鞏佳琦，趙佳寧，王延鴻，杜俊杰，呂光耀，王洪波，凌龍兵

(煙臺(tái)大學(xué)新型制劑與生物技術(shù)藥物研究山東省高校協(xié)同創(chuàng)新中心，長(zhǎng)效和靶向制劑國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，煙臺(tái) 264005)

基于細(xì)胞膜的仿生納米遞藥系統(tǒng)因其良好的生物相容性和低免疫原性已成為研究熱點(diǎn)。利用機(jī)體內(nèi)生物膜，如紅細(xì)胞、免疫細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和干細(xì)胞，對(duì)功能化納米載體進(jìn)行仿生修飾，有效地將天然生物膜“自體”屬性和“人工”納米載體的優(yōu)勢(shì)結(jié)合，極大地提高了納米藥物生物相容性，降低免疫原性，延長(zhǎng)血液循環(huán)時(shí)間；同時(shí)，由于膜結(jié)構(gòu)的包裹，也可以減少遞送過程中的藥物滲漏，一定程度上降低藥物毒性，提高了治療的有效性。本文根據(jù)納米藥物和細(xì)胞膜仿生技術(shù)在腫瘤精準(zhǔn)醫(yī)療領(lǐng)域的研究進(jìn)展，總結(jié)膜仿生納米藥物技術(shù)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)并分類介紹膜仿生納米遞藥系統(tǒng)的構(gòu)建以及在腫瘤靶向治療上的應(yīng)用，進(jìn)一步探討細(xì)胞膜仿生納米技術(shù)在臨床應(yīng)用中所面臨的機(jī)遇

1 膜仿生納米藥物的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)

1.1膜仿生納米藥物制備 膜仿生納米藥物的制備方法主要有自上而下和微流控電穿孔兩種方式，且自上而下方式是制備膜仿生納米藥物的常用方法，主要包括細(xì)胞膜提取和膜與納米載體融合兩步驟[1]。其中，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板這類血細(xì)胞由全血中分離得來(lái)；中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞等免疫細(xì)胞主要由骨髓中提取獲得；腫瘤細(xì)胞由對(duì)應(yīng)細(xì)胞傳代培養(yǎng)獲得；干細(xì)胞一般由動(dòng)物組織中獲取。收集到純化的細(xì)胞后，將細(xì)胞經(jīng)過低滲處理或反復(fù)凍融，然后通過高速離心的方法去除細(xì)胞內(nèi)容物，以獲取細(xì)胞膜碎片。利用多孔聚碳酸酯膜擠出制備細(xì)胞膜衍生囊泡，進(jìn)一步將上述細(xì)胞膜衍生囊泡與納米載體共擠出獲得膜仿生核-殼納米藥物。雖然共擠出法是一種簡(jiǎn)單有效的方法，但不適合大規(guī)模生產(chǎn)，是細(xì)胞膜治療技術(shù)走向臨床實(shí)際應(yīng)用的重大障礙?，F(xiàn)階段，有一些研究者利用超聲法制備膜仿生納米藥物。超聲法主要是將膜囊泡與納米載體在超聲下共孵育，使膜囊泡對(duì)內(nèi)核載體進(jìn)行包裹。過程中，超聲頻率、時(shí)間、超聲強(qiáng)度對(duì)所形成的仿生納米藥物外觀均勻性、藥物載藥量等參數(shù)具有重要影響。類似地，超聲法制備的仿生納米藥物通常分布不均，且局部高溫可能會(huì)造成膜蛋白變性。隨著微流控技術(shù)的發(fā)展，基于微流控芯片的電穿孔技術(shù)因可實(shí)現(xiàn)高度重復(fù)和高通量制備膜仿生納米藥物而備受關(guān)注[2]。微流芯片系統(tǒng)由五部分組成：進(jìn)樣口、Y型合并通道、S型混勻通道、電穿孔區(qū)和出樣口。膜囊泡和納米載體分別通過進(jìn)樣口進(jìn)入系統(tǒng)后，在Y型通道合并，S型通道混合。經(jīng)電穿孔區(qū)的電脈沖作用，完成膜囊泡對(duì)納米載體內(nèi)核的包覆。通過對(duì)脈沖電壓、持續(xù)時(shí)間以及流速等參數(shù)的微調(diào)，可以得到包覆性好、穩(wěn)定性高的納米顆粒，但是這種裝置的成本相對(duì)共擠出和超聲法高。

