(duì)較少，莖稈多汁脆嫩，易感染病害[2]，因此，種植過(guò)程中的病害防治是主要栽培措施之一?；瘜W(xué)防治是玉米種植中比較常見(jiàn)的一種方式，但是會(huì)對(duì)土壤以及玉米造成一定的化學(xué)殘留，因此，不適宜長(zhǎng)期、多次使用[3]。隨著人們對(duì)現(xiàn)代社會(huì)食品安全問(wèn)題的重視，對(duì)農(nóng)業(yè)上的病害防治也提出了更高的要求。因此，我國(guó)玉米病害防治由化學(xué)防治發(fā)展到生物防治，生物防治比重越來(lái)越高[4]。

玉米小斑病也稱斑點(diǎn)病，屬真菌性病害，是危害玉米生產(chǎn)的重要病害之一，主要危害葉片[5]，影響青貯玉米的產(chǎn)量和品質(zhì)。玉米小斑病的生物防治技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中已有較多應(yīng)用，本試驗(yàn)選用黃芩顆粒(細(xì)菌穩(wěn)拿)、真菌360、丁子·香芹酚、哈茨木霉菌等生物制劑，研究不同生物制劑對(duì)玉米病害的防治效果，為保證青貯玉米的品質(zhì)與產(chǎn)量，進(jìn)一步開(kāi)展青貯玉米有機(jī)種植及有機(jī)牛肉生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

本試驗(yàn)地位于云南省昆明市盤龍區(qū)，云南農(nóng)業(yè)大學(xué)校內(nèi)后山試驗(yàn)田，屬于北亞熱帶氣候，25°21′N，102°58′E，海拔1 962 m，年平均氣溫13.4 ℃，年降水量990 mm。土壤肥力中等，pH 5.5，山地紅壤。

供試品種為紅單10號(hào)、曲辰9號(hào)、云青5號(hào)、云瑞10號(hào)和云青2號(hào)，共5個(gè)青貯玉米品種。

供試生物制劑：有效成分2.1%丁子·香芹酚水劑，河南眾人聯(lián)合農(nóng)化有限公司生產(chǎn)，用量為1 605 g·hm-2；有效成分10 g/15 g真菌360水分散粒劑，有效成分12 g/15 g黃芩顆粒(又名細(xì)菌穩(wěn)拿，水分散粒劑)，香港斯奈爾(國(guó)際)植物生命植保有限公司生產(chǎn)，制劑用藥量1 000 g·hm-2，800倍液；哈茨木霉菌(水分散粒劑)1億g-1，成都特普生物科技股份有限公司，用量900 g·hm-2。

1.2 處理設(shè)計(jì)

隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每個(gè)玉米品種種植15個(gè)小區(qū)，小區(qū)長(zhǎng)約5 m，寬2 m，穴播，種植密度80 800苗·hm-2。播種時(shí)間為2020年5月24日，期間未使用化學(xué)農(nóng)藥防治病蟲(chóng)草害，人工除草2次，10月24日收獲青貯玉米。

小斑病為田間自然發(fā)病。在青貯玉米拔節(jié)期間(8月14日)、抽穗開(kāi)花期間(9月18日)，分別對(duì)玉米按照使用劑量進(jìn)行4種生物制劑的噴施。每個(gè)青貯玉米品種每個(gè)制劑處理3個(gè)重復(fù)；每個(gè)品種設(shè)3次空白對(duì)照(CK)，不做任何處理。除試驗(yàn)設(shè)計(jì)外，各處理其他田間管理方式一致。

1.3 調(diào)查與統(tǒng)計(jì)

每個(gè)小區(qū)隨機(jī)調(diào)查10株，每株各在上、中、下部位選2片葉子，即每株共選6片葉子，記錄調(diào)查結(jié)果。于第1次施藥前(8月14日)及施藥后15 d(8月29日)、30 d(9月17日)，第2次施藥后15 d(10月3日)、30 d(10月18日)，共計(jì)調(diào)查5次(雨天調(diào)查時(shí)間后移1～3 d)。計(jì)算病情指數(shù)、評(píng)價(jià)防治效果。產(chǎn)量調(diào)查每個(gè)小區(qū)隨機(jī)取5株，地面10 cm以上全部收割，稱重，依據(jù)種植密度及單株重計(jì)算理論產(chǎn)量和防治效果、產(chǎn)量效果。

