王 偉

(泗洪縣畜牧獸醫(yī)站，江蘇 泗洪 223900)

0 引言

當(dāng)前動(dòng)物疫病防控情況復(fù)雜，動(dòng)物疫病診斷工作難度逐漸加大，傳統(tǒng)疫病診斷方法及檢測(cè)技術(shù)與當(dāng)前動(dòng)物疫病的檢測(cè)需求不符。在生物科技快速發(fā)展過程中，檢測(cè)技術(shù)更新?lián)Q代速度快，因此，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法的選擇極其重要。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)具有技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)、檢測(cè)水平高等多方面優(yōu)勢(shì)，檢測(cè)人員利用疫病防控檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，可確保檢測(cè)流程操作規(guī)范，根據(jù)需求靈活選擇檢測(cè)技術(shù)，快速確診疫病動(dòng)物，掌握動(dòng)物健康狀態(tài)，準(zhǔn)確評(píng)估動(dòng)物防疫工作效果，高效利用檢測(cè)結(jié)果，為檢疫部門和養(yǎng)殖人員提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)概述

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用要求、技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)都相對(duì)較高，檢測(cè)結(jié)果對(duì)于疾病防控工作的開展具有指導(dǎo)作用。從疫病防控角度出發(fā)，利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法對(duì)動(dòng)物及其產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，指導(dǎo)動(dòng)物疫病防治工作的進(jìn)行。在檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用方面，需要選擇高水平的檢測(cè)人員，使用高精度的檢測(cè)設(shè)備。在實(shí)驗(yàn)操作階段，要嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求，對(duì)動(dòng)物展開防疫檢測(cè)，制定檢測(cè)質(zhì)量體系，完成檢測(cè)工作，確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

動(dòng)物疫病防控工作開展的目的是確保動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)、質(zhì)量等方面的安全性。檢驗(yàn)工作實(shí)施階段，需要配備充足數(shù)量的防疫設(shè)備和人員，根據(jù)檢測(cè)區(qū)域動(dòng)物疫病的檢疫流程，按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，選擇檢測(cè)技術(shù)。動(dòng)物疫病防控實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有病原檢測(cè)和抗體檢測(cè)2種。疫病防控階段，應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)便于相關(guān)人員了解動(dòng)物疾病狀況和成長(zhǎng)狀態(tài)。病原檢測(cè)技術(shù)主要目的是檢測(cè)動(dòng)物是否感染病原；抗體檢測(cè)技術(shù)主要是了解被檢驗(yàn)動(dòng)物的抗體狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的利用還體現(xiàn)在及時(shí)隔離感染疫病的動(dòng)物，預(yù)測(cè)動(dòng)物疫病是否存在大范圍傳播情況以及預(yù)測(cè)動(dòng)物疫病流行情況等[1]。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)環(huán)節(jié)十分重要，合理選擇檢測(cè)技術(shù)能夠及時(shí)檢測(cè)出動(dòng)物是否存在疫病，為防疫規(guī)劃制定依據(jù)，還能輔助疫病預(yù)警工作的開展，促進(jìn)防疫工作順利開展。除此之外，還能為動(dòng)物的疫病防控、保健咨詢、產(chǎn)品無害化工作的實(shí)施奠定基礎(chǔ)。

2 常用的動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)

2.1 病原檢測(cè)

在動(dòng)物疫病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)領(lǐng)域，病原學(xué)檢測(cè)具有顯著優(yōu)勢(shì)，此項(xiàng)技術(shù)為動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的核心，主要對(duì)流行病毒進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)過程中借助細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)技術(shù)措施精細(xì)化分離細(xì)菌和病毒，保證檢測(cè)工作順利開展。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中，需要重點(diǎn)注意微生物病毒，由于此類病毒擁有極強(qiáng)的繁殖特性，一旦病毒扎根于動(dòng)物體內(nèi)，就會(huì)出現(xiàn)大規(guī)模的傳染現(xiàn)象。為了消除檢驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)，還需要利用病原學(xué)檢測(cè)作為輔助技術(shù)，充分發(fā)揮其應(yīng)用價(jià)值，高質(zhì)量完成動(dòng)物細(xì)菌類疾病的鑒定。病原檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)?dòng)物疫病進(jìn)行精準(zhǔn)診斷，高效預(yù)防動(dòng)物疫病，在實(shí)驗(yàn)室疫病檢驗(yàn)領(lǐng)域擁有推廣價(jià)值。

