張寶泉
(黑龍江職業(yè)學(xué)院,哈爾濱 150028)
鏈球菌在自然界廣泛分布并且經(jīng)常構(gòu)成人類(lèi)和動(dòng)物菌群的一部分,擁有多種血清型(如A、B、M型等),不同血清型的鏈球菌致病性存在很大的差異性,是一種典型的人畜共患傳染性病原。羊鏈球菌病是羊的一種傳染性疫病,民間俗稱(chēng)嗓喉病。該病的發(fā)生主要是由溶血性鏈球菌引起的一種嚴(yán)重危害羊的急性、發(fā)熱性傳染病,常發(fā)于冬春季節(jié)。該病的傳染方式主要是經(jīng)消化道和呼吸道進(jìn)行傳播,感染后的病羊常表現(xiàn)為下頜淋巴結(jié)與咽喉腫脹,各臟器出血、大葉性肺炎、膽囊腫大等,常常與其他病原菌混合感染,羊群發(fā)病后常造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。羊鏈球菌病在我國(guó)西北地區(qū)存在時(shí)間較為長(zhǎng)久,20世紀(jì)50年代在青海省出現(xiàn)并流行,之后傳播至四川、新疆、甘肅、內(nèi)蒙古、河北等地。近年來(lái),隨著全國(guó)羊養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展及規(guī)模不斷壯大,智能化設(shè)備設(shè)施的投入和使用進(jìn)一步提高了羊的養(yǎng)殖效率。但由于專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員數(shù)量配備不足,專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)掌握不扎實(shí),場(chǎng)區(qū)養(yǎng)殖管理混亂等因素,造成羊的傳染性疫病頻發(fā),尤其是像羊鏈球菌一類(lèi)的急性傳染病。對(duì)于小規(guī)模養(yǎng)殖戶,由于養(yǎng)殖技術(shù)缺乏,常常出現(xiàn)在發(fā)生該病后大量盲目選用抗生素進(jìn)行治療,導(dǎo)致耐藥菌不斷出現(xiàn),使用現(xiàn)有的抗生素難以控制該病的傳播和流行,因此及時(shí)掌握羊鏈球病的發(fā)病特點(diǎn)、臨床特征、耐藥性、防治技術(shù)等情況,對(duì)于提升羊的養(yǎng)殖技術(shù)、增加羊場(chǎng)的養(yǎng)殖效率和效益具有重要作用。
羊鏈球菌病的病原是羊鏈球菌,通常會(huì)根據(jù)菌落形態(tài)、溶血、生化反應(yīng)和血清學(xué)特異性進(jìn)行分類(lèi),一般根據(jù)血瓊脂溶血的類(lèi)型將其分為三組:β溶血(紅細(xì)胞透明、完全溶解)、α溶血(不完全、綠色溶血)和γ溶血(無(wú)溶血)。血清學(xué)分組基于細(xì)胞壁碳水化合物(A組~V組)、細(xì)胞壁菌毛相關(guān)蛋白和B組鏈球菌多糖莢膜中的抗原差異。羊鏈球菌為需氧或兼性厭氧菌,在有氧和無(wú)氧的環(huán)境中均可生長(zhǎng),無(wú)運(yùn)動(dòng)性,一般條件下不形成芽孢,革蘭氏染色呈現(xiàn)陽(yáng)性,球狀??纱嬖谟诓⊙虻母鱾€(gè)臟器組織之中,尤其是在呼吸系統(tǒng)器官,如鼻腔、氣管和肺中分布最多。不同血清型的鏈球菌具有不同的致病方式,如A組鏈球菌通過(guò)其表面特有的M蛋白和磷壁酸、具有抑制吞噬作用的透明質(zhì)酸、細(xì)胞外產(chǎn)生的致熱毒素等致病。
病羊和帶菌羊是羊鏈球菌病的主要傳染源,該病通過(guò)呼吸道、消化道或者損傷的皮膚、黏膜以及節(jié)肢動(dòng)物(虱、蠅等)叮咬而引起傳播,病死羊的皮毛、肉等也能成為傳播的病原。該病常發(fā)生在寒冷的冬季和初春季節(jié),尤其是在飼草資源匱乏的時(shí)期,常呈現(xiàn)地方流行性或者散發(fā)性。該病菌可分布在病羊的任何臟器以及排泄物、分泌物中,如氣管分泌物、鼻液、糞便、尿液等,該病菌對(duì)外界環(huán)境具有較強(qiáng)的抵抗力,常溫條件下能夠存活100d。
