亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        丙型肝炎流行病學(xué)臨床檢驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用的研究進(jìn)展

        2023-01-05 13:20:35
        黑龍江科學(xué) 2022年12期
        關(guān)鍵詞:膠體金丙型肝炎抗原

        張 平

        (甘肅省天水市麥積區(qū)疾病預(yù)防控制中心,甘肅 天水 741020)

        丙型肝炎在全球范圍內(nèi)均具有較高的發(fā)病率,丙型肝炎病毒(HCV)感染是其主要誘發(fā)因素,而HCV感染的傳播途徑復(fù)雜多樣,除了常見的血液傳播以外,HCV病毒還可能通過性接觸、母嬰物質(zhì)交換,甚至一些綜合性途徑、隱性途徑傳播[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,不同年齡段、種族的人群均對(duì)HCV易感,每年因此類感染而死亡的人數(shù)達(dá)到35萬例,其中僅有近25%的患者出現(xiàn)特異性癥狀[2]??紤]到HCV感染傳播途徑具有顯著的復(fù)雜性,且早期癥狀較隱匿,早期提升丙型肝炎大面積篩查能力、推進(jìn)HCV檢驗(yàn)技術(shù)研究、完善HCV防控機(jī)制、有效控制HCV感染是全面降低丙型肝炎發(fā)病率及提升人類健康水平的有效方式。

        近年來,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、熒光定量PCR等多種檢驗(yàn)技術(shù)已在臨床有所應(yīng)用,采用各項(xiàng)技術(shù)分別從不同的角度對(duì)HCV、HCV-RNA的相關(guān)因子進(jìn)行針對(duì)性檢測,借助不同類型的試劑來進(jìn)行HCV篩查。分析以上檢驗(yàn)技術(shù)并發(fā)掘各項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)勢有助于臨床靈活根據(jù)HCV傳播途徑來合理選擇篩查手段,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)全面防控HCV。

        1 ELISA

        ELISA是臨床較常用的抗-HCV檢測手段,其利用酶結(jié)合物與HCV抗原抗體復(fù)合物融合后產(chǎn)生的顯色反應(yīng)分析HCV陰陽性。ELISA憑借簡單的操作步驟、低成本等在臨床抗-HCV檢驗(yàn)中占有一定的地位,然而不同廠家的ELISA HCV基因重級(jí)抗原質(zhì)量、抗原片段比例及診斷閾值的計(jì)算方法有所不同,加之ELISA檢測對(duì)變異抗原體的敏感度較低,可將其作為早期HCV感染篩查手段,避免其漏診[3]。何小宇對(duì)100份抗-HCV試劑分別采用ELISA及Ortho公司的抗-HCV試劑(CLIA 法)進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn),以上兩種方法雖在診斷效能上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但ELISA弱陽性(1≤S/CO值<3.8)檢出率僅占20.75%,低于CLIA檢測的50.98%,對(duì)單行ELISA檢測者最好配合臨床癥狀、特異性血清學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析[4]。

        2 間接ELISA

        間接ELISA檢驗(yàn)也是臨床應(yīng)用度較高的一種檢測方法。孫麗的研究結(jié)果顯示[5],100份抗-HCV標(biāo)本依次經(jīng)間接ELISA、雙抗原夾心ELISA法檢測的陽性檢出率分別為86.08%、97.47%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。間接ELISA陽性檢出結(jié)果不理想或與抗-HCV ELISA試劑與血清中高免疫球蛋白G(IgG)的含量有關(guān),抗-HCV ELISA試劑與血清中IgG結(jié)合形成少量非特異性吸附,可對(duì)HCV陽性檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾,應(yīng)盡量在檢測前稀釋樣本以避免血清中非特異性IgG所形成的固相吸附反應(yīng)導(dǎo)致假陽性。