小斑病分級(jí)方法：1級(jí)，葉片有無(wú)病斑或僅在穗位下部葉片上有零星病斑，病斑占葉面積≤5%；3級(jí)，穗位下部葉片上有少量病斑，病斑占葉面積6%～10%，穗位上部葉片上有零星病斑；5級(jí)，穗位下部葉片上病斑較多，病斑占葉面積11%～30%，穗位上部葉片上有大量病斑；7級(jí)，穗位下部葉片或穗位上部葉片有大量病斑，病斑相連、占葉面積31%～70%；9級(jí)，全株葉片基本為病斑覆蓋，葉片枯死[6]。

計(jì)算病情指數(shù)、防治效果和增產(chǎn)效果[7]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2019對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，并用SPSS 26軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)紅單10號(hào)小斑病的防治效果

表1表明，在8月14日噴施生物制劑前紅單10號(hào)已發(fā)生小斑病，CK發(fā)病最輕，病情指數(shù)為22.6，真菌360待處理區(qū)最高，病情指數(shù)為34.7，顯著高于其他小區(qū)。隨著時(shí)間變化，病情指數(shù)總體呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢(shì)，在9月17日達(dá)到頂峰，10月18日黃芩顆粒處理病情指數(shù)顯著低于CK，效果最佳，其次為哈茨木霉菌處理，最差為丁子·香芹酚處理組，顯著高于CK。從防治效果看，8月29日哈茨木霉菌處理防效顯著高于真菌360處理與黃芩顆粒處理，與丁子·香芹酚處理間無(wú)顯著差異。9月17日各處理間防效無(wú)顯著差異，10月18日防效高于10月3日。從總體防治效果來(lái)講，黃芩顆粒處理防效最好(37.5%)，顯著高于真菌360處理(29.5%)，與哈茨木霉菌處理(33.2%)無(wú)顯著性差異，丁子·香芹酚處理防效(10.3%)顯著低于真菌360處理與哈茨木霉菌處理。

表1 4種生物制劑對(duì)紅單10號(hào)小斑病的防治效果

2.2 對(duì)曲辰9號(hào)小斑病的防治效果

從表2病情指數(shù)結(jié)果看，在8月14日噴施生物制劑前曲辰9號(hào)已發(fā)生小斑病，黃芩顆粒待處理區(qū)最重，病情指數(shù)為26.5，病情指數(shù)顯著高于CK(21.6)，其余待處理區(qū)病情指數(shù)顯著低于CK。9月17日，丁子·香芹酚處理病情指數(shù)(47.7)顯著高于CK的病情指數(shù)(40.1)，其余處理均與CK無(wú)顯著差異，病情得到一定程度的控制。從防治效果看，8月29日防治效果好于9月17日；黃芩顆粒處理總體防效最好(19.5%)，顯著高于其他處理，其余處理對(duì)小斑病無(wú)明顯防治效果。

2.3 對(duì)云青5號(hào)小斑病的防治效果

從表3病情指數(shù)分析結(jié)果看，8月14日噴施生物制劑前云青5號(hào)均已發(fā)生小斑病，對(duì)照最重，病情指數(shù)為22.5，顯著高于哈茨木霉菌處理區(qū)(22.4)，其他待處理區(qū)病情指數(shù)顯著低于CK與哈茨木霉菌待處理區(qū)，病情指數(shù)在10月3日最重。從防治效果看，第1次施藥無(wú)效，第2次施藥效果相對(duì)較好；總體來(lái)看4種處理對(duì)青貯玉米小斑病防效均不理想。

表2 4種生物制劑對(duì)曲辰9號(hào)小斑病的防治效果

表3 4種生物制劑對(duì)云青5號(hào)小斑病的防治效果

2.4 對(duì)云瑞10號(hào)小斑病的防治效果

從表4病情指數(shù)看，8月14日噴施生物制劑前云瑞10號(hào)各小區(qū)均已發(fā)生小斑病，各試劑待處理區(qū)發(fā)病均顯著高于CK。從總體防治效果看，真菌360處理區(qū)防效最好(41.0%)，顯著高于其他處理，黃芩顆粒處理(23.5%)和丁子·香芹酚處理(20.4%)次之，哈茨木霉菌處理(10.7%)顯著低于真菌360處理和黃芩顆粒處理。

