李卓蔚，袁 林，葉明燕，蘭國(guó)新，周 濃

重慶三峽學(xué)院 生物與食品工程學(xué)院，重慶 404120

滇重樓(Parispolyphyllavar.yunnanensis)為百合科重樓屬多年生草本藥用植物，根莖作為其主要藥用部位，具有解毒止血、抗菌消炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤等功效[1]。近些年來(lái)，為了緩解市場(chǎng)供應(yīng)需求，滇重樓的人工種植面積被不斷擴(kuò)增，然而，由于種植技術(shù)的不成熟及化肥的大量施用，嚴(yán)重破壞了滇重樓的生長(zhǎng)環(huán)境，導(dǎo)致種植的滇重樓品質(zhì)不佳，產(chǎn)量也逐漸降低。因此，找到合理的施肥手段來(lái)增加滇重樓的可利用價(jià)值，是滇重樓規(guī)范種植體系的熱點(diǎn)領(lǐng)域[2,3]。

近些年來(lái)，隨著中藥產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展，因環(huán)境污染引發(fā)的中藥材重金屬含量超標(biāo)等問(wèn)題也獲得了廣泛的關(guān)注。重金屬元素具有高隱蔽、難降解、易富集等特點(diǎn)，容易富集在人體內(nèi)且不易排出體外，當(dāng)人體內(nèi)重金屬含量達(dá)到一定量時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生臟器功能性病變，從而誘發(fā)一系列疾病[4]。當(dāng)體內(nèi)汞元素含量超標(biāo)時(shí)，會(huì)損傷腦組織，引起神經(jīng)系統(tǒng)失常；過(guò)量鎘元素和鉻元素會(huì)誘發(fā)腎臟等器官致癌；過(guò)量鉛元素會(huì)影響人的消化和記憶功能[5]；過(guò)量砷元素會(huì)對(duì)人體的肌肉、血液、免疫系統(tǒng)等多種組織器官產(chǎn)生不利影響[6]。解有機(jī)磷細(xì)菌作為一種新型的微生物肥料，能礦化有機(jī)磷化合物，使土壤中難溶性的有機(jī)磷化合物轉(zhuǎn)化為能被植物直接吸收利用的磷元素[7]，增加土壤有效磷含量，從而緩解植物生長(zhǎng)缺磷的現(xiàn)象。此外，有大量研究表明，解有機(jī)磷菌還能鈍化鉛、鎘、銅等重金屬，即將土壤有機(jī)磷中釋放出的磷酸根與重金屬結(jié)合形成磷酸鹽沉淀，降低重金屬在土壤環(huán)境中的移動(dòng)性和生物可利用性，起到固定或鈍化的作用，從而減輕重金屬造成的危害[8]。解有機(jī)磷菌主要包含細(xì)菌、真菌和放線(xiàn)菌，其中細(xì)菌的種類(lèi)和數(shù)量最多，研究發(fā)現(xiàn)芽孢桿菌屬、假單胞菌桿屬、節(jié)桿菌屬中的一些菌株的溶磷能力較強(qiáng)[9,10]，在農(nóng)業(yè)上常被作為磷素菌肥使用。據(jù)報(bào)道，解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)玉米[11]、花生[12]等經(jīng)濟(jì)作物的有效成分和生長(zhǎng)發(fā)育影響具有確切效果并推廣應(yīng)用，不同種類(lèi)或不同產(chǎn)地滇重樓藥材及土壤重金屬含量等方面的研究結(jié)論已十分成熟[4,13]，Yang等[2]也探究了叢枝菌根真菌對(duì)滇重樓根莖及土壤重金屬元素的影響，但接種解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)滇重樓藥材及土壤重金屬含量的影響還未見(jiàn)報(bào)道。

