摘要：基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究小青龍湯治療新型冠狀病毒感染（COVID-19）的作用機(jī)制。應(yīng)用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform，TCMSP）篩選小青龍湯8味中藥的活性成分，運(yùn)用PubChem、SwissTargetPrediction和TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)獲取中藥的潛在作用靶點(diǎn)；運(yùn)用OMIM、DisGeNET和GeneCards 數(shù)據(jù)庫(kù)篩選COVID-19和Delta variant of COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)；利用Venny 2.1在線工具篩選出小青龍湯靶點(diǎn)和COVID-19靶點(diǎn)的交集并作維恩圖；應(yīng)用Cytoscape 3.7.2 軟件構(gòu)建小青龍湯-成分-（COVID-19）-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)；利用STRING數(shù)據(jù)庫(kù)收集數(shù)據(jù)，并在線構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)；應(yīng)用Metascape數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行基因本體（gene ontology， GO）和基于京都基因與基因組百科全書 （ Kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）富集分析，借助微生信在線繪圖工具繪制GO和KEGG富集分析圖。利用AutoDockTools 1.5.6軟件進(jìn)行分子對(duì)接。篩選得到小青龍湯有效活性成分共169個(gè)及靶點(diǎn)1 363個(gè)，藥物與疾病相交靶點(diǎn)292個(gè)， 得到GO富集分析中生物過程共2 393條，細(xì)胞成分共168條，分子功能共264條，KGGG通路共225條。分子對(duì)接結(jié)果顯示篩選出的小青龍湯核心成分與COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)結(jié)合良好。該研究揭示了小青龍湯可能通過作用于TNF、AKT1、GAPDH、IL-6、ALB、TP53、IL-1β、VEGFA、STAT3、EGFR等靶點(diǎn)，參與MAPK信號(hào)通路、PI3K-Akt信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路等通路治療COVID-19。

關(guān)鍵詞：小青龍湯；新型冠狀病毒感染；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；作用機(jī)制

中圖分類號(hào)：R285；R256.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002-4026（2023）03-0010-08

Abstract∶This research aims to study the mechanism of Xiaoqinglong Decoction in the treatment of coronavirus disease 2019 （COVID-19） based on network pharmacology. The traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform （TCMSP） online tool was used to screen the active ingredients of Xiaoqinglong Decoction. PubChem， SwissTargetPrediction， and TCMSP databases were used to obtain the potential targets of eight traditional Chinese medicines. OMIM， DisGeNET， and GeneCards databases were used to obtain COVID-19 and delta variant of COVID-19 related targets. The intersecting targets of eight traditional Chinese medicines and Xiaoqinglong decoction and COVID-19 were screened using online tool Venny 2.1， and a Venn diagram was prepared. The Cytoscape 3.7.2 software was used to construct Xiaoqinglong Decoction-components-（COVID-19）-target network. After using STRING database to collect data， protein-protein interaction network was built online. Metascape database was used for gene ontology （GO） and Kyoto encyclopedia of genes and genomes （KEGG） enrichment analysis， and the GO and KEGG enrichment analysis maps were plotted using Weishengxin online plotting tool. Molecular docking was performed using the AutoDockTools 1.5.6 software. A total of 169 active ingredients， 1 363 targets of Xiaoqinglong Decoction， and 292 intersecting targets of drugs and diseases were screened. A total of 2 393 biological process， 168 cell components， 264 molecular functions were obtained via GO enrichment analysis. A total of 225 pathways were obtained via KEGG. Molecular docking showed that the core components of Xiaoqinglong Decoction screened in this study combined well with the COVID-19 related targets. Xiaoqinglong Decoction could treat COVID-19 through TNF， AKT1， GAPDH， IL-6， ALB， TP53， IL-1β， VEGFA， STAT3， EGFR， and other targets and participate in MAPK signaling pathway， PI3K-Akt signaling pathway， AGE-RAGE signaling pathway in diabetes complications， and other pathways.

