范云庭，林筱鈞，鄭 江,2, ，薄 軍，黃將遠(yuǎn),2

（1.集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，福建廈門 361021；2.鰻鱺現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)教育部工程研究中心，福建廈門 361021；3.福建省特種水產(chǎn)配合飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室福建天馬科技集團(tuán)股份有限公司，福建福清 350308；4.自然資源部海洋第三研究所，福建廈門 361005）

1982年Cech領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)首先發(fā)現(xiàn)四膜蟲核糖體RNA具有自我催化功能[1]，之后Altman實(shí)驗(yàn)室也進(jìn)一步證明了RNA的催化功能[2]。這些具有催化功能的核酸被稱為核酶。核酶的發(fā)現(xiàn)，打破了“酶就是蛋白質(zhì)”的傳統(tǒng)觀念，大大促進(jìn)了酶學(xué)的發(fā)展。目前發(fā)現(xiàn)的天然核酶都是RNA分子，為RNA核酶。1990年Joyce實(shí)驗(yàn)室等開發(fā)出了人造RNA核酶，進(jìn)一步豐富了核酶的外延[3]。受RNA核酶的啟發(fā)，科學(xué)家們將目光放在了DNA上面，試圖尋找DNA核酶。然而，由于天然DNA的雙鏈模式和雙螺旋結(jié)構(gòu)限制了雙鏈DNA分子作為酶的潛力，所以目前天然雙鏈DNA核酶尚未發(fā)現(xiàn)，而化學(xué)合成的單鏈DNA分子，由于不再受雙鏈結(jié)構(gòu)的限制，具有較高的自由度，成為DNA核酶的理想分子[4-5]。1994年Breaker和Joyce[6]利用SELEX技術(shù)篩選出一種以單鏈DNA為基礎(chǔ)成分的核酶，它能在Pb2+的輔助下水解RNA特定位置的磷酸二酯鍵，成為首個(gè)報(bào)道的DNA核酶。

篩選DNA核酶所用的SELEX技術(shù)，又叫指數(shù)富集配體的系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)（Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment，SELEX），是一種體外篩選技術(shù)，它具有篩選效率高、親和特異性好，靶分子范圍廣等優(yōu)點(diǎn)[7-9]，在生物檢測(cè)、藥物開發(fā)和疾病診斷等領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用[10-13]。SELEX技術(shù)早期主要用于篩選對(duì)靶標(biāo)有較高親和特異性的寡核苷酸分子，即核酸適配體，最近發(fā)現(xiàn)SELEX技術(shù)在DNA核酶的篩選方面也具有較好的應(yīng)用。目前采用該技術(shù)已經(jīng)成功篩選出了上百種具有各種催化功能的DNA核酶，有些DNA核酶的催化能力甚至可以與蛋白質(zhì)類酶相媲美，這大大豐富了核酶家族。為更好的了解、掌握和開發(fā)利用DNA核酶，本文將從DNA核酶的分類、篩選和應(yīng)用等幾方面對(duì)其最新進(jìn)展進(jìn)行介紹和分析。

1 DNA核酶的分類及其催化作用

按照催化類型可將DNA核酶分為切割類、連接類、磷酸化類和其他類，相應(yīng)的底物、催化方式及代表性的DNA核酶如表1所示，其中切割類和連接類占的比例較大，也研究較多，下面對(duì)這些DNA核酶進(jìn)行分類介紹。

1.1 切割類

在切割RNA方面，比較經(jīng)典的是10-23和8-17這兩種DNA核酶，它們的催化機(jī)理目前已基本清楚（如圖1A、B）[14]。它們能在Mg2+和Mn2+的輔助下使切割位點(diǎn)處的2'-羥基脫H+，形成的2'-氧陰離子，從而對(duì)其鄰近的磷酸基發(fā)動(dòng)親核攻擊，進(jìn)而使其靶標(biāo)RNA分子降解[14-15]。DNA核酶10-23理論上在人體生理?xiàng)l件下幾乎可以切割所有的靶標(biāo)RNA，具有極強(qiáng)的切割活性，其催化常數(shù)Kcat≈10 min-1，是目前已知最快的DNA核酶[15]。

