溫勝超,劉兆榮
室內(nèi)環(huán)境嗜松青霉的MVOCs釋放特征及影響因素
溫勝超,劉兆榮*
(北京大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,北京 100871)
以嗜松青霉為例,用頂空-固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(HS-SPME-GC-MS)采集分析其代謝揮發(fā)性有機(jī)物(MVOCs),考察了生長時(shí)間、溫度、光照、氧含量(通氣流量)對MVOCs釋放特征的作用,探討了其對室內(nèi)VOCs的源貢獻(xiàn).結(jié)果表明,共發(fā)現(xiàn)6類14種MVOCs,包括濃度較高的乙醇、丙酮、乙酸、乙酸乙酯、異戊醇、苯甲醚,濃度較低的異丁醇、2-甲基丁醇、糠醇、甲苯、間二甲苯、1-辛烯-3-醇、3-辛醇和檸檬烯.氧含量和生長時(shí)間對MVOCs影響最明顯,氧含量主要影響乙醇和丙酮的競爭代謝,乙酸、乙酸乙酯也在缺氧時(shí)產(chǎn)量更多;嗜松青霉在不同的生長階段的代謝產(chǎn)物種類和產(chǎn)量均不同,總MVOCs量在接種第4~6d達(dá)到最大值,除乙酸、檸檬烯外,其他物質(zhì)均受生長時(shí)間的影響;在25℃時(shí)能產(chǎn)生最多的MVOCs量,在35℃時(shí)產(chǎn)生的MVOCs最少,不同溫度下各MVOCs組分也不同;光照對嗜松青霉的MVOCs代謝影響不明顯.在有氧有光的3種實(shí)驗(yàn)溫度下,總MVOCs排放強(qiáng)度在5031~7650ng/(m2×d)之間,各物質(zhì)室內(nèi)濃度貢獻(xiàn)區(qū)間為0.0256~444.0380ng/m3.
嗜松青霉;MVOCs;HS-SPME-GC-MS;影響因素;排放強(qiáng)度
室內(nèi)空氣污染物包含顆粒物和氣態(tài)污染物兩大類,揮發(fā)性有機(jī)物是氣態(tài)污染物的一部分.微生物源揮發(fā)性有機(jī)物(MVOCs)是由微生物代謝產(chǎn)生的一類揮發(fā)性有機(jī)物.潮濕建筑內(nèi)常常伴隨著微生物的污染,帶來不愉悅氣味[1],主要是具有霉味、泥土味、蘑菇味和水果味的氣體[2],這些是室內(nèi)空氣中有氣味的揮發(fā)性有機(jī)物的重要組成部分[3].室內(nèi)微生物很大部分來自室外源,其中曲霉菌和青霉菌屬占室內(nèi)真菌的絕大多數(shù)[4-6],霉菌產(chǎn)生的MVOCs主要包括醇、苯、醛、烯烴、酸、酯、酮類物質(zhì)[3,7].MVOCs可能造成病態(tài)建筑綜合征如咳嗽、嗓子痛、鼻塞等[8-10],在敏感的氣喘人群和超敏感的肺炎易感染人群中的上呼吸道癥狀和哮喘癥狀與霉菌的生長相關(guān),MVOCs暴露也與嗜睡、頭痛以及對眼睛和鼻子、喉嚨的刺激有關(guān)[11-13],霉菌還能引起一些兒童的下呼吸道疾病[14].
最近30a的相關(guān)研究主要采用頂空被動吸附和主動吸附、頂空流動進(jìn)樣的方式采集MVOCs,而MVOCs的分離鑒定手段包括PTR-TOF-MS、GC-MS、GC-FID、IMS等,最常用的是頂空-固相微萃取-氣相質(zhì)譜聯(lián)儀(HS-SPME-GC-MS).微生物在不同條件下產(chǎn)生的MVOCs的種類和量都不相同,溫度、濕度、光照、氧含量、pH值、鹽度、培養(yǎng)基類型、菌種、呼吸強(qiáng)度、生長周期等[15]對其組分和排放量有影響.通過MVOCs的排放物特征能快速鑒定室內(nèi)微生物污染,而目前微生物MVOCs譜極其不完整,需要更準(zhǔn)確的MVOCs指紋和更多菌種的MVOCs研究才有可能實(shí)現(xiàn)室內(nèi)微生物MVOCs示蹤物的建立,同時(shí)確定微生物的室內(nèi)VOCs貢獻(xiàn).由于室內(nèi)環(huán)境的多樣性,室內(nèi)微生物在不同條件下的MVOCs有不同的VOCs貢獻(xiàn).
