包日在，任海英，王康強，鄭錫良，戚行江

(1 浙江省農業(yè)科學院園藝研究所，杭州，310021；2 浙江省泰順縣農業(yè)農村局特產站，浙江泰順，325500；3 浙江省仙居縣特產技術推廣中心，浙江仙居，317300)

楊梅Morellarubra是浙江省最具特色的優(yōu)勢水果，近年楊梅產業(yè)發(fā)展迅猛，已成為浙江省第一大水果產業(yè)。近年來，浙江省楊梅凋萎病普遍發(fā)生，具有發(fā)病快、病程長、傳染性強等特點[1]，嚴重影響產業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。典型癥狀為發(fā)病嫩梢先出現(xiàn)干枯，葉片失綠后干枯，逐漸脫落，雨后葉痕處常出現(xiàn)白色霉層，直至整株枝條干枯，周年可發(fā)病，發(fā)病高峰期9—11月，發(fā)病后一般3～5年整株死亡。楊梅凋萎病病原菌是異色擬盤多毛孢Pestalotiopsisversicolor和小孢擬盤多毛孢Pestalotiopsismicrospora[2]，該菌對環(huán)境適應性強[3-4]。凋萎病發(fā)生后影響楊梅樹體對氮、鈣等營養(yǎng)元素的吸收和傳遞[5-6]，根際菌根活力降低[7]，對楊梅生產影響較大。不同品種楊梅對凋萎病感病性差異明顯，各地以東魁發(fā)病居多，其他品種發(fā)病較輕[8-9]。目前，楊梅凋萎病較難防治，室內篩選的毒力效果較好的藥劑應用于果園防治效果并不能滿足產業(yè)需求[10]，開發(fā)有效的綜合防控措施是楊梅產業(yè)發(fā)展的迫切需求。

硼是植物生長發(fā)育所需的重要微量營養(yǎng)元素之一，參與植物碳水化合物合成和運輸，蛋白質和核酸代謝，細胞壁合成和結構穩(wěn)定，生物膜完整性和功能的維持[11]。硼還可降低植物病害發(fā)生，誘導植物產生系統(tǒng)抗性，抑制病原菌生長，與生防菌協(xié)同控制植物病害發(fā)生等[12]。植物硼元素缺乏和過量有毒之間的濃度范圍較小[13]，低硼和高硼脅迫都顯著抑制植株生長和根系伸長，影響植物發(fā)育和產量[14-18]?；谂鸬闹匾砉δ?，本研究比較楊梅凋萎病株與健株的硼含量，根際土壤速效硼含量，及施硼砂的影響，為制訂凋萎病綜合防治方案提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

在浙江省泰順縣百丈鎮(zhèn)飛云湖村，凋萎病盛發(fā)期選擇中等發(fā)病楊梅園，采集凋萎病病情指數(shù)5級[10]病株，以同果園無病健株為對照，重復3次，每處理3株。樣品包括病株有癥狀、無癥狀和健株的新梢(包括葉片和枝干)、老齡枝條(包括葉片和枝干)及根，取樣長度約50～100 cm，每株從東西南北中等5個方位取5條，將枝、根的樹干與樹皮分開，磨碎后混合樣品，分別檢測樹干和樹皮的硼元素含量[6]。

采集病株和健株滴水線內沿根圍表層土下10～20 cm處細土壤，利用四分法收集混合土壤樣品約2 kg，室溫條件下自然風干，過0.4 mm目篩網(wǎng)。植物樣品用自來水沖洗干凈，去離子水復洗3次，在烘箱中105 ℃加熱15～20 min殺青，70 ℃烘干備用[19]。

1.2 方法

田間硼肥試驗在浙江省泰順縣百丈鎮(zhèn)飛云湖村進行，供試果園為緩坡山地，海拔200 m左右，酸性紅黃壤，pH值4.5，有機質含量1.94%，全氮1.12%，速效磷34.2 mg/kg，速效鉀94 mg/kg，水溶性硼0.16 mg/kg。楊梅花芽萌發(fā)前施用硼肥，苗木硼肥試驗為1年生嫁接東魁楊梅苗，設置每平方米苗床分別用硼砂0、1.5、3、6、9 g對水澆施等5種處理，每處理90株，每30株為重復1次。成年樹硼肥試驗為10年生東魁楊梅，病情指數(shù)5級，設置每平方米樹冠分別施用硼砂0、0.75、1.5、3、4.5 g等5種處理，每處理9株，每3株為重復1次，沿樹冠滴水線開溝施入。常規(guī)管理，凋萎病盛發(fā)期調查發(fā)病率。

