曾丹 黃雨婷 葉緒芳 吳長艷 彭蕾 苑潔 張清芳

生物安全實驗室是開展生物研究和傳染病預(yù)防與檢測的實驗場所[1]，根據(jù)實驗室活動所涉及致病性微生物的危害程度、感染風險以及現(xiàn)有防治措施，目前，國際通用做法是將微生物的風險等級劃分為1 ～4 級，對應(yīng)地將微生物學實驗室生物安全水平劃分為1 ～4 級（biosafty level 1 ～4，BSL 1 ～4）。生物安全三級（biosafty level-3，BSL-3）實驗室是國家（地區(qū)）開展高致病性病原微生物實驗活動的重要技術(shù)支撐平臺，處理對象主要包括動物的烈性傳染病病原（如口蹄疫病毒、鼠疫等）、人畜共患病病原（如布魯氏菌、高致病性禽流感病毒等）以及人的傳染病病原（如結(jié)核分枝桿菌、艾滋病病毒等）[2]。由于處理對象可通過呼吸系統(tǒng)使人或動物染上嚴重甚至致死的疾病[3]，因此，確保實驗活動和實驗室操作人員的安全，保障實驗室內(nèi)、外環(huán)境安全是生物安全三級實驗室開展實驗活動的先決條件和重大課題。新建的生物安全三級實驗室，各項工作均處于學習和摸索階段，如何在參考和學習前期成熟運轉(zhuǎn)的其他高等級實驗室管理模式的基礎(chǔ)上，結(jié)合自身實際摸索出適合的管理體系是關(guān)鍵。文章結(jié)合前期相關(guān)研究，進行歸納和整理，重點圍繞生物安全三級實驗室廢棄物管理進行綜述，為新建生物安全實驗室提供廢棄物管理參考。

1 我國關(guān)于生物安全三級實驗室廢棄物管理相關(guān)規(guī)定和標準

1995 年，為防治固體廢物污染環(huán)境，保障公眾健康，我國頒布了《中華人民共和國固體廢物污染環(huán)境防治法》[4]，對包括醫(yī)療廢棄物等危險廢物的保存、運輸、儲存和處置進行了規(guī)定。2003 年，《醫(yī)療廢棄物管理條例》《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢棄物管理辦法》《醫(yī)療廢物分類目錄》先后發(fā)布[5]。2004 年，國務(wù)院頒布了《病原微生物實驗室生物安全管理條例》[6]，規(guī)定三級實驗室應(yīng)當依照環(huán)境保護的有關(guān)法律、行政法規(guī)和國務(wù)院有關(guān)部門的規(guī)定，對廢水、廢氣以及其他廢物進行處置。同年，我國頒布了《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2004，2008 年修訂）[7]對實驗室廢棄物的處置進行了消毒滅菌的明確要求。2006 年，國家環(huán)?？偩诸C布《病原微生物實驗室生物安全環(huán)境管理辦法》[8]，規(guī)定生物安全三級實驗室的污染防治設(shè)施、設(shè)備需經(jīng)環(huán)境保護行政主管部門驗收，合格后方可投入使用。2008 年，為防治醫(yī)療廢棄物在收集、暫時儲存、運送和處置過程中的環(huán)境污染，防止疾病傳播，國家環(huán)境保護總局會同衛(wèi)生部發(fā)布了《醫(yī)療廢物專用包裝袋、容器和警示標識標準》（HJ421-2008）[9]。為進一步規(guī)范醫(yī)療廢物管理，促進醫(yī)療廢物科學分類、科學處置，《醫(yī)療廢物分類目錄（2021 年版）》[10]于2021 年正式印發(fā)。

2 生物安全三級實驗室廢棄物滅菌分類

按照《醫(yī)療廢棄物分類目錄（2021 年版）》，我國將醫(yī)療廢棄物分為五類，分別是感染性廢棄物、病理性廢棄物、損傷性廢棄物、藥理性廢棄物、化學性廢棄物。文章參考前期相關(guān)研究和報道，結(jié)合貴州省疾病預(yù)防控制中心生物安全三級實驗室工作實際，所有經(jīng)生物安全三級實驗室核心區(qū)域運轉(zhuǎn)出的廢棄物均需嚴格按照感染性廢棄物處置要求，經(jīng)過分類高壓滅菌后方可離開實驗室。根據(jù)滅菌器對不同種類廢棄物的滅菌程序，將生物安全三級實驗室廢棄物大致分為以下幾類。