嗜松青霉()是一種好氧青霉屬菌,最適生長溫度約為30℃,除了室內(nèi),嗜松青霉還在土壤和植物中存在,是一種土傳植物病原真菌[16-17].嗜松青霉被研究用于生產(chǎn)內(nèi)切β-1,4-葡聚糖酶來降解纖維素,以及研究對聚乙烯的降解效果[18-19].Zhao等[20]用固相微萃取分析了其MVOCs組分及對果蠅的毒性,發(fā)現(xiàn)在青霉屬中的毒性為中等水平,Fang等[4]發(fā)現(xiàn)其在青霉屬中占比較高.為了更好地理解室內(nèi)環(huán)境條件對霉菌的MVOCs影響,本研究用頂空固相微萃取采樣、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析該霉菌的MVOCs排放特征,考察溫度、光照、氧含量、生長時(shí)間對MVOCs種類和排放量的影響,進(jìn)一步計(jì)算了排放強(qiáng)度以及對室內(nèi)VOCs的貢獻(xiàn).
將封于玻璃管內(nèi)的冷凍干粉嗜松青霉(GIM3.610,北納創(chuàng)聯(lián))菌株接種于6個斜面培養(yǎng)基上活化,在25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d產(chǎn)生孢子.把一份霉菌孢子用無菌水(SERVA)稀釋至6×106個/mL,其余部分活化的菌株置于4℃冰箱保存.取2mL稀釋的孢子懸浮液置于裝有100mL培養(yǎng)基的250mL錐形瓶中培養(yǎng).上述培養(yǎng)基均為MEA培養(yǎng)基( Solarbio),以4.8g/100mL水配制而成.
如圖1,實(shí)驗(yàn)裝置基于Nilsson的設(shè)備根據(jù)現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室條件搭建[21],用固相微萃取頂空吸附錐形瓶中霉菌產(chǎn)生的MVOCs.錐形瓶用鉆有2個孔的硅橡膠塞封閉,其中一個孔用于進(jìn)氣,另一個用于固相微萃取采樣.裝有霉菌的錐形瓶在恒溫水浴箱中培養(yǎng)7d,在培養(yǎng)第3d開始采集MVOCs,一共采集5d.
圖1 實(shí)驗(yàn)裝置示意
實(shí)驗(yàn)設(shè)置3種條件研究其對實(shí)驗(yàn)菌的MVOCs影響,分別為光照、氧含量(實(shí)際為通氣流量)和溫度.光照強(qiáng)度用照度表示,照度為0表示無光(遮光組),否則為有光(光照組);氧含量用通氣流量控制,通氣流量為0稱為缺氧,通氣流量為6mL/min稱為有氧;溫度分別設(shè)置25,30,35℃.3種條件相互交叉,共12組.
固相微萃取用手動采樣組件( Supelco,57330-U, SPME HOLDER, MANUAL)和二乙烯基苯/羧基/聚二甲基硅氧烷纖維組件(Supelco,57348-U, Divinylbenzene/Carboxen/Pol-ydimethylsiloxane,DVB/CAR/PDMS,50/30μm)組裝使用.
島津GC-MS QP2010SE色譜進(jìn)樣口溫度為230℃,分流比1:20,質(zhì)譜離子溫度200℃,接口溫度230℃,載氣為氦氣(流速1mL/min),色譜柱為J&W DB-1(60m×0.25mm×1μm).色譜升溫程序:30℃保持5min,以10℃/min的速度升溫至260℃,在260℃保持5min,后以20℃/min升溫至220℃.
分離的物質(zhì)通過和NIST數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對,選擇相似度在80%以上的判定為目標(biāo)物質(zhì).將樣品物質(zhì)的參考離子比例及保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的對應(yīng)參數(shù)進(jìn)行比較完成物質(zhì)定性.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用甲醇或環(huán)己烷為溶劑配制為標(biāo)準(zhǔn)溶液,島津AOC-20i自動進(jìn)樣器進(jìn)樣(液體),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線.
檢測限(LOD)為3倍信噪比(/),定量限(LOQ)為10倍信噪比(/).標(biāo)準(zhǔn)曲線的每個點(diǎn)采集3次以上,RSD均小于10%,每做完一組實(shí)驗(yàn)將存儲于冰箱儲備液通過GC-MS分析,回收率基本在95%以上.