Key words∶Xiaoqinglong Decoction; COVID-19; network pharmacology; action mechanism

小青龍湯出自《傷寒論·辨太陽病脈證并治中篇》，作為麻黃湯類方之一，其以散寒蠲飲功效而著稱[1]。小青龍湯的組成為麻黃、五味子、芍藥、炙甘草、細(xì)辛、干姜、桂枝、半夏，臨床上廣泛應(yīng)用于治療支氣管炎、支氣管哮喘、過敏性咳嗽和一些肺部疾病[2-5]。

新型冠狀病毒感染（coronavirus disease 2019，COVID-19）是一種人體感染新型冠狀病毒引起的急性呼吸道傳染病[6]。發(fā)熱和咳嗽是COVID-19患者的主要癥狀，有的還伴有乏力、惡寒、肌痛等，這些都與小青龍湯的主治功效相符合[7]。COVID-19的病原體不斷進(jìn)化和變異，產(chǎn)生新的傳播速度更快、病毒強(qiáng)度更強(qiáng)的變異株[8]。第一代新冠病毒、德爾塔變異毒株和奧密克戎變異株，其病機(jī)核心都為濕、毒、瘀、虛[9-11]。有研究表明，小青龍湯中的中藥成分對(duì)重癥肺炎患者有治療作用，可以提高患者免疫細(xì)胞的活性，對(duì)炎癥因子的表達(dá)有抑制作用，對(duì)增強(qiáng)肺炎患者的機(jī)體抵抗力有重要意義[12-14]。

應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選小青龍湯作用靶點(diǎn)和疾病對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)，并取兩者作用交集建立藥物-靶點(diǎn)-通路，探究小青龍湯治療COVID-19的作用機(jī)制，為揭示小青龍湯在臨床應(yīng)用中的科學(xué)內(nèi)涵奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1小青龍湯活性成分的篩選

應(yīng)用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform，TCMSP），以口服生物利用度（oral availability，OB）≥30%與藥物相似性（drug-likeness，DL）≥0.18作為條件篩選小青龍湯中的8味中藥的活性成分。

1.2小青龍湯的潛在作用靶點(diǎn)

應(yīng)用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)收集小青龍湯8味中藥的潛在作用靶點(diǎn)；通過PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)收集SMILES（simplified molecular input line entry system）號(hào)，在SwissTargetPrediction數(shù)據(jù)庫(kù)輸入SMILES號(hào)獲得藥物成分靶點(diǎn)，將兩種方法獲得的靶點(diǎn)進(jìn)行整理，刪除重復(fù)靶點(diǎn)。

1.3COVID-19疾病相應(yīng)靶點(diǎn)的收集

以“COVID-19”和“Delta variant of COVID-19”為檢索詞在OMIM、DisGeNET和GeneCards三個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)查找與其相關(guān)的基因靶點(diǎn)，最后篩選得到1 323個(gè)靶點(diǎn)。

1.4藥物-（COVID-19）靶點(diǎn)交集的獲取

將小青龍湯8味中藥有效成分的靶點(diǎn)與COVID-19疾病的靶點(diǎn)導(dǎo)入到Venny 2.1在線工具中，篩選出藥物與疾病交集靶點(diǎn)，即小青龍湯有效成分直接作用COVID-19的靶點(diǎn)，并作維恩圖。

1.5構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)

將小青龍湯和COVID-19的交集靶點(diǎn)輸入到STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中。通過該數(shù)據(jù)庫(kù)獲得蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果。將數(shù)據(jù)結(jié)果導(dǎo)入到Cytoscape 3.7.2 軟件中作圖。通過PPI網(wǎng)絡(luò)篩選出核心靶點(diǎn)，將核心靶點(diǎn)映射到活性成分上，得到關(guān)鍵活性成分[15]。

1.6小青龍湯-有效成分-（COVID-19）-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將處理好的小青龍湯與COVID-19的數(shù)據(jù)導(dǎo)入 Cytoscape 3.7.2 軟件中，應(yīng)用此軟件進(jìn)行小青龍湯-有效成分-（COVID-19）-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建。