1.2膜仿生納米藥物表征 膜仿生納米藥物制備完成后需要對(duì)其物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行表征，以獲得最佳制備效果。通過檢測(cè)膜修飾納米藥物前后的粒徑、電位和形態(tài)等基本參數(shù)的變化，用以反饋調(diào)節(jié)制備流程，提高膜仿生納米藥物的產(chǎn)率。此外，需檢測(cè)細(xì)胞膜修飾后納米藥物的生物學(xué)功能，主要包括特異性蛋白和標(biāo)記物的保留情況以及納米藥物安全性、藥物釋放和治療效果[3]。透射電子顯微鏡(TEM)是常見的檢測(cè)納米藥物形貌和膜包覆效率的儀器，其分辨率可達(dá)0.1～0.2 nm。膜仿生納米藥物能夠在磷鉬酸或醋酸雙氧鈾負(fù)染后呈現(xiàn)典型的雙層的納米顆粒圖像，進(jìn)而分析膜仿生納米藥物的粒徑和計(jì)算樣品中膜包覆納米藥物的比率。動(dòng)態(tài)光散射(DLS)技術(shù)作為納米粒徑分布和Zeta電位檢測(cè)的基本方法，可評(píng)估細(xì)胞膜修飾的粒徑和Zeta電位的變化。通常，膜仿生納米藥物的平均尺寸會(huì)增加膜磷脂雙分子層厚度10～20 nm，Zeta電位為表面包覆細(xì)胞膜囊泡電位。最后利用SDS-PAGE 凝膠電泳、蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)和免疫熒光等表征手段檢測(cè)膜包覆納米藥物的生物學(xué)功能及膜表面蛋白標(biāo)志物。由于機(jī)體生物膜來(lái)源、膜修飾原理、納米載體功能和負(fù)載藥物不同，上述的表征方法應(yīng)根據(jù)體系區(qū)別設(shè)計(jì)專屬實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證納米遞藥系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與性能。

2 膜仿生納米遞藥系統(tǒng)在腫瘤治療中應(yīng)用

不同類型的細(xì)胞膜能夠賦予納米藥物不同的運(yùn)輸機(jī)制和獨(dú)特的生物學(xué)功能，從而增強(qiáng)藥物的抗腫瘤作用。例如，紅細(xì)胞能夠延長(zhǎng)納米藥物血液循環(huán)時(shí)間，減少網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)其清除；免疫細(xì)胞包括中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等，可促進(jìn)納米藥物免疫逃避、針對(duì)炎癥或腫瘤位點(diǎn)的特異性靶向，實(shí)現(xiàn)腫瘤的靶向治療；腫瘤細(xì)胞膜繼承了源細(xì)胞同源靶向和抗原庫(kù)的功能，可用于高度特異性的腫瘤精準(zhǔn)治療和免疫治療。本文以細(xì)胞膜為標(biāo)準(zhǔn)，分類總結(jié)近年來(lái)細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng)在腫瘤治療領(lǐng)域的研究。此外，進(jìn)一步介紹了混合細(xì)胞膜制備仿生納米遞藥系統(tǒng)的研究性進(jìn)展。

2.1紅細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng) 基于紅細(xì)胞的仿生修飾是目前納米遞藥系統(tǒng)研究最為成熟的表面改性之一[4]。紅細(xì)胞是機(jī)體血液中含量最多、壽命最長(zhǎng)的血細(xì)胞，體內(nèi)循環(huán)時(shí)間可達(dá)100～120 d。由于其表面特殊的多糖及蛋白(CD47)結(jié)構(gòu)，紅細(xì)胞能夠穿透心腦血管系統(tǒng)和正常組織而不被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識(shí)別吞噬；且成熟的紅細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)容物少、遺傳背景簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)膜分離提取，因此紅細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng)在腫瘤治療領(lǐng)域極具開發(fā)前景。此外，膜磷脂層的流動(dòng)性為賦予紅細(xì)胞表面腫瘤靶向性及功能化提供可能。