羊感染鏈球菌后一般會(huì)有1~3 d的潛伏期,潛伏期之后多呈急性經(jīng)過(guò),部分病羊往往突然發(fā)病死亡,且沒(méi)有表現(xiàn)出任何明顯的癥狀。病情稍輕的患病羊常表現(xiàn)出精神萎頓、食欲減退、反芻遲緩甚至停止的癥狀,通常在1~3 d內(nèi)死亡,個(gè)別癥狀較輕的羊能夠耐過(guò),之后表現(xiàn)出預(yù)后不良的癥狀。病初病羊表現(xiàn)為體溫升高,最高可達(dá)41℃,呼吸加快,達(dá)到50~75次·min-1;脈搏達(dá)到120~160次·min-1,精神沉郁,垂頭弓背,呆立不動(dòng),食欲不振,停止反芻,可視黏膜(如眼角膜)呈現(xiàn)充血的狀態(tài),不停流淚,同時(shí)有膿性分泌物產(chǎn)生,如黏膿性鼻液,部分病羊的咽喉部有出血腫脹的情況,觸診能夠感受到發(fā)熱腫脹的狀態(tài),個(gè)別羊還會(huì)表現(xiàn)出呼吸困難、間斷咳嗽的情況。妊娠母羊在孕期感染了羊鏈球菌會(huì)造成腸胃功能減弱和消化功能減退,子宮黏膜出現(xiàn)結(jié)節(jié),還可能發(fā)生流產(chǎn)[1]。病羊臨死前臥地不起,四肢呈游泳狀劃動(dòng),四肢痙攣和頸部肌肉痙攣,部分羊不斷發(fā)出尖叫聲,有時(shí)表現(xiàn)出磨牙等神經(jīng)癥狀。
通過(guò)對(duì)病羊進(jìn)行病理解剖可見(jiàn)下頜淋巴結(jié)出血、腫大,局部伴有壞死;呼吸系統(tǒng)組織,如鼻、咽喉、氣管黏膜呈現(xiàn)廣泛性出血點(diǎn)、血絲,咽喉部會(huì)出現(xiàn)膠凍樣浸潤(rùn);肺臟呈現(xiàn)明顯腫大和出血的情況,肺大葉可見(jiàn)壞死灶,個(gè)別病羊的肺臟與胸壁呈現(xiàn)粘連的情況;胸腔、腹腔有大量黃色渾濁的積液;肝臟、膽囊腫大;脾臟明顯腫大,顏色呈現(xiàn)暗紅色;腎臟被膜難以剝離,其質(zhì)地變得脆、軟;大網(wǎng)膜、腸系膜出現(xiàn)大面積的出血點(diǎn),淋巴結(jié)腫大;胃腸道多數(shù)呈現(xiàn)鼓氣現(xiàn)象,內(nèi)容物稀軟并呈流水樣流出;膀胱黏膜上也會(huì)呈現(xiàn)出點(diǎn)狀出血。
常常無(wú)菌采取病變的部位,包括病羊胸腔、腹腔的滲出液,肺、肝、脾、腎、淋巴結(jié)組織以及血液等。將采集的滲出液或者組織進(jìn)行涂片或者接片,然后進(jìn)行革蘭氏染色、瑞氏染色。通過(guò)鏡檢可見(jiàn)成對(duì)或4~6個(gè)短鏈狀的革蘭氏陽(yáng)性球形菌,通過(guò)短暫時(shí)間的培養(yǎng)后,可見(jiàn)到呈現(xiàn)長(zhǎng)鏈狀排列的革蘭氏陽(yáng)性球形菌;瑞氏染色后可見(jiàn)有莢膜,多為成對(duì)或者3~5個(gè)短鏈狀排列的球形菌,并且分布比較集中。病料接種于普通培養(yǎng)基或者血瓊脂平板上37℃培養(yǎng)24 h,普通培養(yǎng)基上可見(jiàn)表面光滑、灰白透明、露滴狀的單個(gè)菌落,將其單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色,鏡檢同樣也能夠看到成對(duì)或者短鏈狀排列的革蘭氏陽(yáng)性菌[2];在血瓊脂平板上生長(zhǎng)出無(wú)色、透明、有β型溶血環(huán)的露滴狀菌落,溶血環(huán)直徑為1.0 mm左右。病料接種在馬丁肉湯中培養(yǎng)24 h后,肉湯變混濁,肉眼可見(jiàn)有少量絮狀沉淀,繼續(xù)培養(yǎng)1周后可見(jiàn)培養(yǎng)基部變?yōu)槌吻濉?/p>
采用生化試驗(yàn)進(jìn)行羊鏈球菌的鑒定是在對(duì)病料進(jìn)行培養(yǎng)基培養(yǎng)生成單個(gè)菌落之后進(jìn)行的,一般是采用無(wú)菌棉簽或接種環(huán)將菌株分別接種到葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇等微量糖發(fā)酵管和明膠、0.1%美藍(lán)牛乳等生化培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),根據(jù)培養(yǎng)記錄結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)生化特性表對(duì)照后確定其血清類(lèi)型。