因此本研究采取單因素室內(nèi)盆栽的方式，將篩選出的3株解有機(jī)磷細(xì)菌優(yōu)勢(shì)種為菌種[14]，分別接種和組合接種于栽培基質(zhì)中，以滇重樓根莖、須根和根際土壤為研究對(duì)象，采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(inductively coupled plasma mass，ICP-MS)對(duì)汞(Hg)、鎘(Cd)、鉛(Pb)、鉻(Cr)、砷(As)5種重金屬元素進(jìn)行檢測(cè)，探討解有機(jī)磷細(xì)菌及其組合對(duì)滇重樓根莖、須根及根際土壤重金屬元素含量的影響，以期為滇重樓人工規(guī)范化種植與發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試種苗為同一批長(zhǎng)勢(shì)良好，且無(wú)病蟲(chóng)害的四年生滇重樓實(shí)生苗，由云南省大理州永平縣杉陽(yáng)鎮(zhèn)普棚村規(guī)范化種植基地(25° 39′13.56′′N(xiāo)，99° 33′58.38′′E)提供，將滇重樓實(shí)生苗根系附帶土壤清理干凈后，采用單株低溫干燥保存，以保證種質(zhì)資源的穩(wěn)定性和均一性，并經(jīng)保山中醫(yī)藥高等專(zhuān)科學(xué)校楊發(fā)建副教授鑒定；栽培基質(zhì)為普通黃壤土、沙土和有機(jī)土按2∶1∶1的比例配制而成，過(guò)2 mm篩，采用高壓蒸汽滅菌鍋121 ℃高溫滅菌30 min，取出冷卻密封放置待用；供試菌株為課題組前期從滇重樓根際土壤中分離篩選出的3株溶磷效果最佳的解有機(jī)磷細(xì)菌，分別為運(yùn)動(dòng)芽孢桿菌(Bacillusmycoides)、維德曼芽孢桿菌(Bacilluswiedmannii)、蛋白水解芽孢桿菌(Bacillusproteolyticus)，活化后，用移液槍取少量菌液接種于裝有牛肉膏蛋白胨液培養(yǎng)基的三角瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)菌懸液密度至1×106CFU/mL，每種解有機(jī)磷細(xì)菌菌懸液培養(yǎng)約4 L。

1.2 儀器和試劑

SPX-80型生化培養(yǎng)箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司);金牛4010型微波消解儀(南京瑞尼克科技開(kāi)發(fā)有限公司);EXPEC 7000型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(杭州聚光科技股份有限公司)。Hg(GSB04-1729-2004，1 000 μg/mL)、Cd(GSB04-1721-2004，1 000 μg/mL)、Pb(GSB04-1742-2004，1 000 μg/mL)、Cr(GSB04-1723-2004，1 000 μg/mL)、As(GSB04-1714-2004，1 000 μg/mL)，購(gòu)自國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心。實(shí)驗(yàn)試劑為優(yōu)級(jí)純，水為純凈水。所有玻璃器皿采用15%硝酸浸泡24 h，蒸餾水沖洗干凈后烘干備用。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用室內(nèi)盆栽的方法，于2020年12月在貴州省安順市安順學(xué)院(26° 24′95.21′′N(xiāo)，105°90′75.95′′E)的試驗(yàn)種植基地進(jìn)行種植。試驗(yàn)共分為8組，包括7個(gè)試驗(yàn)處理組(S1～S7)和1個(gè)對(duì)照組(CK)，實(shí)驗(yàn)對(duì)3株解有機(jī)磷細(xì)菌優(yōu)勢(shì)種采取單株接種、兩兩組合接種以及三種菌混合接種的方式分組培養(yǎng)，處理方式：處理組S1接種菌株B.mycoides、處理組S2接種菌株B.wiedmannii、處理組S3接種菌株B.proteolyticus、處理組S4接種菌株B.mycoides和B.wiedmannii、處理組S5接種菌株B.mycoides和B.proteolyticus、處理組S6接種菌株B.wiedmannii和B.proteolyticus、處理組S7接種菌株B.mycoides、B.wiedmannii和B.proteolyticus，CK組不接種處理。每組重復(fù)10次，每盆種植5株生長(zhǎng)狀況良好的滇重樓實(shí)生苗，菌懸液接種量為150 mL/盆，栽培期間按照滇重樓植株室內(nèi)栽培標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行管理。一年后采收滇重樓藥材，將根莖和須根于45 ℃烘箱中烘干，粉碎后過(guò)80目篩，密封干燥保存；通過(guò)抖根法取其根際土壤，室溫自然風(fēng)干，密封干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 滇重樓根莖及須根消解

精密稱(chēng)取0.2 g滇重樓藥材樣品于消解罐中，平行3次，加入濃HNO38 mL密封，浸泡過(guò)夜，采用同法不加樣品制備空白溶液。次日采用Li等[4]方法進(jìn)行微波消解。

