程子明

（同方藥業(yè)集團(tuán)有限公司，北京 102101）

1 本文的主要觀點(diǎn)

本文主要探討的是培養(yǎng)基模擬灌裝驗證中的風(fēng)險點(diǎn)及驗證方法。

1.1 風(fēng)險分析

培養(yǎng)基經(jīng)過配制除菌過濾后，由灌裝崗位灌至經(jīng)335℃滅菌的西林瓶中半壓塞（膠塞121℃滅菌F0值≥15），裝入凍干機(jī)內(nèi)，將制品按既定曲線進(jìn)行抽真空后壓塞，出箱軋蓋。生產(chǎn)過程中設(shè)備自動化程度較高，人員依賴少；為了確保人員、機(jī)器、物料、操作規(guī)程、環(huán)境能達(dá)到無菌保證要求，從各個方面對無菌生產(chǎn)工藝過程影響無菌保證的風(fēng)險要素進(jìn)行分析，以確定無菌培養(yǎng)基模擬灌裝工藝驗證的范圍和程度。

1.1.1 風(fēng)險評估工具：

采用RAC打分方法對驗證前識別的風(fēng)險點(diǎn)進(jìn)行評級。

RAC 風(fēng)險評價指數(shù)矩陣法：采用科學(xué)的RAC 風(fēng)險評價指數(shù)矩陣法對出現(xiàn)的風(fēng)險進(jìn)行分級：風(fēng)險程度（R）=風(fēng)險概率（P）×風(fēng)險嚴(yán)重度（S）。通過規(guī)定風(fēng)險嚴(yán)重性等級及風(fēng)險概率的定性等級，進(jìn)行不同的等級組合對風(fēng)險進(jìn)行分級。如：

1.1.2 風(fēng)險概率等級

A級-頻繁-幾乎經(jīng)常出現(xiàn)，連續(xù)發(fā)生；B級-容易-在整個產(chǎn)品的生命周期中將出現(xiàn)若干次，經(jīng)常發(fā)生；C級-偶然-在整個產(chǎn)品的生命周期中可能出現(xiàn)，有時發(fā)生；D級-很少-不能認(rèn)為不可能發(fā)生，可能發(fā)生；E級-不易-出現(xiàn)的概率接近于零，可以假設(shè)不發(fā)生。

1.1.3 風(fēng)險嚴(yán)重度等級

Ⅰ級-非常危險性的-質(zhì)量管理活動某一部分或某些部分失??；已有證據(jù)證明產(chǎn)品不符合要求導(dǎo)致患者死亡；Ⅱ級-危險性的-已有證據(jù)證明質(zhì)量管理活動某一部分或某些部分受到威脅；Ⅲ級-處于危險與安全之間（臨界）的-質(zhì)量管理活動可能受到潛在威脅，無法證明是否已造成損害或產(chǎn)品不符合要求導(dǎo)致患者死亡；Ⅳ級-安全的-無損害。

1.1.4 風(fēng)險定性分級

用矩陣指數(shù)的大小作為風(fēng)險分級的準(zhǔn)則。一級風(fēng)險：指數(shù)為1～5，是不能接受的風(fēng)險，必須降低；二級風(fēng)險：指數(shù)為6～9，是不希望有的風(fēng)險，必須適當(dāng)?shù)亟抵帘M可能低，需要相關(guān)的組織決策確定是否可以接受；三級風(fēng)險：指數(shù)為10～17，是有條件接受的風(fēng)險。條件允許的情況下，必須適當(dāng)?shù)亟抵帘M可能低，需要相關(guān)的組織評審后可以接受；四級風(fēng)險：指數(shù)為18～20，是完全可以接受的風(fēng)險，不需要相關(guān)的組織評審。