圖 1 部分DNA核酶的催化機(jī)理圖[14]Fig.1 Catalytic mechanism diagram of some deoxyribozymes[14]

在切割DNA方面，主要有Class I、Class II和RadDz3這三種代表性的DNA核酶，它們主要通過氧化裂解方式對(duì)底物DNA中的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割。Class I核酶是在Cu2+和抗壞血酸鹽的輔助下進(jìn)行催化，而Class II核酶則只需要Cu2+的輔助就可以進(jìn)行催化[16]，RadDz3核酶則不需要金屬離子的輔助就能進(jìn)行催化[17]。此外，Gu等[18]篩選出一系列能在Zn2+的輔助下快速水解DNA底物的DNA核酶I-R1、I-R2和II-R1，它們的作用位點(diǎn)也是底物DNA上的磷酸二酯鍵。自然條件下DNA要比RNA更加穩(wěn)定，在生理?xiàng)l件下，DNA磷酸二酯鍵自然降解的半衰期為數(shù)百萬年[18]，而且DNA缺少2'-羥基，所以切割DNA要比切割RNA更加困難，相應(yīng)核酶的催化機(jī)制也更為復(fù)雜。

表 1 DNA核酶的分類Table 1 Classification of deoxyribozyme

在切割其他底物方面，有學(xué)者篩選出一種能光解胸腺嘧啶二聚體的DNA核酶UV1C，它可用較低能量的光激發(fā)發(fā)色基團(tuán)，向胸腺嘧啶二聚體提供電子，使胸腺嘧啶二聚體不穩(wěn)定，從而降解成胸腺嘧啶單聚體[19]。此外，Brandsen等[20]篩選出可催化水解酯類和芳香酰胺類化合物的DNA核酶，能夠水解碳基類底物。Zhou等[21]則通過模擬蛋白質(zhì)中的酰胺鍵，構(gòu)建了一種含有酰胺鍵的DNA，進(jìn)而篩選出可水解該人造DNA中酰胺鍵的DNA核酶，這些均表明DNA核酶在一定程度上具有替代蛋白質(zhì)類酶的潛力。

總的看來，具有切割功能的DNA核酶，其切割底物主要有RNA、DNA、胸腺嘧啶二聚體、酯類、芳香酰胺、以及有酰胺鍵的人造DNA，一般都是在金屬離子的輔助下，通過水解、氧化裂解、光解等方式，斷裂底物中的磷酸二酯鍵、胸腺嘧啶二聚體、C=O雙鍵、酰胺鍵，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)底物的切割。

1.2 連接類

DNA核酶可以催化RNA底物的連接反應(yīng)，目前研究較多的具有連接RNA活性的DNA核酶主要有9DB1、7DE5、7Q10、7S11和9F7。其中DNA核酶9DB1和7DE5，可在Mg2+和Zn2+的輔助下形成3',5'-磷酸二酯鍵快速連接RNA，相應(yīng)的催化機(jī)理如圖1C、D[14]；另外幾個(gè)DNA核酶7Q10、7S11和9F7則通過2',5'-磷酸二酯鍵連接RNA分子形成套索狀或分支型的RNA分子[14,22]。

在連接DNA方面，Cuenoud等[23]篩選出可在Zn2+或Cu2+條件下連接DNA的DNA核酶E47，該核酶能使底物的5'-羥基進(jìn)攻另一底物的3'-磷酸咪唑基，形成3', 5'-磷酸二酯鍵，從而使兩條DNA底物連接在一起。

在連接其他底物方面，Chandra等[24]篩選出了可連接5'-磷酸化的DNA和馬來酰亞胺乙烷的DNA核酶DAB22，該核酶能催化上述底物完成雙分子Diels-Alder反應(yīng)（狄爾斯-阿爾德，一種環(huán)加成反應(yīng)），進(jìn)而在兩個(gè)底物間形成C=C雙鍵實(shí)現(xiàn)對(duì)兩個(gè)底物的連接。還有些學(xué)者報(bào)道了一種DNA核酶Tyr1，是通過催化酪氨酸（Tyr）或絲氨酸（Ser）側(cè)鏈上的羥基與5'-三磷酸化的RNA反應(yīng)，從而連接形成核肽鍵[25-26]。

