程子明

（同方藥業(yè)集團有限公司，北京 102101）

1 本文的主要觀點

本文主要探討的是培養(yǎng)基模擬灌裝驗證中的風(fēng)險點及驗證方法。

1.1 風(fēng)險分析

培養(yǎng)基經(jīng)過配制除菌過濾后，由灌裝崗位灌至經(jīng)335℃滅菌的西林瓶中半壓塞（膠塞121℃滅菌F0值≥15），裝入凍干機內(nèi)，將制品按既定曲線進行抽真空后壓塞，出箱軋蓋。生產(chǎn)過程中設(shè)備自動化程度較高，人員依賴少；為了確保人員、機器、物料、操作規(guī)程、環(huán)境能達到無菌保證要求，從各個方面對無菌生產(chǎn)工藝過程影響無菌保證的風(fēng)險要素進行分析，以確定無菌培養(yǎng)基模擬灌裝工藝驗證的范圍和程度。

1.1.1 風(fēng)險評估工具：

采用RAC打分方法對驗證前識別的風(fēng)險點進行評級。

RAC 風(fēng)險評價指數(shù)矩陣法：采用科學(xué)的RAC 風(fēng)險評價指數(shù)矩陣法對出現(xiàn)的風(fēng)險進行分級：風(fēng)險程度（R）=風(fēng)險概率（P）×風(fēng)險嚴(yán)重度（S）。通過規(guī)定風(fēng)險嚴(yán)重性等級及風(fēng)險概率的定性等級，進行不同的等級組合對風(fēng)險進行分級。如：

1.1.2 風(fēng)險概率等級

A級-頻繁-幾乎經(jīng)常出現(xiàn)，連續(xù)發(fā)生；B級-容易-在整個產(chǎn)品的生命周期中將出現(xiàn)若干次，經(jīng)常發(fā)生；C級-偶然-在整個產(chǎn)品的生命周期中可能出現(xiàn)，有時發(fā)生；D級-很少-不能認(rèn)為不可能發(fā)生，可能發(fā)生；E級-不易-出現(xiàn)的概率接近于零，可以假設(shè)不發(fā)生。

1.1.3 風(fēng)險嚴(yán)重度等級

Ⅰ級-非常危險性的-質(zhì)量管理活動某一部分或某些部分失敗；已有證據(jù)證明產(chǎn)品不符合要求導(dǎo)致患者死亡；Ⅱ級-危險性的-已有證據(jù)證明質(zhì)量管理活動某一部分或某些部分受到威脅；Ⅲ級-處于危險與安全之間（臨界）的-質(zhì)量管理活動可能受到潛在威脅，無法證明是否已造成損害或產(chǎn)品不符合要求導(dǎo)致患者死亡；Ⅳ級-安全的-無損害。

1.1.4 風(fēng)險定性分級

用矩陣指數(shù)的大小作為風(fēng)險分級的準(zhǔn)則。一級風(fēng)險：指數(shù)為1～5，是不能接受的風(fēng)險，必須降低；二級風(fēng)險：指數(shù)為6～9，是不希望有的風(fēng)險，必須適當(dāng)?shù)亟抵帘M可能低，需要相關(guān)的組織決策確定是否可以接受；三級風(fēng)險：指數(shù)為10～17，是有條件接受的風(fēng)險。條件允許的情況下，必須適當(dāng)?shù)亟抵帘M可能低，需要相關(guān)的組織評審后可以接受；四級風(fēng)險：指數(shù)為18～20，是完全可以接受的風(fēng)險，不需要相關(guān)的組織評審。

風(fēng)險評估總結(jié)：根據(jù)此驗證風(fēng)險的評估結(jié)果，此過程未出現(xiàn)一、二級風(fēng)險，但存在三、四級風(fēng)險，針對存在的三、四級風(fēng)險，對該風(fēng)險點采取相應(yīng)的風(fēng)險控制措施?；诂F(xiàn)行管理體系，對所有風(fēng)險均采取了預(yù)防措施。通過本文驗證證明操作的可行性及風(fēng)險是否可控。應(yīng)將所有中等及以上風(fēng)險重點監(jiān)控，并隨時防止低風(fēng)險升高。

