魏冉，盧懿，彭麗，石振峰，李素榮

帶狀皰疹(herpes zoster，HZ)是由水痘—帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)感染所致，主要通過藥物治療，但治療后有5%～30%會并發(fā)HZ后遺神經(jīng)痛(postherpetic neuralgia，PHN)[1]。PHN呈刀割樣、電擊樣長時(shí)間的持續(xù)性疼痛，對患者食欲、睡眠質(zhì)量造成了嚴(yán)重的影響[2]。因此，尋找有效預(yù)測PHN的生物標(biāo)志物是目前的重難點(diǎn)。研究顯示，趨化因子及其受體在神經(jīng)病理性疼痛、炎性疼痛等慢性疼痛中有重要作用[3-4]。其中，CX3C趨化因子受體1(CX3C chemokine receptor 1，CX3CR1)屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族，其基因定位于3p21-3pter。CC趨化因子受體2(CC chemokine receptor 2，CCR2)通過與其高親和配體結(jié)合后引起靶細(xì)胞效應(yīng)，參與機(jī)體的多種生理過程[5]。目前尚未見血清CX3CR1和CCR2水平與HZ患者并發(fā)PHN關(guān)系的報(bào)道。因此，現(xiàn)分析HZ患者血清CX3CR1、CCR2表達(dá)及與并發(fā)PHN的關(guān)系，為預(yù)測PHN的發(fā)生提供新的思路，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2020年7月—2022年2月在邢臺市人民醫(yī)院內(nèi)分泌科和疼痛科就診的HZ患者93例作為研究對象(HZ組)，其中男44例，女49例，年齡23～77(50.39±9.94)歲。選擇同期醫(yī)院健康體檢者40例為健康對照組，男21例，女19例，年齡22～74(50.53±9.92)歲。HZ組和健康對照組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后通過電話、微信或門診進(jìn)行3個(gè)月隨訪，以患者是否出現(xiàn)PHN分為PHN亞組32例(出現(xiàn)PHN)和非PHN亞組(未出現(xiàn)PHN)61例。PHN亞組和非PHN亞組患者性別、發(fā)病部位、吸煙史、糖尿病、高血壓、家族史比例比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，PHN亞組患者年齡≥50歲比例、病程、發(fā)熱比例、HZ分型出血型或壞疽型比例高于非PHN組，應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療比例低于非PHN組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)(2020-LX-034)，受試者及家屬均知情同意并簽署知情同意書。

表1 非PHN亞組和PHN亞組臨床資料比較

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者符合HZ的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②PHN亞組患者符合PHN的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；③HZ患者發(fā)病時(shí)間≤7 d；④病例資料齊全者。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有自身免疫疾病者；②妊娠期及哺乳期患者；③合并心、肝、腎等器官嚴(yán)重疾病。

1.3 觀測指標(biāo)與方法

1.3.1 視覺模擬評分(VAS)[7]：采用VAS評分評估HZ患者的疼痛程度，評分范圍0～10分，分?jǐn)?shù)越高代表疼痛程度越強(qiáng)。

1.3.2 血清CX3CR1、CCR2水平檢測：HZ患者入院后治療前、健康體檢者體檢當(dāng)日采集空腹肘靜脈血5 ml，離心留取血清于新的EP管中，于-70℃低溫保存待測。利用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清CX3CR1、CCR2水平，嚴(yán)格遵守試劑盒(均購自泉州市九邦生物科技有限公司)說明書操作，于酶標(biāo)儀(型號Feyond-A700，購自北京龍躍生物科技發(fā)展有限公司)450 nm處讀取吸光值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié) 果

2.1 健康對照組和HZ組血清CX3CR1、CCR2水平比較 HZ組血清CX3CR1、CCR2水平均高于健康對照組(P<0.01)，見表2。

表2 健康對照組和HZ組血清CX3CR1、CCR2水平比較

2.2 PHN亞組與非PHN亞組VAS評分比較 PHN亞組VAS評分為(8.27±2.86)分，高于非PHN亞組的(5.66±1.34)分，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.001，P<0.001)。

2.3 PHN亞組與非PHN亞組血清CX3CR1、CCR2水平比較 PHN亞組血清CX3CR1、CCR2水平均高于非PHN亞組(P<0.01)，見表3。

表3 PHN亞組與非PHN亞組血清CX3CR1、CCR2水平比較

2.4 HZ患者血清CX3CR1與CCR2的相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，HZ患者血清CX3CR1與CCR2呈正相關(guān)(r=0.442，P<0.001)。

