梁 志，胡 江，宋曉彪，陳俊生，郝繼偉，李 燕，烏日嘎，李鵬達(dá)，董振宇，牛翻燕，王繼軍

(1.內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 包頭 014040；2.包頭市中心醫(yī)院普外三科；3.包頭市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科)

腸道是人體重要的消化器官，在消化食物、吸收營養(yǎng)物質(zhì)的同時(shí)還產(chǎn)生免疫性物質(zhì)從而提高人體抵抗力，對于防止外來病原體入侵起到屏障作用。人類腸道內(nèi)存在大量細(xì)菌，這些細(xì)菌被稱為腸道菌群。某些特定的細(xì)菌可極大地影響人類健康以及疾病的轉(zhuǎn)歸。2018年一項(xiàng)關(guān)于全國惡性腫瘤研究顯示，結(jié)直腸癌發(fā)病率為第三位，死亡率為第五位[1]。腸道菌群在結(jié)腸直腸中分布密度最大，因此在結(jié)直腸癌的癌變進(jìn)程中，腸道菌群的穩(wěn)態(tài)對結(jié)直腸癌進(jìn)展起到延緩作用[2]。結(jié)直腸癌黏膜與細(xì)菌直接接觸，極易受到腸道菌群的影響，并且結(jié)直腸癌患者黏膜細(xì)胞與健康黏膜上皮細(xì)胞存在組織學(xué)差異，其腸道菌群也受到不同程度影響，伴隨一定程度的菌群失衡，菌群移位以及腸道菌群相關(guān)代謝的改變。盡管腸道黏膜菌群繁多，但近年來腸道菌群鑒定方法提高，結(jié)直腸癌黏膜菌群研究也不斷深入，為進(jìn)一步研究結(jié)直腸癌黏膜菌群提供更多的途徑。

1 腸道黏膜菌群功能

目前腸道菌群大致分為兩類。第一類細(xì)菌在漫長的進(jìn)化過程中與宿主細(xì)胞關(guān)系非常緊密，有非常明顯的生理作用，對宿主細(xì)胞有益，這類細(xì)菌稱為固有菌群或常住菌群；第二類腸道菌群與宿主細(xì)胞關(guān)系不緊密，通常不定植或短時(shí)間定植于腸道黏膜細(xì)胞表面，對腸道黏膜上皮有損害作用，這種細(xì)菌稱為外籍菌或過路菌[3]。腸道菌群大部分對人體有益，可以幫助食物消化的同時(shí)參與腸道黏膜新陳代謝，以及刺激腸道黏膜細(xì)胞的免疫系統(tǒng)，阻擋致病性病原體進(jìn)入腸道引起感染。腸道內(nèi)有益菌群可阻擋致病性病原體進(jìn)入機(jī)體，該過程被稱為定植抗力(Colonization resistance,CR)；有益菌群還可刺激宿主的免疫反應(yīng)，阻止致病性病原體的毒性因子對機(jī)體造成損害；另外，有益菌群也有助于清除腸道中的病原體及代謝物[4]。生理狀態(tài)下，人體腸道內(nèi)的細(xì)菌與人體關(guān)系密切，腸道內(nèi)未消化的食物向細(xì)菌提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)腸道菌群幫助人體消化﹑吸收食物，二者互惠共生。在腸黏膜上，腸道黏膜菌群是一些特定的在腸道內(nèi)具有黏附與定植能力的菌群，腸道的生物屏障則是由這些具有特殊能力的細(xì)菌組成。專性厭氧菌(Bifidobacterium)和兼性厭氧菌(Lactobacillus)是該生物屏障的主要組成部分，這兩種類型細(xì)菌的減少可導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生相應(yīng)的病理變化。