每個實(shí)驗(yàn)組設(shè)有3個平行樣,采集分析的數(shù)據(jù)RSD基本小于30%.每組實(shí)驗(yàn)設(shè)有空白樣,分析數(shù)據(jù)前先用Python3.6進(jìn)行Shapiro-Wilk檢驗(yàn)平行數(shù)據(jù)是否服從正態(tài)分布,然后用成對數(shù)據(jù)的檢驗(yàn)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)組和空白組有重合的物質(zhì)是否存在差異,當(dāng)存在差異時(shí)扣除空白,不存在即表示微生物未產(chǎn)生該種物質(zhì).
表1為3種溫度下,不同光照、通氣量條件下檢出物質(zhì)種類最多的MVOCs濃度,檢出物質(zhì)包含6類,分別為醇、酮、酸、酯、芳香族化合物、烯烴,共14種.
檢出醇類占比最大,共檢出有7種醇,其中量最大的是乙醇和異戊醇,乙醇占絕大部分.其次是酮類,只檢出丙酮一種,在一些條件下丙酮的濃度與乙醇濃度相當(dāng).已有研究發(fā)現(xiàn)碳鏈長為2~4的醇類和酮類如乙醇、丙酮分別由糖酵解和三羧酸循環(huán)產(chǎn)生[22],事實(shí)上醇類和酮類分別由脂肪酸的氧化和脂肪酸衍生物的去碳脫羧產(chǎn)生[23].而碳鏈長為8的醇類如1-辛烯-3-醇和3-辛醇則可能是通過亞油酸和亞麻酸的分解形成[23].
檢出乙酸和乙酸乙酯.低分子量的乙酸可能是由微生物對MEA培養(yǎng)基的酒精發(fā)酵的厭氧代謝產(chǎn)生[23].乙酸乙酯伴隨著乙酸出現(xiàn),可能是霉菌產(chǎn)生的乙酸和乙醇在加熱條件下非生物合成,或者是嗜松青霉自身合成,比如Oro發(fā)現(xiàn)幾種酵母菌會產(chǎn)生乙酸乙酯[24].
檢出的芳香族化合物有2類即苯系物和含氧芳烴,苯系物包括甲苯和間二甲苯,含氧芳烴為苯甲醚.2種苯系物濃度均非常低,苯甲醚的濃度比苯系物高.芳香族可能是由芳香族氨基酸的脫羧以及單萜烯的加氧氧化形成[22].
檢出的烯烴為檸檬烯,其他研究者在一種鐮刀霉菌和曲霉菌產(chǎn)生的MVOCs中也發(fā)現(xiàn)了檸檬烯的存在[25-26],可能是同樣的產(chǎn)生機(jī)制.
本實(shí)驗(yàn)菌的所有MVOCs在其他微生物的代謝產(chǎn)物中均有檢出,憑單一物質(zhì)難以實(shí)現(xiàn)對嗜松青霉的鑒定,只有從MVOCs的指紋構(gòu)成著手.
表1 MVOCs總檢出
在一定封閉區(qū)域內(nèi)固定量培養(yǎng)基中培養(yǎng)微生物的生長數(shù)量由生長曲線表示,分成4個階段,即延遲期、對數(shù)生長期、停滯期和衰亡期,反映了4個不同時(shí)期微生物群落生長狀態(tài).嗜松青霉在3種溫度下在接種第3d開始出現(xiàn)肉眼可見的菌落,在第3~5d保持著基本不變的白色菌落形態(tài),第6d相繼出現(xiàn)菌落變黃、變干卷曲甚至脫離培養(yǎng)基表面的特征.從上述現(xiàn)象可以了解在本實(shí)驗(yàn)中霉菌的生長狀態(tài).由圖2可見,總MVOCs濃度從第3d開始增加到第4d,這與Pitt的霉菌在接種前5d為對數(shù)生長期的結(jié)論一致[27],而后迅速下降.糠醇、乙酸乙酯、乙醇、異戊醇的濃度變化情況與總MVOCs類似,同樣在第4d達(dá)到最高濃度后下降.濃度最高的MVOC是乙醇,第3~4d迅速增加,第4~5d迅速下降,然后緩慢下降.推測是由于氧氣和營養(yǎng)源的限制,導(dǎo)致指數(shù)生長期結(jié)束,從而代謝模式改變所致[28].在第3d開始可以觀察到菌落從單個菌落逐漸增大到鋪滿整個培養(yǎng)基面,菌數(shù)增加需要更多的氧氣來進(jìn)行代謝,而菌數(shù)增加、供氧量不變的情況下就造成了氧氣的相對缺乏,這可能是這一時(shí)間段乙醇大量產(chǎn)生的原因.