致病性檢查原理是通過(guò)收集病羊組織中的病原菌,并用一定劑量的病原菌接種健康動(dòng)物,觀察健康動(dòng)物的發(fā)病情況,再?gòu)陌l(fā)病的動(dòng)物體內(nèi)分離病原菌進(jìn)行比對(duì),從而確定其致病性。一般常采用的方法是取病死羊組織,如腸道內(nèi)容物,用生理鹽水進(jìn)行5倍左右稀釋并離心,離心后用一定劑量的上清液通過(guò)靜脈注射的方式接種給大鼠、小鼠、家兔等試驗(yàn)動(dòng)物,在接種后的數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)死亡的情況,則初步證明存在毒性較強(qiáng)的羊鏈球菌,若大鼠、小鼠或者家兔與對(duì)照組對(duì)比有明顯的異常表現(xiàn),初步表明存在羊鏈球菌。再通過(guò)從死亡或者精神狀態(tài)異常的大鼠、小鼠或者家兔中采集病理組織進(jìn)行革蘭氏染色,同樣可見(jiàn)與接種到培養(yǎng)基中的菌染色結(jié)果相同,結(jié)果表明該菌對(duì)大鼠、小鼠或者家兔有致病性,反之無(wú)致病性。
對(duì)羊鏈球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)檢測(cè),一般先將采集的病料在常規(guī)培養(yǎng)基中培養(yǎng),之后將單個(gè)菌落接種于含有特定藥物的培養(yǎng)介質(zhì)(如藥敏紙片)中,通過(guò)觀察接種菌周?chē)尸F(xiàn)出的抑菌圈的大小來(lái)直接或者間接判斷羊鏈球菌對(duì)特定藥物的敏感程度或者耐藥程度。相關(guān)研究表明,在使用氧氟沙星和頭孢曲松后,羊鏈球菌接種后呈現(xiàn)的抑菌圈直徑大于15 mm,表明羊鏈球菌對(duì)這兩種藥物高度敏感,使用慶大霉素、卡那霉素、氨芐西林、林可霉素后,抑菌圈直徑為10~15 mm,表明羊鏈球菌對(duì)此類(lèi)藥物中度敏感性,使用青鏈霉素、紅霉素后的抑菌圈直徑小于10 mm,表明羊鏈球菌對(duì)該類(lèi)藥物的敏感性不強(qiáng)或者耐藥[3]。另外研究表明,羊鏈球菌對(duì)頭孢曲鈉、頭孢噻吩、頭孢噻肟、頭孢他啶、萬(wàn)古霉素、克林霉素、沙拉沙星、頭孢拉定、阿米卡星和阿奇霉素高度敏感,對(duì)四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星表現(xiàn)出中度敏感,對(duì)氨芐青霉素、青霉素、復(fù)方新諾明、紅霉素、諾氟沙星及鏈霉素表現(xiàn)為不敏感[4]。但在生產(chǎn)實(shí)踐中由于條件所限,通常可直接采集典型病羊的病料直接進(jìn)行藥敏試驗(yàn),根據(jù)具體藥敏試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行指導(dǎo)性用藥。若是沒(méi)有進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的條件,也可直接選用針對(duì)羊鏈球菌特別敏感的頭孢曲松或者氧氟沙星類(lèi)藥物,從而達(dá)到快速治療的目的。
羊鏈球菌病的預(yù)防原則是做好羊的日常飼養(yǎng)管理工作。首先應(yīng)針對(duì)不同生長(zhǎng)階段的羊群提供營(yíng)養(yǎng)豐富、全面、潔凈的飼草,建立科學(xué)合理的飼養(yǎng)管理模式,提高羊群的整體膘情,提高整體的抗病能力。其次,對(duì)羊養(yǎng)殖的內(nèi)外環(huán)境、使用過(guò)的器械進(jìn)行定期、周期性的消毒、殺菌處理;對(duì)羊群制定合理的疫苗免疫程序,如周期性(春秋兩季)對(duì)羊群進(jìn)行羊鏈球菌病疫苗的免疫接種工作,提高羊群的整體免疫狀態(tài),同時(shí)定期開(kāi)展免疫接種后的免疫狀態(tài)隨機(jī)抽檢監(jiān)測(cè)工作,針對(duì)免疫接種狀態(tài)不佳的羊進(jìn)行補(bǔ)免。