2 結(jié)直腸癌黏膜菌群失衡

文獻(xiàn)報(bào)道，人體中腸道菌群具有多樣性﹑穩(wěn)定性和修復(fù)能力。腸道菌群失衡一般是指腸道菌群的平衡受到外源性或內(nèi)源性損傷因素的傷害，導(dǎo)致菌群平衡被打破所致，可引起相應(yīng)的神經(jīng)﹑內(nèi)分泌和消化系統(tǒng)疾病的發(fā)生[5]。多數(shù)結(jié)直腸癌患者會發(fā)生不同程度的腸道菌群失衡。一些結(jié)直腸癌的癌前病變相關(guān)疾病也會伴隨不同程度的菌群失衡。Mathias等[6]開展的一項(xiàng)研究顯示，結(jié)腸炎相關(guān)的癌癥中，腸桿菌科與單胞菌屬增加，梭狀桿菌屬減少。這項(xiàng)研究證明結(jié)直腸癌相關(guān)癌前病變疾病的同時(shí)，腸道菌群也隨之發(fā)生相應(yīng)變化。同時(shí)腸道黏膜菌群失衡會伴隨一些代謝物質(zhì)的變化。Xia等[7]研究顯示，內(nèi)毒素(LPS)、D-乳酸(D-lactate)、二胺氧化酶(DAO)會隨著腸黏膜菌群屏障功能的減弱而迅速增長。相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，腸道內(nèi)有益菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量減少的同時(shí)，LPS、D-lactate與DAO上升。致病菌如腸桿菌與具核梭桿菌增長的同時(shí)，也會導(dǎo)致內(nèi)毒素、D-乳酸和二胺氧化酶增加。在結(jié)直腸癌進(jìn)展中，黏膜菌群是黏膜屏障功能的主要維持者，因此腸道黏膜菌群失衡相關(guān)腸道黏膜屏障受損，主要體現(xiàn)在菌群多樣性、炎癥介質(zhì)與致病性菌株變化這三個(gè)方面。

2.1黏膜菌群多樣性降低 有研究表明，菌群多樣性失衡在結(jié)直腸癌患者中有一定程度的發(fā)生。通常采用平板活菌計(jì)數(shù)法，以活菌形式的雙歧桿菌與大腸桿菌二者數(shù)量的比值(B/E)計(jì)算。該值常以10為臨界線，即健康成人的雙歧桿菌數(shù)目是大腸桿菌數(shù)目的10倍，若數(shù)值小于正常值通常判斷為腸道菌群失衡。目前在結(jié)直腸癌術(shù)后該值倒置現(xiàn)象比較明顯[8]。結(jié)直腸癌患者黏膜菌群同樣發(fā)生與糞便菌群相類似的菌群失衡。Ulrich等[9]研究表明，結(jié)直腸癌患者的黏膜菌群較健康成人黏膜菌群的多樣性有降低。Kristin等[10]在一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中顯示，患結(jié)腸或直腸癌的狗，其糞便與黏膜的菌群在豐度上有明顯改變。盡管患有結(jié)直腸癌的犬類數(shù)量極少，但現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以狗為代表的犬科類動(dòng)物，糞便菌群與腸黏膜菌群的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Chen等[11]研究顯示，一些結(jié)腸癌或直腸癌患者其糞便菌群與黏膜菌群在菌群多樣性以及菌群含量方面都有區(qū)別，腸道黏膜菌群的類別更為龐大，主要表現(xiàn)為厚壁菌群(Phylum Firmicutes)在黏膜菌群中極其豐富，但是變性菌與擬桿菌數(shù)量則相對較少。從整體菌群結(jié)構(gòu)層面分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌或直腸癌患者與健康人群菌群結(jié)構(gòu)基本相似。然而從菌群的多樣性層面分析，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者菌群多樣性較健康人群偏低，乳酸桿菌含量豐富，糞桿菌屬(Bacillus faecalis)含量高，同時(shí)該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌組織與癌旁組織的腸道菌群類似。Burkhardt等[12]通過對54例接受結(jié)直腸癌手術(shù)患者的黏膜菌群分析，發(fā)現(xiàn)癌組織與癌旁組織的微生物總體組成非常相似。Gao等[13]開展了一項(xiàng)關(guān)于在結(jié)腸與直腸不同解剖部位層面上是否癌組織與癌旁組織菌群存在多樣性差異的調(diào)查，結(jié)果顯示癌組織與癌旁組織在菌群多樣性方面沒有差異。上述癌旁組織菌群多樣性與癌組織菌群多樣性并無差異，可能由于在實(shí)驗(yàn)過程中二者位置相對臨近，菌群間差異不明顯，也可以初步假設(shè)癌旁組織的菌群不同程度上受到癌組織菌群的影響。黏膜菌群通過與腸黏膜上皮細(xì)胞直接作用促使結(jié)直腸癌發(fā)生。