2011年，HU等[5]首次采用自上而下方法將紅細(xì)胞膜和PLGA微球共擠出制備紅細(xì)胞膜仿生納米遞送系統(tǒng)。研究表明，該體系完整保留紅細(xì)胞膜的功能性，在裸鼠模型中其血液循環(huán)半衰期t1/2可達(dá)39.6 h，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)PEG修飾納米藥物的循環(huán)半衰期(t1/2=15.8 h)。此方法開辟了利用生物膜改善納米載體生物相容性的新思路。近年來(lái)，仿生紅細(xì)胞技術(shù)和光熱治療、免疫治療相結(jié)合來(lái)靶向治療惡性腫瘤。YANG等[6]利用紅細(xì)胞膜修飾含NIR II 光熱劑 (IR1061) 和1-甲基色氨酸(IDO-1抑制劑)的熱敏一氧化氮供體PAAV-SNO聚合物，構(gòu)建了具有調(diào)控腫瘤微環(huán)境(TME)特性的納米遞藥系統(tǒng)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，這種多功能納米藥物在動(dòng)物體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)靶向富集于腫瘤部位并在NIR II激光照射下，實(shí)現(xiàn)藥物的可控釋放。更重要的是，光熱療法局部高溫可激發(fā)腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫原性細(xì)胞死亡(ICD)，募集腫瘤部位 CD8+T 淋巴細(xì)胞。同時(shí)通過1-甲基色氨酸干擾 IDO-1 活性和原位產(chǎn)生的一氧化氮(NO)使腫瘤血管正?；?，編程TME免疫刺激表型，最終獲得對(duì)原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性乳腺癌的實(shí)驗(yàn)性治療。

目前，賦予納米藥物主動(dòng)靶向的基本策略是對(duì)其表面進(jìn)行化學(xué)修飾，但可能會(huì)破壞紅細(xì)胞膜的完整性。鑒于此，有研究開發(fā)了一種脂質(zhì)插入技術(shù)以實(shí)現(xiàn)紅細(xì)胞膜的功能化。FANG等[7]首先將葉酸(FA)與二硬脂酰磷酸乙醇胺脂質(zhì)(DSPE)偶聯(lián)，而后插入紅細(xì)胞膜中。納米載體被這些配體功能化的紅細(xì)胞膜包裹后，在體外和體內(nèi)的腫瘤模型中均獲得了主動(dòng)靶向能力。綜上所述，紅細(xì)胞仿生納米遞藥系統(tǒng)解決了傳統(tǒng)納米藥物的生物相容性差、強(qiáng)免疫原性等缺點(diǎn)，可能為臨床藥物轉(zhuǎn)化提供技術(shù)支持。但在進(jìn)一步的發(fā)展和轉(zhuǎn)化中也面臨新的挑戰(zhàn)，如紅細(xì)胞的離體保存，在整個(gè)保存過程中均需防止污染，及紅細(xì)胞的應(yīng)用要充分考慮血型匹配原則。

2.2免疫細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng) 慢性炎癥是腫瘤發(fā)生的主要病理特征。在此過程中，中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和NK細(xì)胞、T 細(xì)胞及 B 淋巴細(xì)胞等一系列炎癥細(xì)胞參與腫瘤進(jìn)展，同時(shí)腫瘤細(xì)胞會(huì)過度表達(dá)各種細(xì)胞因子和趨化因子來(lái)招募各類免疫細(xì)胞[8]。因此，可以考慮利用二者表面抗原-抗體的相互識(shí)別作用，構(gòu)建免疫細(xì)胞膜仿生遞藥系統(tǒng)于抗腫瘤藥物的靶向遞送。