2.1 固體廢棄物

包括使用過或被污染的個人防護用品，如防護服、一次性使用手套、一次性使用衛(wèi)生帽、一次性使用鞋套、一次性使用N95 口罩等，以及菌毒株污染的或可能污染的相關(guān)物品。其中，損傷性廢棄物，即實驗過程中使用的很容易刺穿廢棄物包裝袋，增加泄漏可能性的“銳器”，包括針頭、不帶針頭的注射器、塑料吸管外科手術(shù)刀或解剖刀片、載物玻片、蓋玻片、玻璃試管等，在實驗過程中以及實驗結(jié)束后均應(yīng)收集整理在專用的銳器盒之中，按照要求打包后可與其他固體廢棄物使用同一高壓滅菌程序進行滅菌。

2.2 液體廢棄物

通常包括但不限于病原體的培養(yǎng)液、儲存液、人體血液、血液成分或人體血液來源的血液制品、感染病原體的體液，如精液、陰道分泌物、腦脊液或胸腔積液等。

2.3 病理性廢棄物

包括廢棄的醫(yī)學實驗動物的組織和尸體。生物安全三級實驗室動物實驗結(jié)束后，實驗動物由于感染了實驗病毒或細菌，需嚴格按照感染性廢棄物處理要求進行滅菌后方能轉(zhuǎn)運至非防護區(qū)域。根據(jù)高壓滅菌器程序設(shè)置，該綜述將動物組織及尸體做單獨分類。

3 生物安全三級實驗室廢棄物管理措施探討

3.1 管理理念

“以人為本，預(yù)防為先”應(yīng)該是生物安全三級實驗室生物安全防護的宗旨。當前，國際和國內(nèi)多個高等級實驗室均逐步開展環(huán)境-健康-安全（environment-health-safety，EHS）管理模式[11]。EHS 管理體系是環(huán)境管理體系和職業(yè)健康、安全管理體系兩體系的整合，用于衡量環(huán)保、健康和安全三大發(fā)展指標。EHS 管理應(yīng)當是各部門協(xié)同作用的結(jié)果，除廢棄物管理外，內(nèi)容還需覆蓋實驗室場地、藥品試劑、儀器使用及維護、實驗室安全教育等多個方面的內(nèi)容，達到消除隱患、預(yù)防事故發(fā)生的目的[12]。

3.2 管理措施

實驗室廢棄物的管理應(yīng)本著“強調(diào)細節(jié)、重在預(yù)防”的原則，制定完善的管理制度和操作規(guī)程，并任命具有專業(yè)資質(zhì)的人員負責管理工作。

3.2.1 定期舉辦生物安全實驗室安全管理培訓 生物安全三級實驗室廢棄物管理人員業(yè)務(wù)素質(zhì)和專業(yè)能力是否過硬對實驗室廢棄物管理以及廢棄物安全起到了至關(guān)重要的作用。《病原微生物實驗室生物安全管理條例》明確規(guī)定，從事高致病性病原微生物相關(guān)實驗活動的實驗室，應(yīng)當每半年將培訓、考核其工作人員的情況進行報告。世界衛(wèi)生組織在《實驗室生物安全手冊》[13]中已明確指出，實驗室工作人員應(yīng)具備的職業(yè)能力、素質(zhì)和責任心是保障實驗室安全運行的重要基礎(chǔ)，《實驗室生物安全通用要求》[14]也對實驗室廢棄物管理人員、工作人員培訓考核的重要性作出了規(guī)定。要明確的是，培訓工作應(yīng)是一項長期的、不斷跟進的學習項目，所有相關(guān)人員需進行嚴格要求，不斷學習，并逐一通過考核后方可上崗。

武漢大學動物實驗室中心張晶等[15]認為，生物安全實驗室廢棄物管理應(yīng)建立分級培訓，將相關(guān)人員根據(jù)工作經(jīng)驗、工作崗位的不同劃分為初級、中級、高級3 個層次，分門別類地制定培訓方案，實施不同的考核內(nèi)容。但對于新建或規(guī)模較小的生物安全三級實驗室，管理人員常常需要兼顧廢棄物管理或設(shè)施設(shè)備管理等不同的崗位，需要系統(tǒng)學習和了解實驗室管理的整體內(nèi)容，尤其在各項工作都處于探索和學習的階段，管理人員均進行全方位地學習有利于不同崗位之間互相配合，及時發(fā)現(xiàn)工作中存在的問題。因此，文章建議對于新建的生物安全三級實驗室應(yīng)當對所有管理人員進行全方位系統(tǒng)的培訓和考核，管理廢棄物處置的人員，同樣需要熟悉儀器設(shè)備的管理，例如高壓滅菌器的熟悉等。生物安全管理培訓應(yīng)結(jié)合工作實際，覆蓋生物安全意識、生物安全理論以及實操全方位展開，同時應(yīng)進行相關(guān)法律法規(guī)、應(yīng)急情況處置的培訓，確保所有管理人員、實操人員明確崗位職責和工作流程，保障實驗室安全工作萬無一失。