1.7GO功能富集分析與KEGG通路富集分析

應(yīng)用Metascape數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)小青龍湯作用于COVID-19的生物過程及調(diào)控通路進(jìn)行基因本體（gene ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析，將分析所得數(shù)據(jù)處理后導(dǎo)入微生信在線繪圖工具繪制GO和KEGG富集分析圖。

1.8分子對(duì)接

利用AutoDockTools 1.5.6軟件進(jìn)行分子對(duì)接。下載化合物的mol2格式，下載COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)蛋白ACE2（PDB ID：1R4L）和PLP（PDB ID：4OVZ）的pdb格式。選取小青龍湯中排名靠前的化合物與COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行分子對(duì)接。

2結(jié)果

2.1小青龍湯活性成分的篩選結(jié)果

應(yīng)用TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)，按照篩選條件最后獲得麻黃23個(gè)、半夏13個(gè)、芍藥13個(gè)、桂枝7個(gè)、細(xì)辛8個(gè)、炙甘草92個(gè)、干姜5個(gè)、五味子8個(gè)活性成分。

2.2小青龍湯的潛在靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)結(jié)果

本研究應(yīng)用SwissTargetPrediction、TCMSP、PubChem預(yù)測(cè)小青龍湯活性成分的作用靶點(diǎn)，篩選后獲得干姜活性成分作用靶點(diǎn)454個(gè)、炙甘草活性成分作用靶點(diǎn)8 065個(gè)、桂枝活性成分靶點(diǎn)272個(gè)、五味子活性成分靶點(diǎn)728、半夏活性成分靶點(diǎn)893個(gè)、芍藥活性成分靶點(diǎn)716個(gè)、麻黃活性成分靶點(diǎn)2 164個(gè)、細(xì)辛活性成分靶點(diǎn)455個(gè)、小青龍湯活性成分的交集靶點(diǎn)1 363個(gè)，見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附表1。

2.3COVID-19疾病相應(yīng)靶點(diǎn)的收集結(jié)果

應(yīng)用相關(guān)疾病數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行COVID-19疾病相應(yīng)靶點(diǎn)收集，篩選靶點(diǎn)并去掉其重復(fù)值共得到1 323個(gè)靶點(diǎn)。

2.4藥物-（COVID-19）靶點(diǎn)交集的獲取結(jié)果

將小青龍湯有效成分的靶點(diǎn)與COVID-19的靶點(diǎn)導(dǎo)入到微生信在線工具中，篩選出交集靶點(diǎn)共292個(gè)，即小青龍湯有效成分直接作用COVID-19的靶點(diǎn)。

2.5PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建分析

將藥物和疾病的交集基因上傳到STRING數(shù)據(jù)庫(kù)得到文本數(shù)據(jù)，Cytosccape 3.7.2軟件用于繪制網(wǎng)絡(luò)圖。以degree值，betweenness值和closeness值大于其平均值為標(biāo)準(zhǔn)來篩選小青龍湯干預(yù)COVID-19的核心靶點(diǎn)，篩選出242個(gè)核心靶點(diǎn)。根據(jù)degree值大小，挑選出小青龍湯治療COVID-19排名前10的核心作用靶點(diǎn)TNF、AKT1、GAPDH、IL-6、ALB、TP53、IL-1β、VEGFA、STAT3、EGFR，這些核心靶點(diǎn)在PPI網(wǎng)絡(luò)中起著關(guān)鍵作用，可能是小青龍湯治療COVID-19的重要靶點(diǎn)，見圖1。

2.6活性成分-（COVID-19）-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建分析

應(yīng)用Cytoscape 3.7.2軟件建立小青龍湯藥物活性成分-（COVID-19）-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，由于獲得的潛在交集靶點(diǎn)較多，選取了前150個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)作圖，網(wǎng)絡(luò)圖見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附圖1。該網(wǎng)絡(luò)由450個(gè)節(jié)點(diǎn)組成了4 067條邊；該網(wǎng)絡(luò)中最大度值81，平均度值9.603；該網(wǎng)絡(luò)中綠色長(zhǎng)方形代表交集靶點(diǎn)，粉紅色橢圓形代表小青龍湯的的活性成分，藍(lán)色菱形為中藥，橙色菱形為疾病COVID-19。圖中GJ代表桂枝、GZ代表干姜、MH代表麻黃、SY代表芍藥、WWZ代表五味子、XX代表細(xì)辛、BX代表半夏、GC代表炙甘草；A1、B1、C1、D1、E1、F1、G1、H1、I1、J1、K1代表中藥的交集成分。