2.2 病理檢測(cè)

在動(dòng)物疫病的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)實(shí)踐領(lǐng)域，大量研究表明病理學(xué)檢測(cè)過程實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)較高，屬于檢測(cè)過程較為科學(xué)、穩(wěn)妥的技術(shù)手段。檢測(cè)實(shí)踐時(shí)，利用病理學(xué)領(lǐng)域技術(shù)，對(duì)動(dòng)物疫病展開深度檢測(cè)，并與免疫學(xué)技術(shù)融合應(yīng)用，不斷提高檢疫質(zhì)量。同時(shí)，檢測(cè)階段還需要對(duì)染病組織進(jìn)行送檢，利用切片進(jìn)行觀察，對(duì)動(dòng)物染病情況進(jìn)行全面了解。對(duì)動(dòng)物組織的病理學(xué)檢測(cè)涵蓋內(nèi)容極為豐富，實(shí)際上，病理學(xué)的診斷技術(shù)涉及內(nèi)容多，應(yīng)用流程復(fù)雜，主要是利用動(dòng)物疫病檢驗(yàn)系統(tǒng)，分析組織機(jī)構(gòu)是否存在病變問題，通過病理學(xué)檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果和免疫工作融合應(yīng)用。因?yàn)椴±韺W(xué)檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用價(jià)值高，可對(duì)動(dòng)物免疫組織內(nèi)部細(xì)胞展開系統(tǒng)化檢驗(yàn)，在檢驗(yàn)流程中，檢驗(yàn)人員可對(duì)病理細(xì)胞進(jìn)行染色，從而對(duì)抗原和抗體進(jìn)行定位檢測(cè)。實(shí)踐表明，組織病理學(xué)技術(shù)，不但操作流程簡(jiǎn)便，而且檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量也相對(duì)較高，因此，可廣泛推廣應(yīng)用組織病理學(xué)的檢測(cè)技術(shù)。

2.3 血清檢測(cè)

動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，血清檢驗(yàn)技術(shù)精度高。目前，隨著血清檢驗(yàn)相關(guān)技術(shù)應(yīng)用逐漸創(chuàng)新和發(fā)展，血清學(xué)抗體領(lǐng)域檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用日益廣泛，技術(shù)種類也各有不同。常見的檢測(cè)方式有酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定，該技術(shù)應(yīng)用成熟度高，且各種技術(shù)之間擁有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性，與檢測(cè)技術(shù)相對(duì)應(yīng)的動(dòng)物疫病區(qū)別相對(duì)較大；禽流感這類疫病的檢測(cè)，可以選擇血凝抑制方法完成試驗(yàn)檢測(cè)；若要檢測(cè)動(dòng)物口蹄疫或者豬瘟等疫病，可以選擇酶聯(lián)免疫測(cè)定進(jìn)行輔助，使其作為可靠類型檢測(cè)技術(shù)，為技術(shù)的推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

2.4 分子生物檢測(cè)

