梁 琴,梁自蕓,李 媛
(廣西北海市動物疫病預(yù)防控制中心,廣西 北海 536000)
2020年7月合浦縣石康鎮(zhèn)陳某一養(yǎng)鵝場發(fā)病,16日齡大白沙鵝,存欄8 000 只,11 日齡發(fā)病,每天死十幾只,至16日齡已死亡近百只,未免疫禽流感。經(jīng)實驗室診斷,確定為鴨疫里氏桿菌病,經(jīng)藥敏試驗,首選大觀霉素和氟苯尼考,其次左氧氟沙星和克林霉素;使用時考慮抗生素的劑量、療程和使用方法,采用單一方式輪換給藥,效果顯著,現(xiàn)報告如下:
嚴(yán)重拉稀,喘氣蹲地不動,拉黃白色或黃綠色水樣帶氣泡稀糞;腳軟難以站穩(wěn),站立時搖頭晃腦,頭頸歪斜轉(zhuǎn)圈;倒退,仰翻臥地,兩腿呈劃水狀,不易爬起;縮頸嗜睡,頭歪向一側(cè)呈瀕死狀態(tài),3 d內(nèi)死亡;用過強(qiáng)效西林、安普霉素和環(huán)丙沙星無效。
解剖4 只鵝:肺出血(2/4),心有出血點(1/4),心包混濁(2/4),肝有白膜(3/4),腎腫(4/4)只,胰出血(2/4),直腸、小腸和十二指腸腸壁出血(1/4),腦、脾和氣囊未見病變。
取心、肝和脾分別涂片,革蘭氏染色,鏡檢,未見病原菌。
無菌操作,分別取病料(心、肝、脾和腦)接種巧克力平板、麥康凱平板和SS 平板,一組燭缸外需氧、另一組主缸內(nèi)厭氧37 ℃24 h培養(yǎng),同時接種正常死亡的鵝腦對照,結(jié)果只有燭缸內(nèi)接種腦的巧克力培養(yǎng)基劃線處長出細(xì)小、凸起、邊緣光滑、透明發(fā)亮露珠狀菌落,生長緩慢。挑取單個菌落涂片,革蘭氏染色鏡檢,見紅色兩極著色細(xì)小短桿菌;挑取另一相同菌落做純培養(yǎng)。挑取純培養(yǎng)物在麥康凱平板和SS平板上劃線,分別置需氧和厭氧中37 ℃培養(yǎng)24 h,均無菌落,說明純培養(yǎng)物不是大腸桿菌和沙門氏菌。無菌操作,用生理鹽水洗下純培養(yǎng)菌苔菌落,用接種針蘸取菌液接生化管,置燭缸37 ℃厭氧培養(yǎng)24~72 h,結(jié)果:不發(fā)酵糖,不產(chǎn)吲哚和硫化氫,硝酸鹽還原和西檬氏枸櫞酸鹽利用陰性,明膠液化和產(chǎn)尿素為不定,氧化酶、過氧化氫酶以及磷酸酶陽性,七葉苷水解酶、透明質(zhì)酸梅和硫酸軟膏素酶陰性;以分離株的核酸為模板,用擴(kuò)增16 s rRNA編碼基因的通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,將長約1.5 kb的擴(kuò)增產(chǎn)物測序后,與RA參考菌株的16s rRNA編碼基因序列進(jìn)行比較,序列相似性在99%以上;根據(jù)以上結(jié)果,確定為鴨疫里氏桿菌。
藥敏紙片購自杭州微生物試劑有限公司。無菌操作,用一次性注射器吸取巧克力平板上洗下的純培養(yǎng)菌液,分別注入4個TSA平板中;如果培養(yǎng)基較干,靜置片刻,待稍吸收,吸取多余菌液,貼藥敏紙片,做好標(biāo)記。20 種藥物敏感試驗結(jié)果:抑菌圈直徑20 mm以上的有大觀霉素和氟苯尼考;抑菌圈直徑15~20 mm的有左氧氟沙星和克林霉素;其他藥物(米諾環(huán)素、林可霉素、羅紅霉素、慶大霉素、諾氟沙星、復(fù)方新諾明、甲氧芐啶素、丁胺卡那、紅霉素、新霉素、桿菌肽、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、多西環(huán)素、阿莫西林、頭孢氨芐)無抑菌圈。綜合以上結(jié)果,首選大觀霉素和氟苯尼考;其次左氧氟沙星和克林霉素;采用單一方式輪換給藥,避免耐藥性,效果顯著。