圖2 30℃有氧無光MVOCs隨時(shí)間的變化
苯甲醚和檸檬烯除了第7d有所回升,其他時(shí)間一直下降.異丁醇、2-甲基丁醇、間二甲苯在第5d達(dá)到最大濃度后下降,丙酮在第4d下降后同樣在第5d達(dá)到最大濃度.丙酮是三羧酸循環(huán)的代表性產(chǎn)物,而前3種物質(zhì)與丙酮的變化相似(除了丙酮第4d有所下降),推測這3種物質(zhì)的產(chǎn)生與三羧酸循環(huán)相關(guān).不同生長階段嗜松青霉的MVOCs排放濃度差別非常大,這主要是由菌數(shù)、代謝類型的變化導(dǎo)致.這一結(jié)果表明微生物的MVOCs排放特征不僅受到不同理化條件的影響,其生長時(shí)間也是重要因素.
2.3.1 光照 光照主要影響真菌孢子的形成、色素的合成、能進(jìn)行光合作用的真菌生長等[29-31].本研究嗜松青霉在兩種光照強(qiáng)度下培養(yǎng),二者照度相差114.1lux.如圖3所示,除了第5d外,光照對MVOCs總量的影響不明顯,2個條件下的總量相差不大.主要區(qū)別在于乙醇,有光組在接種第5d的乙醇明顯多于無光組.而在第4d,有光組無乙醇產(chǎn)生,第6d無光組無乙醇產(chǎn)生,有光組和無光組都只有連續(xù)2d產(chǎn)生乙醇,且無光組先于有光組.同時(shí),因?yàn)橛泄饨M第5d產(chǎn)生大量乙醇的代謝作用與產(chǎn)生丙酮的代謝競爭,導(dǎo)致丙酮的產(chǎn)量遠(yuǎn)低于無光組.值得注意的是乙酸乙酯總是伴隨著乙醇和乙酸的同時(shí)存在而檢出,這說明在該條件下乙酸乙酯很有可能并不是由霉菌自身合成,而是由乙酸和乙醇在加熱條件下非生物脫水酯化形成,這一現(xiàn)象在圖2中也有體現(xiàn).
圖3 35℃有氧時(shí)光照對MVOCs的影響
A:有光條件的MVOCs;B:無光條件的MVOCs
光照對其他物質(zhì)包括乙酸、異戊醇、苯甲醚的產(chǎn)量幾乎無影響,兩組的物質(zhì)不論是絕對量還是百分比都非常接近.這一結(jié)果與Verena等[32]用約300lux的LED燈研究深綠木霉的MVOCs釋放影響相似.
114.1lux的光照差異除了對乙醇的產(chǎn)生有快慢和量的影響外,其他影響不明顯,推測嗜松青霉的MVOCs代謝可能不受光照影響或者一定的光照差異不改變其代謝方式.基于此,在室內(nèi)真菌控制方面,光照這一因素不應(yīng)放在突出地位,在其他條件一致的前提下利用MVOCs特征鑒定時(shí)在光照充足或陰暗的房間均可共用一套特征譜.
2.3.2 氧含量 CO2和O2對真菌的生長都有重要影響,一定低濃度CO2有利于其正常生長發(fā)育[33],而高濃度如體積分?jǐn)?shù)10%的CO2則會明顯抑制真菌的生長和孢子產(chǎn)生[34],在高濃度CO2、低濃度O2的環(huán)境中能產(chǎn)生更多的MVOCs[33].以往的研究多保證了微生物生長時(shí)的O2量,通氣流量主要集中在1~ 10mL/min[15,21,31],而微生物生長的環(huán)境會有厭氧的情況,不同含氧量會造成微生物代謝變化.
由圖4可見,除了第4d有氧組產(chǎn)出乙醇量和缺氧組相當(dāng)外,其他時(shí)間均未產(chǎn)生乙醇.因?yàn)橐掖际翘墙徒猱a(chǎn)生,推測有氧組盡管已經(jīng)充了一定量的空氣,但隨著指數(shù)生長期菌數(shù)不斷增長,現(xiàn)有的氧含量不能滿足其需氧量而進(jìn)行了厭氧代謝.隨著菌數(shù)穩(wěn)定或減少,氧氣量又能滿足其好氧代謝,而不再產(chǎn)生乙醇,這與檢測結(jié)果一致.缺氧組每天都有乙醇產(chǎn)生,但無丙酮產(chǎn)生.反觀有氧組每天有丙酮產(chǎn)生,且第4d有乙醇產(chǎn)生的情況下丙酮量較其他無乙醇產(chǎn)生的情況明顯更少.嗜松青霉糖酵解和三羧酸循環(huán)的兩個代謝過程極有可能是相互競爭的,即在厭氧情況下,傾向于進(jìn)行糖酵解,好氧情況傾向于三羧酸循環(huán),這一特征證明嗜松青霉為兼性菌,而非好氧菌(與生物信息庫不一致),對之后不同氧含量的真菌鑒定有一定參考.
