于 娜，田 寅*，王 博，肇政偉

（1.佳木斯大學附屬第一醫(yī)院腫瘤科，黑龍江 佳木斯 154000；2.哈爾濱市第四醫(yī)院普外科，黑龍江 哈爾濱 150000）

1 CD117 概述

CD117（酪氨酸激酶受體）是最大的一類酶聯(lián)受體，它既是受體，又是酶，能夠同配體結(jié)合，并將靶蛋白的酪氨酸殘基磷酸化。在人類的基因組中鑒定的90 種獨特的酪氨酸激酶基因中，有58 種編碼酪氨酸激酶受體，分為20 類（I-XX）。在這些亞家族中，EGFR/ErbB（Ⅰ類）、胰島素受體（Ⅱ類）、PDGF（Ⅲ類）、FGF（Ⅳ類）、VEGF（Ⅴ類）和HGF（MET，Ⅵ類）與腫瘤疾病密切相關[1]。CD117 是一類在癌癥進展中起重要作用的受體。它是一種具有特殊結(jié)構(gòu)和生物學特征的細胞表面受體，通過在腫瘤細胞中啟動適當?shù)男盘柤壜?lián)反應來響應環(huán)境線索。已知CD117可調(diào)節(jié)多種下游信號通路，絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、Janus 激酶（JAK）/信號轉(zhuǎn)導子和轉(zhuǎn)錄激活子（STAT）以及磷酸肌醇3-激酶（PI3K）/Akt[2]。這些通路在調(diào)節(jié)癌癥干細胞、血管生成和轉(zhuǎn)移中起著關鍵作用。這些通路對于腫瘤和基質(zhì)細胞的相互作用也是必不可少的。

2 CK5/6 概述

CK5/6（細胞角蛋白）是上皮細胞或者角質(zhì)細胞中的主要骨架蛋白，CK5/6 屬于結(jié)構(gòu)蛋白，能維持上皮組織的完整性和連續(xù)性，而且CK5/6 也與上皮細胞的增殖、分化密切相關。CK5/6 作為細胞骨架的中間絲蛋白家族中最大、最復雜的亞類，已成為臨床上對于腫瘤診斷的指標之一。來源于上皮的惡性腫瘤，可從其增殖和凋亡的細胞中釋放出細胞角蛋白，清楚地反映了移行細胞的活性，更重要的是僅上皮細胞可以釋放角蛋白，正常血液循環(huán)中沒有可表達角蛋白的類型。多種上皮細胞來源的癌癥、間皮瘤等患者中，都可能會出現(xiàn)CK5/6 表達的增多。例如食道癌或者肺部鱗狀細胞癌、宮頸癌中，都有可能會有CK5/6 的高表達。因此，CK5/6 可作為協(xié)助上皮惡性腫瘤診斷的有效工具。

CK5/6 是一種成熟的分化標志物系統(tǒng)，已鑒定的20 種人類CK5/6 通常由分層上皮或簡單的腺上皮表達。在正常組織中，它們主要表達于復層鱗狀上皮、前列腺基底/肌上皮細胞、唾液腺、汗腺和乳腺。正常乳腺管腔上皮細胞主要表達簡單上皮型CK5/6（CK5/6、7、8、18 和19），而肌上皮細胞幾乎完全表達分層上皮型CK5/6（5、6、14、15 和17）[3]，并且它們持續(xù)表達額外的中間絲波形蛋白。正常乳腺上皮細胞的某些亞群也表達CK5/6 5、6、13、14、15、16 和17[3]。乳腺癌通常保留正常上皮的簡單上皮CK 模式，但有報道稱乳腺癌表達分層上皮型CK5/6[4]。

3 CD117 和CK5/6 生物化學功能研究進展

3.1 CD117 生物化學功能研究進展

CD117 由一個原癌基因編碼的跨膜酪氨酸激酶受體蛋白。該原癌基因存在于4 號染色體長臂區(qū)（4q11 4q13）[5]，跨越超過34kb 的DNA。它與人類的12 號染色體和小鼠的10 號染色體對應，并由人類和小鼠的9 個外顯子編碼。它由976 個氨基酸組成，核心蛋白質(zhì)大小約為110 kDa。CD117 的細胞外部分由外顯子2～9 編碼，含有519 個氨基酸殘基；而跨膜區(qū)域由外顯子10 編碼，由23 個氨基酸殘基組成；其余的外顯子編碼受體的細胞內(nèi)部分，細胞內(nèi)433個氨基酸的尾部組成，其內(nèi)包含并列膜和一個酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域，由大約80 個氨基酸殘基連接而成。

