摘要：基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探討尪痹方治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）的潛在機制。應(yīng)用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺篩選出尪痹方的化學(xué)成分及作用靶點，GeneCards數(shù)據(jù)庫檢索RA相關(guān)靶點，維恩圖獲取藥物與疾病交集靶點，利用STRING數(shù)據(jù)庫得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（ protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)信息，使用Cytoscape構(gòu)建藥物-有效成分-靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)與PPI網(wǎng)絡(luò)圖，通過DAVID數(shù)據(jù)庫對共同靶點進行基因本體（ gene ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書（ Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）分析。使用SYBYL-X 2.1.1軟件進行分子對接驗證。經(jīng)過篩選得到32個有效成分及99個相關(guān)靶點，核心靶點為IL-6、TNF、AKT1、VEGFA、PTGS2等。GO功能富集分析主要涉及RNA聚合酶II啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控等生物過程，KEGG 通路富集分析主要涉及TNF信號通路、T細胞受體信號通路、Toll樣受體信號通路、破骨細胞分化等信號通路。分子對接結(jié)果顯示，山柰酚、雷公藤內(nèi)酯、柚皮素、川皮苷、刺芒柄花素等核心成分與IL-6、TNF、ATK1、PTGS2、VEGFA等的核心靶點蛋白之間具有良好的結(jié)合活性。本研究初步闡釋了尪痹方通過多成分、多靶點治療RA的潛在機制。

關(guān)鍵詞：網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；分子對接；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；尪痹方

中圖分類號：R285文獻標志碼：A文章編號：1002-4026（2023）03-0038-08

Abstract∶Based on the research methods of network pharmacology， we discuss the potential mechanism of Wangbi formula in the treatment of rheumatoid arthritis （RA） in this article. The chemical components and action targets of the Wangbi formula were extracted using the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform. The RA-related targets were retrieved from the GeneCards database， the intersection targets of drugs and diseases were obtained using a Venn diagram， and the protein-protein interaction （PPI） network information was obtained using the STRING database. Moreover， the Cytoscape software was used to create the network diagram of drug-active ingredient-target-diseases and PPI， and the common targets were analyzed using Gene Ontology （GO） and Kyoto encyclopedia of genes and genomes （KEGG） from the DAVID database. Furthermore， the Sybyl-x 2.1.1 software was used for molecular docking validation. Screening yielded 32 active ingredients and 99 related targets， and the core targets were found to be IL-6， TNF， ATK1， PTGS2， VEGFA， etc. The GO function enrichment analysis mainly involved biological processes， such as positive regulation of RNA polymerase II promoter transcription， whereas KEGG pathway enrichment analysis mainly involved TNF， T-cell receptor， toll-like receptor， osteoclast differentiation， and other signaling pathways. The molecular docking results revealed that the core components， such as kaempferol， triptolide， naringenin， kaempferoside， and prickly shank anthocyanin， demonstrated good binding activity with the core targets， such as IL-6， TNF， ATK1， PTGS2， and VEGFA. This study provided a preliminary explanation of the multicomponent and multitarget mechanisms that may underlie the Wangbi formula′s potential mechanism of action in the treatment of RA.

Key words∶network pharmacology; molecular docking; rheumatoid arthritis; Wangbi formula

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種慢性系統(tǒng)性自身免疫疾病[1]， 以慢性滑膜炎、血管翳、軟骨和骨破壞為典型臨床特征[2]。目前西醫(yī)治療RA多采用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素、非甾體抗炎類等藥物[3]，采用上述西藥治療均有一定的療效，但均有可能引起肝腎損傷、感染等毒副作用[4]。