2.7GO功能和KEGG通路富集分析

將292個(gè)小青龍湯和COVID-19的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入到Metascape數(shù)據(jù)庫(kù)，分析小青龍湯作用于COVID-19的生物過程及調(diào)控通路，將分析所得數(shù)據(jù)處理后導(dǎo)入微生信在線繪圖工具繪制GO和KEGG富集分析圖。

GO富集分析中生物過程（biological process， BP）共2 393條，分子功能（molecular function，MF）共264條，細(xì)胞組成（cell component，CC）共168條，各取前10個(gè)聚類中具有代表性的通路，見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附表2、圖2。

KEGG通路分析，共得到225條通路信號(hào)。依據(jù)基因富集數(shù)目與顯著程度，選出排名前20的KEGG通路，其中PI3K-Akt信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路等信號(hào)通路可能直接或間接參與小青龍湯治療COVID-19的作用，見OSID科學(xué)數(shù)據(jù)與內(nèi)容附表3、圖3。

2.8分子對(duì)接結(jié)果分析

為了更好地說明小青龍湯有效成分與COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)蛋白的關(guān)系，選取排名前15的化合物槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、兒茶素、黃芩苷、芍藥苷、甘草酚、松柏素、甘草黃酮、光甘草寧、半甘草異黃酮B、丁子香萜、豆甾醇、紫杉醇、柚皮素與COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行分子對(duì)接。ACE2是中醫(yī)藥防治COVID-19感染的一個(gè)潛在的藥物作用靶點(diǎn)[16]。冠狀病毒木瓜樣蛋白酶 （PLP） 主要作用于冠狀病毒復(fù)制過程中[17]。根據(jù)打分規(guī)則，以結(jié)合能≤-5.0 kJ/mol的條件篩選作用靶蛋白[18]，本研究分子對(duì)接結(jié)果基本均滿足篩選條件，見表1。根據(jù)對(duì)接結(jié)果，選取了ACE2與黃芩苷、β-谷甾醇，PLP與黃芩苷分子對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化展示，見圖2。

3討論

現(xiàn)代臨床上常用小青龍湯配合西醫(yī)治療支氣管炎、肺炎等，在COVID-19的治療中，也使用了小青龍湯辨證加減，獲得了不錯(cuò)的效果[19]。

本研究通過SwissTargetPrediction、TCMSP、PubChem等數(shù)據(jù)庫(kù)挑選出小青龍湯治療COVID-19的活性成分共169個(gè)，共得交集靶點(diǎn)1 363個(gè)，其中跟COVID-19相關(guān)的靶點(diǎn)292個(gè)。通過網(wǎng)絡(luò)分析可以發(fā)現(xiàn)小青龍湯治療COVID-19的主要化合物有槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、黃芩苷、兒茶素和芍藥苷等。槲皮素有抗氧化、抗腫瘤、抑制炎癥、抑菌和保護(hù)心血管的藥理作用，其主要機(jī)制是調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激反應(yīng)和活性氧介導(dǎo)下游信號(hào)通路，還可以抑制T、B細(xì)胞的增殖[20-21]。山柰酚是一種黃酮醇類化合物，具有抑炎抑菌，抑制蛋白激酶，保護(hù)神經(jīng)、心肌和肝臟等藥理作用[22]。有研究發(fā)現(xiàn)，槲皮素和山柰酚都可以抑制MAPK信號(hào)通路來發(fā)揮抗炎作用[23]。β-谷甾醇對(duì)炎癥、抑郁、腫瘤等有治療作用[24]。黃芩苷能夠清除氧自由基、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、抗腫瘤和調(diào)節(jié)免疫[25]，還具有體內(nèi)外抗肺炎支原體作用[26]。兒茶素和黃芩苷對(duì)COX作用，具有抗炎解熱作用[27]。芍藥苷可以改善機(jī)體的免疫力，具有擴(kuò)張血管、抗血小板聚集、改善微循環(huán)、抗氧化等藥理作用[28]。

