朱慶 計慧姝 李勁 廖昆 余勁 澤仁擁忠 張璐
(1.四川省甘孜藏族自治州動物疫病預防控制中心,四川康定 626000;2.四川省康定市林業(yè)和草原局草原工作站,四川康定 626000)
炭疽是炭疽桿菌引起的急性、熱性、敗血性人畜共患傳染病。炭疽病在藏語中叫“沙”,炭疽桿菌的繁殖體抵抗力不強,在活炭疽病畜體或死亡后未經(jīng)解剖的尸體內(nèi),不形成芽孢,但炭疽桿菌在氧氣充足、溫度適宜(25~30℃)條件下能形成具強大抵抗力的炭疽芽孢,被炭疽芽孢污染的土壤、水源、草地可形成持久疫源地,造成本病常在一定的地區(qū)內(nèi)流行。世界動物衛(wèi)生組織將其列為法定動物報告疫病,我國將其列為二類動物疫病。
甘孜藏族自治州(以下簡稱甘孜州)地處青藏高原東南緣,位于四川省西部,面積15.3 萬km2,占四川省面積的31.5%,轄18 個縣(市),289 個鄉(xiāng)(鎮(zhèn)),其中純牧業(yè)縣5 個,半農(nóng)半牧區(qū)縣13 個,總人口110 萬,以藏族大聚居為主,藏族占總人口的78.7%。甘孜州擁有天然草地1.42 億畝,占全州面積的60.3%,廣大牧民群眾依賴草原生息,長期處于逐水草游牧,形成了較大規(guī)模的草食家畜存欄量。境內(nèi)海拔高低懸殊,地表平均海拔在3500m 以上,主要屬大陸性高原山地季風氣候,呈現(xiàn)出明顯的垂直分布,其特點是氣溫低、氧氣稀薄、冬季長、日照足,自然氣候條件惡劣,災害性天氣頻發(fā),年平均氣溫為0.6~16.3℃,雨旱分明,分布不均,60%集中在6—8月,年總降水量為417.8~935.8mm。
甘孜州1951—2018 年累計報告炭疽5207 例,死亡3145 例。其中1951 年死亡41 例;1975 年死亡13例;1976 年183 個疫點,發(fā)病1078 例,死亡738 例,致死率為68.46%;1977 年148 個疫點,發(fā)病1095例,死亡614 例,致死率為56.07%;1978 年110 個疫點,發(fā)病823 例,死亡353 例,致死率為42.89%;1979 年116 個疫點,發(fā)病882 例,死亡566 例,致死率為64.17%;1980 年106 個疫點,發(fā)病586 例,死亡431 例,致死率為73.55%;1981 年82 個疫點,發(fā)病549 例,死亡360 例,致死率為65.57%;1992 年、1994 年均因人誤食病死牛導致數(shù)十人感染;2003 年發(fā)病24 例;2006 年發(fā)病4 例;2016 年發(fā)病91 例,死亡25 例,致死率為27.47%;2018 年發(fā)病21 例,死亡4 例,致死率為19.04%。根據(jù)歷史資料,1953—2018 年甘孜州18 個縣(市)均發(fā)生過動物炭疽疫情,畜疫過后發(fā)生人間炭疽疫情;年均發(fā)病為77.72 例,發(fā)病致死率較高,發(fā)病高峰在1976—1981 年,隨后動物炭疽病的發(fā)生頻率和疫情數(shù)逐步降低(圖1);全州歷史疫點較多,牲畜眾多且分散,仍偶有零星散發(fā)可能性較大,畜間流行趨勢一直處于高發(fā)狀態(tài)。
圖1 1951—2018 年甘孜藏族自治州炭疽病發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)分布
1.3.1 季節(jié)性