2.2炎性因子的變化 許多腫瘤都伴有一定的慢性炎癥，尤其在結(jié)直腸癌的發(fā)展過程中極為顯著。有研究表明在原發(fā)性結(jié)直腸癌中，伴有炎性細(xì)胞與炎性因子的上升[14]。近期有研究顯示，在結(jié)直腸癌的進(jìn)展過程中，F(xiàn).nucleatum可激活E-cadherin信號通路，從而激活T細(xì)胞產(chǎn)生炎性因子，如β-catenin、NF-κB、c-myc和cyclin D1等，這些物質(zhì)會導(dǎo)致結(jié)直腸癌細(xì)胞過度增殖[15]。同時(shí)一些研究者發(fā)現(xiàn)，若結(jié)直腸癌組織受到牛鏈球菌感染，則會高表達(dá)某些促炎介質(zhì)，如IL-1β、白介素8與環(huán)氧化酶2，這些炎癥因子會隨著結(jié)直腸癌的發(fā)生具有不同程度的改變[16]。Iradj等[17]研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比較，結(jié)直腸癌患者發(fā)生菌群失衡的同時(shí)，患者腸黏膜會高表達(dá)白細(xì)胞介素17(Interleukin-17，IL-17)，這是第一次發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者腸道菌群的改變可引起黏膜免疫反應(yīng)，導(dǎo)致相應(yīng)的炎性因子發(fā)生改變。目前研究結(jié)直腸癌患者菌群引起相應(yīng)的炎性因子變化，以采集患者糞便的形式為主，鮮有研究患者黏膜表面的菌群。黏膜菌群直接接觸黏膜上皮，黏膜上皮細(xì)胞的免疫反應(yīng)是否受到黏膜菌群的影響，是今后研究的焦點(diǎn)。

2.3致病性菌株的增加 結(jié)直腸癌發(fā)生的病因尚不清晰，但消化道疾病中，致病性菌株在癌癥的發(fā)展進(jìn)程中起一定的促進(jìn)作用。因此在結(jié)直腸癌患者菌群失衡方面的研究，更加關(guān)注于致病性菌株。Kostic[18]團(tuán)隊(duì)利用最新的全基因組序列檢查技術(shù)，探究結(jié)直腸癌組織與其臨近的癌旁組織是否存在某些豐度上有明顯差異的細(xì)菌種類。結(jié)果顯示，一些結(jié)腸癌與直腸癌患者梭狀桿菌的含量在宏基因組序列中升高。為了驗(yàn)證結(jié)果，其采用qPCR(quantitative real-time PCR)方法對95組直腸癌與結(jié)腸癌患者進(jìn)行具核梭狀桿菌的含量測定，結(jié)果表明與健康人群的腸道組織相比較，結(jié)直腸癌患者的具核梭狀桿菌含量明顯升高。為進(jìn)一步驗(yàn)證其結(jié)果的可靠性，Kostic等[19]又進(jìn)行了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)具核梭狀桿菌飼養(yǎng)組的小鼠與正常進(jìn)食的小鼠相比較，觀察組小鼠惡變的進(jìn)程明顯加快。目前具核梭狀桿菌的致病機(jī)制尚不明確，大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為該菌的黏附與定植、傳播侵入宿主的結(jié)直腸黏膜上皮細(xì)胞是細(xì)菌發(fā)揮毒力作用的重要環(huán)節(jié)。

脆弱類桿菌(Bacteroides fragilis)在人體內(nèi)比較常見的厭氧菌，生理狀態(tài)下，可以維持消化系統(tǒng)的平衡能力。有研究報(bào)道，脆弱類桿菌中有一種產(chǎn)腸毒素的脆弱類桿菌(Enterotoxigenic bacteroides fragilis，ETBF)，其分泌的脆弱類桿菌毒素(Bacteroides fragilis toxin，BFT)可導(dǎo)致成人腹瀉。一些研究表明，在結(jié)直腸癌黏膜上，BF一定程度可以誘導(dǎo)結(jié)直腸上皮細(xì)胞系Caco-2的IL-8與HT29表達(dá)以及激活NF-KB[20]。BF還可以與結(jié)直腸上皮細(xì)胞的HT29/CT相結(jié)合，導(dǎo)致腫瘤抑制蛋白E-cadherin分解，同時(shí)黏附分子β-catenin核移位，T細(xì)胞因子靶基因表達(dá)增加，導(dǎo)致細(xì)胞持續(xù)增殖[21]。除此之外，產(chǎn)腸毒素脆弱類桿菌以分泌脫氧膽酸的形式間接促進(jìn)結(jié)直腸癌發(fā)生。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，脫氧膽酸可誘導(dǎo)結(jié)直癌黏膜體外增殖[22]。目前，對于產(chǎn)腸毒素脆弱類桿菌的研究僅限于基礎(chǔ)的體外細(xì)胞與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以及小樣本的人體研究，其發(fā)病機(jī)制仍需要大樣本的人體數(shù)據(jù)。在研究結(jié)直腸癌患者切口愈合的一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，結(jié)直腸癌患者黏膜組織除正常黏膜菌群外，還存在一些侵入性細(xì)菌如沙氏別樣桿菌(Alistipes shahill)、害肺小桿菌(Dialister pneumosintes)等,這些細(xì)菌影響患者的切口愈合時(shí)間[23]。