通過改善飼養(yǎng)管理和鵝舍及運(yùn)動場環(huán)境衛(wèi)生是最重要的預(yù)防措施。應(yīng)經(jīng)常清掃地面并更換墊料,消除地面的尖銳物和鐵絲等,防止造成鵝腳部受到損傷;定期清洗料槽和飲水器,消毒并干燥,保證良好的衛(wèi)生條件。
育雛期間要保證良好的溫度和通風(fēng)條件,適時調(diào)整飼養(yǎng)密度,避免過度擁擠。鵝舍要保證足夠的通風(fēng),避免舍內(nèi)氨氣等有害氣體的蓄積對呼吸道黏膜的刺激和傷害。
保證雛鵝飼料的質(zhì)量安全,全程飼喂與日齡相適配的營養(yǎng)均衡的全價飼料,注意補(bǔ)充維生素和微量元素等,盡量減少因營養(yǎng)不良或其他應(yīng)激因素造成機(jī)體免疫力降低而發(fā)病。
藥物預(yù)防仍然是防控鴨疫里氏桿菌病的一個主要措施,由于抗菌素廣泛頻繁地使用,鴨疫里氏桿菌對藥物的耐藥性越來越多,效果越來越差,需及時對癥篩選高敏藥物。使用時為避免超量或濫用抗生素,應(yīng)按照說明書給藥,每個療程在4 d以上,采用單一或者聯(lián)合方式輪換方式給藥。
該群鵝發(fā)病于不易發(fā)病的夏季,但發(fā)病于最易感日齡,解剖病變不典型,發(fā)病率不高,無典型的“三周炎”病變,提示臨床診斷仍需結(jié)合實驗室檢驗;因無與相應(yīng)血清型對應(yīng)的疫苗,當(dāng)日發(fā)病即死,提示需及時做藥敏試驗,篩選高敏藥物,盡早預(yù)防的重要性。
根據(jù)筆者多年經(jīng)驗,病料(心肝脾)直接涂片,革蘭氏染色鏡檢,幾乎看不見與純培養(yǎng)相似的鴨疫里氏桿菌;未見兩極著色細(xì)小桿菌,不可排除鴨疫里氏桿菌的可能性,結(jié)合臨床癥狀和解剖病變,需接種巧克力培養(yǎng)基或TSA培養(yǎng)基,厭氧培養(yǎng)24~48 h予以確定。根據(jù)筆者多年經(jīng)驗,挑取心肝脾在培養(yǎng)基上劃線,分離成功率很低,很容易污染,大多長出2 個以上菌落且難以區(qū)別,難以純化培養(yǎng),降低工作效率。從腦分離成功率很高,通常只長出一種菌落,更易分離純化。感覺上,與鴨相比,鵝的鴨疫里氏桿菌生長較慢。
近年來的研究表明,我國大部分地區(qū)鴨疫里默氏菌分離株均有不同程度的耐藥性,耐藥譜介于5~13種之間(該病例耐藥16種),可見鴨疫里默氏菌的耐藥性已經(jīng)變得越來越普遍。
綜上所述,鵝的鴨疫里氏桿菌對鵝養(yǎng)殖業(yè)影響較大,一旦發(fā)生感染,不但給養(yǎng)殖戶帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失,還會脅迫到整個地區(qū)禽業(yè)養(yǎng)殖的健康發(fā)展。因此各動物疫病防控部門需加強(qiáng)鴨疫里氏桿菌相關(guān)知識的宣傳教育,帶動當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶對鴨疫里氏桿菌疫病的防控,從而優(yōu)化養(yǎng)殖質(zhì)量,促進(jìn)禽類養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。