CD117 蛋白在結(jié)構(gòu)上與血小板衍生生長因子、集落刺激因子-1 受體或血管內(nèi)皮生長因子相關，屬于受體酪氨酸激酶Ⅲ亞類家族。CD117 呈現(xiàn)了一種典型結(jié)構(gòu)，在其界面上有兩個波瓣和一個活性位點。與酪氨酸激酶受體家族第Ⅲ類的其他成員類似，CD117 的結(jié)構(gòu)包括一個含5 個Ig 樣基序的胞外區(qū)、一個較短的跨膜區(qū)和一個含酪氨酸激酶活性的胞漿區(qū)。胞漿區(qū)有自身磷酸化酪氨酸激酶，酪氨酸激酶與磷脂酰肌醇激酶會合，以同型二聚體的形式發(fā)揮作用[6]。在人類中已經(jīng)報道了4 種CD117 亞型。

正常情況，CD117 的活化需要結(jié)合T 配體（stemcellfactor，SCF）參與，CD117 與其配體SCF 結(jié)合后，形成二聚體，導致受體二聚化，最終活化胞漿內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子，并啟動一系列下游信號級聯(lián)，調(diào)節(jié)基因表達，激活參與細胞功能的幾種關鍵的效應器信號通路，并負責維持細胞功能，如細胞存活、代謝、細胞生長和進展、增殖、凋亡、細胞遷移和細胞分化[7]。CD117 與SCF 的結(jié)合可以導致多種信號通路的激活，包括磷脂酰肌醇3 激酶、磷脂酶c-γ、Src 激酶、Janus 激酶信號轉(zhuǎn)導子和轉(zhuǎn)錄激活子，以及絲裂原激活的蛋白激酶通路[8]。CD117 信號通路的最佳調(diào)節(jié)對造血、色素沉著、生育、腸道運動和神經(jīng)系統(tǒng)功能至關重要。而且，CD117 在多種正常細胞和組織中表達，如在干細胞、肥大細胞、生殖細胞和黑素細胞上表達，并在這些細胞的增殖和分化中發(fā)揮重要作用。CD117 的表達不僅限于正常組織，還與多種人類腫瘤的病理生理機制有關。一般認為CD117 引起腫瘤主要表現(xiàn)在兩方面：一是基因表達量異常（增高、降低或缺失）；二是基因缺失或突變引起CD117 結(jié)構(gòu)及功能的改變。正常情況下，CD117 的激活需要SCF的參與，但是當它發(fā)生突變時，沒有配體的結(jié)合也能活化。c-kit 基因的突變刺激腫瘤細胞的持續(xù)增殖和抗凋亡信號的失控，有利于腫瘤的惡性增殖。致癌CD117 受體酪氨酸激酶“驅(qū)動”突變已在許多癌癥中被發(fā)現(xiàn)，如急性髓系白血?。ˋML）、黑色素瘤、肥大細胞白血病和胃腸道間質(zhì)瘤（GIST），以及酪氨酸激酶抑制劑（TKIs），如伊馬替尼或舒尼替尼，具有抗CD117 活性，通常用于治療這些癌癥。KIT 突變檢測對于預測TKI 治療的反應非常重要[9]。Tsuura 等在數(shù)量有限的非小細胞型肺癌、皮膚基底細胞癌、乳腺癌和惡性黑色素瘤中顯示了CD117 的表達[10]。以前的研究報道，在各種癌癥中，具有致癌突變的CD117的表達失調(diào)或上調(diào)，導致SCF 非依賴性CD117 激活和細胞增殖。Gao 等學者發(fā)現(xiàn)CD117 的過度表達是由缺氧以及各種轉(zhuǎn)錄因子的激活引起的，包括AP-2、ETS、SP1、MYB 和MITF[11]。

在乳腺組織中，一些作者已經(jīng)證明，CD117 在轉(zhuǎn)移性或原發(fā)性惡性乳腺腫瘤中的表達更頻繁[12]。Hines 等觀察了大多數(shù)原發(fā)性乳腺腫瘤中c-kit 原癌基因的表達以及SCF mRNA 的存在，并假設存在一個參與腫瘤細胞增殖的自分泌環(huán)[12]。在Simon 等最近的一項研究中，CD117 在髓樣乳腺癌中的表達頻率高于其他組織學腫瘤亞型[13]。此外，一些作者還表明，乳腺腺樣囊性癌的CD1117 表達較高[14]。Ulivi 等人發(fā)現(xiàn)ER 或PR 受體陰性腫瘤患者的CD117 表達明顯高于陽性腫瘤患者[15]。