分子生物檢測(cè)技術(shù)由于優(yōu)勢(shì)顯著，因此逐漸走進(jìn)大眾視野。實(shí)踐表明，該技術(shù)在動(dòng)物檢疫中的應(yīng)用具有較強(qiáng)的驅(qū)動(dòng)力，能夠精準(zhǔn)抓住動(dòng)物的流行病學(xué)特點(diǎn)，在此情況之下，將疫病防治重點(diǎn)內(nèi)容、工作核心加以明確。分子生物檢測(cè)技術(shù)在實(shí)踐應(yīng)用階段，表現(xiàn)特征極為特殊，如果從性質(zhì)方面劃分，技術(shù)類型所屬基因理論的檢測(cè)范疇，是以DNA測(cè)序?yàn)橹鲗?dǎo)，檢測(cè)過程還有可能涉及核酸分子的雜交技術(shù)，多種技術(shù)集成應(yīng)用，利用以上檢測(cè)方法，可以縮短檢測(cè)時(shí)間，體現(xiàn)出檢測(cè)技術(shù)的效率優(yōu)勢(shì)。檢測(cè)實(shí)踐工作環(huán)節(jié)，還能借助PCR從微生物材料內(nèi)獲取大量核酸，將其作為微量樣品的檢測(cè)材料，4 h左右就能完成樣品檢測(cè)工作，效率較高，擁有較高的推廣價(jià)值。所以，為了獲取較為理想化的檢驗(yàn)效果，對(duì)于檢驗(yàn)人員的專業(yè)素養(yǎng)要求更高，只有選擇高水平的技術(shù)人才，才能從本質(zhì)上確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為動(dòng)物疫病工作的開展奠定基礎(chǔ)。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)在動(dòng)物疫病檢測(cè)中的應(yīng)用

3.1 評(píng)估動(dòng)物的免疫情況

應(yīng)用各類實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，完成動(dòng)物防疫各項(xiàng)檢驗(yàn)，同時(shí)，借助實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，使檢測(cè)結(jié)果精度更高。

技術(shù)應(yīng)用階段和動(dòng)物疫情的防控工作密切相關(guān)。比如某地區(qū)畜牧站在2021年采用動(dòng)物疫情監(jiān)測(cè)方法對(duì)當(dāng)?shù)貏?dòng)物養(yǎng)殖存在著新城疫、禽流感和口蹄疫等有高致病性的疫情進(jìn)行監(jiān)測(cè)，對(duì)動(dòng)物采取抽樣檢測(cè)，判斷動(dòng)物體內(nèi)是否存在免疫抗體，檢驗(yàn)抗體合格率是否能夠達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。與此同時(shí)，本年度檢測(cè)羊只血樣共計(jì)5 200份，其中布病病羊數(shù)量138只，結(jié)果陽性率達(dá)到2.6%；奶牛結(jié)核病和布病檢測(cè)數(shù)量共計(jì)420頭，無結(jié)核病病例，布病病例共3例，針對(duì)檢測(cè)出來的患病牛羊全部采取無害化處理措施，同時(shí)，選擇高效消毒液對(duì)于圈舍全部消毒。檢測(cè)階段，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要使用血清檢測(cè)方法，對(duì)動(dòng)物體內(nèi)是否具有疫病抗體進(jìn)行檢測(cè)，判斷免疫效果，使動(dòng)物免疫評(píng)估工作能夠順利開展。對(duì)于動(dòng)物血液采取綜合檢測(cè)，判斷抗體數(shù)量、病毒數(shù)量，疫病檢測(cè)過程當(dāng)中，通過采集動(dòng)物血液進(jìn)行檢測(cè)，并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，研制對(duì)應(yīng)疾病疫苗。常規(guī)條件下，動(dòng)物接種疫苗后，還需判斷疫苗是否具備防疫效果，此時(shí)，也需要對(duì)動(dòng)物的免疫狀態(tài)采取監(jiān)測(cè)，評(píng)估免疫手段的有效性。由于動(dòng)物免疫和評(píng)估工作的影響范圍相對(duì)較廣，為保證工作順利開展，免疫階段需要利用精細(xì)化手段進(jìn)行分析，優(yōu)化免疫流程，基于科學(xué)的理念完成此項(xiàng)工作，提高免疫工作效果。由于該地區(qū)大多養(yǎng)殖戶采取養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖模式，養(yǎng)殖規(guī)模相對(duì)較大，存在各種隱患，若動(dòng)物出現(xiàn)疫病，就會(huì)大范圍傳播，使養(yǎng)殖場(chǎng)效益降低。