表4 4種生物制劑對(duì)云瑞10號(hào)小斑病的防治效果

2.5 對(duì)云青2號(hào)小斑病的防治效果

從表5可以看出，云青2號(hào)小斑病抗病性強(qiáng)，藥前及第1次藥后均不發(fā)病，第2次藥后于10月3日調(diào)查發(fā)現(xiàn)發(fā)病明顯但不重，黃芩顆粒和真菌360處理的病情指數(shù)顯著高于其他處理區(qū)，丁子·香芹酚與哈茨木霉菌防治效果顯著高于其他處理。10月18日，丁子·香芹酚處理與真菌360處理總體病情指數(shù)顯著高于其他處理，黃芩顆粒、哈茨木霉菌處理和CK間無(wú)顯著性差異。哈茨木霉菌處理區(qū)總體防治效果最好，為5.5%，其他處理均無(wú)防效。

表5 4種生物制劑對(duì)云青2號(hào)小斑病的防治效果

2.6 對(duì)青貯玉米小斑病的總體防治效果分析

因各品種種質(zhì)本身差異，藥前病情指數(shù)有所不同，使用同一生物制劑的防治效果也不相同，忽略品種自身原因，故取各品種的藥前病情指數(shù)和總體防治效果的均值作對(duì)比分析(表6)。施藥前各待處理區(qū)與CK的病情指數(shù)，以及施藥后各處理區(qū)與CK的總體防治效果無(wú)顯著性差異。施藥前的病情指數(shù)會(huì)影響最終的防治效果，當(dāng)用藥待處理區(qū)病情指數(shù)大于CK待處理區(qū)時(shí)，會(huì)出現(xiàn)正向防治效果；當(dāng)藥前病情指數(shù)小于CK病情指數(shù)，則無(wú)防治效果。丁子·香芹酚處理的平均藥前病情指數(shù)小于CK平均藥前病情指數(shù)，平均防治效果為負(fù)值，對(duì)青貯玉米小斑病無(wú)防治效果。真菌360、黃芩顆粒和哈茨木霉菌處理的平均防治效果均為正值，有一定防治效果，相比較而言，黃芩顆粒處理防治效果較好，但防治效果仍偏低，僅10.10%。

表6 4種生物制劑對(duì)青貯玉米小斑病的總體防治效果

2.7 4種生物制劑對(duì)5個(gè)青貯玉米品種小斑病的產(chǎn)量效果分析

紅單10號(hào)鮮草產(chǎn)量在丁子·香芹酚處理與黃芩顆粒處理下效果最好，增產(chǎn)效果分別達(dá)16.4%、18.6%，顯著高于真菌360、CK與哈茨木霉菌處理下的鮮草產(chǎn)量。曲辰9號(hào)的鮮草產(chǎn)量在真菌360處理下顯著高于其他處理，達(dá)到65 119 kg·hm-2，增產(chǎn)效果19.7%，哈茨木霉菌處理區(qū)鮮草產(chǎn)量為62 236 kg·hm-2，顯著高于黃芩顆粒處理區(qū)(56 211 kg·hm-2)、丁子·香芹酚處理區(qū)(54 299 kg·hm-2)和CK(54 368 kg·hm-2)。4種生物制劑處理下的云青5號(hào)均較CK增產(chǎn)，真菌360處理下顯著高于其他處理，達(dá)到86 512 kg·hm-2，哈茨木霉菌處理區(qū)鮮草產(chǎn)量(77 785 kg·hm-2)和丁子·香芹酚處理區(qū)鮮草產(chǎn)量(75 200 kg·hm-2)顯著高于黃芩顆粒處理區(qū)(70 567 kg·hm-2)和CK(68 986 kg·hm-2)。黃芩顆粒、哈茨木霉菌處理和CK下，云瑞10號(hào)鮮草產(chǎn)量顯著高于真菌360處理區(qū)，丁子·香芹酚處理與真菌360處理無(wú)顯著差異。云青2號(hào)在真菌360處理下鮮草產(chǎn)量顯著高于其他處理，達(dá)81 233 kg·hm-2(增產(chǎn)效果3.4%)，其次是CK(76 295 kg·hm-2)，顯著高于其他處理。

表7 噴施4種生物制劑對(duì)不同青貯玉米品種產(chǎn)量的影響

忽略品種間差異，以各品種鮮草產(chǎn)量、防治增產(chǎn)量、增產(chǎn)效果的均值進(jìn)行對(duì)比分析(表8)，噴施4種生物制劑均較CK增產(chǎn)，其中真菌360處理增產(chǎn)3 737 kg·hm-2；黃芩顆粒與哈茨木霉菌處理下的增產(chǎn)效果相近，丁子·香芹酚處理下的增產(chǎn)效果最低，為2.2%，但4種生物制劑處理下的產(chǎn)量效果無(wú)顯著性差異。