一年四季均有發(fā)病,但具有明顯的季節(jié)性,主要發(fā)生于夏秋季節(jié),發(fā)病高峰為7-10 月,受到強降雨、洪澇災害等影響,雨水容易把土壤深層或歷史疫點炭疽芽孢沖刷出來,草食動物在采食中通過消化道、呼吸道、皮膚傷口等途徑接觸炭疽芽孢后感染。
1.3.2 地域性
疫情地區(qū)分布廣泛,全州18 縣(市)均發(fā)生過動物炭疽疫情,但具有明顯的區(qū)域性,發(fā)病集中在除瀘定縣外17 個縣(市)的高原牧區(qū)和半農(nóng)半牧區(qū)[1],大部分疫情均在德格、新龍、甘孜、爐霍等偏北的縣份重復發(fā)生,以散發(fā)伴局部地區(qū)暴發(fā)為主,流行多為自然環(huán)境中的病原引發(fā)。
1.3.3 易感動物
以馬、牛、羊等草食家畜最易感。不同年齡、性別、品種的家畜均有感染,幼年和較老齡家畜易感[2]。人可感染,但易感性較低,主要是私屠濫宰病死畜、或食用病死畜肉類,從事加工被污染畜產(chǎn)品(牛羊皮)而導致感染。
動物炭疽病多呈急性經(jīng)過,短時間內(nèi)死亡,又嚴禁對疑似炭疽病例進行解剖,所以診斷該病非常困難。其臨診要點:大多數(shù)易感動物從接觸到炭疽芽孢到發(fā)病一般為3~7d,最短1d 即可發(fā)病,最長可達20d。常在夏季雨后不明原因發(fā)病,大多表現(xiàn)為突然死亡、天然孔(口、鼻、肛門、陰門)出血、血液呈醬油色且不易凝固、尸僵不全、左腹膨脹[3]。
2.1.1 最急型
常見于綿羊、山羊。這種類型的炭疽通常發(fā)病最快,發(fā)病后突然倒地、全身痙攣、呼吸困難、黏膜紫色或有出血點、天然孔流出帶泡沫的暗色血液,常在0.5~2h 內(nèi)死亡。
2.1.2 急性型
多見于牛、馬。這種類型的炭疽通常起病急、病程短,發(fā)病后出現(xiàn)體溫升高至42℃,食欲、反芻、泌乳減少或停止、乳汁量減少或帶血、尿液暗紅、孕牛流產(chǎn),一般1~2d 內(nèi)死亡。
2.1.3 亞急型
多見于牛、馬。這種類型的炭疽通常發(fā)病相對緩和,臨診癥狀與急性型相似,除急性熱性病征外,常在頸部、咽部、胸部、腹下、肩甲、乳房等皮膚松軟處發(fā)生局部水腫,初期堅硬有熱痛,以后熱痛消失,發(fā)生壞死或潰瘍,病程可長達1 周。
2.1.4 慢性型
主要發(fā)生于豬,多不表現(xiàn)臨診癥狀,可能發(fā)生咽炭疽和腸炭疽。咽炭疽頜下淋巴結腫大,出血切面磚紅色,周圍呈膠凍樣浸潤,病豬頸部活動不靈敏、吞咽及呼吸困難、可視黏膜藍紫色,常窒息而亡。腸炭疽常伴有便秘或腹瀉。動物巴氏桿菌病的急性型常以敗血癥和出血性炎癥為主要特征,所以又叫“出血性敗血癥”,頸部腫脹癥狀與炭疽相似,但脾臟不腫大,血液凝固良好[4]。
2.2.1 病料采集
疑為感染炭疽的動物,除慢性型外,若患病動物還未死亡,采取患病動物末梢靜脈血,病變部位取水腫液或滲出液等;若患病動物還已死亡,自消毒后的耳根部或四肢末端采取血液,或切下一小塊耳朵,并用0.5%石炭酸溶液浸濕紗布填塞切口或切口處用燒紅的烙鐵燒灼止血;若已經(jīng)錯剖患病動物尸體,可取肝、脾、腎等臟器,病料必須放入密封的容器中由專人送檢。
2.2.2 涂片鏡檢
取末梢血液制成涂片后,用瑞氏或姬姆薩(或堿性亞甲藍)染色,鏡檢發(fā)現(xiàn)有多量單在成對或2~4個菌體相連的短鏈排列、竹節(jié)狀有莢膜的粗大桿菌,結合臨床癥狀即可初步做出診斷,確診需做分離培養(yǎng)和動物接種。豬體局部炭疽涂片的菌體形態(tài)常不典型。尸體不新鮮及腐敗病料不適于鏡檢。
2.2.3 分離培養(yǎng)