PPI網(wǎng)絡(luò)篩選出TNF、AKT1、GAPDH、IL-6、ALB、TP53、IL-1β、VEGFA、STAT3、EGFR可能是在小青龍湯治療COVID-19的過程中發(fā)揮重要作用的關(guān)鍵靶點(diǎn)。TNF-α、IL-6和IL-1β是促炎性細(xì)胞因子。AKT1參與周期蛋白的磷酸化過程，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)其增殖[29]。GAPDH是一種重要的催化酶，涉及細(xì)胞內(nèi)糖酵解代謝過程，可以與多種蛋白、RNA或者端粒DNA相互作用，在癌癥、自身免疫性疾病中有重要作用[30]。ALB是一種多效性蛋白質(zhì)，有調(diào)節(jié)組織與血管之間水分的動(dòng)態(tài)平衡，調(diào)節(jié)炎癥基因轉(zhuǎn)錄的作用[31-32]。VEGFA是一種血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，在炎癥和腫瘤中有重要作用[33]。研究表明，肺炎支原體感染引起的呼吸道疾病可能與EGFR和FOXA2的表達(dá)有關(guān)[34]。

KEGG通路分析表明PI3K-Akt信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路等信號(hào)通路可能直接或間接參與小青龍湯治療COVID-19的作用。PI3K-Akt信號(hào)通路與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、運(yùn)動(dòng)、代謝等過程有關(guān)[35]。PI3K-Akt信號(hào)通路參與了肺部的炎癥反應(yīng)[36]。PI3K通路，特別是PI3Kd亞型，是治療氣道疾病的一個(gè)新靶點(diǎn)，PI3Kd抑制劑單獨(dú)或與抗組胺藥依巴斯汀聯(lián)合使用，可能是一種有前途的治療COVID-19的策略[37-38]。研究發(fā)現(xiàn)COVID-19重癥患者促凝血小板的增加是由IgG抗體通過PI3K-Akt 信號(hào)通路介導(dǎo)的[39]。MAPK通路在IFN-I的產(chǎn)生、病毒復(fù)制、黏液產(chǎn)生和T細(xì)胞應(yīng)答中起作用， MAPK信號(hào)通路的激活在血液免疫系統(tǒng)對(duì)抗SARS-CoV-2感染中發(fā)揮了關(guān)鍵作用[40]。AGE/RAGE信號(hào)通路是血管疾病，肺疾病嚴(yán)重程度的重要標(biāo)志。分子對(duì)接結(jié)果顯示，小青龍湯的核心成分與COVID-19相關(guān)靶點(diǎn)結(jié)合結(jié)果良好，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，說明小青龍湯中的有效成分有治療COVID-19的作用。

本研究將小青龍湯中前15個(gè)主要活性成分與COVID-19關(guān)鍵靶點(diǎn)ACE2、PLP進(jìn)行分子對(duì)接，結(jié)果顯示小青龍湯主要活性成分與ACE2、PLP的結(jié)合能基本都≤-5.0 kJ/mol，說明小青龍湯的主要活性成分與COVID-19的受體蛋白具有較好的親和力。槲皮素可以顯著影響病毒S蛋白與ACE2受體的結(jié)合，也可以與S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)域結(jié)合，可以使受體阻斷[41]。實(shí)驗(yàn)研究顯示，黃芩苷能通過調(diào)節(jié)A549細(xì)胞的增殖、下調(diào)ACE2蛋白及其mRNA的表達(dá)，發(fā)揮潛在抗新型冠狀病毒活性作用[16]。兒茶素與刺突蛋白形成有利的相互作用，并可能損害其功能，沒食子兒茶素沒食子酸酯通過干擾病毒尖峰的受體結(jié)合域（RBD）與宿主細(xì)胞的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）受體結(jié)合，在入口處阻斷感染[42-43]。這些結(jié)果都說明本研究分子對(duì)接結(jié)果具有較高可信度。