3 結(jié)直腸癌黏膜菌群代謝

由于腸道菌群代謝組學(xué)的進(jìn)步，伴隨高通量測序技術(shù)進(jìn)一步發(fā)展，人們越來越關(guān)注腸道菌群與其代謝物的研究。腸道黏膜菌群的致癌機(jī)制尚不明確，但是在結(jié)直腸黏膜癌變進(jìn)展過程中，腸道黏膜菌群的代謝產(chǎn)物影響結(jié)直腸癌的發(fā)生。Petra[24]研究發(fā)現(xiàn)，未消化完全的食物抵達(dá)腸道后，許多人體非內(nèi)在物質(zhì)會在腸道菌群作用下生成，例如食物在與結(jié)直腸癌黏膜相接觸的同時(shí)，受到腸道菌群的作用，生成一些特定物質(zhì)，如SCFAs(Three short-chain fatty acids),該物質(zhì)是腸道中一些富含膳食纖維難以被消化的化合物，經(jīng)腸腔內(nèi)的黏膜菌群作用下發(fā)酵產(chǎn)生。SCFAs的一些分解產(chǎn)物在腸道菌群作用下，產(chǎn)生相應(yīng)的代謝物對腸道黏膜形成一定的保護(hù)作用。一項(xiàng)關(guān)于結(jié)直腸癌患者黏膜菌群相關(guān)性分析研究表明，結(jié)直腸癌患者菌群失衡常表現(xiàn)為SCFAs耗竭，主要因?yàn)橐宜?、丙酸與丁酸的短鏈不飽和脂肪酸被結(jié)腸上皮吸收[25]。有研究顯示，在腸道菌群作用下，SCFAs的分解產(chǎn)物丁酸鹽在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，可導(dǎo)致結(jié)直腸癌上皮凋亡，有效緩解腸道上皮細(xì)胞DNA的氧化損傷，對結(jié)直腸癌細(xì)胞起到抑制作用。還有研究者發(fā)現(xiàn)，結(jié)合型的初級膽汁酸流入腸道后經(jīng)過一系列的反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)榇渭壞懼?，此過程通常受到腸道黏膜菌群的作用，產(chǎn)生活性氧自由基。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為癌癥是正常細(xì)胞異常增生所致，細(xì)胞增生的過程伴隨染色體的復(fù)制，由于腸道中膽汁酸的轉(zhuǎn)變過程中，伴隨產(chǎn)物活性氧自由基產(chǎn)生，導(dǎo)致染色體紊亂，促使結(jié)直腸癌發(fā)生[26]。一些研究者認(rèn)為，富含高蛋白的食物殘?jiān)?jīng)過硫酸鹽還原菌的作用，可以轉(zhuǎn)變?yōu)镠2S,該物質(zhì)具有遺傳毒性的作用，可導(dǎo)致腸道上皮細(xì)胞發(fā)生惡性的轉(zhuǎn)化形成癌變[27]。

4 結(jié)直腸癌黏膜菌群研究方法

隨著科技的進(jìn)步，腸道黏膜菌群的研究方法由傳統(tǒng)直接涂片法與平板活菌計(jì)數(shù)法，轉(zhuǎn)變?yōu)橐苑肿由飳W(xué)技術(shù)為基礎(chǔ)的高通量測序和以宏基因組學(xué)為代表的新型研究技術(shù)。

4.1傳統(tǒng)研究方法

4.1.1細(xì)菌涂片法 細(xì)菌涂片法是較為簡單的一種方法，一般先將細(xì)菌用相應(yīng)的染料染色，然后放置在于顯微鏡下觀察。此方法操作簡便，但是缺點(diǎn)也比較明顯，僅能鑒定其中約1 %的極少數(shù)的細(xì)菌，不能反映人體腸道內(nèi)真正的菌群情況。