巨噬細(xì)胞作為一種非特異性免疫細(xì)胞，可以吞噬和降解侵略性的外來(lái)物質(zhì)，靶向于腫瘤炎癥微環(huán)境，并通過腫瘤表面抗原特異性作用促進(jìn)納米藥物與腫瘤細(xì)胞的結(jié)合。PARODI等[9]利用巨噬細(xì)胞膜包覆納米多孔硅顆粒。巨噬細(xì)胞膜上的CD45、CD11c蛋白和聚糖多功能分子有利于防止納米藥物被吞噬和消除，顯著改善體內(nèi)循環(huán)時(shí)間和腫瘤部位的累計(jì)。在此基礎(chǔ)上，該課題組進(jìn)一步驗(yàn)證了巨噬細(xì)胞膜和腫瘤血管內(nèi)皮受體ICAM-1之間的相互作用，使之增強(qiáng)納米藥物對(duì)腫瘤血管系統(tǒng)的粘附性，促進(jìn)藥物在腫瘤部位的富集[10]。此外，由于巨噬細(xì)胞與腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)，其仿生細(xì)胞膜的修飾可以促進(jìn)載體與腫瘤細(xì)胞的粘附，實(shí)現(xiàn)藥物的轉(zhuǎn)移靶向。4T1荷瘤小鼠的體內(nèi)熒光成像證實(shí)了巨噬細(xì)胞膜包裹脂質(zhì)體在給藥48 h后仍蓄積在腫瘤組織，且提高了納米載體轉(zhuǎn)移靶向作用，有效抑制乳腺癌肺轉(zhuǎn)移。

中性粒細(xì)胞是哺乳動(dòng)物體內(nèi)最重要的一種白細(xì)胞，可通過黏附因子(LFA-1-ICAM-1、L-選擇素-CD44 和 β1 整合素VCAM-1 相互作用)與循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)相互作用，準(zhǔn)確地靶向遷移到腫瘤炎癥部位和血液中循環(huán)的腫瘤細(xì)胞，具趨化性。受此機(jī)制啟發(fā)，KANG等[11]研究發(fā)現(xiàn)，包被有中心粒細(xì)胞膜的 PLGA 可以靶向惡性黑色素瘤，在鼠黑素瘤細(xì)胞系 B16F10 中顯示出明顯增強(qiáng)的細(xì)胞毒性。除了優(yōu)異的腫瘤炎癥靶向性，中性粒細(xì)胞被證明能夠穿透血腦屏障來(lái)治療腦膠質(zhì)瘤[12]。XUE等[13]構(gòu)建了中性粒細(xì)胞膜修飾的負(fù)載紫杉醇脂質(zhì)體納米粒，用于腦膠質(zhì)瘤的術(shù)后防復(fù)發(fā)治療。手術(shù)切除小鼠腦膠質(zhì)瘤后，在其傷口部位會(huì)產(chǎn)生豐富的炎癥因子，這些炎癥因子會(huì)誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞仿生納米粒穿透血腦屏障到達(dá)腫瘤位置，后將負(fù)載藥物釋放到腫瘤部位發(fā)揮抗腫瘤作用。