具有連接功能的DNA核酶，其連接底物中通常都有RNA、DNA，一般都需要在金屬離子的輔助下，連接底物形成3', 5'-磷酸二酯鍵、2', 5'-磷酸二酯鍵、C=C雙鍵、核肽鍵等化學(xué)鍵，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)底物的連接。

1.3 磷酸化類

除了具有切割和連接作用的DNA核酶之外，一些具有磷酸化修飾作用的DNA核酶也被篩選出來。有學(xué)者報(bào)道多種可自我磷酸化的DNA核酶ATP-2.1、DK1和DK2，它們可將γ-磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA的5'-羥基上，從而實(shí)現(xiàn)DNA自身的磷酸化[27-28]。

與自我磷酸化對(duì)應(yīng)的是去磷酸化，有學(xué)者篩選出具有酪氨酸激酶活性的DNA核酶，該核酶能使5'-三磷酸化RNA上的γ-磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到多肽鏈中酪氨酸的羥基上，從而使RNA去磷酸化[29-30]。

1.4 其他類

這類核酶主要包括能催化DNA自我腺苷酸化、卟啉環(huán)金屬化、賴氨酸?；菵NA核酶。DNA自我腺苷酸化也稱自蓋帽反應(yīng)，是一種DNA的自我修飾方式。Li等[31]報(bào)道一種DNA核酶可催化AMP連到DNA分子的5'-磷酸末端，形成蓋帽DNA。之后他還報(bào)道一種DNA核酶能將平面卟啉扭曲成過渡態(tài)，然后使Zn2+和Cu2+螯合到卟啉環(huán)中，從而催化卟啉環(huán)金屬化[32]。Yao等[33]則篩選出一種能使賴氨酸?；腄NA核酶，該核酶能將5'-戊二?；疍NA上的戊二?；D(zhuǎn)移到多肽鏈中賴氨酸的氨基上，從而使賴氨酸酰基化，這些都進(jìn)一步擴(kuò)大了DNA核酶的催化范圍。

2 DNA核酶的篩選

由于RNA和DNA都缺乏蛋白質(zhì)中許多重要的蛋白官能團(tuán)，而一些復(fù)雜、特殊的化學(xué)反應(yīng)都需要這些官能團(tuán)，因此DNA核酶展現(xiàn)的催化種類遠(yuǎn)少于蛋白質(zhì)類酶[21,34-35]。目前，所有已經(jīng)報(bào)道的DNA核酶都是利用SELEX技術(shù)篩選出來的，其基本篩選過程為建庫、結(jié)合、分離、擴(kuò)增和循環(huán)，相應(yīng)的篩選流程如圖2。傳統(tǒng)SELEX篩選主要是為了獲得對(duì)靶分子有較好親和特異性的寡核苷酸分子，DNA核酶的SELEX篩選則是為了獲得對(duì)靶分子有較好催化活性的寡核苷酸分子，二者的篩選目標(biāo)和所要獲得的活性分子是不同的，相應(yīng)的二者的分離方法也有不少差別，傳統(tǒng)的篩選通常采用加熱變性的方法使具有活性的寡核苷酸分子空間結(jié)構(gòu)變化從而與靶分子分離，對(duì)應(yīng)的分離方法較多，而DNA核酶的SELEX篩選，有活性的寡核苷酸分子不僅要對(duì)靶分子有較好親和特異性，還要具有催化靶分子的能力，因此核酶的篩選要求更高，相應(yīng)活性分子的分離方式也較少，目前主要有兩種分離方式，一種是利用生物素和鏈霉親和素之間的偶聯(lián)作用進(jìn)行分離的，另一種則是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE電泳）分離的。下面分別以這兩種分離方式為基礎(chǔ)介紹DNA核酶的篩選。

圖 2 SELEX篩選工作示意圖Fig.2 Schematic diagram of SELEX

圖 3 生物素-鏈霉親和素法分離篩選DNA核酶的原理圖Fig.3 Schematic diagram of deoxyribozyme isolated and selected by biotin-streptavidin method