1.4.2 滇重樓根際土壤消解

精密稱(chēng)取0.2 g根際土壤樣品于消解罐中，平行3次，加入濃HNO37 mL、HF 2 mL和HClO40.6 mL密封，浸泡過(guò)夜，采用同法不加樣品制備空白溶液。次日采用Lan等[15]方法進(jìn)行微波消解。

1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)工作液的制備

精密稱(chēng)取適量混合對(duì)照品儲(chǔ)備液，采用2%的稀硝酸逐級(jí)稀釋?zhuān)唧w配置濃度參照Huang等[16]方法進(jìn)行。

1.4.4 元素含量測(cè)定

參照Li等[4]方法進(jìn)行。

1.4.5 藥材重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)

藥材限量標(biāo)準(zhǔn)參照《中國(guó)藥典》(2020年版)[17]和《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量》(GB2762-2017)規(guī)定[18]：Hg≤0.2 mg/kg，Cd≤1.0 mg/kg，Pb≤5.0 mg/kg，Cr≤2.0 mg/kg，As≤2.0 mg/kg。

1.4.6 土壤污染現(xiàn)狀評(píng)價(jià)方法

已測(cè)得CK、S4和S5組pH值大于7.5，S1～S3、S6、S7組pH值介于6.5～7.5之間。參考《土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用土壤污染風(fēng)險(xiǎn)管控標(biāo)準(zhǔn)》(GB15618-2018)[19]對(duì)5種重金屬元素的限量：當(dāng)6.57.5時(shí)，Hg≤3.4 mg/kg，Cd≤0.6 mg/kg，Pb≤170 mg/kg，Cr≤250 mg/kg，As≤25 mg/kg。參照《土壤環(huán)境檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》(HJ/T166-2004)，采用單項(xiàng)污染指數(shù)法和內(nèi)梅羅污染指數(shù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)滇重樓根際土壤污染情況進(jìn)行評(píng)價(jià)[20]，土壤內(nèi)梅羅污染指數(shù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)見(jiàn)表1。其中：

土壤單項(xiàng)污染指數(shù)(Pi)=

土壤污染物實(shí)測(cè)值(Ci)/土壤污染物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(Si)

內(nèi)梅羅污染指數(shù)(Pn)=

{[(Pi均2)+(Pi最大2)]/2}1/2

表1 土壤內(nèi)梅羅污染指數(shù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Evaluation standard of soil Nemero pollution index

1.5 數(shù)據(jù)處理

原始數(shù)據(jù)處理采用Excel 2003軟件，方差分析及相關(guān)性分析采用SPSS 22.0軟件，繪圖采用Origian 9.0軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)滇重樓根莖和須根重金屬元素含量的影響

不同解有機(jī)磷細(xì)菌接種處理后，滇重樓根莖5種重金屬元素含量見(jiàn)圖1。由圖可知，7個(gè)處理組中Pb元素的含量均顯著低于CK組(P<0.05)，表明接種解有機(jī)磷細(xì)菌能夠降低滇重樓根莖對(duì)Pb元素的吸收能力，其中含量最低的為S5組，其含量為0.723 mg/kg，僅是CK組含量的12.86%。此外，S5組的Hg和Cd元素含量為最低值，顯著低于CK組，表明S5組的接種處理能有效降低滇重樓根莖對(duì)Hg、Cd和Pb 3種重金屬元素的吸收力。Cr和As元素含量最低均為S7組，且都顯著低于CK組，表明3種菌混合處理能有效降低滇重樓根莖對(duì)重金屬元素Cr和As的吸收能力?？傮w上來(lái)看，接種解有機(jī)磷細(xì)菌后對(duì)滇重樓根莖中Hg、Cd、Pb和Cr元素含量均有所改善，但對(duì)As元素含量的改善效果不明顯，其中，接種效果較好為S5、S6和S7組。參考《中國(guó)藥典》(2020年版)和《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量》(GB2762-2017)可知，在已獲得的根莖重金屬元素含量中，除CK和S2組的Pb、Cr元素含量以及S5組的Cr元素含量略有超標(biāo)以外，其余組中的重金屬元素含量均已達(dá)標(biāo)。

