苗 雷，左 銳，季曉君，周秋華，馬昌友，吳 艦，徐 丹

(南京正大天晴制藥有限公司，江蘇 南京 210046)

造血祖細(xì)胞激酶1(hematopoietic progenitor kinase 1, HPK1)又稱(chēng)MAP4K1，是一種造血特異性蛋白絲氨酸-蘇氨酸激酶，是哺乳動(dòng)物Ste20相關(guān)蛋白激酶MAP4K家族的成員。HPK1由1個(gè)N端激酶結(jié)構(gòu)域和4個(gè)富含脯氨酸的基序組成，這些基序能夠與含SH3結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)結(jié)合；在C末端也有1個(gè)Cirton同源結(jié)構(gòu)域，可能作為調(diào)節(jié)域且可能參與大分子相互作用[1-2]；中央結(jié)構(gòu)域還包含1個(gè)caspase-3切割位點(diǎn)。HPK1是一種免疫調(diào)節(jié)抑制激酶，主要在淋巴器官/組織中表達(dá)，包括骨髓、淋巴結(jié)、胸腺、脾臟、胎盤(pán)、胎肝；在造血室中，HPK1在所有類(lèi)型的細(xì)胞中表達(dá)，如造血祖細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞[3-4]。作為免疫因子，HPK1在免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，能夠?qū)APK家族中的MAP3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至MAP2K，引起c-Jun N末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)的活化，JNK激酶與Th1/Th2分化、細(xì)胞增殖與凋亡等多種T細(xì)胞反應(yīng)相關(guān)[5]。自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病關(guān)節(jié)炎，患者外周血單核細(xì)胞和T細(xì)胞中的HPK1表達(dá)水平下調(diào)[6-7]，表明HPK1可能通過(guò)調(diào)控T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用。本文將主要描述HPK1在多種腫瘤中的研究進(jìn)展，如乳腺癌[8-9]、肺癌[10]、胰腺癌[11]、膀胱癌[12]、結(jié)腸癌[13]等。

1 HPK1信號(hào)通路

HPK1是T細(xì)胞受體(T cell receptor, TCR)的負(fù)調(diào)控因子[14]。當(dāng)TCR激活后，HPK1被Gads和Grb2等銜接蛋白募集到TCR復(fù)合物，Lck/Zap70在Tyr381位點(diǎn)磷酸化HPK1，為SLP76(一個(gè)分子量76 ku，含有SH2結(jié)構(gòu)域的白細(xì)胞磷蛋白)創(chuàng)造一個(gè)對(duì)接點(diǎn)[15]。HPK1的完全激活需要Ser171和Thr165位點(diǎn)的磷酸化，Ser171可通過(guò)PKD1的途徑被磷酸化，而Thr165似乎是一個(gè)自磷酸化位點(diǎn)。完全激活的HPK1導(dǎo)致SLP76在Ser376殘基位點(diǎn)被磷酸化，14-3-3蛋白(與磷酸絲氨酸/蘇氨酸結(jié)合的第一信號(hào)分子)的募集[16]和TCR復(fù)合物的降解，從而抑制TCR信號(hào)傳導(dǎo)。HPK1介導(dǎo)的T細(xì)胞信號(hào)的負(fù)調(diào)控也可通過(guò)前列腺素E2受體以PKA依賴(lài)的方式交替觸發(fā)。

HPK1可與許多接頭蛋白結(jié)合，如SLP76家族，Gads、HIP-55、GRB2家族，LAT、CRK家族等，活化造血干細(xì)胞的SAPK/JNK信號(hào)途徑，從而對(duì)TCR通路進(jìn)行負(fù)向調(diào)節(jié)。HPK1能負(fù)調(diào)控樹(shù)突狀細(xì)胞的活化和T細(xì)胞與B細(xì)胞反饋[6,17]；與TCR負(fù)反饋調(diào)控類(lèi)似的機(jī)制，B細(xì)胞受體(B cell receptor, BCR)也將HPK1作為負(fù)反饋機(jī)制控制B細(xì)胞激活。在腫瘤中，TCR由于HPK1的激活而被抑制，從而造成了免疫逃逸，因此，抑制HPK1可增強(qiáng)T細(xì)胞活性，從而提高抗腫瘤免疫。