4.1.2平板活菌計(jì)數(shù)法 該方法需要結(jié)合一些選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌。在分離細(xì)菌的同時(shí)，依據(jù)各種血清學(xué)、染色等一系列方法對細(xì)菌鑒定，后倍比稀釋，再進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。該方法以研究細(xì)菌微生態(tài)三定原則(定位，定性，定量)的角度分析，優(yōu)于涂片法，在原籍菌和過路菌的定量變化方面比較明顯。但是該方法最大的缺點(diǎn)在于需要耗費(fèi)大量的時(shí)間去培養(yǎng)細(xì)菌，對于廣大一線臨床醫(yī)生而言，相對耗時(shí)、耗力。

4.2現(xiàn)代研究方法

4.2.1高通量測序 目前研究腸道黏膜菌群最廣泛的研究方法是高通量測序的方法。Nelson等[28]在文章中講述該方法針對特定長度的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序，主要測定16SrRNA,因?yàn)榇蠖鄶?shù)細(xì)菌包含16SrRNA，并且以操縱子的形式存在。目前臨床研究者廣泛采用第二代高通量測序技術(shù)，可以獲取無法分離培養(yǎng)的菌株，對腸道菌群進(jìn)行多樣性的研究，但是此方法容易受到樣品處理的影響以及分析方法不夠全面的限制，在反應(yīng)樣品中的菌群結(jié)構(gòu)方面較差[29]。

4.2.2宏基因組的衍生 由于測序技術(shù)的快速進(jìn)步，費(fèi)用大幅降低，研究員越來越傾向于采用宏基因組的方法研究結(jié)直腸癌黏膜菌群的功能與分類，該方法可以測定任何菌群的所有基因[30]。但是該技術(shù)無法區(qū)分死亡的細(xì)菌與活菌[31]。

4.2.3其他方法 除上述菌群檢查方法外，在腸道黏膜菌群研究領(lǐng)域也經(jīng)常涉及凝膠電泳技術(shù)，其中變性梯度與溫度梯度凝膠電泳兩種技術(shù)在腸道黏膜菌群的檢查中最為常用。方法基于DNA指紋圖譜方法，利用DNA片段在特定溫度下溶解的性質(zhì)使其分離的一種凝膠系統(tǒng)，將DNA序列中排布有差異的DNA分離，在聚丙烯酰胺凝膠的不同位置留下不同分子標(biāo)記的菌群，電泳圖譜上的印記則顯示腸道菌群的組成結(jié)構(gòu)。16SrRNA-PCR聯(lián)合DGGE是目前較為常用的腸道菌群狀況的一種檢測方法。

5 益生菌群在結(jié)直腸癌黏膜上皮的作用

大量研究顯示，在腸道黏膜上，某些益生菌(Probiotics)可以改善腸道功能，促進(jìn)人體健康，例如雙歧桿菌，乳酸桿菌等。Enck等[32]研究顯示，由于年齡增長，某些腸道菌群的數(shù)量隨之增加，例如大腸桿菌等，而某些菌群則隨年齡增長而減少，例如擬桿菌屬等。但是雙歧桿菌與乳酸桿菌卻依然保持穩(wěn)定，可能因?yàn)槿梭w機(jī)能隨年齡衰退時(shí)，益生菌對保持人體健康起關(guān)鍵作用。有研究表明，在結(jié)直腸癌發(fā)生﹑發(fā)展中，益生菌發(fā)揮一些抑制效應(yīng)。針對性研究益生菌在結(jié)直腸癌中作用的流行病學(xué)調(diào)查仍較少。一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，在動(dòng)物的進(jìn)食過程中外源地補(bǔ)充益生菌能影響腸道的菌群，可以使腸桿菌減少，乳桿菌增多，同時(shí)對結(jié)直腸癌的發(fā)生起到抑制作用[33]。Ashley等[34]探索一項(xiàng)外源性進(jìn)食有益菌對結(jié)直腸癌患者黏膜上皮菌群影響的研究中發(fā)現(xiàn)，接受有益菌干預(yù)的結(jié)直腸癌患者腸道內(nèi)產(chǎn)丁酸鹽細(xì)菌含量升高。丁酸鹽是短鏈不飽和脂肪酸的一種類型，對結(jié)直腸癌上皮細(xì)胞癌變起到一定的抑制作用。同時(shí)最新的一項(xiàng)基于使用益生菌制劑對早期結(jié)直腸癌根治術(shù)的作用研究顯示，使用益生菌制劑可提高患者免疫系統(tǒng)的活力，一些免疫細(xì)胞如自然殺傷細(xì)胞、CD4+與CD8+細(xì)胞的數(shù)量提高，并且一些腸道黏膜屏障功能評價(jià)指標(biāo)如二胺氧化酶、血漿D-乳酸、內(nèi)毒素與腸道脂肪酸結(jié)合蛋白的水平也有一定程度的下降，顯示腸道益生菌制劑對腸道黏膜穩(wěn)定性的維持有促進(jìn)作用。該實(shí)驗(yàn)采用最新的16sDNA高通量測序技術(shù)，發(fā)現(xiàn)在屬水平上，使用益生菌制劑的患者有益菌相對豐度較之前有提高，同時(shí)某些條件致病菌如糞腸球菌及葡萄球菌屬降低[35]。