此外，其他代表性的免疫細(xì)胞，如T細(xì)胞、NK細(xì)胞膜也用于仿生納米遞藥系統(tǒng)的制備。作為一種重要的淋巴細(xì)胞，T細(xì)胞參與機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng)，且可以靶向殺傷腫瘤細(xì)胞，在癌癥治療中具有應(yīng)用潛力。最近報(bào)道了一種基于細(xì)胞毒性T細(xì)胞膜負(fù)載紫杉醇的仿生遞藥系統(tǒng)TPNP，并對(duì)TPNP進(jìn)行局部低劑量輻射處理[14]。細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞膜可有效增長(zhǎng)TPNP納米藥物的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間；經(jīng)輻射處理后，誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞膜包裹的TPNP靶向胃癌微環(huán)境，觸發(fā)紫杉醇的釋放，協(xié)同抑制胃癌進(jìn)展。該研究為T細(xì)胞膜修飾納米粒構(gòu)建遞藥系統(tǒng)提供了可行性[14]。除可用于靶向化療外，T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫治療在腫瘤治療領(lǐng)域也引起了廣泛的關(guān)注[15]。NK細(xì)胞是一種顆粒狀淋巴細(xì)胞，通過異常表達(dá)細(xì)胞和主要組織相容性復(fù)合體1 (MHC-1)分子標(biāo)記物來(lái)保護(hù)宿主抵抗癌細(xì)胞。裝載在NK-MPEG-PLGA NPs中的TCPP通過PDT抑制原代腫瘤細(xì)胞增殖，同時(shí)觸發(fā)垂死的腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫原性細(xì)胞死亡(ICD)，激活抗原提呈細(xì)胞(APCs)。在近紅外光的照射下，Ce6發(fā)生能級(jí)躍遷，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的光熱/光動(dòng)力協(xié)同治療。同時(shí) NK 細(xì)胞膜還有免疫激活功能，最終獲得對(duì)肺癌的實(shí)驗(yàn)性治療[16]。

2.3腫瘤細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng) 腫瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力，很容易通過體外培養(yǎng)獲得，這為大量腫瘤細(xì)胞膜的收集奠定了來(lái)源基礎(chǔ)。腫瘤細(xì)胞膜能夠賦予納米粒免疫逃逸性質(zhì)，從而延長(zhǎng)血液循環(huán)時(shí)間。同時(shí)，腫瘤細(xì)胞膜還繼承了源細(xì)胞同源靶向和抗原庫(kù)的功能，這些功能主要?dú)w因于膜表面的蛋白，包括N-鈣粘蛋白，半乳糖凝集素-3 和上皮細(xì)胞粘附分子，可用于高度特異性的腫瘤靶向治療和免疫治療[17]。研究顯示，HepG-2腫瘤細(xì)胞膜修飾負(fù)載多柔比星PLGA納米粒與單純納米粒相比，同源腫瘤細(xì)胞對(duì)其攝取量顯著增強(qiáng)。在體內(nèi)攜帶HepG2的異種移植小鼠模型中，由于血液循環(huán)延長(zhǎng)和免疫逃逸，仿生PLGA納米藥物表現(xiàn)出良好的抗腫瘤作用和較低的體內(nèi)毒性[18]。近年來(lái)，基于腫瘤微環(huán)境構(gòu)建刺激響應(yīng)型腫瘤細(xì)胞膜仿生納米粒的研究受到了人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。LIU等[19]報(bào)道了一種前列腺癌LNCaP-AI細(xì)胞膜包被負(fù)載多柔比星的二氧化硅納米粒(Dox/MSN@CaCO3@CM)，內(nèi)嵌CaCO3則作為藥物pH控釋的開關(guān)層。與游離Dox相比，所得納米藥物Dox/MSN@CaCO3@CM可以有效的靶向內(nèi)化至LNCaP-AI 前列腺細(xì)胞；在酸性pH作用下，CaCO3層分解進(jìn)而響應(yīng)釋放負(fù)載Dox，誘導(dǎo)更高的細(xì)胞凋亡。體內(nèi)抗腫瘤結(jié)果顯示，該納米藥物顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)。