新鮮病料可直接于普通瓊脂或肉湯中培養(yǎng),污染或陳舊的病料應先制成懸浮液,水浴15~30min,殺死非芽孢后再接種培養(yǎng)。強毒炭疽芽孢桿菌在普通瓊脂平板上培養(yǎng)18~24h(溫度為37℃)后,直接觀察可見有扁平、灰白色不透明、邊緣不整的粗糙型大菌落,低倍鏡觀察可見有花紋,呈現(xiàn)卷發(fā)狀,中央暗褐色,邊緣有菌絲射出。強毒炭疽芽孢桿菌在普通肉湯中培養(yǎng)18~24h(溫度為37℃)后,觀察可見肉湯中生長成菌絲或絮狀的菌團,上液透明,管底有大絮狀沉淀。經(jīng)肉湯培養(yǎng)24h 后進行分離培養(yǎng)。
2.2.4 動物接種
分析60例行靜脈溶栓治療的患者,其中38例為發(fā)病后6 h內(nèi)進行治療,其血管再通率為89.47%,22例發(fā)病后6~12 h治療患者的血管再通率為72.73%,二者之間的比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。
用培養(yǎng)物或病料懸液注射0.5mL 于小鼠腹腔,1~3d 后小鼠因敗血癥死亡,其血液或脾臟中可檢出有莢膜的炭疽菌。
2.2.5 環(huán)狀沉淀反應(Ascoli 氏反應)
該方法診斷炭疽具有簡便、快速的優(yōu)點,當培養(yǎng)失效時,仍可進行診斷,適宜于腐敗病料及動物皮張或風干、腌浸過肉品的檢驗。先制備可溶性被檢抗原液:采用熱浸出法,取疑似病料(各種實質臟器、血液、滲出液)等1~3g 研碎后,加5~10 倍生理鹽水,用移液管吸至試管內(nèi),水浴15~30min,冷卻后用濾紙過濾或離心沉淀,透明濾液即為被檢的抗原;采用冷浸出法,取懷疑為炭疽病畜的皮張或風干、腌浸過肉品等材料,高壓滅菌30min,取被檢材料1~3g,加入5~10 倍的0.5%石炭酸生理鹽水,在室溫下或4℃冰箱浸泡14~20h,濾紙過濾或離心沉淀,透明濾液即為被檢的抗原。用毛細吸管吸取少量炭疽沉淀素血清,沿管壁慢慢注入沉淀反應管內(nèi)1/3 處,再取被檢抗原液,沿管壁緩慢加入已裝有炭疽血清管內(nèi)2/3 處,靜置5~10min 內(nèi),兩液面交界處若出現(xiàn)清晰、整齊的白色沉淀環(huán),則可判為陽性[5]。
全州堅持 “預防為主” 的炭疽病防控方針,1953-2017 年對經(jīng)常發(fā)病或歷史疫區(qū)及受威脅地區(qū)的牛、羊等易感動物,每年春季均免疫接種炭疽疫苗,并逐年擴大免疫范圍。2018 年以來,全州對動物炭疽病實施強制免疫,每年均招標采購無莢膜炭疽芽孢苗和Ⅱ號炭疽芽孢疫苗共370 萬mL,完成對牛、羊等易感動物的免疫接種。除疫苗經(jīng)費外,無專項防治經(jīng)費投入,每年只能開展少量血清學監(jiān)測,對部分歷史疫點(炭疽尸體無害化處理點)進行標示和密封加固,將部分歷史疫點劃為禁牧區(qū)。
全州曾多次暴發(fā)炭疽疫情,歷史疫點(炭疽尸體無害化處理點)多,病原廣泛存在于自然環(huán)境和數(shù)量眾多的野生動物中,引發(fā)炭疽疫情的因素客觀存在,防控難度大。
炭疽病屬于二類動物疫病,防控經(jīng)費由地方財政負擔,但由于甘孜州財政困難,炭疽病的宣傳培訓、疫情應急處置、歷史疫點的密封加固等防控經(jīng)費嚴重不足。
全州牦牛、羊等家畜存欄量大,并且大多數(shù)是在野外放牧的,野性較大,疫苗皮下或皮內(nèi)注射量為0.2~1mL,注射方式和劑量均難以把握,致使免疫質量無從保證。
全州縣級獸醫(yī)實驗室建設嚴重滯后,實驗室設施設備陳舊,對疫苗免疫抗體缺乏有效監(jiān)測。