但是目前益生菌抑制結(jié)直腸癌發(fā)生的機(jī)制尚不明確，有幾種學(xué)說被廣為接受。第一種假說認(rèn)為，益生菌群可以抑制腸上皮異形隱窩的形成，而異性隱窩則是結(jié)直腸癌形成的早期形式，其與結(jié)直腸高分化腺瘤的發(fā)生有密切聯(lián)系。在一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，顯示嗜酸性乳桿菌可以減少異性隱窩的數(shù)量[36]。第二種假說認(rèn)為，結(jié)直腸黏膜上的有益菌群可增強(qiáng)腸黏膜屏障功能，結(jié)直腸黏膜屏障受損則是結(jié)直腸癌發(fā)展階段的重要變化。腸道黏膜的益生菌群有穩(wěn)定腸黏膜屏障的功能，其中在腸黏膜表面的黏液層有重要作用，該黏液層對腸黏膜有保護(hù)作用。Sana等[37]研究顯示腸道黏膜菌群與腸道黏液間的相互作用共同維持人類健康。一方面，對于腸道黏膜菌群而言，腸道黏液層可作為細(xì)菌的主要碳水化合物來源，另一方面，腸道菌群也會一定程度上影響腸道的黏液層。腸道黏液層的構(gòu)成主要為黏液素，而黏膜菌群憑借分解或者合成黏液素來改變黏液層的結(jié)構(gòu)，因此腸道黏膜菌群的失衡會影響腸道黏液素的結(jié)構(gòu)，從而進(jìn)一步減弱黏液層結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，加劇腸道黏膜屏障的損傷。在一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，腸道的黏膜菌群失衡加劇腸道黏液層的結(jié)構(gòu)紊亂，導(dǎo)致結(jié)直腸癌發(fā)生。黏液層中主要成分是黏液素2(Mucin2，MUC2)。研究表明，小鼠MUC2缺陷導(dǎo)致結(jié)直腸癌發(fā)生[38]。綜上所述，腸道黏膜益生菌對結(jié)直腸黏膜上皮有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制在未來會有更深入研究。

6 研究展望

黏膜菌群失衡導(dǎo)致結(jié)直腸癌發(fā)生的機(jī)制尚不明確，黏膜菌群與結(jié)直腸癌的關(guān)聯(lián)仍有大量未知領(lǐng)域有待研究。隨著人類對腸道菌群分離技術(shù)的提高，腸道黏膜菌群分析將會不斷深入。目前，腸黏膜菌群的研究僅限于初步對已知菌株的分離及含量的鑒定。腸黏膜菌群相比以糞便為代表的腸道菌群，在反應(yīng)腸道菌群方面更加真實(shí)，但該方法屬于有創(chuàng)性檢查，樣本收集難度大，菌群代謝產(chǎn)物在結(jié)直腸癌上皮癌變過程中的作用僅停留在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中。下一步希望研究關(guān)注人體的臨床結(jié)果，通過對疑似結(jié)直腸癌患者，常規(guī)行電子腸鏡檢查獲取樣本，克服樣本量較少的問題，從而進(jìn)一步獲取精確結(jié)果。同時(shí)其研究結(jié)果將有利于指導(dǎo)結(jié)直腸癌的預(yù)防、診療與預(yù)后評估。