翁童喜，李 巧

（廣州檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證集團(tuán)有限公司，廣東廣州 511447）

四氯苯酚（TeCP）和五氯苯酚（PCP）是紡織品、皮革制品、木材、漿料等產(chǎn)品中常用的傳統(tǒng)防霉防腐劑，同時(shí)也是一種毒性物質(zhì)，對(duì)人體具有致畸性和致癌性。為此，各國(guó)相繼建立法規(guī)限制其應(yīng)用。德國(guó)對(duì)四氯苯酚和五氯苯酚的限量要求：與皮膚直接接觸產(chǎn)品0.05 mg/kg，不與皮膚直接接觸產(chǎn)品5.00 mg/kg；2021 年版STANDARD 100 by OEKO-TEX?［1］對(duì)四氯苯酚總量和五氯苯酚進(jìn)行限量，其中嬰幼兒類產(chǎn)品為0.05 mg/kg，其他類產(chǎn)品為0.50 mg/kg。

目前紡織品中的四氯苯酚和五氯苯酚可以采用氣相色譜法、氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜法、液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行測(cè)試。GB/T 18414—2006 規(guī)定樣品中的2,3,5,6-四氯苯酚和五氯苯酚經(jīng)碳酸鉀溶液提取、乙酸酐衍生化后，可以采用氣相色譜/質(zhì)譜法［2］或者氣相色譜法［3］進(jìn)行測(cè)定。氣相色譜法或者氣相色譜/質(zhì)譜法都需要先將紡織品中的四氯苯酚和五氯苯酚經(jīng)K2CO3溶液提取，再加乙酸酐衍生化生成對(duì)應(yīng)的含氯苯酚乙酸酯后再進(jìn)行檢測(cè)，該前處理過程復(fù)雜，處理效率低。李琳等［4］采用加速溶劑萃取-高效液相色譜法測(cè)定皮革和紡織品中的四氯苯酚和五氯苯酚，該方法以正己烷作為萃取溶劑，采用加速溶劑萃取皮革及紡織品中的四氯苯酚和五氯苯酚，再采用高效液相色譜、二極管陣列檢測(cè)器（HPLC/DAD）進(jìn)行分析，該方法前處理需要用到快速溶劑萃取儀，一般實(shí)驗(yàn)室不具備，而且高效液相色譜法具有定性特異性差、容易受樣品基質(zhì)干擾等缺點(diǎn)，不利于復(fù)雜樣品的檢測(cè)。王成云等［5］采用高效液相色譜/靜電場(chǎng)軌道（UPLC/Orbitrap HRMS）進(jìn)行紡織品中含氯酚的快速篩查以及確證，使用的儀器價(jià)格昂貴，一般實(shí)驗(yàn)室很難開展相關(guān)檢測(cè)。高永剛等［6］研究了液相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定紡織品中的19 種含氯苯酚類化合物，該方法使用的設(shè)備型號(hào)為Agilent 6120，是單四級(jí)桿質(zhì)譜，只能進(jìn)行SIM 模式掃描。本實(shí)驗(yàn)室采用高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀同時(shí)測(cè)定紡織品中的2,3,4,5-四氯苯酚、2,3,4,6-四氯苯酚、2,3,5,6-四氯苯酚以及五氯苯酚。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 試劑

甲醇、乙酸銨（色譜純），一級(jí)水（Millipore 純水機(jī)制備），四氯苯酚和五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品（詳細(xì)信息如表1所示）。

表1 四氯苯酚和五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品信息

1.2 儀器

MS2045分析天平（精度0.000 1 g，梅特勒-托利多集團(tuán)），DL-820E超聲波發(fā)生器（上海之信儀器有限公司），高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent Technologies 1290 Infinity Ⅱ，6470 Triple Quad LC/MS），有機(jī)相針式過濾器（0.22 μm）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別稱取約10 mg TeCP 和PCP 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，置于25 mL 棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成400 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液；分別移取一定體積的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液配制成質(zhì)量濃度均為1 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，再根據(jù)需要進(jìn)行適當(dāng)稀釋，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.4 樣品前處理