近期有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，HPK1通過(guò)NF-κB-Blimp1信號(hào)軸來(lái)調(diào)控T細(xì)胞的功能[18]。RNA-Seq分析發(fā)現(xiàn)，在HPK1敲除的T細(xì)胞中，PRDM1(Blimp1基因編碼的蛋白)和GATA3表達(dá)顯著降低，TBX21表達(dá)增加。在B16-F10小鼠移植瘤模型中，PRDM1在HPK1敲除的T細(xì)胞中表達(dá)顯著降低，而GATA3的表達(dá)水平則與野生型T細(xì)胞無(wú)明顯差別。因此，HPK1是一種關(guān)鍵的TCR近端激酶，在T細(xì)胞活化時(shí)通過(guò)促進(jìn)Blimp1的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞的功能障礙(例如T細(xì)胞衰竭，Th1細(xì)胞無(wú)力，激活誘導(dǎo)T細(xì)胞死亡等)，而HPK1基因敲除能促進(jìn)小鼠T細(xì)胞的抗腫瘤反應(yīng)，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)。

2 HPK1與腫瘤

HPK1會(huì)影響Fas介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，caspase-3介導(dǎo)HPK1在A(yíng)sp385位點(diǎn)被切割，將HPK1從NF-κB的激活因子轉(zhuǎn)變?yōu)镹F-κB的抑制劑，從而有利于細(xì)胞的凋亡[1]。在不同癌癥患者中，HPK1與多種T細(xì)胞衰竭信號(hào)(CD3E、TIGIT、PDCD1、CTLA4、HAVCR2及LAG3)呈正相關(guān)。同時(shí)，HPK1的表達(dá)水平與多種腫瘤患者的生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，如腦低級(jí)別膠質(zhì)瘤、腎透明細(xì)胞癌、胰腺癌以及浸潤(rùn)性乳腺癌等，HPK1低表達(dá)的患者具有更長(zhǎng)的生存期[18]。此外，研究發(fā)現(xiàn)下調(diào)HPK1的轉(zhuǎn)錄可抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞中的腫瘤進(jìn)展[13]。

HPK1的過(guò)表達(dá)和敲除研究發(fā)現(xiàn)，HPK1負(fù)調(diào)控T細(xì)胞中MAP激酶信號(hào)通路和AP-1的轉(zhuǎn)錄[1]。多項(xiàng)研究表明，HPK1在減弱T細(xì)胞、B細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞的免疫應(yīng)答中發(fā)揮非冗余作用，使得HPK1成為一個(gè)有吸引力的腫瘤免疫治療靶點(diǎn)[2]。

2.1 HPK1與乳腺癌2020年，全球乳腺癌的新發(fā)病例數(shù)超過(guò)肺癌位列第一，占比達(dá)11.7%[19]。乳腺癌是全球癌癥死亡的第5大原因之一，約占女性癌癥病例的1/4和死亡病例的1/6。已證實(shí)乳腺癌與BRCA1、BRCA2、PTEN、p53等基因相關(guān)[20]，HPK1在乳腺癌中的研究亦有報(bào)道。

在乳腺癌中，HPK1的功能與其他腫瘤似乎存在差異，HPK1的過(guò)表達(dá)能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖與遷移。都闖等[8]通過(guò)檢測(cè)102例乳腺癌患者的癌組織和癌旁組織(距癌邊緣>5 cm)中p-Akt和HPK1的蛋白表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中p-Akt和HPK1表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。因此，p-Akt的高表達(dá)可提高癌細(xì)胞下游p16蛋白的表達(dá)，增強(qiáng)癌細(xì)胞的浸潤(rùn)和黏附能力；HPK1表達(dá)缺失則導(dǎo)致殺傷性T淋巴細(xì)胞活力不足，導(dǎo)致乳腺癌的進(jìn)展。王磊等[9]通過(guò)對(duì)91例乳腺癌組織和85例乳腺腺瘤組織中Kif2a和HPK1的表達(dá)研究，發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中Kif2a表達(dá)量高于乳腺腺瘤組織，而HPK1表達(dá)量低于乳腺腺瘤組織；進(jìn)一步相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中Kif2a表達(dá)量與多種癌基因(DEK、iASPP-SV、Stat3、MDM2、Fra-1)和耐藥基因(ESR1、MDR1、P-gp、MRP1、GST-π)呈正相關(guān)，而HPK1表達(dá)量與上述癌基因和耐藥基因呈負(fù)相關(guān)。因此認(rèn)為乳腺癌組織中Kif2a基因的異常高表達(dá)和HPK1基因的異常低表達(dá)會(huì)影響癌基因和耐藥基因的表達(dá)，影響乳腺癌的惡性進(jìn)展。