2.5 血清CX3CR1、CCR2預(yù)測HZ患者發(fā)生PHN的臨床價(jià)值 繪制ROC曲線結(jié)果顯示，血清CX3CR1、CCR2及二者聯(lián)合預(yù)測HZ患者發(fā)生PHN的AUC分別為0.859、0.863、0.908，但二者聯(lián)合預(yù)測與血清CX3CR1、CCR2各自預(yù)測AUC比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z/P=1.117/0.264、0.974/0.330)，見表4、圖1。

表4 ROC曲線分析血清CX3CR1、CCR2預(yù)測HZ患者發(fā)生PHN的臨床價(jià)值

圖1 血清CX3CR1、CCR2預(yù)測HZ患者發(fā)生PHN的ROC曲線

2.6 多因素Logistic回歸分析HZ患者發(fā)生PHN的獨(dú)立危險(xiǎn)因素 以年齡(≥50歲=1、<50歲=0)、病程(連續(xù)變量)、發(fā)熱(發(fā)熱=1、未發(fā)熱=0)、HZ分型(出血型或壞疽型=2、大皰型=1、頓挫型或普通型=0)、應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療(否=1，是=0)、VAS評分(連續(xù)變量)、CX3CR1(連續(xù)變量)、CCR2(連續(xù)變量)為自變量，以HZ患者是否發(fā)生PHN為因變量(發(fā)生=1，未發(fā)生=0)，經(jīng)Logistic回歸分析顯示，VAS評分高及血清CX3CR1水平高、CCR2水平高均是影響HZ患者發(fā)生PHN的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.01)，見表5。

表5 多因素Logistic回歸分析HZ患者發(fā)生PHN的獨(dú)立危險(xiǎn)因素

3 討 論

VZV具有嗜神經(jīng)特性，可長期潛伏在人體中，當(dāng)機(jī)體受到外界刺激后病毒會重新激活，從而感染造成HZ皮膚病[8]。臨床上主要表現(xiàn)為聚集性紅斑水泡，治療主要以抗病毒、營養(yǎng)神經(jīng)為主，大部分患者經(jīng)過治療會在1個(gè)月內(nèi)痊愈，但也有一部分患者并不能得到完全有效的治療，繼而并發(fā)PHN。目前PHN的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但有研究認(rèn)為與周圍神經(jīng)炎性反應(yīng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳導(dǎo)異常有關(guān)[9]。臨床上PHN患者數(shù)月甚至常年伴有疼痛，身體健康和生活質(zhì)量受到影響[10]。因此，探究PHN的危險(xiǎn)因素，早期預(yù)測PHN的發(fā)生，并制定有效方案對該疾病的治療有重大意義。

趨化因子及其受體在調(diào)節(jié)神經(jīng)可塑性、炎性反應(yīng)等方面發(fā)揮著重要作用[11]。CX3CR1是趨化因子受體中一員，由1 065個(gè)核苷酸、355個(gè)氨基酸組成的功能蛋白，其主要在單核細(xì)胞、NK細(xì)胞和T細(xì)胞上表達(dá)[12-13]。CX3CR1配體是CX3C趨化因子家族唯一成員，CX3CR1可以通過脊髓中的神經(jīng)元—神經(jīng)膠質(zhì)信號調(diào)節(jié)神經(jīng)性疼痛中的神經(jīng)炎性反應(yīng)，直接參與免疫炎性反應(yīng)和病理性疼痛發(fā)生發(fā)展[14]。臨床研究證實(shí)，牙周炎患者血清CX3CR1水平顯著高于健康人，且與牙周參數(shù)和炎性因子呈正相關(guān)，并發(fā)現(xiàn)CX3CR1可能通過調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)或牙周病的發(fā)病機(jī)制發(fā)揮作用[15]。本研究結(jié)果顯示，HZ患者血清CX3CR1水平高于健康者，且HZ后PHN患者血清CX3CR1水平高于非PHN患者，說明血清CX3CR1水平升高與HZ后PHN發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可能是由于CX3CR1參與調(diào)控神經(jīng)性炎性反應(yīng)，隨著CX3CR1表達(dá)上調(diào)能夠激活炎性相關(guān)通路，導(dǎo)致更多炎性細(xì)胞因子分泌增加，加重神經(jīng)炎性反應(yīng)。本研究結(jié)果還顯示，CX3CR1水平高是HZ患者發(fā)生PHN的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，證實(shí)CX3CR1在HZ疾病向PHN病變過程中有重要作用，考慮CX3CR1水平越高HZ患者的神經(jīng)炎性反應(yīng)越嚴(yán)重，加重病情，導(dǎo)致預(yù)后不良，并發(fā)PHN，故臨床監(jiān)測CX3CR1水平變化能夠診斷PHN。已有報(bào)道稱，單核細(xì)胞CX3CR1可能是潛在的對經(jīng)皮冠狀動脈介入治療后支架內(nèi)再狹窄的輔助診斷指標(biāo)和遠(yuǎn)期再狹窄的陰性預(yù)測指標(biāo)[16]。本研究ROC曲線分析顯示，血清CX3CR1預(yù)測HZ患者發(fā)生PHN效能較好，表明其可作為HZ患者治療后發(fā)生PHN的預(yù)測標(biāo)志物，但其敏感度較低，容易導(dǎo)致漏診，需要與其他指標(biāo)聯(lián)合以提高診斷準(zhǔn)確率。