2.4雜化細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng) 鑒于來(lái)自不同類型細(xì)胞的細(xì)胞膜具有特定的特性，越來(lái)越多的研究將兩種不同來(lái)源的細(xì)胞膜融合來(lái)構(gòu)建雜化膜仿生納米遞藥系統(tǒng)，以放大兩種源細(xì)胞的特性。DEHAINI等[22]利用紅細(xì)胞和血小板混合膜包覆納米粒，獲得雜化膜納米粒。由此產(chǎn)生的雙膜包被納米粒與單膜紅細(xì)胞包被納米粒和血小板包被納米粒相比，該納米粒在小鼠模型中表現(xiàn)出良好的長(zhǎng)循環(huán)和分布的交叉雜化膜特征，且具有良好的生物相容性，為多功能性細(xì)胞仿生藥物遞送平臺(tái)的構(gòu)建提供了新的技術(shù)支持。WANG等[23]開發(fā)了紅細(xì)胞-黑色素腫瘤細(xì)胞雜化膜，并將雜化膜修飾載有多柔比星的CuS納米粒(DCuS@[RBC-B16]NPs)用于黑色素瘤的化療/光熱聯(lián)合治療。結(jié)合光熱特性和兩個(gè)源細(xì)胞的固有特性，DCuS@[RBC-B16]NPs表現(xiàn)出長(zhǎng)時(shí)間血液循環(huán)和腫瘤靶向性，對(duì)黑色素瘤腫瘤生長(zhǎng)抑制率近100%。此外，雜化膜包括血小板-白細(xì)胞雜化膜仿生納米粒、紅細(xì)胞-巨噬細(xì)胞雜化膜仿生納米粒及腫瘤干細(xì)胞-血小板雜化膜仿生納米粒在腫瘤的治療上也備受青睞，有助于不同腫瘤的個(gè)性化治療[3]。

2.5其他類型膜仿生納米遞藥系統(tǒng) 干細(xì)胞是一種具有低免疫原性和自我復(fù)制能力的多功能細(xì)胞，已被證實(shí)能夠靶向腫瘤細(xì)胞并追蹤浸潤(rùn)的腫瘤細(xì)胞，例如間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)、神經(jīng)干細(xì)胞和造血干細(xì)胞，均顯示出腫瘤歸巢能力。MSC的這些獨(dú)特特性主要?dú)w因于不同膜上的各種受體，如細(xì)胞因子受體(ILR1、ILR3、ILR4、TNFR和IFN γR)，生長(zhǎng)因子受體(TGF-β、HGF)，細(xì)胞基質(zhì)受體(CD44、Integrins)，趨化因子受體(CXCR、CCR)和細(xì)胞-細(xì)胞相互作用受體(Notch、ICAM和VAM1)[24-25]。鑒于MSC膜上的配體和受體，干細(xì)胞結(jié)合NPs治療不僅可以復(fù)制干細(xì)胞的復(fù)雜功能，還可以保持NPs核心的納米級(jí)和載藥特性。因此，干細(xì)胞膜包被的NPs由于其固有的嗜腫瘤和炎癥遷移特性，在抗腫瘤治療中具有很高的應(yīng)用潛力。MU課題組[26]通過低滲處理的方式提取間充質(zhì)干細(xì)胞膜，并用其包覆攜帶siRNA的氧化鐵納米粒子，用于腫瘤的光熱/基因協(xié)同治療。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 所得納米藥物能夠靶向遞送siRNA至小鼠皮下移植瘤部位，并引發(fā)癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。結(jié)合納米氧化鐵的光熱治療效果，該納米藥物起到了較好的抗腫瘤效果。

外泌體是由各種類型的細(xì)胞分泌的納米級(jí)(30～120 nm)膜囊泡，可有效地將攜帶的蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到靶細(xì)胞并被靶細(xì)胞接收，從而誘導(dǎo)細(xì)胞反應(yīng)。此外，外泌體具有免疫原性低和較好的包載能力[27]。受這些優(yōu)勢(shì)的啟發(fā)，外泌體有被設(shè)計(jì)成治療腫瘤的納米載體的潛能。研究表明，與人工化學(xué)遞送載體相比，外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成以及其他天然成分在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面等發(fā)揮著重要作用，且外泌體能以最小的免疫清除率被靶細(xì)胞攝取，重復(fù)注射耐受性良好。基于這些特征，外泌體在腫瘤診斷和治療中的應(yīng)用范疇日益擴(kuò)大。YONG等[28]開發(fā)了一種生物相容的腫瘤細(xì)胞胞吐外泌體仿生多孔硅納米顆粒(PSiNPs)，用于遞送Dox靶向治療腫瘤。外泌體包被負(fù)載Dox的 PSiNPs (DOX@E-PSiNPs)納米粒由腫瘤細(xì)胞內(nèi)吞DOX@E-PSiNPs的胞吐作用產(chǎn)生。在皮下、原位和轉(zhuǎn)移性小鼠腫瘤模型中，DOX@E-PSiNPs表現(xiàn)出增強(qiáng)的腫瘤積累、血管外滲和滲透到腫瘤深部的作用，具有明顯的抑瘤效果。