1.2 人員及干擾項目設(shè)計

根據(jù)風(fēng)險分析結(jié)果，模擬灌裝試驗除對配制、藥液傳遞、灌裝、軋蓋的整個工藝過程進行模擬外，還應(yīng)在培養(yǎng)基模擬灌裝過程中增加人員干預(yù)項，對設(shè)備運行異常的調(diào)試和設(shè)備故障的維修過程、灌裝間的人員數(shù)量限制、人員手部消毒頻次、灌裝時限等進行挑戰(zhàn)實驗。

1.2.1 可接受標(biāo)準(zhǔn)

本文模擬灌裝批量為30000支，超過10000支，故根據(jù)《2010版GMP附錄一無菌藥品》中的要求，培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，當(dāng)出現(xiàn)污染時應(yīng)遵循以下要求：

有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進行調(diào)查。

1.2.2 灌裝機速度

根據(jù)設(shè)備驗證結(jié)果日常灌裝速度擬定為240～480瓶/min，日常生產(chǎn)時，灌裝過程約為6h，本文模擬最差條件，模擬最長生產(chǎn)時限為16h。

1.2.3 驗證過程中的干擾和中斷情況

培養(yǎng)基灌裝盡量模擬所有正常生產(chǎn)中的活動，如測裝量、加塞，開關(guān)門，最多人數(shù)、滅菌物品在接近有效期、最低速度等操作，為評估這些活動對無菌性的影響，因此在培養(yǎng)基灌裝時將模擬以上干擾活動。

（1）加塞頻次。日常生產(chǎn)生產(chǎn)批量為18.4萬支，膠塞桶每桶裝約10000只20-D3丁基膠塞，共約18桶。

（2）檢測裝量頻次。日常生產(chǎn)批量為18.4萬支，灌裝開始至灌裝結(jié)束最長時限約6h，灌裝過程中每30分鐘檢測一次裝量，需共測裝量12次左右。

（3）故障維修干擾。日常生產(chǎn)時，灌裝過程中會有一些非計劃性的、不可避免的設(shè)備故障維修活動，由于設(shè)備定期維護保養(yǎng)，設(shè)備故障一般在較短時間內(nèi)能夠解除。

（4）更換陶瓷泵干擾。日常生產(chǎn)時，灌裝過程中會發(fā)生一些極端情況如：陶瓷泵漏液、抱死情況等，需更換陶瓷泵。

（5）拆卸零部件干擾。日常生產(chǎn)時，灌裝過程中會有一些拆卸零部件活動。

1.3 使用的培養(yǎng)基類型

采用濃度為2.98%胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基進行本文模擬灌裝驗證。

1.4 模擬灌裝裝量、包材及批量

本文驗證采用灌裝量裝為4ml培養(yǎng)基/瓶。采用20-D3膠塞、10ml西林瓶、19.8*7.0鋁蓋作為內(nèi)包材。生產(chǎn)批量為3.0萬支/批。

1.5 模擬灌裝最差條件的確定

本文驗證采用灌裝裝量為4ml培養(yǎng)基/瓶。培養(yǎng)基生產(chǎn)驗證過程中應(yīng)當(dāng)保存生產(chǎn)過程中的視頻資料。本文驗證挑戰(zhàn)配液系統(tǒng)，膠塞鋁蓋等滅菌后的最長時限挑戰(zhàn)，本文驗證為再驗證。為指導(dǎo)模擬灌裝操作，分別模擬不同的干擾條件，在干擾的同時，進行培養(yǎng)基灌裝操作，所有的干擾樣品均在這3個時間段進行。