2.1 生物素-鏈霉親和素法分離篩選DNA核酶

目前，大多數(shù)DNA核酶的篩選都是利用生物素和鏈霉親和素之間的偶聯(lián)作用來分離有催化活性的DNA核酶分子。許多學(xué)者利用此方法篩選出具有切割RNA活性的DNA核酶，具體篩選原理如圖3[14,35-36]。首先合成一個(gè)兩端為引物結(jié)合序列（固定序列）、中間為50個(gè)隨機(jī)序列（N50）的單鏈DNA初始文庫，以該DNA文庫為模板進(jìn)行第一次PCR擴(kuò)增，形成的雙鏈DNA則再作為第二次擴(kuò)增模板，用含有5'端標(biāo)記生物素基團(tuán)和3'末端為核糖腺苷酸（rA）的DNA引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，則生成含有rA的DNA產(chǎn)物，其中的rA就是核酶切割的靶點(diǎn)。之后利用生物素和鏈霉親和素之間的偶聯(lián)作用，將該DNA產(chǎn)物固定在有鏈霉親和素的載體上，再加入NaOH溶液破壞該DNA產(chǎn)物，使其DNA雙鏈解開，則未標(biāo)記生物素的那條DNA鏈被洗去，然后用含有輔助因子（如Mg2+等金屬離子）的篩選緩沖液與載體上的DNA產(chǎn)物共同孵育，Mg2+會(huì)使相應(yīng)的DNA鏈折疊成活性結(jié)構(gòu)，并在rA處進(jìn)行切割，從而使有活性的DNA分子從載體上脫落下來，而沒有活性的DNA分子則會(huì)繼續(xù)保留在鏈霉親和素的載體上。最后收集具有活性的DNA分子進(jìn)行PCR，生成的PCR產(chǎn)物可作為次級(jí)文庫進(jìn)入下一輪的篩選。這樣循環(huán)篩選之后，具有切割活性的DNA分子就會(huì)逐漸被富集，在DNA文庫中的比例不斷增加，一般篩選10～20輪即可獲得具有切割活性的DNA核酶。目前利用這種分離方法已篩選到能催化RNA、DNA、胸腺嘧啶二聚體、卟啉等底物的DNA核酶，相關(guān)的核酶為10-23[14-15]、8-17[14-15]、Class I/II[16]、RadDz3[17]、I-R 1/2[18]、UV1C[19]、E47[23]、PS5.M[32]（見表1）。

2.2 PAGE電泳法分離篩選DNA核酶

少數(shù)DNA核酶的篩選是利用聚丙烯酰胺凝膠電泳（Polyacrylamide Gel Electrophoresis，PAGE）來分離具有催化活性的DNA核酶分子。有學(xué)者利用此方法篩選出具有連接RNA活性的DNA核酶，具體篩選原理如圖4[37]。首先利用T4 RNA連接酶將5'-腺苷酸化的RNA（App-RNA），即底物1連接到含有40個(gè)隨機(jī)序列（N40）的單鏈DNA初始文庫的5'端，然后在含有輔助因子（如Mn2+等金屬離子）的篩選緩沖液中，將RNA底物2和上述底物1-DNA初始文庫復(fù)合物共同孵育，Mn2+等輔助因子會(huì)使相應(yīng)的DNA鏈折疊成具有核酶活性的結(jié)構(gòu)，促使底物1和底物2的連接。然后PAGE電泳可根據(jù)分子量大小的不同將分子量較大的連接有兩個(gè)RNA底物的、具有催化活性的DNA分子分離出來，再通過引物對(duì)其中有催化活性的DNA分子進(jìn)行不對(duì)稱PCR，從而獲得大量的活性單鏈DNA，最后將這些活性單鏈DNA分子再次連接到底物1上，進(jìn)入下一輪篩選。如此循環(huán)篩選可獲得相應(yīng)的有催化活性的DNA分子，即DNA核酶。目前利用這種分離方法已篩選到能催化RNA、DNA、酯類、芳香酰胺、氨基酸等底物的一系列DNA核酶（見表1）。

圖 4 PAGE電泳法分離篩選DNA核酶的原理圖Fig.4 Schematic diagram of the separation and selection of deoxyribozyme by PAGE electrophoresis