圖4 30℃無光時(shí)氧含量對MVOCs的影響
α:缺氧條件的MVOCs;β:有氧條件的MVOCs
氧含量對乙酸也有明顯影響,氧含量低時(shí),乙酸隨著乙醇的增多而增加,與Boots推測乙酸是由酒精厭氧發(fā)酵產(chǎn)生相符[23],有氧組的乙酸在沒有乙醇的情況下仍能產(chǎn)生,這證明有氧時(shí)其產(chǎn)乙酸機(jī)制有所不同.從MVOCs總量來看,霉菌缺氧能產(chǎn)生更多量的MVOCs,說明霉菌在缺氧時(shí)活性更低,代謝物質(zhì)用于自身干重增長更少[35].氧含量對嗜松青霉的MVOCs影響非常顯著,尤其是乙醇、丙酮、乙酸、乙酸乙酯的差異最大.
圖5 3種溫度下各MVOCs的相對含量和總濃度
2.3.3 溫度 溫度會影響生物細(xì)胞內(nèi)酶的活性,從而影響生化反應(yīng)和代謝產(chǎn)物.由圖5可見,3個溫度條件濃度最高的都是乙醇,其中25℃時(shí)最多,是35℃的近2倍.乙醇、乙酸乙酯和檸檬烯的相對占比類似.可知霉菌在25℃產(chǎn)生乙醇、乙酸乙酯和檸檬烯的代謝過程最強(qiáng).其次是異戊醇、丙酮、乙酸,35℃時(shí)的占比最高,30℃時(shí)除異戊醇較低,丙酮和乙酸的量都和25℃時(shí)接近.2-甲基丁醇和異丁醇的占比類似,35℃時(shí)產(chǎn)量最多,25℃時(shí)其次,最少的是30℃時(shí).甲苯和糠醇只在2種溫度下產(chǎn)生,在30和35℃時(shí)產(chǎn)生甲苯,在25和30℃時(shí)產(chǎn)生糠醇.溫度對甲苯和糠醇的影響最明顯,在溫度差異較大情況下,該兩種物質(zhì)無法產(chǎn)生.同時(shí),一些物種在高溫下產(chǎn)量更高,如2-甲基丁醇、甲苯、異丁醇、異戊醇、丙酮.霉菌適宜低溫條件產(chǎn)生乙醇、檸檬烯、糠醇、乙酸乙酯.溫度對丙酮和乙酸的影響較小,不同溫度的產(chǎn)量相差不大.
嗜松青霉的最適生長溫度為30℃,本研究中25℃總MVOCs最高,其次是30℃,最低的是35℃.Calvo的研究發(fā)現(xiàn)微生物在適宜的生長條件下產(chǎn)生的MVOCs更少[35],而Polizzi等[36]研究溫度影響時(shí),發(fā)現(xiàn) MVOCs排放量與真菌生長狀態(tài)一致.可見,微生物的生長狀態(tài)和代謝MVOCs總量之間的相關(guān)性尚存在爭議,還需要深入研究.
由固相微萃取分配系數(shù)[37]:
fg=f/g=(f/f)/(g/g) (1)
式中:fg為萃取涂層/樣品分配系數(shù);f為萃取涂層上吸附樣品的濃度單位,ng/m3;g為樣品頂空濃度單位,ng/m3;f為樣品涂層上的質(zhì)量,ng;g為頂空樣品質(zhì)量,ng;f為萃取涂層的體積,m3;g為采樣容器頂空體積,m3.
通過GC-MS獲得固相微萃取頭上的樣品濃度和該物質(zhì)的分配系數(shù),即可求得培養(yǎng)容器中樣品的濃度.分配系數(shù)和溫度、萃取涂料等因素相關(guān),與濃度無關(guān)[37].通過文獻(xiàn)可直接得到丙酮、甲苯、間二甲苯、1-辛烯-3-醇、3-辛醇、檸檬烯的分配系數(shù)[21].線性程序升溫保留指數(shù)(LTPRI)是在一種色譜柱中化合物的保留時(shí)間和直鏈烷烴保留時(shí)間之間的關(guān)系,可在NIST Chemistry WebBook按照相同的色譜柱獲得.LTPRI和fg之間具有線性關(guān)系[38]:
lgfg=·LTPRI+(2)
式中:,與色譜柱涂層材料相關(guān),聚二甲基硅氧烷(PDMS)的色譜柱其關(guān)系式為[38]:
lgfg=0.00415LTPRI-0.188 (3)
霉菌的排放強(qiáng)度:
MVOCs=g/(·) (4)
式中:為霉菌落面積:m2;為生長時(shí)間:d.