外泌體作為一種獨(dú)特類型的納米載體，無(wú)法實(shí)現(xiàn)高負(fù)載能力，臨床轉(zhuǎn)化仍面臨一定的挑戰(zhàn)。此外，外泌體的表面修飾、純化和作用機(jī)制研究有待進(jìn)一步深入，這將有助于提高外泌體的生物安全性評(píng)價(jià)。

3 結(jié)束語(yǔ)

本文重點(diǎn)介紹了基于細(xì)胞膜的仿生納米遞藥系統(tǒng)的研究進(jìn)展及其在腫瘤治療中的應(yīng)用。來(lái)自不同源細(xì)胞的膜可以直接賦予納米載體多種生物學(xué)功能，而無(wú)需復(fù)雜的合成設(shè)計(jì)。相對(duì)于其他藥物遞送系統(tǒng)，通過細(xì)胞膜包被可以降低納米藥物免疫原性，避免被內(nèi)皮網(wǎng)狀系統(tǒng)清除，延長(zhǎng)藥物在血液中的循環(huán)時(shí)間。此外，被巨噬細(xì)胞、干細(xì)胞和癌細(xì)胞膜包裹的仿生納米藥物保留了其天然的腫瘤歸巢能力，能夠克服生理屏障，主動(dòng)靶向和滲透腫瘤部位，對(duì)原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移性腫瘤治療具有重要意義。根據(jù)疾病屬性，納米粒的細(xì)胞膜包被技術(shù)創(chuàng)新性地將不同納米材料和不同細(xì)胞膜靈活融合，在藥物靶向遞送、腫瘤治療和和免疫調(diào)節(jié)等眾多領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

然而，細(xì)胞膜仿生納米遞藥系統(tǒng)仍處于起步階段，很難轉(zhuǎn)化為臨床試驗(yàn)。首先，細(xì)胞提取和純化方法尚未成熟。某些類型的細(xì)胞壽命較短，難以實(shí)現(xiàn)規(guī)?；ぬ崛。黄浯?，細(xì)胞膜上有許多不同種類的蛋白質(zhì)，需要識(shí)別出具有特定作用的重要蛋白質(zhì)，并按照可接受的標(biāo)準(zhǔn)消除不需要的蛋白質(zhì)?，F(xiàn)階段仿生納米粒表征手段有限，膜包被的成功僅通過粒度檢測(cè)和形態(tài)觀察來(lái)驗(yàn)證。蛋白質(zhì)印跡分析只能證明膜仿生納米藥物的表面組成與源細(xì)胞膜的表面組成是否相似，但未能驗(yàn)證膜包被后細(xì)胞膜是否被部分破壞。此外，本文中報(bào)道的大多數(shù)研究主要是在小鼠模型中進(jìn)行測(cè)試的，有必要評(píng)估其在人類機(jī)體中的免疫原性。面臨細(xì)胞膜仿生納米藥物的大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)和質(zhì)量控制的挑戰(zhàn)，需建立膜提取、蛋白表征和復(fù)合納米粒制備的可控性、使用安全性和有效性標(biāo)準(zhǔn)方案。

展望未來(lái)，盡管從實(shí)驗(yàn)室到臨床應(yīng)用仍有許多問題需要解決，但細(xì)胞膜仿生納米藥物的天然優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用潛能不可否認(rèn)。相信隨著仿生納米技術(shù)的創(chuàng)新研究和發(fā)展，膜仿生藥物遞送系統(tǒng)必將推動(dòng)腫瘤的精準(zhǔn)醫(yī)療邁入新的階段。