滇重樓須根中5種重金屬元素含量如圖2所示。由圖可知，接種處理后須根中Hg元素的含量較CK組均有所降低，表明接種解有機(jī)磷細(xì)菌能夠降低滇重樓須根對(duì)Hg元素的吸收能力，其中含量最低的為S4組，為0.116 mg/kg，僅占CK組含量的12.86%。此外，Cd和Pb元素含量最低的為S4組，且均顯著低于CK組，表明S4組的接種處理方式能有效降低滇重樓須根對(duì)Hg、Cd和Pb 3種重金屬元素的吸收力。S7組的Cr和As元素含量均顯著低于CK組，且達(dá)到最低，此結(jié)果與根莖中Cr和As元素含量所得相同，表明3種菌混合處理能有效降低滇重樓根莖和須根對(duì)Cr和As的吸收能力。總的來(lái)看，接種解有機(jī)磷細(xì)菌后對(duì)滇重樓須根中Hg、Pb、Cr和As元素含量均有較大改善，而對(duì)Cd元素含量的改善效果不明顯，其中，S4和S7組的接種效果表現(xiàn)良好。由對(duì)藥材重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可知，除As元素外，其余元素都有一些組超，除S2組的Pb元素外，其余超標(biāo)均不過(guò)2倍。

圖1 接種解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)滇重樓根莖5種重金屬含量的影響Fig.1 Effects of inoculation with organophosphate-degradation bacteria on the contents of five heavy metals in the rhizomes of Paris polyphylla var.yunnanensis注：圖中不同小寫(xiě)字母代表不同處理組間的差異顯著(P<0.05)，下同。Note:Different lowercase letters in the figure represent significant differences among different treatment groups (P<0.05),the same below.

2.2 解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)滇重樓根際土壤重金屬元素含量的影響及重金屬污染評(píng)價(jià)

滇重樓根際土壤5種重金屬元素含量變化見(jiàn)圖3，由圖可知，與CK組相比，接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，滇重樓根際土壤中的重金屬含量變化不明顯且無(wú)規(guī)律性，表明接種處理對(duì)滇重樓根際土壤中的重金屬元素含量不會(huì)造成影響，而各組中重金屬含量的微小變化可能是由混土不勻或者實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的人為誤差造成。由《土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用土壤污染風(fēng)險(xiǎn)管控標(biāo)準(zhǔn)》(GB15618-2018)對(duì)農(nóng)田土壤重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可知，所有處理組中的重金屬含量均達(dá)標(biāo)。單項(xiàng)污染指數(shù)和內(nèi)梅羅污染指數(shù)的評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表2。由表可知，所有重金屬元素的單項(xiàng)污染指數(shù)均<1，除S1組的內(nèi)梅羅污染指數(shù)介于0.7～1.0之間，土壤處于尚清潔水平，存在被污染的風(fēng)險(xiǎn)以外，其余處理組的內(nèi)梅羅污染指數(shù)均<0.7，為清潔土壤水平。

2.3 滇重樓根莖和須根重金屬元素富集系數(shù)

植物體中重金屬元素的富集系數(shù)(BCF)(BCF =元素在植物中的含量/元素在其植物所生長(zhǎng)土壤中的含量)能側(cè)面反映植物對(duì)其根際土壤中重金屬的富集能力[2]，BCF<0.1表示絕對(duì)貧化，0.13.0表示絕對(duì)富集[21]。滇重樓根莖和須根重金屬元素的富集系數(shù)見(jiàn)表3。

圖2 接種解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)滇重樓須根5種重金屬含量的影響Fig.2 Effects of inoculation with organophosphate-degradation bacteria on the contents of five heavy metals in fibrous roots of Paris polyphylla var.yunnanensis

圖3 接種解有機(jī)磷細(xì)菌對(duì)滇重樓根際土壤5種重金屬含量的影響Fig.3 Effects of inoculation with organophosphate-degradation bacteria on the contents of five heavy metals in the rhizosphere soil of Paris polyphylla var.yunnanensis

表2 滇重樓根際土壤重金屬污染評(píng)價(jià)Table 2 Evaluation of heavy metal pollution in the rhizosphere soil of Paris polyphylla var.yunnanensis