實(shí)踐表明，利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段輔助免疫工作開展，對(duì)動(dòng)物疫病的防控效果較好，特別是動(dòng)物處于生長(zhǎng)期的疫病情況。利用血清檢測(cè)輔助免疫評(píng)估，彰顯其疫病防控功能。針對(duì)強(qiáng)制性免疫疾病防控，要提高防控效果，即可根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，規(guī)范養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖行為，引導(dǎo)其強(qiáng)化日常動(dòng)物的飼養(yǎng)管理，利用程序化免疫措施，加強(qiáng)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)的衛(wèi)生消毒，從而確保防控工作的順利進(jìn)行，降低動(dòng)物疫病暴發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

此外，抗體檢測(cè)的應(yīng)用還能輔助動(dòng)物免疫評(píng)估工作的開展，因?yàn)閯?dòng)物體內(nèi)注射疫苗或者注射免疫苗后，即可產(chǎn)生對(duì)應(yīng)疾病的抗體，所以通過檢測(cè)能夠把握抗體存在的情況，全面把握各類疫苗使用后的動(dòng)物抗體水平。例如生豬疫病防控重點(diǎn)在于藍(lán)耳病、口蹄疫和豬瘟等，如果仔豬接種了藍(lán)耳病疫苗，經(jīng)過4周，體內(nèi)就能產(chǎn)生抗體，抵御萊利斯塔病毒。因此，防疫部門可利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)對(duì)不同品牌的疫苗抗體進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比檢測(cè)結(jié)果和國(guó)家要求標(biāo)準(zhǔn)，確認(rèn)疫苗是否具備推廣應(yīng)用價(jià)值。

3.2 監(jiān)測(cè)動(dòng)物疫情

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的開展成為動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的有力措施，通過檢測(cè)技術(shù)輔助疫病防控。實(shí)踐操作階段，可綜合利用不同檢測(cè)手段，對(duì)動(dòng)物疫病情況進(jìn)行分析。監(jiān)測(cè)過程通常從病源檢測(cè)入手，輔助流行病學(xué)相關(guān)調(diào)查，從角度出發(fā)，多層次了解疫病防控情況，分析流行病發(fā)展趨勢(shì)，采取有利的保障措施，對(duì)動(dòng)物疫情準(zhǔn)確評(píng)估。同時(shí)，為了對(duì)動(dòng)物的疫情動(dòng)態(tài)進(jìn)行精準(zhǔn)把控，還需要養(yǎng)殖場(chǎng)制定高度可行的防控措施，一旦動(dòng)物群體出現(xiàn)陽性病例，應(yīng)該給予高度重視，立刻上報(bào)相關(guān)部門。采取實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)，精準(zhǔn)判斷疾病情況，為動(dòng)物防疫工作提供支持。除此之外，疫病監(jiān)測(cè)屬于控制動(dòng)物疫情的重要措施，依托實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能夠確保檢測(cè)精準(zhǔn)度，判斷動(dòng)物體內(nèi)是否存在問題，及時(shí)發(fā)現(xiàn)是否有病原體存在，并制定防范措施。例如，某畜牧獸醫(yī)站利用抗體檢測(cè)技術(shù)完成動(dòng)物疫病檢測(cè)，對(duì)于轄區(qū)動(dòng)物常見疾病進(jìn)行檢測(cè)，選擇 Tris-HCl進(jìn)行緩沖處理，抗體檢測(cè)結(jié)果如下：豬瘟抗體92.5%、藍(lán)耳病抗體94.6%，口蹄疫抗體90.5%，新城疫抗體91.2%，以上數(shù)據(jù)符合國(guó)家要求的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，說明該地區(qū)動(dòng)物免疫工作效果較好。