3.2.2 建立實驗室廢棄物處置規(guī)章制度

3.2.2.1 明確廢棄物處置各環(huán)節(jié)責任人 廢棄物管理人員：需從宏觀把控實驗室廢棄物處置各環(huán)節(jié)是否符合規(guī)程。實驗人員進入核心區(qū)前，廢棄物管理人員需對其作出規(guī)范處置廢棄物的提示，并對實驗過程以及實驗結(jié)束后廢棄物的處置進行監(jiān)督，如有發(fā)現(xiàn)異常，立即要求整改。同時，廢棄物管理人員需不定時對廢棄物的處置以及處置記錄進行檢查，及時排查風險。實驗人員：各核心區(qū)域?qū)嶒炄藛T在實驗結(jié)束后，需對產(chǎn)生的廢棄物進行分類打包，液體廢棄物要采用防滲漏、防外溢的專用器皿收集，銳器需放置于專門的銳器盒。打包過程中需采用75%酒精或其他有效消毒液，先對封口進行初步消毒再完成逐級打包。打包完畢后，在最外層包裝上標注清楚廢棄物的種類（固體、液體或動物尸體等）、產(chǎn)生廢棄物的實驗項目名稱、日期等關(guān)鍵信息，并在緩沖區(qū)域?qū)⒋虬玫膹U棄物放于高壓滅菌器內(nèi)，及時與高壓滅菌器操作人員取得溝通。離開核心區(qū)后，實驗人員需按照規(guī)定填寫廢棄物處置記錄。

高壓滅菌器管理人員：操作高壓滅菌器必須是具備特種設(shè)備操作合格資質(zhì)的人員。實驗人員將打包好的廢棄物置于高壓滅菌器后，及時與高壓滅菌器管理人員聯(lián)系，告知放入滅菌器的廢棄物種類，高壓滅菌器管理人員根據(jù)獲取的廢棄物種類信息操作對應(yīng)滅菌程序進行高壓。高壓滅菌器管理人員需使用化學指示卡（每次滅菌處理）或生物指示劑（每月/每實驗周期1 次）對滅菌效果進行監(jiān)測，對滅菌過程進行監(jiān)控和評估，滅菌結(jié)束將廢棄物交于廢棄物轉(zhuǎn)運人員，并填寫高壓滅菌器工作記錄。

廢棄物轉(zhuǎn)運人員：負責將完成滅菌的廢棄物進行收集和信定期開展學習和培訓，摸索出適合筆者所在實驗室的完善的管理體系，對于保障實驗室安全至關(guān)重要。息登記，詳細記錄當日完成滅菌的廢棄物數(shù)量、種類，并將相關(guān)信息與實驗人員登記信息進行核對，如有發(fā)現(xiàn)與實驗人員登記不符合的情況，如滅菌數(shù)量少于實驗人員登記數(shù)量等，需立即告知廢棄物管理人員。信息核對并登記無誤后，廢棄物轉(zhuǎn)運工作人員通過專用通道將廢棄物轉(zhuǎn)運至指定地點，由實驗室指定合作機構(gòu)定期進行收集和集中處理。

3.2.2.2 明確廢棄物處置規(guī)程 廢棄物處置規(guī)程需列入生物安全三級實驗室管理體系文件，從處置流程、處置方式、處置人員、異常情況應(yīng)急處置等各環(huán)節(jié)進行詳細規(guī)定。實驗室運轉(zhuǎn)過程中，管理人員、實驗人員均需嚴格按照規(guī)程執(zhí)行各項工作任務(wù)。

3.2.3 建立生物安全三級實驗室廢棄物管理安全檢查制度 生物安全三級實驗室應(yīng)成立生物安全委員會，并建立安全檢查制度，實驗室負責人以及廢棄物管理人員采取定期檢查和不定期抽查的方式，對廢棄物處置和轉(zhuǎn)運是否符合規(guī)范進行檢查，發(fā)現(xiàn)不合規(guī)項立即要求整改，確保廢棄物處置不留安全隱患。

3.2.4 制定生物安全三級實驗室廢棄物處置應(yīng)急管理預(yù)案實驗室需制定廢棄物處置異常情況應(yīng)急預(yù)案，一旦發(fā)現(xiàn)有廢棄物處置不符合流程規(guī)范，立即啟動應(yīng)急預(yù)案，按照要求進行事故報告和風險評估，在生物安全委員會指導(dǎo)下合理處置，必要情況下立即將相關(guān)情況報上一級行政主管部門。綜上，生物安全三級實驗室產(chǎn)生的廢棄物種類繁多，風險較高，若處理不當將對人體和周圍環(huán)境造成無法估量的危害。做好廢棄物處置需從管理和實操全環(huán)節(jié)進行把控，管理工作尤為重要。制定嚴格的規(guī)章制度和處置流程，落實責任到個人，