王晶晶，周雨萌，周曉琪，于佳圻，李銘，楊威，徐闖，張冰冰*

（1．黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，黑龍江大慶 163319；2．黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，黑龍江大慶 163319）

肝臟是生物體的中心器官，可調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝平衡。肝臟除具有代謝和解毒作用外，也是一個(gè)重要的免疫器官，含有大量的免疫細(xì)胞[1-2]。肝臟的高度血管化特性，加之其有孔毛細(xì)血管樣血管（稱為竇狀管）中的血流減少，構(gòu)成了一個(gè)獨(dú)特的環(huán)境，可使免疫細(xì)胞最大限度地暴露于血源性和腸道源性病原體[3]。肝臟的免疫監(jiān)測(cè)涉及傳統(tǒng)的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞，其中CD4+T細(xì)胞的數(shù)量低于CD8+T細(xì)胞[4-5]，主要參與機(jī)體的細(xì)胞免疫，控制和清除感染，是機(jī)體抵抗感染疾病的重要屏障。文章主要簡(jiǎn)述了肝臟疾病與肝臟微環(huán)境中CD4+T細(xì)胞亞群之間的聯(lián)系。

1 CD4+T細(xì)胞的分類及功能

1.1 CD4+T細(xì)胞的分類

CD4+T細(xì)胞的亞群分為輔助性T細(xì)胞（Th）和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）。其中Th細(xì)胞又被分類為輔助性T細(xì)胞1（Th1）、輔助性T細(xì)胞2（Th2）和輔助性T細(xì)胞17（Th17）細(xì)胞亞群。

1.2 CD4+T細(xì)胞的功能

細(xì)胞免疫由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)宿主防御，是一種防御細(xì)胞內(nèi)吞噬微生物的機(jī)制。T淋巴細(xì)胞分為CD4+T細(xì)胞亞群和CD8+T細(xì)胞亞群；CD4+T細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)的指揮中心，負(fù)責(zé)消除和控制各種感染并對(duì)抗入侵的病菌[6]。CD4+T細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)時(shí)，涉及淋巴器官中細(xì)胞的初始激活，以產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞和記憶細(xì)胞；效應(yīng)細(xì)胞遷移至感染部位，消除感染性病原體。

Th細(xì)胞是適應(yīng)性免疫反應(yīng)和炎癥性疾病的重要調(diào)節(jié)細(xì)胞。被專門的抗原呈遞細(xì)胞（APC）激活后，CD4+T細(xì)胞亞群是細(xì)胞因子分泌和免疫調(diào)節(jié)功能的基礎(chǔ)。已有關(guān)于分化為不同細(xì)胞譜系Th細(xì)胞的研究結(jié)果表明，Th細(xì)胞譜系由細(xì)胞因子環(huán)境決定，活化APC產(chǎn)生的白細(xì)胞介素-12（IL-12）在Th1細(xì)胞分化中起到關(guān)鍵作用[7]，活化T細(xì)胞或先天免疫細(xì)胞可產(chǎn)生白細(xì)胞介素-4（IL-4），驅(qū)動(dòng)Th2細(xì)胞分化[8]。Th17細(xì)胞的發(fā)育和功能受白細(xì)胞介素-23（IL-23）調(diào)控，Treg細(xì)胞的分化則在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）和白細(xì)胞介素-2（IL-2）的誘導(dǎo)下完成。

Th1細(xì)胞是構(gòu)成Th細(xì)胞的一個(gè)亞群。與免疫反應(yīng)的許多其他特征一樣，Th1極化受樹突狀細(xì)胞（DC）調(diào)節(jié)。在穩(wěn)定狀態(tài)下，未激活的DC向T細(xì)胞呈遞自身抗原，導(dǎo)致耐受性。一旦被激活，載有抗原的DC即可啟動(dòng)抗原特異性免疫，導(dǎo)致T細(xì)胞增殖并分化為輔助細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞。Th1細(xì)胞產(chǎn)生干擾素-γ（IFN-γ），在細(xì)胞介導(dǎo)免疫細(xì)胞內(nèi)病原體中發(fā)揮重要作用。

Th2細(xì)胞產(chǎn)生的IL-4、白細(xì)胞介素-5（IL-5）和白細(xì)胞介素-13（IL-13）可參與體液免疫和過(guò)敏反應(yīng)。Th2細(xì)胞通過(guò)白細(xì)胞介素-25（IL-25）、白細(xì)胞介素-33（IL-33）和胸腺基質(zhì)淋巴生成素（TSLP）細(xì)胞因子調(diào)控，在癌癥的治療中發(fā)揮重要作用。當(dāng)CD4+T淋巴細(xì)胞存在于Th2型腫瘤微環(huán)境時(shí)，可通過(guò)調(diào)節(jié)TAMs的腫瘤特性促進(jìn)轉(zhuǎn)移，而非通過(guò)參與細(xì)胞毒性機(jī)制根除惡性細(xì)胞。上述療法中和了腫瘤微環(huán)境中適應(yīng)性和固有免疫細(xì)胞的腫瘤特性，與增強(qiáng)抗腫瘤免疫的細(xì)胞毒性藥物聯(lián)合使用時(shí)，能夠延長(zhǎng)晚期癌患者的生存時(shí)間。來(lái)自CD4+T細(xì)胞的Th2細(xì)胞因子對(duì)腫瘤發(fā)展和進(jìn)展的影響可能受器官微環(huán)境或腫瘤微環(huán)境中IL-4或IL-13受體狀態(tài)的調(diào)節(jié)。