        3 雙抗原夾心ELISA

        雙抗原夾心ELISA檢驗(yàn)技術(shù)能夠彌補(bǔ)間接ELISA在抗-HCV檢測特異性結(jié)果中的不足,雙抗原夾心ELISA檢測試劑可對(duì)受測者體內(nèi)相關(guān)抗體給予2次特異性反應(yīng),對(duì)于減少間接ELISA檢驗(yàn)單次特異性反應(yīng)所致假陽性有積極意義。有學(xué)者就雙抗原夾心ELISA與間接ELISA在抗-HCV檢測中的效能進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn),雙抗原夾心ELISA檢測的診斷符合率、特異度分別為96.23%、98.73%,而間接ELISA檢測的診斷符合率及特異度僅有86.69%、84.81%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)[6];該結(jié)果不僅與雙抗夾心ELISA檢測對(duì)抗-HCV基因產(chǎn)生的2次特異性反應(yīng)有關(guān),還可能跟雙抗夾心ELISA采取酶類標(biāo)記抗原替代間接ELISA酶標(biāo)標(biāo)記二抗、對(duì)包含多種免疫球蛋白的總抗體檢測有關(guān)。在以上檢測技術(shù)的綜合作用下,檢測特異度得到顯著提高,檢測結(jié)果不會(huì)受非特異性免疫球蛋白反應(yīng)的干擾。

        4 化學(xué)發(fā)光微粒子免疫測定技術(shù)(CMIA)

        CMIA檢驗(yàn)技術(shù)的出現(xiàn)彌補(bǔ)了傳統(tǒng)的ELISA檢驗(yàn)技術(shù)在檢驗(yàn)反應(yīng)周期、發(fā)光信號(hào)峰值達(dá)到時(shí)間上的不足,此項(xiàng)技術(shù)在各類抗體、酶、脂肪酸等檢測中有較高的靈敏度,其包被載體的磁性微粒面積較大。磁性微粒與項(xiàng)目稀釋液混合后,樣本中的HCV抗體可與微粒融合良好,對(duì)于加快反應(yīng)樣本下沉、分離效率等有積極作用;有CMIA相關(guān)研究指出[7],與ELISA血清學(xué)監(jiān)測相比,CMIA在低風(fēng)險(xiǎn)人群HCV篩查中的靈敏度達(dá)到100.00%。CMIA檢測樣本中HCV抗體HCV包被微粒子在激發(fā)液的作用下能夠出現(xiàn)特異性反應(yīng),臨床上根據(jù)CMIA檢測中化學(xué)發(fā)光信號(hào)的呈現(xiàn)情況可獲得特異度較高的抗-HCV含量檢測結(jié)果,且CMIA不具有放射性,可保證受測者反復(fù)檢驗(yàn)的安全性。薛海玲等就CMIA、ELISA在丙型肝炎病毒抗體(HCV-Ab)檢測中的應(yīng)用效果進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn)[8],當(dāng)S/CO值≥1.0且<5.0時(shí),處于1.0≤S/CO<2.0范圍內(nèi)的45例陽性標(biāo)本經(jīng)ELISA檢測均為陰性,CMIA與ELISA檢測結(jié)果符合率僅為58.33%,提示CMIA的靈敏度與ELISA檢測相比優(yōu)勢較大,且CMIA全自動(dòng)化操作、較短的反應(yīng)時(shí)間、較少的干擾物作用等優(yōu)勢均可對(duì)HCV的定量檢測產(chǎn)生積極影響;但CMIA仍可能受到外標(biāo)本因素的影響,例如離心時(shí)間過短、合并溶血或黃疸等不良反應(yīng),或正處于HCV感染恢復(fù)期內(nèi)、病原體含量過低等。CMIA作為HCV初篩手段較ELISA有更高的精準(zhǔn)度,考慮到CMIA同樣可能受到外部因素的影響,后續(xù)臨床診斷過程中可適當(dāng)配合高特異度血清學(xué)檢驗(yàn)。

        5 電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLIA)