由表5可見5d的MVOCs的平均排放強(qiáng)度.嗜松青霉的總MVOCs排放強(qiáng)度為5031~7650ng/ (m2?d),各種物質(zhì)的排放強(qiáng)度差異很大,最多相差6個量級.單個物質(zhì)排放強(qiáng)度最大的是乙醇,占總排放強(qiáng)度的57%~76%,其次是丙酮、乙酸、乙酸乙酯、異戊醇.其他物質(zhì)的排放量極少,在0.003~17.165ng/ (m2?d)不等.
表3 有氧有光3種溫度的MVOCs排放強(qiáng)度
以一間50m3的房間中有50.77cm2的菌落生長為例(本研究實(shí)驗(yàn)條件),控制室內(nèi)溫度為25℃,室內(nèi)MVOCs的濃度可由如下方法計(jì)算:
=MVOCs? (1-e-nt) /(r?) (5)
式中:為MVOCs濃度,ng/m3;r房間體積,m3;MVOCs排放強(qiáng)度,ng/(m2?h);為常見室內(nèi)換氣次數(shù),0.1,0.2,0.5次/h[39].
由表4可見,不同的換氣次數(shù)室內(nèi)MVOCs濃度相差10倍以上,按照0.1次/h換氣次數(shù),如果采用U.S. EPA TO11A的檢測限為1000ng/m3,即使?jié)舛茸罡叩囊掖?44.0380ng/m3,仍無法檢出,故采用傳統(tǒng)的SUMMA罐采集室內(nèi)MVOCs是不合適的.
表4 不同換氣次數(shù)室內(nèi)MVOCs濃度(ng/m3)
3.1 嗜松青霉生長過程釋放6類14種MVOCs,涵蓋醇、酮、酸、酯、芳香族化合物和烯烴,分別是乙醇、丙酮、乙酸、乙酸乙酯、異丁醇、異戊醇、2-甲基丁醇、甲苯、糠醇、間二甲苯、苯甲醚、1-辛烯-3-醇、3-辛醇、檸檬烯.
3.2 釋放MVOCs的影響因素中氧含量和生長時(shí)間影響最明顯,溫度影響其次,光照影響最弱.氧含量的影響主要體現(xiàn)在營養(yǎng)代謝類型的改變,缺氧時(shí)進(jìn)行厭氧代謝,氧氣充足時(shí)進(jìn)行好氧代謝,厭氧和好氧代謝的標(biāo)志物分別為乙醇和丙酮.生長時(shí)間的影響主要集中在乙醇、丙酮、乙酸、乙酸乙酯、異戊醇等高濃度的MVOCs排放量.溫度影響具體物質(zhì)的生成,1-辛烯-3-醇只在25℃產(chǎn)生,而糠醇在35℃不會產(chǎn)生.
3.3 在有氧有光的3種實(shí)驗(yàn)溫度下,MVOCs總排放強(qiáng)度在5031~7650ng/(m2?d)之間,相應(yīng)MVOCs排放貢獻(xiàn)為0.0256~444.0380ng/m3.
[1] Lonnblad P, Kokotti H, Kujanpaa L, et al. Occurrence of microbes in non-ventilated outer walls and health effects [C]//Proceedings of the 10th International Conference on Indoor Air Quality and Climate, 2005:4-9.
[2] Ruth J H. Odor thresholds and irritation levels of several chemical substances: A review [J]. American Industrial Hygiene Association journal, 1986,47(3):142-151.
[3] Morath S U, Hung R, Bennett J W. Fungal volatile organic compounds: A review with emphasis on their biotechnological potential [J]. Fungal Biology Reviews, 2012,26(2/3):73-83.
[4] Fang Z, Tang Q, Gong C, et al. Profile and distribution characteristics of culturable airborne fungi in residential homes with children in Beijing, China [J]. Indoor and Built Environment, 2015,26(9):1232- 1242.
[5] Odebode A, Adekunle A, Stajich J, et al. Airborne fungi spores distribution in various locations in Lagos, Nigeria [J]. Environmental Monitoring and Assessment, 2020,192(2):87-101.
