柏自琴，趙曉珍，李興忠，王 彬，馬玉華

(貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹科學(xué)研究所，貴陽，550006)

火龍果是近年新興熱帶亞熱帶水果，隨著其種植業(yè)快速發(fā)展，種植區(qū)域集中成片，病蟲害逐年加重，導(dǎo)致火龍果產(chǎn)量和品質(zhì)急劇下降。其中，由新暗色蛀節(jié)孢Neoscytalidiumdimidiatum[1-2]引起的火龍果潰瘍病是國內(nèi)火龍果種植常見病害，該病害導(dǎo)致植株枝條及果實(shí)產(chǎn)生大量褪綠病斑，直至壞死腐爛。調(diào)查發(fā)現(xiàn)[3]，火龍果潰瘍病在貴州省普遍發(fā)生，枝條發(fā)病率從3.33%至100%不等，部分果園甚至絕收，損失慘重。

前期研究[4-9]發(fā)現(xiàn)，多菌靈、40%氟硅唑乳油和10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑等藥劑對火龍果潰瘍病菌具有較好的抑制效果，但同時(shí)也發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)火龍果潰瘍病菌對藥劑敏感性存在差異。如海南省和廣西火龍果潰瘍病菌對嘧菌酯的敏感性差異明顯[7]。為研究貴州火龍果潰瘍病菌對常用藥劑的敏感性，本文在前期系統(tǒng)調(diào)查貴州省火龍果潰瘍病發(fā)生情況基礎(chǔ)上，根據(jù)貴州省火龍果潰瘍病發(fā)生特點(diǎn)，開展了殺菌劑室內(nèi)篩選及田間防效試驗(yàn)，以為貴州省火龍果產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展提供重要的技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 供試病菌和藥劑

田間采集典型火龍果潰瘍病樣本，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原分離、純化、鑒定和致病性測定后，獲得供試菌株新暗色柱節(jié)孢菌Neoscytalidiumdimidiatum。

選擇市面上常見的12種化學(xué)殺菌劑及11種生物藥劑。化學(xué)藥劑包括75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑、43%氟菌·肟菌酯懸浮劑，拜耳作物科學(xué)(中國)有限公司北京分公司產(chǎn)；32.5%苯甲·嘧菌酯懸浮劑、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑，先亞達(dá)南通作物保護(hù)有限公司產(chǎn)；42.4%唑醚·氟酰胺懸浮劑、50%醚菌酯水分散粒劑，巴斯夫(中國)有限公司產(chǎn)；40%氟硅唑乳油，廣東省江門市大光明農(nóng)化新會(huì)有限公司產(chǎn)；50%多菌靈可濕性粉劑，四川潤爾科技有限公司產(chǎn)；12.5%烯唑醇乳油可濕性粉劑，江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司產(chǎn)；45%咪鮮胺水乳劑，蘇州富美實(shí)植物保護(hù)劑有限公司產(chǎn)；50%啶酰菌胺水分散粒劑，杭州宇龍化工有限公司產(chǎn)；30%苯甲·丙環(huán)唑乳油，先正達(dá)(蘇州)作物保護(hù)有限公司產(chǎn)。