本研究通過分析揭示了小青龍湯可能通過作用于TNF、AKT1、GAPDH、IL-6、ALB、TP53、IL-1β、VEGFA、STAT3、EGFR等靶點(diǎn)，并參與PI3K-Akt信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路等通路治療COVID-19。小青龍湯治療COVID-19是多成分、多途徑、多靶點(diǎn)共同作用的結(jié)果，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)小青龍湯治療COVID-19作用機(jī)制的預(yù)測(cè)還需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)：

［1］張迪， 王文雅， 許宗穎， 等. 從經(jīng)方方元解讀小青龍湯的組方內(nèi)涵[J]. 吉林中醫(yī)藥， 2021， 41（8）： 1094-1097. DOI：10.13463/j.cnki.jlzyy.2021.08.030.

[2]曾麗珍. 小青龍湯治療慢阻肺急性加重期的臨床運(yùn)用[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘， 2019， 19（26）： 219 DOI：10.19613/j.cnki.1671-3141.2019.26.127.

[3]衛(wèi)志穎， 劉竹云. 小青龍湯加減治療兒童肺系疾病驗(yàn)案3則[J]. 江蘇中醫(yī)藥， 2019， 51（8）： 61-62. DOI： 10.3969/j.issn.1672-397X.2019.08.021.

[4]卓超林， 王輝， 李常， 等. 變通小青龍湯治療支氣管哮喘（虛哮證）的臨床研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)急癥， 2019， 28（8）： 1414-1416. DOI： 10.3969/j.issn.1004-745X.2019.08.026.

[5]王鑫， 劉巧平， 閆占峰， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究小青龍湯治療過敏性鼻炎的作用機(jī)制[J]. 山東大學(xué)耳鼻喉眼學(xué)報(bào)， 2021， 35（5）： 46-55. DOI：10.6040/j.issn.1673-3770.0.2021.134.

[6]陳銳， 孫阿茹， 陳娟， 等. 920例新型冠狀病毒肺炎患者舌象特征與中醫(yī)證候的關(guān)系研究[J]. 長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2022， 38（3）： 295-300. DOI：10.13463/j.cnki.cczyy.2022.03.014.

[7]謝炎烽， 阮永隊(duì)， 劉曉茹， 等. 中醫(yī)藥治療8例重型新型冠狀病毒肺炎經(jīng)驗(yàn)[J]. 實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志， 2020， 34（8）： 1-3. DOI：10.13729/j.issn.1671-7813.z20200188.

[8]天津防治新型冠狀病毒肺炎中醫(yī)專家組. 境外輸入新型冠狀病毒奧密克戎變異株感染患者的中醫(yī)證候特征[J]. 天津中醫(yī)藥， 2022， 39（2）： 142-146. DOI：10.11656/j.issn.1672-1519.2022.02.03.

[9]楊道文， 李得民， 晁恩祥， 等. 關(guān)于新型冠狀病毒肺炎中醫(yī)病因病機(jī)的思考[J]. 中醫(yī)雜志， 2020， 61（7）： 557-560. DOI：10.13288/j.11-2166/r.2020.07.002.

[10]張偉， 陳鳳. 德爾塔變異毒株致新型冠狀病毒肺炎中醫(yī)分析[J]. 山東中醫(yī)雜志， 2022， 41（1）： 1-5. DOI：10.16295/j.cnki.0257-358x.2022.01.001.

[11]王鳳霞， 張?jiān)疲?李曉彬， 等. 小青龍湯用于新冠肺炎患者救治可行性分析[J]. 陜西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2021， 44（4）： 11-14. DOI：10.13424/j.cnki.jsctcm.2021.04.003.