RA屬中醫(yī)學(xué)“尪痹”“歷節(jié)病”“歷節(jié)風(fēng)”“白虎歷節(jié)”“痹病”“痹證”范疇[5]，漢代張仲景在《金匱要略》中將歷節(jié)病另列一篇，描述癥狀為“諸肢節(jié)疼痛，身體尪羸，腳腫如脫等”。中醫(yī)在治療RA方面具有特有的優(yōu)勢。山東省名老中醫(yī)藥專家宋紹亮教授系認為邪毒內(nèi)伏是RA產(chǎn)生的重要因素，在治療時應(yīng)以尪痹方為底方，貫穿清熱利濕、消腫止痛之法，以清除余毒伏邪，控制病情[6]。尪痹方組成包括雷公藤、青風(fēng)藤、白芍、甘草，臨床對于RA治療效果顯著。方中君藥雷公藤具有清熱解毒、祛濕除痹的作用，臣藥青風(fēng)藤可祛風(fēng)除濕、通利經(jīng)絡(luò)、利尿消腫，雷公藤與青風(fēng)藤相配伍具有祛風(fēng)濕、止痹痛、解毒消腫之效，佐藥白芍與甘草相配伍，酸收甘潤，酸甘化陰，緩急止痛，用于RA可明顯緩解疼痛病癥。

尪痹方治療RA的機制目前尚不明確，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是現(xiàn)代藥理學(xué)的分支方向，能夠在整體思維的指導(dǎo)下探討方劑與疾病之間的聯(lián)系，為臨床及基礎(chǔ)研究提供理論支持。故本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究方法，對尪痹方治療RA的作用機制進行探索。

1資料與方法

1.1尪痹方中主要化學(xué)成分和相關(guān)靶點收集

以雷公藤、青風(fēng)藤、白芍、甘草為關(guān)鍵詞，在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺（traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform，TCMSP）（http：//tcmspw.com）檢索出尪痹方中4味中藥所含的化學(xué)成分。以類藥性（drug-likeness，DL）≥0.18，口服生物利用度（oral biovailability，OB）≥30%的條件篩選出活性成分，通過活性成分名稱在TCMSP中檢索到相應(yīng)的靶點，通過Uniprot數(shù)據(jù)庫（https：//www.uniprot.org）查詢出靶標蛋白對應(yīng)的基因名稱。

1.2疾病靶點的收集

在GeneCards數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org）與OMIM數(shù)據(jù)庫（https：//omim.org）中輸入“Rheumatoid Arthritis”進行檢索并得到RA的靶點信息。對靶點的相關(guān)分數(shù)（relevance score）取2倍中位數(shù)，將相關(guān)分數(shù)大于等于2倍中位數(shù)的靶點作為RA疾病靶點。

1.3疾病與藥物共同靶點的篩選

將尪痹方中篩選出的有效成分靶點及RA疾病靶點，通過Venny在線繪制平臺（http：//www.bioinformatics.com.cn ）繪制維恩圖，并得到有效成分與疾病的交集靶點。

1.4藥物-有效成分-交集靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將藥物名稱、有效成分、有效成分與疾病交集靶點、疾病名稱等信息導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件中構(gòu)建藥物-有效成分-交集靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)。

1.5構(gòu)建及分析蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)

將篩選出的交集靶點基因?qū)隨TRING 11.5數(shù)據(jù)庫中（https：//www.string-db.org），分析靶基因間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（ protein-protein interaction，PPI），將物種設(shè)置為“Homo sapiens”，將置信度設(shè)定為“＞0.4”，將結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件中計算節(jié)點度值，評價節(jié)點的重要程度。

1.6GO與KEGG分析

使用DAVID v6.8數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov）對尪痹方與RA交集靶點進行基因本體（gene ontology， GO）功能富集分析和京都基因與基因組百科全書 （ Kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）通路分析，物種設(shè)置為“Homo sapiens”，GO分析選擇生物過程（biological process，BP），細胞組分（cellular component， CC）和分子功能（molecullar fuction，MF），通過Rstudio ggplot2軟件包根據(jù)-lg P值分別選取BP、CC、MF排名前10與KEGG排名前20的條目進行GO與KEGG分析的可視化處理。