3.2 CK5/6 生物化學功能研究進展

CK5/6：細胞角蛋白5/6（cytokeratin5/6，CK5/6）作為細胞角蛋白家族（cytokeratins，CKs）中的一員，是一種高分子量角蛋白。細胞角蛋白（cytokeratin，CK）受細胞分化調(diào)控，主要表達于上皮細胞來源的細胞質(zhì)和細胞核中，并且可作為一種維持細胞支架的中間纖維蛋白。它能夠特異性地表達于上皮細胞的基底細胞層。人類上皮細胞含有中等大小的細絲，由與表皮α-角蛋白（“細胞角蛋白”）相關的多肽形成，這些多肽在不同的上皮細胞中以不同的組合表達。近些年研究顯示，CKs 與多種惡性腫瘤的診斷、藥物療效評價以及預后判斷有關。

CK5/6 被證實是乳腺基底細胞特異表達的CK，也是識別基底細胞樣乳腺癌的重要分子標志物。國內(nèi)外專家研究發(fā)現(xiàn)CK5/6 在三陰性乳腺癌中高表達，同時提示三陰性乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與ERK/MAPK 信號傳導通路被異常激活有關，并且發(fā)現(xiàn)CK5/6 的表達與乳腺癌腦轉(zhuǎn)移有明顯的相關性，也與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和其它遠處臟器轉(zhuǎn)移有相關性。同時還表明，CK5/6 陽性腫瘤患者的生存時間通常較短。這些發(fā)現(xiàn)可能反映了一種普遍現(xiàn)象即多個研究已經(jīng)描述了癌癥中預后不良和/或不良腫瘤表型的趨勢，這些癌癥顯示細胞角蛋白的從頭表達，而在其正常來源細胞類型中不表達。中間絲表達模式的改變似乎代表了癌癥進展過程中發(fā)生的癌細胞去分化的一個共同特征，因此與不利的腫瘤特征有關。因為乳腺腺體和導管組織包括3 種細胞類型：肌上皮細胞（MEC）、基底細胞和管腔細胞，所以CK5/6 被認為是乳腺癌的獨立預后因素。并且可能是三陰性乳腺癌預后的獨立影響因素。事實上，細胞角蛋白（CKs）5 和6 在功能上不相關，但通常在診斷性免疫組織化學中使用雙特異性抗體一起分析。在腫瘤中，它通常在鱗狀細胞癌（SCC）、基底細胞癌（BCC）、胸腺瘤、涎腺腫瘤、上皮樣間皮瘤中表達。所以被認為是鑒別胸膜上皮性間皮瘤和肺腺癌的一個非常有用的標志物。Ordo'n～ez 報道，24%的卵巢或腹膜漿液性腺癌中有CK5/6 染色，盡管在所有患者中都有CK5/6 染色，但有一例染色較弱，呈局灶性。在肺鱗癌和腺鱗癌的鱗狀成分中也有報道稱CK 5/6 陽性。

Tot 等通過對乳腺腺樣囊性癌的研究發(fā)現(xiàn)，CK5/6 是這一系列髓樣癌中最常見的鱗狀上皮CK。25%的典型髓樣癌、43%的非典型髓樣癌和20%的轉(zhuǎn)移瘤表達CK5/6，尤其是其非典型變體，通常CK5/6 陽性，并表明CK 表達的失調(diào)參與了癌變和腫瘤進展。研究證實，CK5/6 因其能夠特異性地表達于上皮細胞的基底層，且可維持上皮細胞形態(tài)的完整性被證實是免疫組化診斷基底樣型乳腺癌（BLBC）的一個重要標記物。因為三陰性乳腺癌和基底樣型乳腺癌約有70%～80%的重疊率，兩者的相似之處有很多，故柴翠青[14]依據(jù)CK5/6 表達與BLBC 之間的關系推測，三陰性乳腺癌可能起源于乳腺組織的基底層。另外多項關于CK5/6 研究表明，基底樣乳腺癌通常表達基底細胞角蛋白（CK），包括CK5/6、CK14 和CK17。CK5/6 表達是鑒別基底細胞組最重要的標志物，并且與TNBC 預后不良相關;CK5 和CK6 的表達均與乳腺癌的高級別、雌激素受體和孕激素受體陰性（各p＜0.0001）有關。

4 結(jié)語

三陰性乳腺癌由于其受體狀態(tài)，常規(guī)化療仍然是TNBC 患者的主要術后治療選擇。與其他乳腺癌亞型相比，TNBC 在診斷后的最初幾年內(nèi)復發(fā)的概率顯著較高，總體生存率較低。有限的治療選擇，加上這些腫瘤更具侵襲性和實質(zhì)性的異質(zhì)性，有必要確定三陰性乳腺癌的預后和預測標志物。本文通過對CD117 和CK5/6 兩因子研究進展的概述，為三陰性乳腺癌的臨床治療提供新靶點、新思路。