將樣品裁剪成5 mm×5 mm 的碎片，混勻后稱取1 g（精確至0.001 g），置于帶螺紋的具塞硬質(zhì)玻璃管中，加入20 mL 甲醇，30 ℃超聲萃取30 min，冷卻，將提取液過濾至圓底燒瓶中，再用20 mL 甲醇將殘?jiān)曁崛?5 min，過濾后合并提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在40 ℃以下將提取液濃縮至近干；準(zhǔn)確移取1 mL 甲醇溶解殘?jiān)^0.22 μm 濾膜后供HPLC-MS/MS 測(cè)定。

1.5 儀器條件

1.5.1 色譜條件

色譜柱：Eclipse Plus C18 色譜柱（50.0 mm×2.1 mm×1.8 μm，美國(guó)Agilent 公司）；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；流動(dòng)相A：5 mmol/L 乙酸銨溶液；流動(dòng)相B：甲醇；流速：0.2 mL/min；梯度洗脫程序：0～2 min，0%～50%A；2～10 min，50%～35%A；11.0～11.1 min，35%～70%A，停留時(shí)間15 min。四氯苯酚和五氯苯酚的總離子流圖見圖1。

圖1 四氯苯酚和五氯苯酚的總離子流圖

1.5.2 質(zhì)譜條件

掃描模式：電噴霧負(fù)離子模式（ESI-）；干燥氣溫度：300 ℃；干燥氣流速：5 L/min；鞘氣溫度：250 ℃；鞘氣流速：11 L/min；監(jiān)測(cè)方式：多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式。按照液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化步驟分別對(duì)四氯苯酚和五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行優(yōu)化，得出的子離子、母離子、碎裂電壓以及碰撞能結(jié)果如表2所示。

表2 四氯苯酚和五氯苯酚的掃描參數(shù)

1.6 結(jié)果計(jì)算

按照下式計(jì)算紡織品中四氯苯酚和五氯苯酚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)：

式中：ρi表示樣液中四氯苯酚或五氯苯酚的質(zhì)量濃度，ng/L；V表示定容體積，mL；m表示樣品質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取條件的優(yōu)化

2.1.1 提取方式

紡織品中有害物質(zhì)的常見提取方式有超聲提取法、振蕩提取法以及索氏提取法。索氏提取法的優(yōu)點(diǎn)是提取效果好，但是耗時(shí)長(zhǎng)、使用溶劑量大，不利于提效降耗。相比較而言，超聲提取法、振蕩提取法操作簡(jiǎn)單，效率高。

本實(shí)驗(yàn)比較超聲提取法以及振蕩提取法對(duì)紡織品貼襯布加標(biāo)樣品提取效果的影響。分別稱取1.0 g（精確至0.001 g）白色棉貼襯布于硬質(zhì)玻璃管中，加入1 mL 混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別在30 ℃下采用超聲波以及水浴恒溫振蕩器提取30 min，其他步驟同1.4，比較2 種提取方法的提取效果。由表3 可以看出，超聲提取法提取效率略高于振蕩提取法，因此最終選擇超聲提取法。

表3 2 種提取方法的比較

2.1.2 提取溶劑

含氯酚是強(qiáng)極性化合物，易溶于甲醇、乙醇、乙醚、苯等有機(jī)溶劑，不溶于水，其中乙醚、苯的毒性較大，不適合作為提取溶劑。為了避免溶劑峰的干擾，提取溶劑宜選擇甲醇。

2.1.3 提取溫度

分別稱取1.0 g（精確至0.001 g）白色棉貼襯布于硬質(zhì)玻璃管中，加入1 mL 混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別在不同溫度下超聲提取1 h，其他步驟同1.4。由圖2 可以看出，不同溫度下的測(cè)試結(jié)果相差不大，溫度越高，溶劑越容易揮發(fā)，會(huì)造成測(cè)試結(jié)果的重現(xiàn)性變差，而且超聲波溫度升高過程較慢，不利于提高效率，因此，最終選擇在30 ℃下超聲提取。