目前，DNA核酶的SELEX篩選基本上都是采用以上兩種方式分離有核酶活性的DNA分子，其中生物素-鏈霉親和素法屬于DNA核酶篩選中的傳統(tǒng)分離方式，常應(yīng)用于核酸底物的核酶篩選；PAGE電泳分離法則是近年來新發(fā)展出的一種分離方式，較多應(yīng)用于非核酸底物的核酶篩選，如蛋白質(zhì)和多肽等底物，這也是學(xué)者們更加關(guān)注的方向。近年來，通過PAGE電泳的SELEX技術(shù)篩選出了許多非核酸類底物的DNA核酶，大大豐富了DNA核酶的催化種類。

3 DNA核酶的主要應(yīng)用

3.1 在體內(nèi)外金屬離子檢測(cè)中的應(yīng)用

多數(shù)DNA核酶都需要依靠金屬離子才能發(fā)揮其催化活性，這個(gè)特點(diǎn)使DNA核酶在體內(nèi)外金屬離子的檢測(cè)中得到較好的應(yīng)用。DNA核酶常與熒光粹滅基團(tuán)聯(lián)用檢測(cè)體外金屬離子，其檢測(cè)原理如圖5。在核酶的3'端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)Q，底物RNA的5'端則標(biāo)記有熒光基團(tuán)F，當(dāng)檢測(cè)體系中不存在要檢測(cè)的金屬離子時(shí)，DNA核酶與底物RNA成互補(bǔ)雙鏈狀態(tài)，此時(shí)熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)非常近，會(huì)導(dǎo)致最大化的熒光淬滅。而當(dāng)檢測(cè)體系中存在要檢測(cè)的金屬離子時(shí)，該DNA核酶會(huì)將底物切割成兩個(gè)片段，導(dǎo)致熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)的分離，從而產(chǎn)生熒光信號(hào)[38-40]。目前利用該原理已經(jīng)構(gòu)建出多種熒光型傳感器，實(shí)現(xiàn)對(duì)Na+[41]、Cu2+[42]和Pb2+[43]等多種金屬離子的檢測(cè)。隨著納米材料的開發(fā)，許多學(xué)者將其聯(lián)用到DNA核酶上，如利用納米金顆粒（Gold Nanoparticle，AuNPs）的顯色變化與核酶聯(lián)用對(duì)Pb2+進(jìn)行檢測(cè)[44]；利用氧化石墨烯（Graphene Oxide，GO）作為熒光淬滅基團(tuán)與核酶聯(lián)用對(duì)Pb2+進(jìn)行檢測(cè)[45]。

圖 5 DNA核酶檢測(cè)金屬離子的原理Fig.5 Principle of detection of metal ions by deoxyribozyme

對(duì)體內(nèi)金屬離子的檢測(cè)，目前的報(bào)道還較少。而利用DNA核酶則可以檢測(cè)斑馬魚的胚胎和幼體內(nèi)的金屬離子，該檢測(cè)技術(shù)的原理與體外金屬離子的檢測(cè)類似，也是依據(jù)熒光淬滅原理進(jìn)行設(shè)計(jì)的。利用近紅外光對(duì)活體細(xì)胞損傷小和穿透能力強(qiáng)的特點(diǎn)，研究人員設(shè)計(jì)了一種底物-DNA核酶-納米材料的復(fù)合物，DNA核酶與其底物成互補(bǔ)雙鏈狀態(tài)。當(dāng)該復(fù)合物受到近紅外光的照射時(shí)，納米材料會(huì)受熱分解，將核酶-底物復(fù)合物從納米材料上釋放到活體環(huán)境內(nèi)，如果環(huán)境中有Zn2+，核酶則會(huì)在Zn2+的作用下切割底物，由于核酶與底物是根據(jù)上述熒光淬滅原理設(shè)計(jì)的，因此當(dāng)?shù)孜锉磺懈詈?，就?huì)有熒光信號(hào)產(chǎn)生，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)斑馬魚活體內(nèi)Zn2+的檢測(cè)[46]。