[6] Sautour M, Sixt N, Dalle F, et al. Profiles and seasonal distribution of airborne fungi in indoor and outdoor environments at a French hospital [J].Science of The Total Environment, 2009,407(12):3766-3771.
[7] Korpi A, Jarnberg J, Pasanen A L. Microbial volatile organic compounds [J]. Critical Reviews in Toxicology, 2009,39(2):139-193.
[8] M?lhave L, Liu Z, J?rgensen A H, et al. Sensory and physiological effects on humans of combined exposures to air temperatures and volatile organic compounds [J]. Indoor Air, 1993,3(3):155-169.
[9] M?lhave L. Volatile organic compounds and sick building syndrome [M]. Environmental Toxicants Hoboken, NJ, USA: John Wiley & Sons, Inc, 2009:241-256.
[10] Araki A, Kawai T, Eitaki Y, et al. Relationship between selected indoor volatile organic compounds, so-called microbial VOC, and the prevalence of mucous membrane symptoms in single family homes [J]. Science of The Total Environment, 2010,408(10):2208-2215.
[11] Mendell M J, Mirer A G. Dampness, mould, and health-a review of epidemiologic evidence for the upcoming WHO guidelines for indoor air quality [J]. Epidemiology, 2008,19(6):S136-S137.
[12] Arthur R. Damp indoor spaces and health [M]. Oxford: Oxford University Press, 2005:234-234.
[13] Choi H, Schmidbauer N, Bornehag C G. Volatile organic compounds of possible microbial origin and their risks on childhood asthma and allergies within damp homes [J]. Environment International, 2017,98: 143-151.
[14] Adan C G, Samson R A. Fundamentals of mold growth in indoor environments and strategies for healthy living [C]//Wageningen, Wageningen Academic Publishers, 2011:277-302.
[15] Misztal P K, Lymperopoulou D S, Adams R I, et al. Emission factors of microbial volatile organic compounds from environmental bacteria and fungi [J]. Environmental Science & Technology, 2018,52(15): 8272-8282.
[16] Stefano S, Nicoletti R, Zambardino S, et al. Structure elucidation of a novel funicone-like compound produced by Penicillium pinophilum [J].Natural Product Letters, 2002,16(3):207-211.
[17] Qing S W. Identification and Biocontrol of Latent Pathogenic Fungi in Blueberry Fruits [J]. Northern Horticulture, 2017,18:41-48.
[18] VolkeSepulveda T, SaucedoCastaneda G, GutierrezRojas M, et al. Thermally treated low density polyethylene biodegradation by Penicillium pinophilum and Aspergillus niger [J]. Journal of Applied Polymer Science, 2002,83(2):305-314.
[19] Jeya M, Joo A R, Lee K M, et al. Characterization of endo-beta-1, 4-glucanase from a novel strain of Penicillium pinophilum KMJ601 [J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2010,85(4):1005-1014.
[20] Zhao G, Yin G, Inamdar A, et al. Volatile organic compounds emitted by filamentous fungi isolated from flooded homes after hurricane Sandy show toxicity in a Drosophila bioassay [J]. Indoor Air, 2017, 27(3):518-528.
[21] Nilsson T, Larsen T, Montanarella L, et al. Application of head-space solid-phase microextraction for the analysis of volatile metabolites emitted by Penicillium species [J]. Journal of Microbiological Methods, 1996,25(3):245-255.
[22] Wilkins K, Larsen K, Simkus M. Volatile metabolites from mold growth on building materials and synthetic media [J]. Chemosphere, 2000,41(3):437-446.
[23] Boots A W, Smolinska A, van Berkel J, et al. Identification of microorganisms based on headspace analysis of volatile organic compounds by gas chromatography-mass spectrometry [J]. Journal of Breath Research, 2014,8(2):027106.
[24] Oro L, Feliziani E, Ciani M, et al. Volatile organic compounds from,andinhibit growth of decay causing fungi and control postharvest diseases of strawberries [J]. International Journal of Food Microbiology, 2018,265:18-22.
[25] Pasanen A L, Lappalainen S, Pasanen P. Volatile organic metabolites associated with some toxic fungi and their mycotoxins [J]. Analyst, 1996,121(12):1949-1953.
[26] Cheng Z, Li M, Marriott P J, et al. Chemometric analysis of the volatile compounds generated by Aspergillus carbonarius strains isolated from grapes and dried vine fruits [J]. Toxins, 2018,10(2): 71-88.
[27] Pitt R E. a descriptive model of mold growth and aflatoxin formation as affected by environmental-conditions [J]. Journal of Food Protection, 1993,56(2):139-146.