研究表明[21]，HPK1在乳腺癌組織和細(xì)胞中均低表達(dá)，而HPK1過(guò)表達(dá)則可抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7和MDA-MB-231的細(xì)胞增殖和遷移，并誘導(dǎo)凋亡，可使MCF-7乳腺癌細(xì)胞周期阻斷在G0/G1期。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，HPK1過(guò)表達(dá)可抑制人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)，提高其生存率。機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，HPK1過(guò)表達(dá)會(huì)引起JNK、p53、caspase-3、PTEN蛋白的表達(dá)上調(diào)，MMP-9、MMP-2和Ki-67蛋白的表達(dá)下調(diào)。

2.2 HPK1與肺癌肺癌是2020年全球第二大最常見(jiàn)的癌癥，也是癌癥死亡的主要原因，新發(fā)病例數(shù)占比達(dá)11.4%，死亡數(shù)達(dá)18.0%[19]。

非小細(xì)胞肺癌具有免疫原性差的特點(diǎn)，可能與腫瘤環(huán)境中存在前列腺素2(prostaglandin E 2,PGE2)等免疫抑制因子相關(guān)。PGE2被證實(shí)能激活HPK1，而在HPK1基因缺失的小鼠模型中，PGE2誘導(dǎo)的Lewis肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)明顯受到抑制。研究人員將3LL細(xì)胞靜脈注射到野生型或HPK1-/-小鼠中，免疫組化發(fā)現(xiàn)HPK1-/-小鼠的腫瘤灶中存在CD3+淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，野生型小鼠腫瘤灶中未檢測(cè)到，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)CD4+和CD8+T細(xì)胞均有浸潤(rùn)；再將野生型或HPK1-/-的T細(xì)胞與3LL細(xì)胞一起轉(zhuǎn)移到T細(xì)胞缺陷的RAG-/-宿主中，發(fā)現(xiàn)接受HPK1-/-T細(xì)胞的小鼠肺部腫瘤病灶數(shù)量和大小均顯著減少。腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(tumor infiltrating lymphocyte, TILs)的存在以及T細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T細(xì)胞缺陷小鼠體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明腫瘤排斥反應(yīng)是T細(xì)胞介導(dǎo)的。進(jìn)一步分析表明可能是由于HPK1敲除的T細(xì)胞能夠耐受PGE2介導(dǎo)的對(duì)T細(xì)胞增殖、IL-2產(chǎn)生和凋亡的抑制。因此得出結(jié)論，PGE2通過(guò)HPK1抑制T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤反應(yīng)[10]。

55 ku的HPK1相互作用蛋白(HPK1-interaction protein of 55 ku, HIP-55)，又稱(chēng)DBNL、SH3P7和mAbp1，是一種多域結(jié)合蛋白，對(duì)器官發(fā)育和免疫反應(yīng)至關(guān)重要，能夠調(diào)控心血管功能、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)元形態(tài)等[22]。HIP-55是適當(dāng)?shù)募?xì)胞生長(zhǎng)控制所必需的，有研究顯示，HIP-55在肺癌細(xì)胞系和肺癌患者的腫瘤組織中上調(diào)，增強(qiáng)HIP-55的表達(dá)可促進(jìn)肺癌細(xì)胞的增殖、集落形成、遷移和侵襲，而沉默HIP-55可逆轉(zhuǎn)這些效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)證明，14-3-3蛋白參與HIP-55對(duì)HPK1-JNK信號(hào)通路的調(diào)節(jié)。機(jī)制上，HIP-55調(diào)節(jié)腫瘤發(fā)生的機(jī)制可能是通過(guò)其與HPK1的相互作用，HIP-55介導(dǎo)的腫瘤發(fā)生活性似乎部分通過(guò)拮抗HPK1的功能介導(dǎo)。HIP-55與HPK1的相互作用可成為一種針對(duì)HIP-55介導(dǎo)的癌癥的新策略，比如抑制HIP-55或破壞HIP-55與HPK1的相互作用[23]。

2.3 HPK1與胰腺癌胰腺癌惡性程度高，通常預(yù)后不良，5年生存率不足10%，被稱(chēng)為“癌中之王”，2020年全球新發(fā)病例占比為2.6%，死亡人數(shù)與新發(fā)病例數(shù)幾乎一樣，是男女癌癥死亡的第7大原因[19]。