由表可知，在滇重樓根莖中，S5組的Hg、Cd和Pb元素BCF最低，S7組的Cr和As元素BCF最低，而CK組的Hg、Cd、Pb和Cr元素的BCF均為最高值，表明接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，能一定程度上降低滇重樓根莖對(duì)重金屬元素的吸附。其中，Cd元素的BCF相對(duì)較高，CK、S1、S3、S4和S6組的富集能力>0.5，表明滇重樓根莖對(duì)Cd元素的吸附能力較強(qiáng)。此外，除CK和S2組的Pb元素以及S1組的As元素的BCF大于0.5以外，其余根莖中的重金屬元素富集能力均偏小，富集能力最小的為Cr元素，表明滇重樓根莖對(duì)重金屬Cr的吸附能力較弱。在滇重樓須根BCF中，S4組的Hg、Cd和Pb元素BCF最低，S7組的Cr和As元素BCF最低，CK組的Hg和As元素的BCF最高，表明接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，能緩解滇重樓須根對(duì)重金屬元素的吸附能力。其中，在須根中Cd元素的BCF相對(duì)較高，S1組的富集能力大于3.0，S7組的富集能力大于1.5，表明滇重樓根莖對(duì)Cd元素的吸附能力較強(qiáng)。此外，除CK和S2組中的Pb元素以外，其余須根中的重金屬元素BCF均小于0.5，其中Cr元素的BCF最小，均小于0.1，表明滇重樓須根對(duì)Cr的吸附能力較弱，此結(jié)果與根莖的富集系數(shù)結(jié)果相似。

表3 滇重樓根莖和須根富集系數(shù)Table 3 Enrichment coefficients of rhizomes and fibrous roots of Paris polyphylla var.yunnanensis

2.4 相關(guān)性分析

滇重樓根莖、須根及根際土壤中5種重金屬元素相關(guān)性分析如表4所示。由表可知，根莖與須根中的Hg元素呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，相關(guān)系數(shù)為0.771；Pb元素中，須根與根莖呈顯著正相關(guān)，與土壤呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.758和-0.750；根莖及須根中的Hg和Pb元素呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.761和0.811；根莖中的Hg和Cd元素之間呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.807；根莖中的Cr元素與須根中的As元素呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.822；根莖中的As元素與土壤中的Cd元素呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.747。

3 討論與結(jié)論

解有機(jī)磷細(xì)菌可以通過(guò)礦化有機(jī)磷化合物，將土壤中難溶性的有機(jī)磷化合物轉(zhuǎn)化為植物能直接吸收利用的有效磷，促進(jìn)滇重樓的生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)而獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的中藥材[22,23]，同時(shí)解有機(jī)磷細(xì)菌還能固定和鈍化土壤中重金屬元素[8]，使其難以被藥用植物直接吸收，從而減輕中藥材中重金屬元素殘留。在本研究中，與不接種的CK組相比，接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，總體上能降低滇重樓根莖和須根中的重金屬含量，對(duì)Pb元素含量的降低程度最為顯著，其原因是解有機(jī)磷細(xì)菌可以鈍化土壤中的Pb元素，使重金屬Pb由活性高的形態(tài)轉(zhuǎn)化為活性低的形態(tài)，降低其生物有效性[24,25]，從而減少了滇重樓對(duì)Pb元素的吸收利用。對(duì)Hg和Cr元素含量也有較大改善，且混合接種處理優(yōu)于單接種處理，S6和S7組的接種處理方式對(duì)滇重樓的影響效果最佳。參考《中國(guó)藥典》(2020年版)和《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量》(GB2762-2017)作為滇重樓藥材限量標(biāo)準(zhǔn)，根莖中僅一些處理組中的Pb和Cr略有超出標(biāo)準(zhǔn)，而須根中大部分重金屬已超出限量標(biāo)準(zhǔn)，其原因可能是由于須根表面存在大量根毛，不僅能直接吸收土壤中的各種有害物質(zhì)，還能有效增大與土壤的接觸面積，從而增大對(duì)土壤元素的吸收能力[26]。在滇重樓根際土壤中，接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，土壤中的重金屬含量沒(méi)有改變。以《土壤環(huán)境質(zhì)量農(nóng)用土壤污染風(fēng)險(xiǎn)管控標(biāo)準(zhǔn)》(GB15618-2018)為參考，所有處理組土壤均未超出國(guó)家限定標(biāo)準(zhǔn)；而以《土壤環(huán)境檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》(HJ/T166-2004)為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，所有處理組中的單項(xiàng)污染指數(shù)均<1，除S1組的內(nèi)梅羅指數(shù)大于0.7，土壤屬于尚清潔水平，存在污染風(fēng)險(xiǎn)以外，其余處理組的土壤均達(dá)到清潔水平。表明本試驗(yàn)所用的栽培基質(zhì)中的重金屬含量完全符合種植標(biāo)準(zhǔn)，且接種解有機(jī)磷細(xì)菌后并沒(méi)有對(duì)土壤造成較大的重金屬污染風(fēng)險(xiǎn)，因此對(duì)滇重樓植株接種解有機(jī)磷細(xì)菌的試驗(yàn)安全有效。