農(nóng)牧民群眾對病死畜的危害性缺乏認識,加上經(jīng)濟欠發(fā)達,群眾往往不愿舍棄而就地屠剖病死畜,造成新疫情的發(fā)生。
在炭疽病常發(fā)地區(qū)或威脅地區(qū),每年定期對牛、羊等易感動物進行疫苗接種。目前,我國使用的疫苗有無毒炭疽芽孢疫苗(山羊忌用)和Ⅱ號炭疽芽孢疫苗,疫苗接種后14 天產(chǎn)生免疫力,大部分易感動物可獲得一年的免疫力。
在疫源地設置警示標志,一類疫源地嚴禁放牧,二類疫源地避免放牧,三類疫源地在風險月份禁止放牧[6]。
進一步加大對民族地區(qū)獸醫(yī)實驗室建設資金投入力度,建設“布局合理、設施齊全、制度完善、安全高效” 的動物病原微生物實驗室,提高動物疫病檢測診斷能力。探索建立國家和民族地區(qū)人畜共患病應急儲備金制度,落實炭疽為主的人畜共患病預防控制、疫情監(jiān)測、歷史疫點標識和密封加固等防控經(jīng)費,保證畜間炭疽病防控工作的需要。
強化動物產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫、引種運輸檢疫監(jiān)管工作,嚴格打擊私屠濫宰和屠宰、加工、銷售病死或者死因不明動物及動物產(chǎn)品等違法行為。
在炭疽疫情發(fā)生具有明顯的地域性和季節(jié)性,實行網(wǎng)格化管理日報制,規(guī)范炭疽病監(jiān)測預警。對炭疽老疫區(qū)的牛羊養(yǎng)殖、交易、屠宰、無害化處理等場所開展全面排查,對死因不明或疑似炭疽病畜采取病料進行實驗室診斷,及時發(fā)現(xiàn)和處置異常情況。
廣泛進行公共衛(wèi)生宣傳教育,對農(nóng)牧民群眾普及防治知識,宣傳家畜不要在炭疽疫點疫區(qū)、無害化處理場點、洪水侵襲過的草場牧地等炭疽芽孢污染的高風險區(qū)域放牧,不要飼喂洪水污染的飼草飼料;重點宣傳“四不準一處理” 原則,即“不準宰殺、不準食用、不準出售、不準轉運病死畜禽及產(chǎn)品,對病死畜禽必須進行無害化處理”。開展技術培訓,對牲畜養(yǎng)殖、牲畜集散市場、畜產(chǎn)品屠宰加工等從業(yè)人員、獸醫(yī)等專業(yè)技術人員進行防治技術培訓,使其熟悉炭疽病典型的臨床癥狀、診斷要點,能夠及時發(fā)現(xiàn)疫情并上報。
一旦發(fā)生動物炭疽疫情或疑似疫情時,任何單位和個人應及時報告疫情。農(nóng)業(yè)農(nóng)村(畜牧獸醫(yī))主管部門或動物疫病預防控制機構在接到疫情報告后,要迅速做出反應,采取邊調查邊處理邊核實的方式,有效控制疫情發(fā)展;劃定疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū);病畜尸體嚴禁解剖,與患病動物做無血撲殺后一并無害化處理,對假定健康動物進行強制免疫接種,并隔離觀察20d;禁止動物、動物產(chǎn)品和草料出入疫區(qū),必要時應封鎖疫區(qū);對廄舍、產(chǎn)地、用具等進行嚴格消毒,病畜躺過的地面應把表土除去15~20cm,取下的土消毒后深埋,墊草及糞便應予燒毀;疫區(qū)、受威脅區(qū)易感動物進行緊急免疫接種;最后1 頭病畜死亡或病畜和同群畜撲殺處理后20d 內(nèi)不再出現(xiàn)新的病例,并嚴格按規(guī)定程序解除封鎖。
綜上所述,炭疽病在甘孜州流行多年,20 世紀70-80 年代動物炭疽疫情嚴重,90 年代疫情持續(xù)下降,21 世紀后零星散發(fā)。防控炭疽病需要加大人力、物力、財力投入,重視各類人才的培育,加大基礎設施建設,提升基層畜牧獸醫(yī)動物防疫水平,從而有效控制炭疽病的傳播和流行。