有研究表明，HPK1在胰腺癌組織中丟失，HPK1蛋白表達(dá)的缺失與胰腺上皮內(nèi)瘤變(pancreatic intraepithelial neoplasia, PanIN)的進(jìn)展和侵襲性胰腺導(dǎo)管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinomas, PDA)的發(fā)展顯著相關(guān)，可能有助于胰腺癌的腫瘤發(fā)生[24]。該研究同時(shí)表明，PDA中的HPK1蛋白表達(dá)缺失是通過(guò)蛋白酶體途徑實(shí)現(xiàn)的，這需要HPK1激酶活性來(lái)降解。HPK1在胰腺癌中穩(wěn)定p21和p27并導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯，進(jìn)一步證明HPK1可能在PDA中作為腫瘤抑制基因發(fā)揮作用。

Song等[11]研究發(fā)現(xiàn)，HPK1是一種腫瘤抑制因子，通過(guò)靶向Axl進(jìn)行內(nèi)吞轉(zhuǎn)運(yùn)和溶酶體降解下調(diào)AXL蛋白表達(dá)及其下游信號(hào)通路。HPK1優(yōu)先通過(guò)其C端結(jié)構(gòu)域與Axl相互作用，并導(dǎo)致Axl的下調(diào)，HPK1介導(dǎo)的Axl降解依賴(lài)于HPK1激酶活性。此外，還發(fā)現(xiàn)HPK1增加了Axl與原癌基因c-Cbl的結(jié)合，促進(jìn)Axl泛素化并加速Axl內(nèi)化，通過(guò)內(nèi)體運(yùn)輸?shù)饺苊阁w進(jìn)行降解。在人類(lèi)PanIN病變中，Axl蛋白表達(dá)與HPK1表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，HPK1的低表達(dá)和AXL的高表達(dá)與胰腺導(dǎo)管腺癌患者的低生存率顯著相關(guān)。

一項(xiàng)使用HPK1-M46轉(zhuǎn)基因小鼠的研究表明，HPK1的免疫抑制功能需要HPK1激酶活性，激酶結(jié)構(gòu)域的失活增強(qiáng)了抗腫瘤免疫反應(yīng)和抗PD-L1功效。說(shuō)明使用選擇性小分子抑制劑結(jié)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療，靶向免疫細(xì)胞中的HPK1激酶活性可能是有效癌癥治療的替代策略[2]。然而，HPK1激酶活性是胰腺癌中HPK1介導(dǎo)的致癌酪氨酸受體AXL降解及其下游信號(hào)通路抑制所必需的，因此，HPK1在腫瘤細(xì)胞中與腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞的相互作用和激活中的作用還有待研究[11]。

2.4 HPK1與膀胱癌膀胱癌是全球第10大常見(jiàn)的癌癥，2020年大約有57.3萬(wàn)新發(fā)病例，占所有癌癥新發(fā)病例數(shù)的3.0%，約21.3萬(wàn)人死亡。男性中更為常見(jiàn)，發(fā)病率和死亡率約為全球女性的4倍，是男性第6大常見(jiàn)癌癥和第9大癌癥死亡原因[19]。

Hsa-miR-96位于人類(lèi)7號(hào)染色體上，長(zhǎng)度22nt。Hsa-miR-96的靶基因，包括IRS1和HPK1。Wang等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在膀胱尿路上皮癌中，hsa-miR-96的表達(dá)水平高于正常組織，且無(wú)性別差異。hsa-miR-96的下調(diào)顯著影響膀胱癌T24細(xì)胞的表型，抑制細(xì)胞的增殖與遷移并促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。與對(duì)照相比，hsa-miR-96的下調(diào)會(huì)導(dǎo)致T24細(xì)胞中IRS1和HPK1的mRNA水平和蛋白水平顯著降低，MAP2K2的表達(dá)無(wú)差異，表明hsa-miR-96可能通過(guò)上調(diào)IRS1和HPK1水平來(lái)影響膀胱癌T24細(xì)胞的生長(zhǎng)。

2.5 HPK1與其他腫瘤據(jù)報(bào)道，HPK1還與其他幾種腫瘤相關(guān)。HPK1高拷貝數(shù)與接受奧沙利鉑為基礎(chǔ)化療的III期結(jié)直腸癌患者的復(fù)發(fā)和生存一致相關(guān)，強(qiáng)調(diào)HPK1在調(diào)節(jié)奧沙利鉑反應(yīng)中的重要作用及其作為以?shī)W沙利鉑為基礎(chǔ)的化療療效的生物標(biāo)志物的潛力[25]。