生物藥劑包括4%嘧啶核苷類抗菌素水劑，陜西麥可羅生物科技有限公司產(chǎn)；80%乙蒜素乳油，開封大地農(nóng)化生物科技有限公司產(chǎn)；3%中生菌素可濕性粉劑，福建凱立生物制品有限公司產(chǎn)；10%多抗霉素可濕性粉劑，日本科研制藥株式會(huì)社產(chǎn)；1%申嗉霉素懸浮劑，上海農(nóng)樂生物制品有限公司產(chǎn)；20%井岡霉素可溶粉劑，溫州鹿城東甌染料中間體廠產(chǎn)；2%春雷霉素水劑，日本北興化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社產(chǎn)；2%潰腐靈水劑，淮坊奧豐作物病害防治有限公司產(chǎn)；0.3%四霉素水劑，遼寧微科生物工程股份有限公司產(chǎn)；1 000億芽孢/g枯草芽孢桿菌可濕性粉劑，江西順泉生物科技有限公司產(chǎn)；220億/g綠康威，中農(nóng)綠康(北京)生物技術(shù)有限公司產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 室內(nèi)藥劑篩選 采用菌絲生長速率法測定，用PDA平板培養(yǎng)火龍果潰瘍病菌，培養(yǎng)2 d后用直徑5 mm打孔器沿菌落邊緣取菌餅備用。參照《農(nóng)藥生物活性測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》[10]，將供試藥劑梯度稀釋，制成含藥平板，以加入無菌水的PDA平板為對照，每個(gè)處理重復(fù)3次，每平板中央接種菌餅1塊，28 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2 d后取出，用十字交叉法測量菌落直徑，計(jì)算生長抑制率，抑制率(%)=(對照菌落直徑-藥劑處理菌落直徑) /(對照菌落直徑-5)×100。取抑制率16%～84%之間數(shù)據(jù)計(jì)算各藥劑的回歸方程、EC50、相關(guān)系數(shù)R，評(píng)價(jià)藥劑對病菌的生物活性。數(shù)據(jù)采用Exel、SPSS統(tǒng)計(jì)分析。

1.2.2 田間小區(qū)藥效試驗(yàn) 試驗(yàn)地點(diǎn)3個(gè)，具體信息見表1。根據(jù)室內(nèi)藥劑篩選結(jié)果，按照商品說明配置藥液，即設(shè)置75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑5 000倍液、40%氟硅唑乳油8 000倍液、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 000倍液、42.4%唑醚·氟酰胺懸浮劑2 500倍液、30%苯甲·丙環(huán)唑乳油1 500倍液、50%多菌靈可濕性粉劑500倍液、45%咪鮮胺水乳劑1 000倍液、80%乙蒜素乳油5 000倍液、0.3%四霉素水劑50倍液、3%中生菌素可濕性粉劑800倍液、1%申嗉霉素懸浮劑750倍液，以及對照(清水)，開展田間小區(qū)防治試驗(yàn)。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)每個(gè)處理于第1次施藥前分別在試驗(yàn)區(qū)和對照區(qū)隨機(jī)抽取1行，每行隨機(jī)選擇6株，每株在東南西北中5個(gè)方位隨機(jī)標(biāo)記新抽生無病嫩莖1條掛上標(biāo)簽；使用背負(fù)式手搖噴霧器對各處理莖表面噴霧，噴施藥液量以莖表面藥液均勻而不滴下為宜；每次施藥間隔7～10 d，連續(xù)施藥5次。施藥時(shí)間分別為2021年4月5日、4月12日、4月19日、4月26日、5月3日。

表1 貴州省火龍果潰瘍病田間藥效試驗(yàn)點(diǎn)情況

2021年5月31日調(diào)查各處理發(fā)病情況，對標(biāo)簽枝條估算病斑面積占枝條面積的百分比，按照林珊宇等[8]的方法進(jìn)行病情分級(jí)。病情分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)，無病斑；1級(jí)，病斑面積占整個(gè)肉質(zhì)莖面積的5%以下；3級(jí)，病斑面積占整個(gè)肉質(zhì)莖面積的6%～10%；5級(jí)，病斑面積占整個(gè)肉質(zhì)莖面積的11%～25%；7級(jí)，病斑面積占整個(gè)肉質(zhì)莖面積的26%～50%；9級(jí)：病斑面積占整個(gè)肉質(zhì)莖面積的51%以上。計(jì)算各處理發(fā)病率、病情指數(shù)及防效，用SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性分析。病情指數(shù)=Σ(各病級(jí)莖段數(shù)×病級(jí))/(調(diào)查總莖段數(shù)×最高病級(jí))×100，防效(%)=[對照(清水)病情指數(shù)-藥劑處理病情指數(shù)]/對照(清水)病情指數(shù)×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)殺菌劑藥效