表8 噴施4種生物制劑對(duì)青貯玉米產(chǎn)量的影響

3 小結(jié)與討論

玉米小斑病在玉米病害中時(shí)常發(fā)生，是造成玉米減產(chǎn)和質(zhì)量下降的重要原因之一。玉米小斑病是由真菌侵染造成的病害，生產(chǎn)上大多是使用殺菌劑進(jìn)行防治。目前，應(yīng)用于生物防治的生物制劑主要包括微生物農(nóng)藥、生物化學(xué)農(nóng)藥以及植物源農(nóng)藥3類?？捎糜诜乐斡衩仔“卟〉纳谰鷦┲饕醒挎邨U菌[8]、哈茨木霉菌[9]、青霉菌[10]、伯克霍爾德氏菌屬[11]等，對(duì)小斑病病原菌都有較好的抑制效果，但在生產(chǎn)上很少大面積推廣使用，主要以化學(xué)防治為主。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，從連續(xù)用藥后的防治效果看，最終丁子·香芹酚、真菌360、黃芩顆粒、哈茨木霉菌對(duì)紅單10號(hào)、云瑞10號(hào)青貯玉米品種的防治效果最好，但對(duì)云青5號(hào)基本無(wú)防效；曲辰9號(hào)使用黃芩顆粒、云青2號(hào)使用哈茨木霉菌處理均有防效。本研究得出的結(jié)論與前人研究結(jié)果有所不同，4種生物制劑對(duì)于小斑病的防治有一定效果但不甚理想，可能是因?yàn)椴∏橹笖?shù)初始值存在差異，且有病害增長(zhǎng)速率過(guò)快、交叉感染、人為誤差等因素影響，導(dǎo)致在本研究中無(wú)防治效果。另外，防治效果一般具有速效性和時(shí)效性，本次調(diào)查時(shí)間為藥后15 d與30 d，亦是造成防治效果偏低的原因，但實(shí)際生產(chǎn)中也很難保證在藥劑施用短期內(nèi)收獲或補(bǔ)施藥劑。根據(jù)馬佳等[9]的研究表明，哈茨木霉SH2303對(duì)玉米小斑病的防治效果普遍較高,但對(duì)不同品種玉米、同一品種不同種植地的防效也有所不同，防治效果在42%～78%，其持效期大致在15 d左右。劉勇等[12]研究表明，哈茨木霉菌對(duì)青貯玉米小斑病有較好防治效果，且藥后14 d的防效大多低于藥后7 d的防效。

從田間病情指數(shù)和防治效果看，不同生物制劑對(duì)不同青貯玉米品種的小斑病防治效果有差異，應(yīng)與品種本身的種質(zhì)因素有關(guān)。初次調(diào)查時(shí)，不同玉米品種間小斑病病情指數(shù)有較大差別，證明不同玉米品種對(duì)小斑病的抗性有較大的差異，這與前人研究相一致[13-14]。而不同的發(fā)病條件下使用相同生物制劑，對(duì)不同玉米品種的防治效果理應(yīng)存在差異。從各品種產(chǎn)量綜合效果來(lái)看，4種生物制劑處理后均較對(duì)照增產(chǎn)，但黃芩顆粒處理下對(duì)不同品種的保產(chǎn)效果最穩(wěn)定。從實(shí)用方面講，防治效果最后歸根于保產(chǎn)效果，因此，也可用保產(chǎn)效果來(lái)評(píng)定防治效果。

本試驗(yàn)選用的4種生物制劑為植物源和微生物源藥劑，無(wú)污染、無(wú)殘留、安全環(huán)保。在防治細(xì)菌真菌病害的同時(shí)可以促進(jìn)植物生長(zhǎng)，也稱之為微生物肥。本試驗(yàn)由于研究條件所限，僅就5個(gè)品種青貯玉米小斑病的防治效果作了一些初步研究，還有諸如不同濃度梯度處理、混配處理對(duì)青貯玉米小斑病防治效果的影響，與常用化學(xué)藥劑防效對(duì)比、調(diào)整調(diào)查時(shí)間后的相對(duì)藥效等，均有待于進(jìn)一步研究。