3.3 輔助重大疫情預(yù)警

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)選擇和應(yīng)用能夠?qū)?dòng)物疾病進(jìn)行及時(shí)預(yù)警。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果制定防控方案，同時(shí)，根據(jù)疫病臨床癥狀選擇針對(duì)性措施，對(duì)動(dòng)物疫病及時(shí)預(yù)警，形成科學(xué)的檢測(cè)體系，使得防控工作標(biāo)準(zhǔn)化、科學(xué)化發(fā)展，并促使養(yǎng)殖行業(yè)不斷發(fā)展。具體而言，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用在動(dòng)物疫情的預(yù)警層面作用顯著。首先，利用檢測(cè)技術(shù)確認(rèn)疫病流行情況，從而制定針對(duì)性的防控方案；其次，依托檢測(cè)技術(shù)，將動(dòng)物防疫工作關(guān)口前移，有前瞻性地展開防疫工作；再次，通過實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)，獲得準(zhǔn)確的檢測(cè)數(shù)據(jù)，經(jīng)過專業(yè)人員分析對(duì)比，為動(dòng)物疾病診療工作開展提供支撐；最后，利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，保證動(dòng)物防疫相關(guān)工作標(biāo)準(zhǔn)化、科學(xué)化的開展，讓疫病控制程序更為合理，有效提高動(dòng)物疫病防護(hù)工作的質(zhì)量。

如果動(dòng)物出現(xiàn)疫情，就會(huì)對(duì)畜牧行業(yè)造成嚴(yán)重?fù)p失。某地區(qū)為了提高當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫情防控工作質(zhì)量，每個(gè)月對(duì)縣域動(dòng)物疫病的發(fā)生情況采取抗疫檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，形成抗體檢測(cè)報(bào)告，對(duì)于報(bào)告內(nèi)部數(shù)據(jù)展開全面分析，了解區(qū)域動(dòng)物的疫病情況，強(qiáng)化動(dòng)物疾病預(yù)警，降低重大疫情產(chǎn)生的損失。利用抗體檢測(cè)技術(shù)能夠檢測(cè)雞體內(nèi)新城疫病毒是否存在變異情況，檢測(cè)結(jié)果可以和McAB結(jié)果、NDV標(biāo)準(zhǔn)等相互對(duì)比，掌握雞NDV病毒毒株的實(shí)際分布情況，根據(jù)實(shí)際比例建立反應(yīng)群，明確動(dòng)物抗體、病毒毒株存在的相關(guān)特性，提高動(dòng)物疫情預(yù)警工作的質(zhì)量。

3.4 診斷凈化動(dòng)物疫病

利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)還能診斷動(dòng)物疫病情況。通過檢測(cè)技術(shù)，判斷動(dòng)物所患疾病類型，為開展疾病預(yù)防、治療等工作奠定基礎(chǔ)。需要注意的是，檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用不可局限于單一技術(shù)，而應(yīng)該選擇不同檢測(cè)技術(shù)，根據(jù)動(dòng)物疫病檢測(cè)需求，靈活應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)，獲準(zhǔn)確檢測(cè)結(jié)果，為動(dòng)物診斷與治療措施的運(yùn)用提供支持，不斷提高動(dòng)物疫病防控工作效果。從動(dòng)物疫病凈化角度分析，利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)可以對(duì)特定感染病源采取診斷、治療。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用可以將多種動(dòng)物常見傳染病檢測(cè)出來，為疫病凈化工作提供支撐，還能發(fā)揮技術(shù)優(yōu)勢(shì)，精準(zhǔn)診斷動(dòng)物的疫病，為科學(xué)診斷提供數(shù)據(jù)支撐。

4 結(jié)語

隨著畜牧行業(yè)的快速發(fā)展，規(guī)?；B(yǎng)殖進(jìn)程的推進(jìn)為動(dòng)物疾病防治工作帶來巨大挑戰(zhàn)。對(duì)于動(dòng)物疫病的防控檢驗(yàn)而言，實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)屬于基礎(chǔ)性工作，也是高效完成檢疫工作的關(guān)鍵所在。目前，利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)還不能完全將所有類型的疫病檢測(cè)出來，但隨著檢測(cè)技術(shù)快速發(fā)展，更多類型的檢測(cè)技術(shù)會(huì)逐漸應(yīng)用于動(dòng)物疫病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)領(lǐng)域，能夠建立完善疫病防控管理體系，推動(dòng)畜牧行業(yè)的持續(xù)發(fā)展。