HPK1在高三尖杉酯堿(homoharringtonine，HHT)誘導(dǎo)的抗性AML細(xì)胞系中高度表達(dá)。HPK1在A(yíng)ML細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)了AML細(xì)胞對(duì)HHT的抵抗。HPK1的過(guò)度表達(dá)是預(yù)測(cè)AML預(yù)后不良的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。體外研究顯示，HPK1通過(guò)MAPK和DNA損傷/修復(fù)途徑調(diào)控細(xì)胞周期，揭示HPK1是開(kāi)發(fā)AML治療方法的一個(gè)潛在目標(biāo)[26]。

3 靶向HPK1的藥物研發(fā)現(xiàn)狀

腫瘤免疫逃逸有兩種機(jī)制[27]，其一是腫瘤細(xì)胞下調(diào)其抗原加工/遞呈機(jī)制，如主要組織相容性復(fù)合體(MHC)I、蛋白酶體亞基潛伏膜蛋白(LMP)2和LMP7、抗原加工相關(guān)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)和tapasin，以阻止被T細(xì)胞識(shí)別，造成腫瘤免疫逃逸；另一機(jī)制是腫瘤細(xì)胞向腫瘤微環(huán)境分泌免疫抑制因子，如TGF-β、IL-8、IL-10、VEGF、ROS等，抑制T細(xì)胞功能和/或樹(shù)突細(xì)胞的成熟，導(dǎo)致腫瘤抗原向T細(xì)胞交叉遞呈缺陷。

腫瘤細(xì)胞通過(guò)促進(jìn)其PD-L1和B7-1/2分別與T細(xì)胞上的免疫檢查點(diǎn)蛋白PD-1和CTLA-4結(jié)合，或者增加PD-L1和PD-1的表達(dá)，均可導(dǎo)致T細(xì)胞衰竭[28]。HPK1誘導(dǎo)腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞障礙，減弱T細(xì)胞、B細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞的免疫應(yīng)答，是一個(gè)潛在的腫瘤免疫治療靶點(diǎn)，且可與PD1/PD-L1聯(lián)用。但截至目前，尚無(wú)HPK1相關(guān)藥物上市，進(jìn)展較快的在研藥物處于臨床Ⅰ或Ⅰ/Ⅱ期，均為腫瘤免疫治療。

2021年3月，百濟(jì)神州宣布其開(kāi)發(fā)的高活性、高選擇性HPK1小分子抑制劑BGB-15025 的Ⅰ期臨床試驗(yàn)(NCT04649385)，已完成首例患者給藥。該臨床試驗(yàn)采取BGB-15025單用和與PD-1單克隆抗體替雷利珠單抗聯(lián)用，治療晚期實(shí)體瘤患者。根據(jù)開(kāi)發(fā)公司公布的臨床前數(shù)據(jù)，BGB-15025可增加PMBC中IL-2的產(chǎn)生；CT26WT同源模型中聯(lián)用PD-1抗體，低至1 mg·kg-1也可表現(xiàn)出顯著的聯(lián)用效果：68%的腫瘤體積小于100 mm3，28%達(dá)到無(wú)瘤狀態(tài)；初步毒理研究還表明BGB-15025治療窗較寬，約20～50倍。

2020年9月，由Treadwell Therapeutics公司開(kāi)發(fā)的新型、口服強(qiáng)效HPK1激酶抑制劑CFI-420411的Ⅰ/Ⅱ期臨床研究(NCT04521413)，將進(jìn)行首次患者給藥，擬采取單用或聯(lián)合帕博利珠單抗在實(shí)體瘤患者中的療效。專(zhuān)利中(WO2016205942)示例性化合物A1對(duì)HPK1的IC50小于0.05 μmol·L-1。CT26結(jié)腸癌細(xì)胞系異種移植模型研究顯示，每日給藥一次劑量為75 mg·kg-1和150 mg·kg-1g的A1分別使腫瘤生長(zhǎng)抑制44%和64%，21 d存活率分別為25%和37.5%；抗PD-1抗體單用TGI為34%，21 d存活率為12.5%，與150 mg·kg-1的A1聯(lián)用可使TGI增至86%，21 d存活率提高至87.5%，顯示出良好的體內(nèi)抗腫瘤活性。以上兩種藥物的臨床前實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均提示，HPK1抑制劑與抗PD-1抗體聯(lián)用可能是一個(gè)較好的方案。