1.7分子對接

通過PubChem（http：//www.pdb.org）平臺獲取尪痹方湯活性成分3D結(jié)構(gòu)的SDF格式文件，使用化學(xué)結(jié)構(gòu)繪圖軟件Chem3D Pro 14.0將SDF格式文件轉(zhuǎn)換為mol2格式文件。利用RSCB PDB數(shù)據(jù)庫（https：//www1.rcsb.org）獲取關(guān)鍵靶點的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)的 PDB 格式文件。利用分子對接軟件SYBYL-X 2.1.1進行分子對接，對接分數(shù)越大，則代表活性成分與靶點結(jié)合情況越好。

2結(jié)果

2.1尪痹方活性成分及作用靶點

使用TCMSP數(shù)據(jù)庫以DL≥0.18，OB≥30%為條件篩選后，共得到122個有效活性成分，其中白芍有效成分8個，甘草有效成分86個，青風(fēng)藤有效成分6個，雷公藤有效成分28個，部分主要活性成分見表1，全表見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附表1。

2.2疾病靶點

基于GeneCards數(shù)據(jù)庫，得到與RA相關(guān)的疾病靶點基因共4 792個。將相關(guān)性（relevance score）≥1.348的靶點做為RA的潛在靶點，共篩選出1 260個靶點。

2.3藥物與疾病靶點的交集

通過Venny在線制圖工具平臺繪制尪痹方有效成分靶點與RA疾病靶點的維恩圖，共得到99個交集靶點，見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附圖1。

2.4藥物-有效成分-交集靶點靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)

尪痹方的藥物-有效成分-交集靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)圖中共包含225個節(jié)點，1 156條邊，圖中每個節(jié)點越大則代表連接度越高，其在疾病的治療中發(fā)揮的作用就越重要。連接度前5的核心成分為山柰酚、雷公藤內(nèi)酯、柚皮素、川皮苷、刺芒柄花素，見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附圖2。

2.5PPI網(wǎng)絡(luò)的建立

RA與尪痹方交集靶點的PPI網(wǎng)絡(luò)圖顯示，圖中共有99個靶點蛋白與1 568條邊，連接度前5的核心靶點蛋白為IL-6、TNF、ATK1、PTGS2、VEGFA，見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附圖3。

2.6基因本體功能富集分析和京都基因與基因組百科全書通路分析結(jié)果

利用DAVID v6.8數(shù)據(jù)庫對RA與尪痹方交集的100個靶點進行GO與KEGG富集分析，并根據(jù)P lt;0.01、FDR（1 discovery rat）lt;0.05 作為條件進行篩選，篩選得到211個GO條目與85個KEGG條目。BP主要涉及藥物反應(yīng)、DNA模板轉(zhuǎn)錄正調(diào)控、凋亡過程的負調(diào)控、一氧化氮生物合成過程的正調(diào)控等，CC主要涉及細胞外間隙、細胞外區(qū)域、質(zhì)膜外側(cè)、核質(zhì)等，MF主要涉及相同蛋白質(zhì)結(jié)合、細胞因子活性、酶結(jié)合、轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)DNA結(jié)合等，見圖1。KEGG富集分析主要涉及腫瘤壞死因子信號通路、T細胞受體信號通路、Toll樣受體信號通路、破骨細胞分化等信號通路，見圖2。

2.7分子對接結(jié)果

選取RA關(guān)鍵靶點蛋白IL-6、TNF、ATK1、PTGS2、VEGFA分別與尪痹方活性成分山柰酚、雷公藤內(nèi)酯、柚皮素、川皮苷、刺芒柄花素使用SYBYL-X 2.1.1進行分子對接，得到對接分數(shù)，前10名見表2，全表見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附表2，同時得到分子對接結(jié)果示意圖，部分示意圖見圖3，對接分數(shù)≥5代表活性成分與靶點具有較好的結(jié)合作用[7]，本次分子對接結(jié)果顯示活性最強的對接組合為PTGS2與川皮苷、ATK1與山柰酚、TNF與山柰酚、PTGS2與雷公藤內(nèi)酯、PTGS2與柚皮素。