表4 滇重樓根莖、須根及根際土壤中重金屬含量相關(guān)性分析Table 4 Correlation analysis of heavy metal contents in rhizomes,fibrous roots and rhizosphere soils of Paris polyphylla var. yunnanensis

重金屬富集系數(shù)是描述重金屬在生物體內(nèi)累積趨勢(shì)的重要指標(biāo)，側(cè)面反映了植物對(duì)其根際土壤中重金屬的富集能力。一般來(lái)說(shuō)，作物對(duì)重金屬的富集系數(shù)越小，則表明其吸收重金屬的能力越差，對(duì)于土壤重金屬的抗逆性則越強(qiáng)[27]。水稻對(duì)Cd的富集作用較強(qiáng)，在種植水稻過(guò)程中則需要注意土壤及環(huán)境中Cd的殘留量，避免對(duì)Cd的過(guò)度富集導(dǎo)致大米中Cd含量超標(biāo)，從而危害人類(lèi)健康[28]。本研究中，接種不同解有機(jī)磷細(xì)菌，滇重樓根莖和須根對(duì)Hg、Cd、Pb、Cr、As 5種重金屬元素的富集能力各不相同，其中，Cr元素的富集能力屬于強(qiáng)烈貧化，而對(duì)Cd元素生物累積作用則較大，但均顯著低于超富集植物臨界含量標(biāo)準(zhǔn)(1 000 mg/kg)，須根的富集系數(shù)大于根莖，混合接種處理組的富集能力弱于單接種處理組。因此，不考慮將滇重樓須根作為藥用部位，可考慮將效果最佳的兩種接種處理方式作為生物菌肥的參考，應(yīng)用于滇重樓人工種植過(guò)程中，從而降低滇重樓藥材的重金屬污染風(fēng)險(xiǎn)，而在今后對(duì)解有機(jī)磷細(xì)菌和滇重樓大田推廣栽培實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)優(yōu)先對(duì)Cd元素進(jìn)行調(diào)控。

相關(guān)性分析表明，接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，Hg和Pb元素之間的相關(guān)性較大，其他元素的相關(guān)程度則較小，表明接種解有機(jī)磷細(xì)菌后，滇重樓對(duì)根際土壤中Hg和Pb元素的吸收具有顯著的協(xié)同作用；此外，根莖與須根的相關(guān)性強(qiáng)于根際土壤，表明根莖之間、須根之間以及根莖與須根之間的重金屬元素含量相互影響能力較強(qiáng)。因此，在今后的大田栽培中，應(yīng)同時(shí)考慮根莖與須根之間以及Hg和Pb元素之間的協(xié)同影響作用。

綜上所述，接種不同解有機(jī)磷細(xì)菌或復(fù)合菌，能有效降低滇重樓根莖、須根中Hg、Pb和Cr元素含量，從而降低滇重樓藥材重金屬含量超標(biāo)風(fēng)險(xiǎn)，還能有效控制滇重樓根際土壤重金屬污染風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)，本研究結(jié)果也表明，3種菌混合接種以及混合接種菌株B.wiedmannii和B.proteolyticus這兩種方式對(duì)滇重樓的影響效果最佳，因此，可將這兩種解有機(jī)磷細(xì)菌的接種方式推廣應(yīng)用到滇重樓人工種植過(guò)程中，從而為滇重樓人工種植過(guò)程中重金屬污染修復(fù)提供參考。