西安宇繁的XYF-19 CAR-T細(xì)胞，正在開(kāi)展在復(fù)發(fā)或難治性CD19+血液系統(tǒng)惡性腫瘤的安全性研究，利用慢病毒載體向T細(xì)胞插入CD19特異性嵌合抗原受體，用CRISPR基因編輯消除內(nèi)源性HPK1，目前也處于Ⅰ期臨床(NCT04037566)。開(kāi)發(fā)人員的研究報(bào)道，HPK1敲除的CD19 CRA-T細(xì)胞能降低瘤內(nèi)T細(xì)胞衰竭標(biāo)志物PD-1、TIM-3和LAG-3表達(dá)水平，促進(jìn)細(xì)胞因子IL-13、IL-2的分泌，從而提高抗腫瘤作用[18]。

此外，還有一些對(duì)HPK1有較好抑制活性的化合物被報(bào)道。GNE-1858是一種ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，能夠以劑量依賴(lài)性方式抑制HPK激酶結(jié)構(gòu)域的所有3種變異。在SLP76磷酸化實(shí)驗(yàn)中，對(duì)野生型HPK1和活性模擬突變體HPK1-TSEE的抑制作用相同，IC50均為1.9 nmol·L-1，對(duì)HPK1-SA的殘余激酶活性的IC50為4.5 nmol·L-1[14]。選擇性小分子抑制劑CompK，能夠顯著改善人類(lèi)T細(xì)胞的功能，增強(qiáng)TCR識(shí)別病毒和腫瘤相關(guān)抗原的能力以及CD8+T細(xì)胞對(duì)腫瘤的溶解活性，與抗PD-1有顯著協(xié)同作用；動(dòng)物研究顯示，CompK聯(lián)合PD-1抗體治療表現(xiàn)出免疫應(yīng)答的提高和極好的抗腫瘤療效；該研究還發(fā)現(xiàn)HPK1激酶的抑制可通過(guò)調(diào)節(jié)人類(lèi)樹(shù)突狀細(xì)胞及其相關(guān)網(wǎng)絡(luò)來(lái)促進(jìn)抗腫瘤免疫[29]。

4 小結(jié)

相較于傳統(tǒng)的手術(shù)、放療和常規(guī)化療，尋找合適的靶點(diǎn)來(lái)實(shí)現(xiàn)抗腫瘤免疫治療成為具有前景的手段之一。HPK1作為一種絲/蘇氨酸蛋白激酶，負(fù)調(diào)控TCR/BCR信號(hào)以及樹(shù)突狀細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，已被證實(shí)與多種癌癥的發(fā)生、進(jìn)展相關(guān)聯(lián)，是一個(gè)適合腫瘤治療干預(yù)的靶點(diǎn)。但在不同癌癥中，HPK1所發(fā)揮的作用似乎有所差別，如在乳腺癌、胰腺癌中，其可能發(fā)揮抑癌作用，而在已開(kāi)展臨床試驗(yàn)的藥物中，除XYF-19 CAR-T細(xì)胞治療明確表示適應(yīng)癥為血液瘤外，另兩項(xiàng)針對(duì)實(shí)體瘤的適應(yīng)癥尚不知曉，因此，在開(kāi)發(fā)靶向HPK1藥物過(guò)程中需注意篩選相應(yīng)的腫瘤適應(yīng)癥。

MAP4K家族中除HPK1(MAP4K1)外，還有MAP4K2、MAP4K3、MAP4K4、MAP4K5和MAP4K6五個(gè)成員。其中，MAP4K3又稱(chēng)為GLK激酶，它和HPK1都與SLP-76結(jié)合，但在TCR信號(hào)通路中作用相反[30]：SLP-76介導(dǎo)GLK激酶的激活，活化的GLK與PKCθ相互作用并激活PKCθ，導(dǎo)致T細(xì)胞活化；而HPK1磷酸化SLP-76的Ser-376，誘導(dǎo)激活的SLP-76的蛋白酶體降解，導(dǎo)致TCR信號(hào)的衰減。因此，在藥物開(kāi)發(fā)中要注意篩選出對(duì)GLK激酶具有選擇性的HPK1抑制劑。