        常規(guī)的丙型肝炎抗體、核心抗體檢測篩查窗口期最長可達(dá)2個(gè)月,ECLIA高靈敏度的優(yōu)勢能夠協(xié)助醫(yī)生迅速檢測到較微量的HCV抗體。有學(xué)者對(duì)ECLIA與ELISA在HCV檢測中的一致性進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn),兩種檢測方式在ECLIA S/CO值處于1.0~15.0范圍內(nèi)、ELISAS/CO值處于1.0~4.0范圍內(nèi)時(shí),符合率整體偏低[9-10]。巫文勛等就化學(xué)發(fā)光免疫測定法(CLIA)、ELISA在丙型肝炎初期篩查中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn),CLIA檢測具有較高的靈敏度,經(jīng)第三方試劑驗(yàn)證不符的51例HBsAg標(biāo)本,經(jīng)CLIA法測值準(zhǔn)確檢測出49例[11]。黃燕青的研究顯示,CLIA、ELISA在HCV抗體檢測中與金標(biāo)準(zhǔn)PCR的Kappa一致性依次為0.898、0.832,其中的CLIA診斷優(yōu)勢較顯著,CLIA全自動(dòng)化操作將免疫反應(yīng)與發(fā)光信號(hào)反應(yīng)相融合,加快了標(biāo)本中抗原檢測的效率,同時(shí)彌補(bǔ)了ELISA在定量檢測上的不足,對(duì)提高篩查精準(zhǔn)度有顯著作用[12]。

        6 膠體金法快速試驗(yàn)(GICA)

        膠體金是一種較為理想的免疫標(biāo)記物,其檢測HCV的原理為:與白磷、枸櫞酸鈉等還原劑相互作用后,其中所含的氯金酸能夠聚合為金顆粒,并在靜電環(huán)境下形成較穩(wěn)定的膠體狀,膠體中的負(fù)電荷能夠與蛋白質(zhì)分子中的正電荷基團(tuán)進(jìn)行良好融合,且經(jīng)靜電作用結(jié)合不易破壞蛋白質(zhì)生物特性。王安然對(duì)GICA法、ELISA對(duì)抗-HCV特異性抗體的檢驗(yàn)效果進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn),膠體金法能夠提高檢驗(yàn)效率[13];膠體金高電子密度、體積小、顏色反應(yīng)顯著等優(yōu)勢為其廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)奠定了基礎(chǔ),臨床利用顯微鏡可在膠體金法檢測后觀察到金標(biāo)蛋白結(jié)合處的黑色顆粒聚集,迅速完成定性免疫檢測。但是,GICA檢測仍可能受到病毒載量、某種抑制病毒核酸擴(kuò)增等因素的影響,此方法雖能縮短ELISA的檢測時(shí)間,但采取GICA檢測期間聯(lián)合HCV-RNA檢測能夠弱化短時(shí)間檢測中反應(yīng)不充分、過濾膜破損所致檢驗(yàn)結(jié)果模糊等不良情況的影響,進(jìn)而降低檢測精準(zhǔn)度。GICA以膠體金為標(biāo)志物,臨床可通過分析標(biāo)記物產(chǎn)生的層析反應(yīng)檢測抗原及抗體反應(yīng),借助直觀操作縮短檢測的耗時(shí),這種低成本操作強(qiáng)化了這一檢測手段在基層醫(yī)院的臨床應(yīng)用價(jià)值;此外,GICA檢測利用高電子密度特性吸引目標(biāo)物質(zhì)聚集,不會(huì)對(duì)受測者產(chǎn)生放射性同位素污染,對(duì)于擴(kuò)寬GICA的應(yīng)用范圍有積極作用[14-15]。