另外,定期開(kāi)展羊群的體內(nèi)體外驅(qū)蟲(chóng)工作。再次,規(guī)范產(chǎn)地檢疫和引種檢疫制度,加強(qiáng)檢疫力度,嚴(yán)格控制疫病傳入非疫病區(qū)域;對(duì)于剛引種的羊群進(jìn)行隔離飼養(yǎng)。最后,若羊場(chǎng)發(fā)生本病,應(yīng)嚴(yán)格做好場(chǎng)區(qū)的封鎖、隔離并進(jìn)行場(chǎng)區(qū)的徹底消毒,對(duì)病死的羊只應(yīng)及時(shí)進(jìn)行無(wú)害化處理。
針對(duì)羊鏈球菌病的治療,一般是在羊發(fā)病的初期和中期階段會(huì)選擇敏感性強(qiáng)的藥物進(jìn)行治療。治療措施主要包括抗菌消炎、強(qiáng)心利尿、防止出血等。針對(duì)病情較輕的病羊一般進(jìn)行對(duì)癥治療,如按160萬(wàn)IU·頭-1的劑量肌肉注射頭孢曲松鈉,2次·d-1,連續(xù)使用3 d;或者肌肉注射磺胺間甲氧嘧啶鈉,按照0.3~0.5 mg·kg-1體重的劑量,2次·d-1,連續(xù)使用3 d。針對(duì)病情較重的羊,采用全身性治療和對(duì)癥治療相結(jié)合的方式,如出現(xiàn)呼吸困難,可先肌肉注射尼可剎米,以緩解呼吸困難癥狀;如出現(xiàn)便血或者其他情況的出血可使用維生素K3,另外,在全身性治療中常常也會(huì)使用到10%葡萄糖、安鈉咖、輔酶A等藥物[5],提高動(dòng)物機(jī)體對(duì)藥物的消化吸收、轉(zhuǎn)化代謝等作用。
羊鏈球菌病一年四季均可發(fā)生,主要發(fā)生在冬春季節(jié)。羊鏈球菌所產(chǎn)生的外毒素可直接破壞宿主組織的結(jié)構(gòu)和功能,造成機(jī)體器官功能紊亂,引發(fā)敗血型病變,同時(shí)羊鏈球菌的感染也最容易與支原體、巴氏桿菌等引起混合感染,從而增加羊群的病死率。羊養(yǎng)殖中由于養(yǎng)殖戶缺乏病原菌檢測(cè)的知識(shí)和技術(shù)手段,忽視對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的清理和消毒,在羊感染上鏈球菌病時(shí),僅僅憑借生產(chǎn)中的經(jīng)驗(yàn)給病羊大量盲目使用抗生素類(lèi)藥物,或者將抗生素直接添加到飼料、飲水中進(jìn)行飼喂,會(huì)造成大量的細(xì)菌耐藥。在羊場(chǎng)出現(xiàn)發(fā)病羊后缺乏科學(xué)合理的防治和尸體處理方法,會(huì)增加細(xì)菌在羊群中傳播的風(fēng)險(xiǎn)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,通過(guò)分離得到的致病菌多數(shù)都是耐藥菌株,并且同株菌還存在多重耐藥性,因此,在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)針對(duì)疑似病例進(jìn)行及時(shí)的致病菌診斷,排除其他病原的干擾,及時(shí)有針對(duì)性地應(yīng)用敏感藥物進(jìn)行治療。
同時(shí)規(guī)?;B(yǎng)羊場(chǎng)應(yīng)根據(jù)細(xì)菌分離鑒定及藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果合理選用抗菌藥物,嚴(yán)格遵守不同抗生素的使用量、休藥期及機(jī)體藥物最高殘留量的規(guī)定,從而減少耐藥菌產(chǎn)生。有條件的養(yǎng)殖場(chǎng)也可篩選優(yōu)勢(shì)菌株制作特異性更強(qiáng)的疫苗進(jìn)行整個(gè)羊群的群體免疫,提高羊群整體的抗病能力,從而達(dá)到高效、健康養(yǎng)殖的目的,為養(yǎng)殖場(chǎng)創(chuàng)造更大經(jīng)濟(jì)效益。