從表2和表3可以看出，供試化學(xué)殺菌劑中，50%多菌靈可濕性粉劑、75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、30%苯甲·丙環(huán)唑乳油、45%咪鮮胺水乳劑、40%氟硅唑乳油、42.4%唑醚·氟酰胺懸浮劑的EC50均小于1 mg/L，對火龍果潰瘍病菌的抑制效果均較好；50%醚菌酯水分散粒劑無明顯效果。在生物藥劑中，1%申嗉霉素懸浮劑、0.3%四霉素水劑、3%中生菌素可濕性粉劑、80%乙蒜素乳油對病菌抑制效果較好。1 000億芽孢/g枯草芽孢桿菌可濕性粉劑和220億/g綠康威2種活性生物藥劑對火龍果潰瘍病菌的抑制效果均不明顯。因此，選擇EC50<1 mg/L的化學(xué)藥劑及EC50<15 mg/L的生物藥劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。

表2 23種殺菌劑對火龍果潰瘍病菌菌絲生長抑制情況比較

表3 2種活性生物藥劑對火龍果潰瘍病菌的菌絲抑制率

2.2 田間藥效

從表4可以看出，第5次施藥后28 d調(diào)查，各藥劑處理病情指數(shù)與對照(清水)相比有明顯差異。7種化學(xué)藥劑處理的防效為62.58%～86.33%，以75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑5 000倍液的防效最佳；其次，40%氟硅唑乳油8 000倍液、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 000倍液、42.4%唑醚·氟酰胺懸浮劑2 500倍液的防效中等。4種生物藥劑中，80%乙蒜素乳油5 000倍液、0.3%四霉素水劑50倍液的防效相當(dāng)，差異不顯著，分別為70.63%、66.34%；而3%中生菌素可濕性粉劑800倍液、1%申嗉霉素懸浮劑750倍液的防效較低，分別為42.64%、40.06%。

表4 11種藥劑對火龍果潰瘍病藥后28 d的田間防效

3 結(jié)論與討論

藥劑防治是火龍果潰瘍病的重要防治手段。本試驗(yàn)評(píng)價(jià)了75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑等12種化學(xué)殺菌劑及1%申嗉霉素懸浮劑等11種生物殺菌劑對火龍果潰瘍病菌的防治效果，結(jié)果顯示，化學(xué)藥劑中75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑5 000倍液、40%氟硅唑乳油8 000倍液、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 000倍液，生物藥劑中80%乙蒜素乳油5 000倍液、0.3%四霉素水劑 50倍液對火龍果莖潰瘍病具有較好防治效果，可在生產(chǎn)上推廣使用。本研究中化學(xué)藥劑的防效總體上優(yōu)于生物藥劑，因此在病害發(fā)生前或初期預(yù)防時(shí)可使用生物藥劑，但在病害有流行擴(kuò)展趨勢或發(fā)生已較為嚴(yán)重時(shí)可使用化學(xué)藥劑，及時(shí)減少損失。同時(shí)注意輪換或混配使用不同作用機(jī)理藥劑，控制用藥次數(shù)，延緩抗藥性產(chǎn)生。

對照王會(huì)會(huì)等[5]、李界秋等[6]、賢小勇等[7]的試驗(yàn)結(jié)果，本研究藥劑EC50與其存在差異，本研究中50%多菌靈可濕性粉劑、40%氟硅唑乳油、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑等的EC50相對較小，說明各產(chǎn)區(qū)間菌株的敏感性存在明顯差異。貴州火龍果潰瘍病菌較廣西、海南地區(qū)病菌對這些藥劑更為敏感，可能與這些藥劑在田間使用頻率較低有關(guān)。此外，同種藥劑田間防效存在差異[6-8]，可能由于受到氣象、品種抗性、田間病原量等多種因素的影響。