[28] Viitanen H, Ojanen T. Improved model to predict mold growth in building materials [J]. Ashrae, 2007:1-8.
[29] Choi K S, Park Y B, Kim J, et al. Characteristics of photosynthesis and leaf growth of Peucedanum japonicum by leaf mold and shading level in forest farming [J]. Korean Journal of Medicinal Crop Science, 2015,23(1):43-48.
[30] Yamaga I, Takahashi T, Ishii K, et al. Suppression of blue mold symptom development in satsuma mandarin fruits treated by low- intensity blue LED irradiation [J]. Food Science and Technology Research, 2015,21(3):347-351.
[31] Kalalian C, Abis L, Depoorter A, et al. Influence of indoor chemistry on the emission of mVOCs from Aspergillus niger molds [J]. Science of The Total Environment, 2020,741:140-148.
[32] Speckbacher V, Zeilinger S, Zimmermann S, et al. Monitoring the volatile language of fungi using gas chromatography-ion mobility spectrometry [J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2021, 413(11):3055-3067.
[33] Larsen T O, Frisvad J C. Comparison of different methods for collection of volatile chemical markers from fungi [J]. Journal of Microbiology Method, 1995,24(2):135-144.
[34] Stover R H, Freiberg S R. Effect of carbon dioxide on multiplication of fusarium in soil [J]. Nature, 1958,181(4611):788-789.
[35] Calvo A M, Wilson R A, Bok J W, et al. Relationship between secondary metabolism and fungal development [J]. Microbiology and Molecular Biology Reviews, 2002,66(3):447-459.
[36] Polizzi V, Adams A, De Saeger S, et al. Influence of various growth parameters on fungal growth and volatile metabolite production by indoor molds [J]. Science of The Total Environment, 2012,414:277- 286.
[37] Pawliszyn J. Handbook of solid phase microextraction [M]. Canada: Chemical Industry Press, 2012:42-50.
[38] Martos P A, Saraullo A, Pawliszyn J. Estimation of air/coating distribution coefficients for solid phase microextraction using retention indexes from linear temperature-programmed capillary gas chromatography. Application to the sampling and analysis of total petroleum hydrocarbons in air [J]. Analytical Chemistry, 1997,69(3): 402-408.
[39] Schleibinger H, Laussmann D, Brattig C, et al. Emission patterns and emission rates of MVOC and the possibility for predicting hidden mold damage? [J]. Indoor Air, 2005,15:98-104.
Characteristics and influencing factors of microbial volatile organic compounds from a common indoor mold.
WEN Sheng-chao, LIU Zhao-rong*
(College of Environmental Science and Engineering, Peking University, Beijing 100871, China)., 2022,42(11):5055~5062
was used as an example in this study and headspace-solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry (HS-SPME-GC-MS) was used to collect and analyze microbial volatile organic compounds (MVOCs). The effects of the growth time, the temperature, the light and the oxygen content on the characteristics of MVOCs were investigated, and each contribution to indoor VOCs was discussed. A total of 6categories and 14 MVOCs were detected, including higher-concentration MVOCs such as ethanol, acetone, acetic acid, ethyl acetate, isoamyl alcohol and anisole, and lower-concentration MVOCs such as isobutanol, 2-methylbutanol, 2-Furanmethanol, toluene, m-xylene, 1-octene-3-ol, 3-octanol and limonene. The most obvious effects on MVOCs emission were the oxygen content and the growth time, which mainly affected the competitive metabolism of ethanol and acetone. The amounts of acetic acid and ethyl acetate were higher when the oxygen content was lower. There were considerable discrepancies of the types and the quantities of metabolites ofalongthe growth time. The total amount of MVOCs reached maximum on the 4th ~ 6th day of inoculation. Except acetic acid and limonene, other substances were obviously affected by the growth time. The maximum amount of MVOCs was produced at 25℃, and the minimum was at 35℃. The components of MVOCs were influenced by temperature. The light intensity had no obvious effect on the metabolism of. Under three experimental temperatures with certain oxygen content and light, the emission intensity of total MVOCs was between 5031and 7650ng/(m2×d), and the contribution of MVOCs concentrations to indoor air ranged from 0.0256 to 444.0380ng/m3.
;MVOCs;HS-SPME-GC-MS;influence parameters;emission intensity
X172
A
1000-6923(2022)11-5055-08
溫勝超(1995-),男,四川內(nèi)江人,北京大學(xué)碩士研究生,研究方向?yàn)槭覂?nèi)環(huán)境與健康.發(fā)表論文1篇.
2022-04-25
* 責(zé)任作者, 副教授, zrliu@pku.edu.cn