3討論

本研究中，通過表1、圖1、圖2可得出尪痹方共有122個作用于RA的有效活性成分以及對應(yīng)的99個核心調(diào)控靶點。有效活性成分中的核心成分包括山柰酚、雷公藤內(nèi)酯、柚皮素、川皮苷、刺芒柄花素等。其中山柰酚能夠通過抑制NF過抑和Akt/mTOR通路從而抑制滑膜成纖維細胞的異常增殖，減輕RA-FLS的炎癥反應(yīng)[8]。同時Pan等[9]研究證明山柰酚可以阻斷MAPK通路激活，減輕膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的關(guān)節(jié)炎嚴重程度。雷公藤內(nèi)酯參與NF-κB途徑、環(huán)氧化酶-2、VEGFA等與炎癥相關(guān)的信號通路的調(diào)節(jié)[10]，并且參與調(diào)節(jié)RA中Th1和Th2細胞、巨噬細胞、成纖維細胞和內(nèi)皮細胞的活化。湯艷華等[11]研究證明，雷公藤內(nèi)酯可通過抑制JAK/STAT信號通路激活緩解小鼠炎癥免疫反應(yīng)。秦登優(yōu)等[12]研究證明雷公藤內(nèi)酯可以通過CCAAT/增強子結(jié)合蛋白α（CCAAT/enhancerbinding proteinα，C/EBPα）抑制炎癥因子IL-12/IL-23的表達。因此雷公藤內(nèi)酯具有較強的免疫與炎癥抑制活性，有利于促進患者循環(huán)免疫復(fù)合物的清除及阻斷致炎作用，加速炎癥的恢復(fù)，從而促進RA的治療。柚皮素作為一種口服類黃酮，已被證明可通過增加超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽的抗氧化系統(tǒng)來降低氧化應(yīng)激[13]。Hajizadeh等[14]研究證明柚皮素可以通過調(diào)節(jié)和極化Th1、Th17對Th2和Treg的反應(yīng)來降低干擾素-γ（Th1細胞指數(shù)細胞因子）和白細胞介素17 （Th17細胞指數(shù)細胞因子）的水平，從而可以有效地減輕大鼠的RA癥狀。MMP-3（基質(zhì)金屬蛋白酶3），MMP-13（基質(zhì)金屬蛋白酶13）是參與RA相關(guān)軟骨破壞的關(guān)鍵降解酶，而川皮苷可以減弱IL-21誘導(dǎo)的基質(zhì)MMP-3與MMP-13表達的能力[15]。刺芒柄花素能夠減少單核巨噬細胞向破骨細胞的增殖與分化，從而降低破骨細胞相關(guān)蛋白基因表達水平以抑制破骨細胞的骨吸收[16]。

通過對交集基因進行PPI分析發(fā)現(xiàn)，IL-6、TNF、AKT1、VEGFA、PTGS2等為尪痹方治療RA的關(guān)鍵靶點蛋白，其中IL-6是促炎細胞因子家族的成員，IL-6的快速產(chǎn)生在抗感染的防御機制中起著重要作用，而其過度和持續(xù)合成失調(diào)會對慢性免疫介導(dǎo)的疾病產(chǎn)生病理影響[17-18]，因此IL-6是RA病程中重要的炎癥介質(zhì)。TNF在免疫、炎癥和控制細胞分化、增殖和凋亡中起著關(guān)鍵作用[19]，且TNF-α在分化的某些階段可以抑制成骨細胞的活性，并刺激破骨細胞的增殖和分化，是免疫介導(dǎo)的骨性疾病（包括RA）的重要致病因子[20]。AKT1可以影響軟骨細胞與滑膜成纖維細胞的增殖、凋亡和自噬[21-22]。VEGFA是一種血內(nèi)皮生長與血管通透性因子，新血管生成是促進病理性滑膜增生和炎癥發(fā)展的早期和關(guān)鍵事件[23]，因此VEGFA與滑膜增生、炎性細胞浸潤和關(guān)節(jié)破壞密切相關(guān)。PTGS2（前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2）也稱為COX2，可以顯著促進RA患者滑膜組織中前列腺素的產(chǎn)生[24]，是治療RA的常用靶點之一。

