宋曉昕

（遼寧省東港海關綜合技術服務中心 118300）

養(yǎng)豬業(yè)作為促進農(nóng)村經(jīng)濟增長重要支柱，非洲豬瘟是影響?zhàn)B豬業(yè)健康發(fā)展的關鍵性因素，目前主要采用非洲豬瘟病毒核酸檢測方式來進行防控，礙于檢測強度不斷提升，實驗室檢測能力明顯不足，因此，提升實驗室非洲豬瘟病毒檢測能力是各相關人員需要考慮的問題。

1 非洲豬瘟病毒檢測的必要性

一旦豬染非洲豬瘟病毒死亡率100%。對養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展有極大的影響，所造成的經(jīng)濟損失非常嚴重。非洲豬瘟病毒抗外界環(huán)境因素干擾能力強，傳播途徑多樣化，可進行糞便傳播、運輸工具傳播、人員間接觸傳播等，豬受到非洲豬瘟病毒侵染，產(chǎn)生有效抗體概率極低，現(xiàn)階段尚未研制出有效的疫苗，基于此，非洲豬瘟病毒核酸檢測逐漸成為目前對非洲豬瘟進行防控的必要手段與有效舉措[1]。

鑒于非洲豬瘟對養(yǎng)豬業(yè)極大的影響，非洲豬瘟病毒核酸檢測越來越受重視，檢測方法多樣化，如熒光PCR 檢測方法，因具有較高敏感性、穩(wěn)定性及高效性被廣泛運用于各獸醫(yī)實驗室、養(yǎng)豬場、第三方檢測機構中。但隨著非洲豬瘟病毒檢測強度不斷提升，促使目前實驗室陸續(xù)出現(xiàn)檢測結果不穩(wěn)定等情況，在一定程度上阻礙了實驗室正常非洲豬瘟病毒檢測工作開展，導致實驗室非洲豬瘟病毒檢測能力下降。因此，下面將基于全面質(zhì)量管理對實驗室非洲豬瘟病毒檢測能力提升路徑進行分析與闡述，實現(xiàn)全面提高實驗室檢測水平。

2 全面加強質(zhì)量管理，有效提升實驗室非洲豬瘟病毒檢測能力

2.1 人員方面

從目前實驗室非洲豬瘟病毒檢查工作情況來看，人員是導致非洲豬瘟病毒檢測結果不準確的關鍵因素之一，在實際非洲豬瘟病毒檢測過程中，如樣品采集、樣品運輸、樣品預處理及核酸提取等多個環(huán)節(jié)均需要由人工操作完成，因此，檢測人員是否具備高水平專業(yè)能力與職業(yè)素養(yǎng)對實驗室非洲豬瘟病毒檢測能力有極大影響。一旦其中某一環(huán)節(jié)由于人為誤操作而出現(xiàn)失誤情況，極有可能造成檢測結果失效，為避免此種情況，確保實驗室檢測人員較高工作水準非常必要。如何規(guī)范檢測人員行為可參考以下方面。

首先，增強檢驗操作規(guī)范性。實驗室內(nèi)檢測人員需要明確意識到保證檢驗操作規(guī)范的重要性，了解操作不規(guī)范對非洲豬瘟病毒檢測工作造成的影響，嚴格要求個人操作行為，避免實驗室污染問題；其次，踐行相關檢測管理制度。以制度方式來加強實驗室非洲豬瘟病毒檢測各個環(huán)節(jié)所涉及的人員管理，并要保證非洲豬瘟病毒核酸檢測崗位獨立性，并配置專管人員，嚴格遵守檢測流程，詳細確認該崗位人員檢測技能是否達到規(guī)定標準，設立崗位及人員考核機制，定期或不定期對檢測人員進行考核，嚴禁考核不合格人員參與實驗室非洲豬瘟病毒檢測工作，以此來達到全面提升實驗室檢測人員工作水平的目的；最后，注重實驗室采樣與檢測兩個崗位人員的專業(yè)培訓，主要培訓與非洲豬瘟病毒檢測相關內(nèi)容，幫助相關人員不斷提升檢測能力與，使其更好地應對日常檢測工作中出現(xiàn)的各種新問題、新情況。

此外，為了確保實驗室檢測人員各項能力強化效果，可選擇定期開展檢測能力對比方式來掌握不同檢測人員的實際水平，便于確認工作中潛在的不足，及時進行處理與改正，有效提升實驗室整體檢測水平[2]。