[12]楊春燕， 江炳源. 小青龍湯聯(lián)合西醫(yī)對(duì)重癥肺炎患者肺功能和炎癥因子的影響[J]. 實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床， 2019， 19（4）： 69-70. DOI：10.13638/j.issn.1671-4040.2019.04.034.

[13]張高峰， 陳潔. 加減小青龍湯治療老年重癥肺炎臨床療效及對(duì)免疫功能和血清IFN-γ、IL-1β、PCT的影響[J]. 四川中醫(yī)， 2018， 36（10）： 63-66.

[14]許晶， 石鳳芹， 杜可心， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討“半枝蓮-白花蛇舌草”抗乳腺癌的作用機(jī)制[J]. 中國(guó)中藥雜志， 2020， 45（18）： 4448-4454. DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20200302.502.

[15]孫堯， 王藝璇， 張洪銘， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)研究四逆胃痛顆粒治療萎縮性胃炎的作用機(jī)制[J]. 特產(chǎn)研究， 2022， 44（2）： 64-70. DOI：10.16720/j.cnki.tcyj.2022.030.

[16]龐曉軍，黎東旺，劉春芳.中藥有效成分對(duì)人肺泡Ⅱ型肺泡細(xì)胞ACE2作用的研究[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2022，42（13）：1321-1325.DOI：10.13286/j.1001-5213.2022.13.06.

[17]SHIN D， MUKHERJEE R， GREWE D， et al. Papain-like protease regulates SARS-CoV-2 viral spread and innate immunity[J]. Nature， 2020， 587（7835）： 657-662. DOI：10.1038/s41586-020-2601-5.

[18]徐森楠， 莊莉， 翟園園， 等. 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究二至丸防治骨質(zhì)疏松癥的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)制[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志， 2018， 53（22）： 1913-1920. DOI： 10.11669/cpj.2018.22.007.

[19]林子琦， 焦瑩瑩， 文證， 等. 小青龍湯治療肺系疾病的現(xiàn)代臨床應(yīng)用進(jìn)展[J]. 實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志， 2021， 35（2）： 30-33. DOI：10.13729/j.issn.1671-7813.Z20200444.

[20]楊穎， 王蕓蕓， 蔣琦辰. 槲皮素藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)植物， 2020， 23（5）： 24-28.

[21]司麗君， 王雪， 王林林， 等. 槲皮素的抗炎免疫及部分機(jī)制研究[J]. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)， 2021， 18（27）： 26-29.

[22]曲一帆. 山柰酚緩解小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的腸道微生態(tài)機(jī)理研究[D]. 呼和浩特： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)， 2021.

[23]楊嫄， 吳波， 陶國(guó)水， 等. 化濕敗毒方治療新型冠狀病毒肺炎的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究[J]. 山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2022， 46（2）： 218-226. DOI：10.16294/j.cnki.1007-659x.2022.02.015.

[24]陳元堃， 曾奧， 羅振輝， 等. β-谷甾醇藥理作用研究進(jìn)展[J]. 廣東藥科大學(xué)學(xué)報(bào)， 2021， 37（1）： 148-153. DOI：10.16809/j.cnki.2096-3653.2020040801.

[25]張喜平， 田華， 程琪輝. 黃芩苷的藥理作用研究現(xiàn)狀[J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)， 2003， 19（11）： 1212-1215. DOI： 10.3321/j.issn： 1001-1978.2003.11.003.

[26]蒙艷麗， 徐佳瑩， 王曉溪， 等. 黃芩苷抗肺炎支原體研究[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊， 2020， 38（2）： 158-161. DOI：10.13193/j.issn.1673-7717.2020.02.039.

[27]王力彬. 兒茶-黃芩配伍體內(nèi)效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D]. 楊凌： 西北農(nóng)林科技大學(xué)， 2018.

[28]ALTAVILLA D， SQUADRITO F， BITTO A， et al. Flavocoxid， a dual inhibitor of cyclooxygenase and 5-lipoxygenase， blunts pro-inflammatory phenotype activation in endotoxin-stimulated macrophages[J]. British Journal of Pharmacology， 2009， 157（8）： 1410-1418. DOI：10.1111/j.1476-5381.2009.00322.x.