CCR2作為一種參與單核細(xì)胞動員的趨化因子受體，在炎性細(xì)胞趨化過程中有重要作用，是具有7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)的G蛋白偶聯(lián)受體，具有5種配體，包括CC趨化因子配體(CCL)2、CCL7、CCL8、CCL12、CCL13，其中CCL2是CCR2的最主要配體[17-18]。CCL2與急、慢性神經(jīng)炎性反應(yīng)密切相關(guān)，但CCL2生物學(xué)功能需要通過受體CCR2結(jié)合，二者相互作用，才能將免疫細(xì)胞遷移至損傷部位引發(fā)神經(jīng)炎性反應(yīng)[19]。動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，治療后腦缺血再灌注損傷大鼠模型的神經(jīng)炎性反應(yīng)降低，其機(jī)制可能與腦組織CCR2及CCL2表達(dá)水平降低有關(guān)[20]。陳永昌等[21]研究指出，CX3CR1和CCR2通過對單核細(xì)胞進(jìn)行介導(dǎo)作用而參與免疫反應(yīng)及人類免疫缺陷病毒-1相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，HZ患者血清CCR2水平高于健康者，且PHN患者血清CCR2水平高于非PHN患者，提示血清CCR2參與HZ的發(fā)生發(fā)展，隨病情加重，CCR2水平升高，其通過與CCL2結(jié)合導(dǎo)致神經(jīng)炎性反應(yīng)加重，從而引發(fā)PHN，應(yīng)對該指標(biāo)異常的患者加強(qiáng)監(jiān)測。本研究發(fā)現(xiàn)，血清CCR2水平高是HZ患者發(fā)生PHN的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一，提示CCR2參與HZ后PHN發(fā)生發(fā)展過程，是PHN的潛在生物學(xué)標(biāo)志物，檢測其血清水平變化能夠?yàn)榕R床診斷提供參考。ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清CCR2預(yù)測HZ患者發(fā)生PHN具有一定價(jià)值，表明血清CCR2可作為臨床上HZ患者發(fā)生PHN的潛在標(biāo)志物。將CCR2與CX3CR1聯(lián)合檢測能夠提高AUC及敏感度，可準(zhǔn)確反映HZ病情進(jìn)展，為臨床HZ預(yù)后分析提供可靠支持。此外，本研究相關(guān)性分析結(jié)果顯示，HZ患者血清CX3CR1與CCR2呈正相關(guān)，表明血清CX3CR1與CCR2可能共同參與PHN發(fā)生過程。

綜上所述，血清CX3CR1、CCR2在HZ患者中異常升高，并對患者發(fā)生PHN有一定的預(yù)測價(jià)值。但是仍需要大量樣本來證實(shí)本研究結(jié)論。且CX3CR1、CCR2參與PHN的具體調(diào)控機(jī)制尚不清楚，仍需后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等證實(shí)，從而為探究PHN的發(fā)病機(jī)制和治療提供可靠的理論依據(jù)。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

魏冉：設(shè)計(jì)研究方案，實(shí)施研究過程，論文撰寫；盧懿：提出研究思路，分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，論文審核；彭麗：實(shí)施研究過程，資料搜集整理，論文修改；石振峰、李素榮：進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，課題設(shè)計(jì)