        7 熒光定量 PCR

        熒光定量 PCR是臨床低水平核酸定量檢測中特異度較高的一種檢測方式,能夠檢出丙型肝炎患者血清中低表達(dá)量的HCV-RNA,彌補(bǔ)傳統(tǒng)檢測方法難以明確現(xiàn)行、既往HCV感染的不足,同時(shí)降低生物污染率;此檢測方式主要利用反應(yīng)中形成的系統(tǒng)熒光曲線明確循環(huán)數(shù)量,通過擴(kuò)增特異性HCV基因片段來測定病毒中的核苷酸序列,臨床上可將其作為標(biāo)準(zhǔn)化HCV-RNA基因分型檢測結(jié)果[16]。有學(xué)者就ELISA、熒光定量PCR在HCV感染診斷中的價(jià)值進(jìn)行對(duì)比后發(fā)現(xiàn),熒光定量PCR、ELISA檢測陽性率分別為96.36%、89.09%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)[17],提示熒光定量PCR在丙型肝炎診斷中的價(jià)值較顯著。HCV感染需要一定的抗體產(chǎn)生時(shí)間,而ELISA僅在定性分析上有一定效用;熒光定量PCR能夠利用自身定量分析的優(yōu)勢明確受測者體內(nèi)HCV-RNA含量,直觀地顯示受測者的HCV水平,同時(shí)能夠反映出治療期間抗病毒藥物殺滅HCV病原體的效果[18]。

        8 結(jié)語

        丙型肝炎早期癥狀的隱匿性決定了丙肝患者需要借助客觀、高特異性手段來明確診斷,ELISA、CMIA、ECLIA、GICA、熒光定量PCR等檢測手段分別在檢測耗時(shí)、操作方式、特異度等方面各具優(yōu)缺點(diǎn)。后續(xù)工作中應(yīng)繼續(xù)深入研究各種檢測手段的特性,建立更加完善的HCV流行病學(xué)檢測方案,推動(dòng)HCV核酸定量、基因分析檢測技術(shù)的廣泛應(yīng)用,靈活聯(lián)用以上檢測技術(shù),在最佳窗口期內(nèi)最大程度地減少誤診、漏診。

        猜你喜歡
        膠體金丙型肝炎抗原
        圍剿暗行者——丙型肝炎
        肝博士(2022年3期)2022-06-30 02:48:54
        膠體金在鉤體病監(jiān)測中相關(guān)因素的研究
        α-干擾素聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎
        丙型肝炎治療新藥 Simeprevir
        A族鏈球菌膠體金免疫層析試紙條的制備及應(yīng)用
        梅毒螺旋體TpN17抗原的表達(dá)及純化
        結(jié)核分枝桿菌抗原Lppx和MT0322人T細(xì)胞抗原表位的多態(tài)性研究
        慢性丙型肝炎中醫(yī)治療進(jìn)展
        APOBEC-3F和APOBEC-3G與乙肝核心抗原的相互作用研究
        新型B族鏈球菌膠體金免疫層析試紙條的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)
        亚洲av无码不卡久久| 国产精品女同一区二区软件| 蜜桃av在线免费网站| 国产又色又爽又刺激在线播放| 91av小视频| 中文字幕一区二区三区97| 给我看免费播放的视频在线观看| 日韩av无码精品一二三区| 成人网站在线进入爽爽爽| 无码精品国产va在线观看| 就国产av一区二区三区天堂| 亚洲日本中文字幕乱码| 亚洲av男人的天堂一区| 亚洲成在人线av品善网好看| 国产黄色片在线观看| 韩国免费一级a一片在线| 国产在线视频91九色| 五月综合激情婷婷六月| 亚洲有码转帖| 久久99亚洲网美利坚合众国| 国产三级不卡视频在线观看| 在线看片免费人成视频电影 | 欧美黑吊大战白妞| 日日干夜夜操高清视频| av大片在线无码永久免费网址| 五十路在线中文字幕在线中文字幕 | 亚洲色欲综合一区二区三区| 五月天综合社区| 性感人妻一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区丝袜美腿| 国产电影无码午夜在线播放| 亚洲成色在线综合网站| 国产在线观看精品一区二区三区| 白白色日韩免费在线观看| 欧美人与善在线com| 国产精品v欧美精品v日韩精品| 中文幕无线码中文字蜜桃| 69国产成人综合久久精| 在线观看视频免费播放| 色www视频永久免费| 国产精品九九九久久九九|