[29]張家寧. 芍藥苷對(duì)耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌的抗菌機(jī)制及其納米乳制備[D]. 西安： 陜西科技大學(xué)， 2021.

[30]秦燕， 史曉娟， 梁卓文. ATF4靶向AKT1對(duì)膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡及軟骨退變的影響[J]. 解剖學(xué)研究， 2022， 44（1）： 18-23. DOI：10.20021/j.cnki.1671-0770.2022.01.04.

[31]李文. 靶向GAPDH小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)與機(jī)制研究[D]. 煙臺(tái)： 煙臺(tái)大學(xué)， 2021.

[32]EZRA A， RABINOVICH-NIKITIN I， RABINOVICH-TOIDMAN P， et al. Multifunctional effect of human serum albumin reduces Alzheimer′s disease related pathologies in the 3xTg mouse model[J]. Journal of Alzheimer′s Disease， 2016， 50（1）： 175-188. DOI：10.3233/JAD-150694.

[33]崔瑩. 人血白蛋白對(duì)自發(fā)性腦出血患者保護(hù)作用的臨床研究[D]. 大連： 大連醫(yī)科大學(xué)， 2021.

[34]彭哲. VEGFA參與神經(jīng)損傷誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛的機(jī)制[D]. 廣州： 廣州醫(yī)科大學(xué)， 2021.

[35]范改煥， 禹香菊， 趙憲文. 肺炎支原體對(duì)支氣管上皮細(xì)胞黏蛋白分泌的影響[J]. 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2018， 35（11）： 975-980. DOI：10.7683/xxyxyxb.2018.11.007.

[36]YANG J， NIE J， MA X L， et al. Targeting PI3K in cancer： Mechanisms and advances in clinical trials[J]. Molecular Cancer， 2019， 18（1）： 26. DOI：10.1186/s12943-019-0954-x.

[37]李燕梅， 郝金平， 郭永林， 等. 克洛己新干混懸劑通過PI3K/AKT信號(hào)通路改善銅綠假單胞菌誘發(fā)的小鼠急性肺炎[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志， 2021， 41（20）： 4497-4501. DOI： 10.3969/j.issn.1005-9202.2021.20.046.

[38]BASILE M S， CAVALLI E， MCCUBREY J， et al. The PI3K/Akt/mTOR pathway： A potential pharmacological target in COVID-19[J]. Drug Discovery Today， 2022， 27（3）： 848-856.DOI：10.1016/j.drudis.2021.11.002.

[39]PELZL L， SINGH A， FUNK J， et al. Antibody-mediated procoagulant platelet formation in COVID-19 is AKT dependent[J]. Journal of Thrombosis and Haemostasis， 2022， 20（2）： 387-398. DOI：10.1111/jth.15587.

[40]HUANG LL， SHI Y， GONG B， et al. Dynamic blood single-cell immune responses in patients with COVID-19[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy， 2021， 6： 110. DOI：10.1038/s41392-021-00526-2.

[41]PAN B Y， FANG S B， ZHANG J， et al. Chinese herbal compounds against SARS-CoV-2：Puerarin and quercetin impair the binding of viral S-protein to ACE2 receptor[J]. Computational and Structural Biotechnology Journal， 2020， 18： 3518-3527. DOI：10.1016/j.csbj.2020.11.010.

[42]MHATRE S， GURAV N， SHAH M， et al. Entry-inhibitory role of catechins against SARS-CoV-2 and its UK variant[J]. Computers in Biology and Medicine， 2021， 135： 104560.DOI：10.1016/j.compbiomed.2021.104560.

[43]LIU J B， BODNAR B H， MENG F Z， et al. Epigallocatechin gallate from green tea effectively blocks infection of SARS-CoV-2 and new variants by inhibiting spike binding to ACE2 receptor[J]. Cell amp; Bioscience， 2021， 11（1）： 168. DOI：10.1186/s13578-021-00680-8.