2 驗證方法

2.1 物料確認(rèn)

所有物料均由批準(zhǔn)的供應(yīng)商處采購，檢查符合標(biāo)準(zhǔn)要求并放行使用，在合格有效期內(nèi)。

2.2 物料進入潔凈區(qū)的轉(zhuǎn)移

進入潔凈區(qū)的物料嚴(yán)格按SOP進行操作。

2.3 工服、膠塞、鋁蓋、器具滅菌確認(rèn)

（1）測試方法：檢查濕熱滅菌過程中自動打印記錄的控制參數(shù)和監(jiān)測曲線。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)：滅菌設(shè)備自動打印記錄附在批生產(chǎn)記錄中，控制參數(shù)和監(jiān)測曲線一致，滅菌參數(shù)符合工藝要求。

2.4 培養(yǎng)基液體配制

（1）測試方法。胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基按29.8g→1000mL的比例加入注射用水（20～25℃）中，攪拌10min使全部溶解。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)基批號和用量符合要求。

2.5 培養(yǎng)基液體過濾

（1）測試方法，使用1個無菌取樣瓶對緩沖罐內(nèi)的培養(yǎng)基進行取樣，送質(zhì)檢中心檢查無菌。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。無菌生長。

2.6 無菌培養(yǎng)基灌裝

（1）測試方法。培養(yǎng)基液體通過配液管路系統(tǒng)傳遞至灌裝間緩沖罐中，進行培養(yǎng)基灌裝。灌裝半壓塞樣品通過自動進出料系統(tǒng)進入凍干機進行凍干工藝模擬。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。灌裝前的操作應(yīng)不得對生產(chǎn)過程產(chǎn)生污染。

2.7 環(huán)境監(jiān)測

（1）測試方法。對生產(chǎn)過程中的沉降菌、浮游菌、表面微生物等進行測試。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。生產(chǎn)過程中沉降菌、浮游菌、表面微生物等的測試結(jié)果符合相應(yīng)潔凈級別的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.8 模擬凍干

（1）測試方法。凍干機滅菌周期連續(xù)生產(chǎn)同一品種每周對凍干機進行一次在線滅菌，首次生產(chǎn)前或超過滅菌效期時進行滅菌。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。準(zhǔn)確、詳細(xì)記錄模擬凍干過程中的全部干預(yù)操作。

2.9 軋蓋

（1）測試方法。全壓塞產(chǎn)品通過軌道系統(tǒng)傳入。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。與密封性無關(guān)的缺陷樣品均應(yīng)進行下一步培養(yǎng)

2.10 樣品傳遞

模擬灌裝合格的培養(yǎng)基經(jīng)過凍干、軋蓋工序傳交接給質(zhì)檢中心、整個物料傳遞過程應(yīng)無遺漏。

2.11 微生物培養(yǎng)與檢查

（1）測試方法。每天由實驗室人員逐支檢查無菌情況。

（2）接受標(biāo)準(zhǔn)。灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染物；灌裝數(shù)量在5000～10000支時：有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證；灌裝數(shù)量超過10000支時：有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。

3 結(jié)語

本培養(yǎng)基灌裝驗證是對設(shè)備、環(huán)境以及人員操作的一種系統(tǒng)驗證，是判斷無菌保證水平的關(guān)鍵手段，其目的是為了證明生產(chǎn)線是否具備無菌工藝生產(chǎn)產(chǎn)品的能力、參與生產(chǎn)人員是否具備無菌灌裝的資格以及是否符合GMP的要求。通過培養(yǎng)基模擬灌裝試驗以及灌裝培養(yǎng)基的西林瓶染菌率能否達到規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)，來確認(rèn)無菌灌裝室的潔凈環(huán)境以及進行無菌灌裝過程中所采用的各種防止微生物污染的方法和規(guī)程的可行性，從而為保證所生產(chǎn)產(chǎn)品的無菌性提供依據(jù)。