從GO富集結(jié)果分析可知富集的生物學(xué)過程主要涉及藥物反應(yīng)、DNA模板轉(zhuǎn)錄正調(diào)控、凋亡過程的負調(diào)控、一氧化氮生物合成過程的正調(diào)控等生物過程，并涉及相同蛋白質(zhì)結(jié)合、細胞因子活性、酶結(jié)合、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)DNA結(jié)合等分子功能。

研究顯示尪痹方治療靶點顯著富集于TNF信號通路、T細胞受體信號通路、Toll樣受體信號通路、破骨細胞分化等通路。TNF信號通路可以通過NF-κB原活化蛋白激酶通路介導(dǎo)炎癥反應(yīng)和細胞的增殖、分化和死亡[25]，因此TNF信號通路被認為是治療RA的重要通路[26]。T細胞與維持免疫穩(wěn)態(tài)密切相關(guān)，其介導(dǎo)的免疫反應(yīng)被認為是RA發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵因素[27]，因此自身反應(yīng)性T細胞積聚和CD4+ T輔助細胞穩(wěn)態(tài)失調(diào)為RA的重要特征。 RA是一種與慢性滑膜炎相關(guān)的慢性炎癥性自身免疫性疾病，Toll樣受體信號通路的內(nèi)源性激活可啟動RA患者動脈壁和關(guān)節(jié)滑膜的永久炎癥循環(huán)[28-29]，誘導(dǎo)IL-19、IL-20和IL-24在外周血和滑膜關(guān)節(jié)中產(chǎn)生[30]?；ぱ装Y和不可逆的骨侵蝕是RA的特征，這兩者都突出了免疫系統(tǒng)和骨系統(tǒng)之間的巨大相互關(guān)系，滑膜和骨界面處破骨細胞介導(dǎo)的骨吸收是關(guān)節(jié)骨侵蝕產(chǎn)生的原因之一，而RA的炎癥反應(yīng)會影響全身骨重塑，增加骨吸收，產(chǎn)生全身性骨質(zhì)疏松癥[31]，因此破骨細胞分化通路對RA的病理過程有著重要影響。

我們將篩選出的尪痹方中的核心活性成分與RA的核心靶點蛋白分別進行分子對接，對接結(jié)果顯示PTGS2與川皮苷、ATK1與山柰酚、TNF與山柰酚、PTGS2與雷公藤內(nèi)酯、PTGS2與柚皮素有著較強的結(jié)合能力，因此我們推測尪痹方具有通過多成分、多靶點治療RA的潛在機制。

綜上所述，本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究了尪痹方作用于RA的可能的分子機制，發(fā)現(xiàn)其可通過多靶點、多通路產(chǎn)生抑制炎癥產(chǎn)生、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、減少骨破壞的藥理作用，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

參考文獻：

［1］向高， 何克劍， 尹龍， 等. 正清風(fēng)痛寧治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎療效及安全性系統(tǒng)評價和GRADE證據(jù)級別評價[J]. 中國免疫學(xué)雜志， 2022， 38（3）： 379-386. DOI： 10.3969/j.issn.1000-484X.2022.03.022.

[2]JANG S， KWON E J， LEE J J. Rheumatoid arthritis： Pathogenic roles of diverse immune cells[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2022， 23（2）： 905. DOI：10.3390/ijms23020905.

[3]周唯踐， 顧玲麗. 中醫(yī)辨證聯(lián)合益賽普治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[J]. 中醫(yī)學(xué)報， 2018， 33（12）： 2449-2454. DOI：10.16368/j.issn.1674-8999.2018.12.577.