3.2 在藥物治療中的應(yīng)用

最初應(yīng)用于抗病毒和腫瘤的工具是RNA核酶，它們最大的功能就是剪切靶標(biāo)RNA，利用這一特性，可以抑制mRNA的轉(zhuǎn)錄和翻譯，使基因的表達(dá)受到抑制，從而達(dá)到藥物治療的目的。

DNA核酶10-23是目前最有潛力的可應(yīng)用于藥物治療的工具酶。它具有極強(qiáng)的切割活性，而它的底物結(jié)合臂又具有很好的包容性，能與多種病毒的RNA結(jié)合，從而能較好地實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒RNA的切割。大量文獻(xiàn)都報(bào)道了它對(duì)各種靶病毒基因表達(dá)的抑制作用，尤其能抑制HIV病毒的基因表達(dá)，是一種較有潛力的治療藥物[47]。此外，F(xiàn)an等[48]利用納米材料構(gòu)建了一種MnO2納米給藥體系，將DNA核酶放到這種MnO2納米片上可用于藥物治療；Zhang等[49]利用納米材料與核酶偶聯(lián)構(gòu)建了一種復(fù)合物（DzNPs），可敲除腫瘤壞死因子mRNA，從而可抑制動(dòng)脈粥硬化的發(fā)展，這也進(jìn)一步促進(jìn)了DNA核酶在藥物治療中的應(yīng)用。

3.3 在DNA分子加密系統(tǒng)中的應(yīng)用

有學(xué)者設(shè)計(jì)了一種基于DNA核酶的分子加密系統(tǒng)，該系統(tǒng)由編碼、加密和解密3部分構(gòu)成。他先將要加密的文本內(nèi)容按照ASCII編碼轉(zhuǎn)化為二進(jìn)制數(shù)字，此過程為編碼；再設(shè)計(jì)一個(gè)二進(jìn)制數(shù)字與DNA堿基序列相互對(duì)應(yīng)的規(guī)則或?qū)?yīng)表，這樣這些二進(jìn)制數(shù)字就可轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的DNA序列形成密文，此過程為加密；接收者收到了含有該DNA序列的DNA文庫后，利用手中能特異性識(shí)別密文序列的DNA核酶，對(duì)文庫中的DNA進(jìn)行切割、連接等加工操作，從DNA文庫中分離出目的片段，然后通過測(cè)序得到對(duì)應(yīng)的DNA序列，從而得到原來的加密文本，此過程為解密[50]。由于DNA分子中包含4種脫氧核苷酸，是較好的信息存儲(chǔ)的載體，DNA核酶更具有較高的特異性識(shí)別能力，是較好的解密鑰匙，因此，與傳統(tǒng)加密系統(tǒng)相比，DNA分子加密系統(tǒng)具有容量大和破譯技術(shù)難等優(yōu)勢(shì)[51]。但目前仍然存在一些弊端，如解密過程中出現(xiàn)的非特異性偽降解等問題。但作為一個(gè)新的研究方向，該加密技術(shù)仍展現(xiàn)出了較大的應(yīng)用前景。

4 展望

DNA核酶的發(fā)展經(jīng)歷了一個(gè)從無到有，從簡(jiǎn)單到復(fù)雜，從催化單一核酸底物的水解反應(yīng)到催化多種底物的多種反應(yīng)，越來越多具有多種功能的DNA核酶被篩選出。但與蛋白質(zhì)類酶相比，DNA核酶的種類還較少，大多數(shù)DNA核酶的底物都還是局限于核酸，因此，進(jìn)一步篩選DNA核酶，尤其是篩選能催化更多類型底物的DNA核酶，是未來DNA核酶研究的一個(gè)重要任務(wù)；研究探索DNA核酶的催化機(jī)制，其催化活性與其空間折疊結(jié)構(gòu)的關(guān)系，也是未來DNA核酶的一個(gè)研究方向；此外，隨著納米、稀土和石墨烯等新材料的興起，未來很可能會(huì)將DNA核酶與這些新材料聯(lián)系到一起應(yīng)用于納米機(jī)器人和生物傳感等相關(guān)領(lǐng)域。相信未來人們對(duì)DNA核酶的研究定會(huì)邁入更高的層次。