2.2 儀器設備方面

熒光PCR 儀、組織勻漿機、離心機、移液器、生物安全柜等均是實驗室非洲豬瘟病毒檢測過程中常常使用的儀器設備，通常情況下，對實驗樣品進行處理和加樣時，若儀器設備精度不高及存在硬軟件問題，極有可能發(fā)生實驗室污染或交叉感染等問題，因此，實驗室管理人員要特別重視使用過程中的儀器設備是否存在問題，一旦發(fā)現(xiàn)問題應及時處理，避免實驗室非洲豬瘟病毒檢測工作受到影響。常見的儀器設備問題主要表現(xiàn)為以下幾個方面。

（1）熒光PCR 儀精確性不足。對實驗室非洲豬瘟病毒檢測的關鍵儀器的精度及儀器元件精細度有嚴格要求，在實際使用過程中，常常出現(xiàn)各種問題，促使熒光PCR 儀精確性不足。如熒光PCR 儀濾鏡表面污漬清理不干凈，造成光路強度降低及燈源實際效果不明顯，該情況屬于硬件問題；吸光值未達到檢測標準、擴增曲線適用性不強及樣品顯示結果呈陰性，該情況屬于軟件問題?；诖耍瑸榱藴p少上述問題出現(xiàn)，確保熒光PCR 儀的精確性，實驗室管理人員可根據(jù)行業(yè)現(xiàn)行《聚合酶鏈反應分析儀校準規(guī)范》 相關內(nèi)容對熒光PCR 儀采取定期校準，使其讓熒光PCR 儀硬件始終保持良好狀態(tài)。針對熒光PCR 儀軟件問題，在正式檢測前，要求檢測人員再次確認循環(huán)段和恒溫段兩處位置起始溫度是否正常，所設置的熒光信號采集點是否準確，掌控影響熒光PCR 儀精確性的軟件因素，逐項檢查，從根源上解決熒光PCR 儀潛在的軟件問題。

（2）生物安全柜、離心機及核酸提取儀操作不當。在實驗室非洲豬瘟病毒檢測工作中，若設備操作不當極易形成氣溶膠，致使樣品間出現(xiàn)交叉污染情況；待氣溶膠污染發(fā)生后，檢測人員需要讓實驗室內(nèi)部保持良好通風效果，借助相關工具提升通風頻率與強度，同時利用紫外線燈進行照射，一般情況下，照射時間維持在2h 以上，使用一定濃度的84 消毒液對污染處進行消毒，充分降解機體或腔體中潛在的氣溶膠，防止氣溶膠二次污染[3]。

（3）移液器腔體交叉污染。使用移液器時，借助移液器中彈簧裝置對所需液體進行提取，一旦接觸到陽性樣品，極易導致在腔體內(nèi)形成氣溶膠，此時移液器提取其他樣品會發(fā)生交叉污染?；诖?，檢測人員應對移液器進行定期核查，確認移液器是否存在交叉污染問題，使用84 消毒器對其消毒，再利用樣品對其進行測試，確認消毒后的移液器不存在交叉污染問題。

2.3 物料方面

由于實驗室物料選擇不當，導致非洲豬瘟病毒檢測結果出現(xiàn)“假陽性”“假陰性”情況，針對此方面問題可參考以下內(nèi)容。

（1）合理采集與處理樣品。雖然樣品采集屬于檢測前期處理，但樣品采集是否達到既定標準直接關系著后續(xù)實驗室非洲豬瘟病毒檢測工作的開展。非洲豬瘟病檢測樣品較為多樣，糞便、血漿、肝臟等均可作為采集樣品。需要嚴格遵守檢測規(guī)范進行樣品采集，如采集豬血時，切忌不要使用肝素，否則會導致熒光PCR 產(chǎn)生強烈的抑制反應，出現(xiàn)檢測結果“假陰性”，可選用EDTA 鈉鹽作為抗凝劑，采集完成的樣品需存放在冷凍柜中，防止唾液中酶對非洲豬瘟病毒核酸造成破壞。

（2）選擇合適的檢測耗材。吸頭、離心管、熒光PCR 管均是實驗室非洲豬瘟病毒檢測中消耗過多的物料，由于材質(zhì)差異，其質(zhì)量反應也各不相同，其中若吸頭材質(zhì)不達標，存在熒光PCR 抑制劑，會影響檢測結果。實驗室需要充分注意此方面問題，在條件允許的前提下，選擇一次性耗材，既能保證檢測結果的準確性，又能有效避免交叉污染問題。

3 結束語

綜上所述，基于全面質(zhì)量管理，從實驗室人員、設備、物料等方面著手，使其達到全面提升實驗室非洲豬瘟病毒檢測能力的目的，與此同時做好實驗室內(nèi)部環(huán)境管理工作，保持室內(nèi)通風良好，并要保證預防交叉污染各項舉措落實到位，增強檢查人員專業(yè)水平，確保檢測結果準確性，為非洲豬瘟防控提供保障。