[4]陳震霖， 張碩. 加減桂枝芍藥知母湯合益腎除濕丸治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的療效觀察[J]. 中成藥， 2017， 39（7）： 1539-1541. DOI： 10.3969/j.issn.1001-1528.2017.07.050.

[5]考希良. 宋紹亮教授治療緩解期類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎經(jīng)驗擷萃[J]. 中國中醫(yī)急癥， 2010， 19（11）： 1888-1889. DOI：10.3969/j.issn.1004-745X.2010.11.030.

[6]王鈺， 姜萍， 張艷艷. 宋紹亮辨治尪痹經(jīng)驗[J]. 山東中醫(yī)雜志， 2021， 40（1）： 75-78. DOI：10.16295/j.cnki.0257-358x.2021.01.014.

[7]黃彭， 曲佳琳， 段文倩， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及實驗驗證探究清熱利膽湯治療膽汁瘀積性肝損傷的作用機制[J]. 中草藥， 2021， 52（15）： 4577-4586. DOI： 10.7501/j.issn.0253-2670.2021.15.016.

[8]WANG J， ZHAO Q. Kaempferitrin inhibits proliferation， induces apoptosis， and ameliorates inflammation in human rheumatoid arthritis fibroblast-likesynoviocytes[J]. Phytotherapy Research： PTR， 2019， 33（6）： 1726-1735. DOI：10.1002/ptr.6364.

[9]PAN D M， LI N， LIU Y Y， et al. Kaempferol inhibits the migration and invasion of rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes by blocking activation of the MAPK pathway[J]. International Immunopharmacology， 2018， 55： 174-182. DOI：10.1016/j.intimp.2017.12.011.

[10]SONG X Q， ZHANG Y， DAI E Q， et al. Prediction of triptolide targets in rheumatoid arthritis using network pharmacology and molecular docking[J]. International Immunopharmacology， 2020， 80： 106179.DOI：10.1016/j.intimp.2019.106179.

[11]湯艷華， 劉玲， 劉炬， 等. 雷公藤內(nèi)酯醇調(diào)控JAK/STAT信號通路對系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型小鼠炎癥免疫的影響[J]. 中藥材， 2021， 44（8）： 1976-1980. DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2021.08.037.

[12]秦登優(yōu)， 田恩， 祁海峰. 雷公藤內(nèi)酯通過CCAAT/增強子結(jié)合蛋白α抑制狼瘡樣腎炎小鼠IL-12/IL-23的表達[J]. 毒理學(xué)雜志， 2020， 34（1）： 62-66. DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2020.01.013.

[13]ZAIDUN N H， THENT Z C， LATIFF A A. Combating oxidative stress disorders with citrus flavonoid： Naringenin[J]. Life Sciences， 2018， 208： 111-122. DOI： 10.1016/j.lfs.2018.07.017.

[14]HAJIZADEH A， ABTAHI FROUSHANI S M， TEHRANI A A， et al. Effects of naringenin on experimentally induced rheumatoid arthritis in wistar rats[J]. Archives of Razi Institute， 2021， 76（4）： 903-912. DOI：10.22092/ari.2020.351612.1527.

[15]LIU Z B， GUO S G， DONG Q R. Nobiletin suppresses IL-21/IL-21 receptor-mediatedinflammatory response in MH7A fibroblast-like synoviocytes （FLS）： An implication in rheumatoid arthritis[J]. European Journal of Pharmacology， 2020， 875： 172939. DOI：10.1016/j.ejphar.2020.172939.

[16]洪一波，姜宏，王建偉，等.芒柄花素抑制RANKL誘導(dǎo)破骨細胞分化的實驗研究[J]. 中國骨傷， 2020， 33（1）： 64-70. DOI：10.3969/j.issn.1003-0034.2020.01.012.

[17]NARA H， WATANABE R. Anti-inflammatory effect of muscle-derived interleukin-6 and its involvement in lipid metabolism[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2021， 22（18）： 9889. DOI：10.3390/ijms22189889.

