王 宇，孫玉林

（1.官渡區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，云南 昆明 650201；2.昆明市技術(shù)合同認(rèn)定登記站，云南 昆明 650201）

動物鏈球菌病常見于豬、牛、羊、馬、雞等。鏈球菌病的臨診表現(xiàn)多種多樣，可以引起各種化膿瘡和敗血癥，也可表現(xiàn)為局部感染[1]。藥物濫用導(dǎo)致的耐藥性，已經(jīng)給疾病防治帶來了新問題，如何減少細(xì)菌耐藥性已經(jīng)成為重點關(guān)注的問題。對患病雞病料采集、分離培養(yǎng)、染色鏡檢，生化實驗、病原鑒定及藥敏試驗，發(fā)現(xiàn)鏈球菌對環(huán)境適應(yīng)能力強，易產(chǎn)生耐藥性，可根據(jù)藥敏結(jié)果為養(yǎng)殖場合理用藥提供依據(jù)，為診斷該疾病提供參考，減少養(yǎng)殖經(jīng)濟損失。

1 材料與方法

1.1 試驗時間地點

材料病例來自昆明市某養(yǎng)殖場，試驗于2020年2月20日至3月20日在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)實驗室內(nèi)開展。

1.2 臨床癥狀

該養(yǎng)殖場養(yǎng)雞1 000多只。主訴雞昏睡、消瘦、呼吸困難、有腹瀉，沒有任何異常情況下突然病死。死前食欲良好，沒有經(jīng)過藥物治療。挑選癥狀較明顯病雞8只檢查，另外解剖病亡雞2只。

1.3 檢測方法

對病雞病變臟器取樣進行細(xì)菌分離培養(yǎng)、生化實驗、藥敏試驗等實驗室診斷。

2 檢測結(jié)果

2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果

分離培養(yǎng)得到的菌株在鮮血瓊脂平板上生長良好，未見明顯溶血，呈露滴狀，邊緣整齊，表面光滑、濕潤，有灰白色光澤，不透明，見輕微的α溶血環(huán)（見圖1）。

圖1 鮮血平板的菌落生長狀況

2.2 染色鏡檢結(jié)果

對所分離到的可疑菌株進行革蘭氏染色，并于10倍目鏡×100倍物鏡下鏡檢，觀察到紫色的短鏈狀（見圖2）。

圖2 分離菌株顯微鏡下形態(tài)

2.3 生化實驗結(jié)果（表1）

表1 細(xì)菌生化實驗結(jié)果

該生化指標(biāo)符合鏈球菌屬生化特性。鏈球菌與乳糖、蔗糖、棉實糖、海藻糖的反應(yīng)為陽性；與甘露醇、山梨醇的反應(yīng)為陰性；與七葉苷反應(yīng)緩慢；與水楊苷反應(yīng)不明顯。從以下生化結(jié)果來看此菌為鏈球菌。

2.4 藥敏試驗結(jié)果（表2）

表2 藥敏試驗結(jié)果

按《抗菌藥物藥敏試驗判斷標(biāo)準(zhǔn)》抑菌圈≥20 mm為極敏、15（含）～20 mm為高敏、10（含）～15 mm為中敏、＜10 mm為低敏[2]。

7種藥物為極敏，藥物抑菌圈直徑分別為羧芐西林27 mm、頭孢氨芐22 mm、卡那霉素25 mm、頭孢哌酮21 mm、哌拉西林28 mm、頭孢曲松22 mm、頭孢拉定20 mm；2種高敏藥物為青霉素16 mm、新霉素18 mm；四環(huán)素14 mm為中敏。

3 討 論

3.1 結(jié)果分析討論

根據(jù)上述病死雞發(fā)病情況、臨床癥狀、細(xì)菌染色鏡檢及分離培養(yǎng)特性，結(jié)合生化實驗結(jié)果，判定從病料中所分離到的病原菌是鏈球菌。在雞腸道鏈球菌是正常菌群的組成部分之一，飼養(yǎng)環(huán)境中廣泛分布，屬于一種條件性的致病菌[3]，此次試驗沒有進行具體的分群。

3.2 發(fā)病原因與防治

此病發(fā)生與應(yīng)激因素有關(guān)，如氣候變化、溫度偏低、潮濕擁擠、飼養(yǎng)不當(dāng)、不清潔的飲水和劣質(zhì)的墊料等都能導(dǎo)致鏈球菌病的發(fā)生[4]。因此，預(yù)防的關(guān)鍵要從減少應(yīng)激因素、搞好雞舍環(huán)境衛(wèi)生、抓好定期帶雞消毒、減少和消滅環(huán)境中的病原菌體，保持飲水器具清潔衛(wèi)生幾方面著手[5]。

3.3 需鑒定的原因

鏈球菌病從發(fā)病季節(jié)及各種特征，臨床癥狀上與其他細(xì)菌性病極其相似，因此發(fā)病時僅靠臨床癥狀和病理變化不能準(zhǔn)確判斷，必須通過細(xì)菌分離培養(yǎng)、鑒定，才能與其他易混的細(xì)菌病區(qū)別開來，并進行有效治療，才能減少相應(yīng)的經(jīng)濟損失。

4 結(jié) 論

通過對雞肺臟和心臟組織細(xì)菌的培養(yǎng)分離鑒定為鏈球菌；通過藥敏試驗得出羧芐西林、頭孢氨芐、卡那霉素、哌拉西林、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢拉定對鏈球菌反應(yīng)為極敏；青霉素、新霉素反應(yīng)為高敏；四環(huán)素反應(yīng)為中敏。