圖2 超聲提取溫度對(duì)化合物峰面積的影響

2.1.4 提取時(shí)間

分別稱取1.0 g（精確至0.001 g）白色棉貼襯布于硬質(zhì)玻璃管中，加入1 mL 混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別在30 ℃下超聲提取不同時(shí)間，其他步驟同1.4。由圖3 可以看出，少于30 min 時(shí)，4 種化合物的峰面積隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增大，到30 min 時(shí)，峰面積均達(dá)到最大并趨于穩(wěn)定。因此，合理的超聲提取時(shí)間為30 min。

圖3 超聲提取時(shí)間對(duì)化合物峰面積的影響

2.2 線性關(guān)系與檢出限

選取質(zhì)量濃度均為10～1 000 ng/mL 的3 種四氯苯酚和五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測(cè)定，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。由表4可知，在對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，4種化合物的相關(guān)系數(shù)R2均大于0.999，線性關(guān)系良好。

表4 四氯苯酚和五氯苯酚的線性方程和檢出限

稱取1.0 g 白色空白貼襯布于硬質(zhì)玻璃管中，加入一定體積的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，使按照1.4 步驟處理后的樣液質(zhì)量濃度為線性方程的最低質(zhì)量濃度，4種化合物的信噪比（S/N）均大于10，按照3 倍信噪比定性、10 倍信噪比定量原則，滿足定量要求。計(jì)算得到的檢出限見表4。

2.3 方法重現(xiàn)性及回收率

將白色空白貼襯布裁剪成5 mm×5 mm 的碎片，混合均勻后稱取1 g（精確至0.001 g），置于帶螺紋的硬質(zhì)玻璃管中，再加入一定體積的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，制備成四氯苯酚和五氯苯酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為0.01、0.02 和0.10 mg/kg 的加標(biāo)樣品，最后按照1.4 的步驟進(jìn)行前處理，每個(gè)水平重復(fù)測(cè)定7 次，得到的回收率如表5所示。

表5 方法的重現(xiàn)性和回收率

由表5 可以看出，在3 個(gè)加標(biāo)水平下，2,3,4,6-TeCP 的回收率為91.51%～106.82%，2,3,4,5-TeCP 的回收率為91.99%～101.67%，2,3,5,6-TeCP 的回收率為95.58%～101.69%，PCP 的回收率為88.73%～101.37%。因此，四氯苯酚以及五氯苯酚在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線范圍內(nèi)的回收率為80%～120%，且RSD 均小于10%，完全滿足分析要求。

2.4 實(shí)際陽(yáng)性樣品的測(cè)定

分別選取日常分析檢測(cè)中的陽(yáng)性樣品，按照本實(shí)驗(yàn)的HPLC-MS/MS 方法和GB/T 18414.1—2006 中的GC/MS 進(jìn)行測(cè)試。

由表6 可以看出，雖然2 種方法的測(cè)試結(jié)果相差不大，但是HPLC-MS/MS 方法簡(jiǎn)化了前處理步驟，節(jié)省了時(shí)間和成本。

表6 2種測(cè)試方法的結(jié)果比較

3 結(jié)論

采用超聲法提取紡織品中的四氯苯酚以及五氯苯酚，優(yōu)化提取溫度為30 ℃，提取時(shí)間為30 min，樣液經(jīng)濃縮后使用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行檢測(cè)，大大簡(jiǎn)化了操作步驟，節(jié)省了時(shí)間以及成本，檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏，結(jié)果穩(wěn)定，滿足紡織品中四氯苯酚和五氯苯酚的檢測(cè)要求，更符合企業(yè)批量化生產(chǎn)、節(jié)能降耗的要求。