[18]TANAKA T， NARAZAKI M， KISHIMOTO T. Interleukin （IL-6） immunotherapy[J]. Cold Spring Harbor Perspectives in Biology， 2018， 10（8）： a028456. DOI：10.1101/cshperspect.a028456.

[19]HOSSEINZADEH A， KAMRAVA S K， JOGHATAEI M T， et al. Apoptosis signaling pathways in osteoarthritis and possible protective role of melatonin[J]. Journal of Pineal Research， 2016， 61（4）： 411-425. DOI：10.1111/jpi.12362.

[20]WANG T T， HE C Q. TNF-α and IL-6： The link between immune and bone system[J]. Current Drug Targets， 2020， 21（3）： 213-227. DOI：10.2174/1389450120666190821161259.

[21]DAI Q D， ZHOU D， XU L P， et al. Curcumin alleviates rheumatoid arthritis-induced inflammation and synovial hyperplasia by targeting mTOR pathway in rats[J]. Drug Design， Development and Therapy， 2018， 12： 4095-4105. DOI：10.2147/DDDT.S175763.

[22]TONG S C， LIU J， ZHANG C Q. Platelet-rich plasma inhibits inflammatory factors and represses rheumatoid fibroblast-likesynoviocytes in rheumatoid arthritis[J]. Clinical and Experimental Medicine， 2017， 17（4）： 441-449. DOI：10.1007/s10238-017-0449-2.

[23]JIA W W， WU W J， YANG D， et al. GATA4 regulates angiogenesis and persistence of inflammation in rheumatoid arthritis[J]. Cell Death amp; Disease， 2018， 9（5）： 503. DOI：10.1038/s41419-018-0570-5.

[24]LI Z， FU J， CAO Y L， et al. Drug discovery in rheumatoid arthritis with joint effusion identified by text mining and biomedical databases[J]. Annals of Palliative Medicine， 2021， 10（5）： 5218-5230. DOI：10.21037/apm-20-2631b.

[25]BORGHI A， VERSTREPEN L， BEYAERT R. TRAF2 multitasking in TNF receptor-induced signaling to NF-κB， MAP kinases and cell death[J]. Biochemical Pharmacology， 2016， 116： 1-10. DOI： 10.1016/j.bcp.2016.03.009.

[26]LING Y， XU H， REN N N， et al. Prediction and verification of the major ingredients and molecular targets of Tripterygii radix against rheumatoid arthritis[J]. Frontiers in Pharmacology， 2021， 12： 639382. DOI： 10.3389/fphar.2021.639382.

[27]WANG D， LI Y， LIU Y， et al. The role of autoreactive T cell in the pathogenesis of rheumatoid arthritis and implications for T cell targeted vaccine therapy[J]. MinervaMedica， 2015， 106（3）： 157-167.

[28]MONACO C， TERRANDO N， MIDWOOD K S. Toll-like receptor signaling： common pathways that drive cardiovascular disease and rheumatoid arthritis[J]. Arthritis Care amp; Research， 2011， 63（4）： 500-511. DOI：10.1002/acr.20382.

[29]HU X M， TANG J H， ZENG G， et al. RGS1 silencing inhibits the inflammatory response and angiogenesis in rheumatoid arthritis rats through the inactivation of Toll-like receptor signaling pathway[J]. Journal of Cellular Physiology， 2019， 234（11）： 20432-20442. DOI：10.1002/jcp.28645.

[30]KRAGSTRUP T W， ANDERSEN T， HEFTDAL L D， et al. The IL-20 cytokine family in rheumatoid arthritis andspondyloarthritis[J]. Frontiers in Immunology， 2018， 9： 2226. DOI：10.3389/fimmu.2018.02226.

[31]AURAL M， MACHUCA-GAYET I， COURY F. Rheumatoid arthritis in the view of osteoimmunology[J]. Biomolecules， 2020， 11（1）：48. DOI：10.3390/biom11010048.