風(fēng)險評估總結(jié)：根據(jù)此驗證風(fēng)險的評估結(jié)果，此過程未出現(xiàn)一、二級風(fēng)險，但存在三、四級風(fēng)險，針對存在的三、四級風(fēng)險，對該風(fēng)險點(diǎn)采取相應(yīng)的風(fēng)險控制措施?；诂F(xiàn)行管理體系，對所有風(fēng)險均采取了預(yù)防措施。通過本文驗證證明操作的可行性及風(fēng)險是否可控。應(yīng)將所有中等及以上風(fēng)險重點(diǎn)監(jiān)控，并隨時防止低風(fēng)險升高。

1.2 人員及干擾項目設(shè)計

根據(jù)風(fēng)險分析結(jié)果，模擬灌裝試驗除對配制、藥液傳遞、灌裝、軋蓋的整個工藝過程進(jìn)行模擬外，還應(yīng)在培養(yǎng)基模擬灌裝過程中增加人員干預(yù)項，對設(shè)備運(yùn)行異常的調(diào)試和設(shè)備故障的維修過程、灌裝間的人員數(shù)量限制、人員手部消毒頻次、灌裝時限等進(jìn)行挑戰(zhàn)實驗。

1.2.1 可接受標(biāo)準(zhǔn)

本文模擬灌裝批量為30000支，超過10000支，故根據(jù)《2010版GMP附錄一無菌藥品》中的要求，培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，當(dāng)出現(xiàn)污染時應(yīng)遵循以下要求：

有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。

1.2.2 灌裝機(jī)速度

根據(jù)設(shè)備驗證結(jié)果日常灌裝速度擬定為240～480瓶/min，日常生產(chǎn)時，灌裝過程約為6h，本文模擬最差條件，模擬最長生產(chǎn)時限為16h。

1.2.3 驗證過程中的干擾和中斷情況

培養(yǎng)基灌裝盡量模擬所有正常生產(chǎn)中的活動，如測裝量、加塞，開關(guān)門，最多人數(shù)、滅菌物品在接近有效期、最低速度等操作，為評估這些活動對無菌性的影響，因此在培養(yǎng)基灌裝時將模擬以上干擾活動。

（1）加塞頻次。日常生產(chǎn)生產(chǎn)批量為18.4萬支，膠塞桶每桶裝約10000只20-D3丁基膠塞，共約18桶。

（2）檢測裝量頻次。日常生產(chǎn)批量為18.4萬支，灌裝開始至灌裝結(jié)束最長時限約6h，灌裝過程中每30分鐘檢測一次裝量，需共測裝量12次左右。

（3）故障維修干擾。日常生產(chǎn)時，灌裝過程中會有一些非計劃性的、不可避免的設(shè)備故障維修活動，由于設(shè)備定期維護(hù)保養(yǎng)，設(shè)備故障一般在較短時間內(nèi)能夠解除。

（4）更換陶瓷泵干擾。日常生產(chǎn)時，灌裝過程中會發(fā)生一些極端情況如：陶瓷泵漏液、抱死情況等，需更換陶瓷泵。

（5）拆卸零部件干擾。日常生產(chǎn)時，灌裝過程中會有一些拆卸零部件活動。

1.3 使用的培養(yǎng)基類型

采用濃度為2.98%胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基進(jìn)行本文模擬灌裝驗證。

1.4 模擬灌裝裝量、包材及批量

本文驗證采用灌裝量裝為4ml培養(yǎng)基/瓶。采用20-D3膠塞、10ml西林瓶、19.8*7.0鋁蓋作為內(nèi)包材。生產(chǎn)批量為3.0萬支/批。

1.5 模擬灌裝最差條件的確定

本文驗證采用灌裝裝量為4ml培養(yǎng)基/瓶。培養(yǎng)基生產(chǎn)驗證過程中應(yīng)當(dāng)保存生產(chǎn)過程中的視頻資料。本文驗證挑戰(zhàn)配液系統(tǒng)，膠塞鋁蓋等滅菌后的最長時限挑戰(zhàn)，本文驗證為再驗證。為指導(dǎo)模擬灌裝操作，分別模擬不同的干擾條件，在干擾的同時，進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝操作，所有的干擾樣品均在這3個時間段進(jìn)行。