土壤速效硼采用姜黃素比色法[20]測定，植物樣品硼元素測定采用酸溶姜黃素比色法。苗木發(fā)病率(%)=發(fā)病株數(shù)/30×100。成年樹調查每株東南西北等4個方位相似的大枝各1組，統(tǒng)計末級枝發(fā)病率。成年樹發(fā)病率(%)=末級枝發(fā)病枝數(shù)/調查總枝數(shù)×100。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Excel軟件統(tǒng)計數(shù)據(jù)，采用SAS軟件分析數(shù)據(jù)，兩組數(shù)據(jù)和多組數(shù)據(jù)分別采用t-test和Duncan’s新復極差法進行差異顯著性分析(p<0.05)。

2 結果與分析

2.1 不同組織和根際土壤硼含量

由表1可以看出，病株嫩梢干枯葉片、嫩梢無癥狀葉片和無癥狀老齡葉片的硼含量都顯著低于健株(對照)，分別低8.11%、6.04%和7.56%，說明植株發(fā)病后可能對硼的吸收和運輸能力減弱。病株有癥狀嫩梢表皮、無癥狀嫩梢表皮和根表皮的硼含量都顯著高于健株(對照)，分別高7.94%、9.76%和11.77%。病株無癥狀老齡枝梢表皮硼含量與健株(對照)幾乎沒有差異；病株干枯嫩梢和無癥狀老齡枝梢硼含量比健株(對照)略高，但無顯著性差異；而病株無癥狀嫩梢和根硼含量低于健株(對照)，也無顯著性差異。說明發(fā)病后，植株嫩梢表皮和根表皮硼含量顯著增加，而所有枝梢硼含量則變化不大。病株根圍土壤的速效硼含量比健株(對照)高29.03%，兩者差異極顯著。由此可以推測病株可能吸收土壤中硼的功能已衰退。

表1 楊梅凋萎病株及健株不同組織及根際土壤速效硼含量比較 mg/kg

2.2 田間硼肥試驗

由表2可以看出，苗圃土壤施硼處理的楊梅苗木凋萎病發(fā)病率為41.0%～44.94%，硼砂9 g/m2處理的發(fā)病率顯著高于對照，其他硼砂處理發(fā)病率與對照無顯著性差異。成年樹土壤施硼處理的楊梅凋萎病發(fā)病率為37.8%～41.1%，每平方米樹冠土壤施硼砂1.5 g處理的楊梅凋萎病發(fā)病率顯著低于對照，其他硼砂處理無明顯性差異。說明土壤增施硼砂對苗木生長不利，成年樹土壤適量增施硼砂可一定程度減輕發(fā)病率。

表2 苗木和成年樹土壤施用不同量硼砂對楊梅凋萎病的影響

3 結論與討論

硼是植物重要微量元素之一，對促進根系生長發(fā)育，增強植物抗逆性，促進作物早熟和花粉萌發(fā)等具有重要影響[21]。相關研究發(fā)現(xiàn)，植物通過被動擴散、硼轉運蛋白的主動運輸和內在蛋白的易化運輸?shù)?種機制完成對硼元素的吸收，然后在蒸騰作用拉力下向植株地上部運輸[22]。本研究結果發(fā)現(xiàn)，病株無癥狀嫩梢和根的硼含量低于健株(對照)，這與病樹對氮的吸收和分配[5]相似；病株有癥狀嫩梢的干枯葉片、無癥狀嫩梢葉片和無癥狀老齡葉片的硼含量都顯著低于健株葉片，這可能是發(fā)病楊梅植株須根受到嚴重破壞[7]而影響了其吸收功能，同時包括蒸騰作用等其他生理功能衰弱也導致輸送能力減弱。有研究發(fā)現(xiàn)，高濃度硼處理后，洋桔梗的超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和抗壞血酸過氧化物酶活性增強，黃酮類化合物含量增加，表明硼可以提高洋桔梗的抗病能力[23]。本研究結果顯示，病株嫩梢表皮和根表皮硼含量均顯著高于健株(對照)，可能是植株發(fā)病后引發(fā)防衛(wèi)反應導致，其生理機理有待進一步研究。

有研究結果表明，硼對煙草黑脛病菌[24]和柑桔炭疽菌[25]有較強的抑制作用。本研究發(fā)現(xiàn)，成年樹土壤適量增施硼可以一定程度減輕發(fā)病率；苗圃土壤增施中低量硼對楊梅凋萎病的發(fā)病率影響不大，可能與發(fā)病楊梅植株須根受到破壞，導致根的吸收功能減弱[26]有關；增施高量硼反而增加苗圃發(fā)病率，這可能由于高量硼對植株的毒害作用導致。病株根圍土壤速效硼含量極顯著高于健株根圍土壤，進一步說明凋萎病對楊梅樹體的損害是系統(tǒng)性的，發(fā)生凋萎病后使植株硼吸收能力衰退。凋萎病影響楊梅植株吸收及分配硼的機理尚待進一步研究。