2 驗證方法

2.1 物料確認(rèn)

所有物料均由批準(zhǔn)的供應(yīng)商處采購，檢查符合標(biāo)準(zhǔn)要求并放行使用，在合格有效期內(nèi)。

2.2 物料進(jìn)入潔凈區(qū)的轉(zhuǎn)移

進(jìn)入潔凈區(qū)的物料嚴(yán)格按SOP進(jìn)行操作。

2.3 工服、膠塞、鋁蓋、器具滅菌確認(rèn)

（1）測試方法：檢查濕熱滅菌過程中自動打印記錄的控制參數(shù)和監(jiān)測曲線。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)：滅菌設(shè)備自動打印記錄附在批生產(chǎn)記錄中，控制參數(shù)和監(jiān)測曲線一致，滅菌參數(shù)符合工藝要求。

2.4 培養(yǎng)基液體配制

（1）測試方法。胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基按29.8g→1000mL的比例加入注射用水（20～25℃）中，攪拌10min使全部溶解。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)基批號和用量符合要求。

2.5 培養(yǎng)基液體過濾

（1）測試方法，使用1個無菌取樣瓶對緩沖罐內(nèi)的培養(yǎng)基進(jìn)行取樣，送質(zhì)檢中心檢查無菌。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。無菌生長。

2.6 無菌培養(yǎng)基灌裝

（1）測試方法。培養(yǎng)基液體通過配液管路系統(tǒng)傳遞至灌裝間緩沖罐中，進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝。灌裝半壓塞樣品通過自動進(jìn)出料系統(tǒng)進(jìn)入凍干機(jī)進(jìn)行凍干工藝模擬。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。灌裝前的操作應(yīng)不得對生產(chǎn)過程產(chǎn)生污染。

2.7 環(huán)境監(jiān)測

（1）測試方法。對生產(chǎn)過程中的沉降菌、浮游菌、表面微生物等進(jìn)行測試。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。生產(chǎn)過程中沉降菌、浮游菌、表面微生物等的測試結(jié)果符合相應(yīng)潔凈級別的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.8 模擬凍干

（1）測試方法。凍干機(jī)滅菌周期連續(xù)生產(chǎn)同一品種每周對凍干機(jī)進(jìn)行一次在線滅菌，首次生產(chǎn)前或超過滅菌效期時進(jìn)行滅菌。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。準(zhǔn)確、詳細(xì)記錄模擬凍干過程中的全部干預(yù)操作。

2.9 軋蓋

（1）測試方法。全壓塞產(chǎn)品通過軌道系統(tǒng)傳入。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。與密封性無關(guān)的缺陷樣品均應(yīng)進(jìn)行下一步培養(yǎng)

2.10 樣品傳遞

模擬灌裝合格的培養(yǎng)基經(jīng)過凍干、軋蓋工序傳交接給質(zhì)檢中心、整個物料傳遞過程應(yīng)無遺漏。

2.11 微生物培養(yǎng)與檢查

（1）測試方法。每天由實驗室人員逐支檢查無菌情況。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染物；灌裝數(shù)量在5000～10000支時：有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證；灌裝數(shù)量超過10000支時：有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。

3 結(jié)語

本培養(yǎng)基灌裝驗證是對設(shè)備、環(huán)境以及人員操作的一種系統(tǒng)驗證，是判斷無菌保證水平的關(guān)鍵手段，其目的是為了證明生產(chǎn)線是否具備無菌工藝生產(chǎn)產(chǎn)品的能力、參與生產(chǎn)人員是否具備無菌灌裝的資格以及是否符合GMP的要求。通過培養(yǎng)基模擬灌裝試驗以及灌裝培養(yǎng)基的西林瓶染菌率能否達(dá)到規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)，來確認(rèn)無菌灌裝室的潔凈環(huán)境以及進(jìn)行無菌灌裝過程中所采用的各種防止微生物污染的方法和規(guī)程的可行性，從而為保證所生產(chǎn)產(chǎn)品的無菌性提供依據(jù)。