Th17細(xì)胞產(chǎn)生的白細(xì)胞介素-17（IL-17）、白細(xì)胞介素-17F（IL-17F）和白細(xì)胞介素-22（IL-22）可促進(jìn)組織炎癥。IL-23可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)并防止免疫監(jiān)視，為Th17細(xì)胞發(fā)育后期必需，且具有擴(kuò)增Th17細(xì)胞并促進(jìn)其功能的作用，故在Th17細(xì)胞內(nèi)大量表達(dá)。IL-17可通過(guò)調(diào)節(jié)趨化因子表達(dá)發(fā)揮促炎的作用[9]，誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞等產(chǎn)生白細(xì)胞介素-6（IL-6）、粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）和幾種趨化因子。Th17細(xì)胞在維持慢性炎癥和塑造腫瘤發(fā)展所必需的微環(huán)境方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。雖然已有針對(duì)Th17細(xì)胞的研究，但Th17細(xì)胞與肝臟疾病的關(guān)系及其在免疫中的作用仍待進(jìn)一步探討。

Treg細(xì)胞在控制體內(nèi)自身免疫反應(yīng)性及其他細(xì)胞的免疫應(yīng)答、幫助維持機(jī)體的免疫平衡和預(yù)防自身免疫病等方面發(fā)揮重要作用。Treg細(xì)胞作為構(gòu)成CD4+T細(xì)胞的一個(gè)亞群，包括CD4+CD25+亞群等[10]。已有研究表明，CD4+CD25+Treg細(xì)胞的叉狀核轉(zhuǎn)錄因子3（FoxP3）及其細(xì)胞表面的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4（CTLA-4）表達(dá)水平發(fā)生變化時(shí)，Treg細(xì)胞功能的發(fā)揮受到影響，進(jìn)而影響機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能。Foxp3被確定為對(duì)Treg的功能特性至關(guān)重要的譜系特異性因子[11-12]，其穩(wěn)定性和連續(xù)基因表達(dá)對(duì)維持Treg的功能至關(guān)重要。胸腺中Treg的發(fā)育過(guò)程涉及一個(gè)活躍、漸進(jìn)的去甲基化過(guò)程，自Foxp3誘導(dǎo)開始，于進(jìn)入外周組織后完成。

2 CD4+T細(xì)胞亞群與肝臟疾病

奶牛脂肪肝是一種能量代謝性疾病，多發(fā)生于圍產(chǎn)期，極大地危害奶牛的健康。產(chǎn)犢后，奶牛的采食量減少，泌乳量增加，此時(shí)體內(nèi)乳糖的消耗導(dǎo)致奶牛糖供應(yīng)不足，促進(jìn)肝臟脂肪動(dòng)員，非酯化脂肪酸顯著增加，奶牛易患脂肪肝[13]。脂肪肝可破壞圍產(chǎn)期奶牛的免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致生育時(shí)間推遲，提高感染乳腺炎、子宮內(nèi)膜炎的概率。

奶牛脂肪肝是揭示非酒精性脂肪肝（NAFLD）發(fā)病機(jī)制的良好動(dòng)物模型。肝臟脂質(zhì)積累通過(guò)改變肝臟合成和降解，參與免疫反應(yīng)的化合物的能力，進(jìn)而直接影響免疫反應(yīng)，還可通過(guò)改變具有免疫功能的代謝物間接降低免疫反應(yīng)[14]。目前，奶牛泌乳期脂肪肝的防治一般采用產(chǎn)前減少精料飼喂量。CD4+T細(xì)胞在維持慢性炎癥和形成腫瘤發(fā)展所必需的微環(huán)境方面具有關(guān)鍵功能，但CD4+T細(xì)胞亞群在奶牛肝臟免疫相關(guān)疾病中的相關(guān)報(bào)道甚少，主要聚焦于小鼠模型和人體。

2.1 CD4+T細(xì)胞亞群與非酒精性脂肪性肝炎

NAFLD是由除酒精外的其他因素造成的肝臟脂肪性病變，表現(xiàn)為脂質(zhì)代謝紊亂，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞聚集甘油三酯和膽固醇引起的脂肪肝變性，產(chǎn)生胰島素抵抗，導(dǎo)致血清中游離脂肪酸的含量增加，肝臟吸取血液中的游離脂肪酸進(jìn)行脂質(zhì)合成或直接代謝。當(dāng)脂質(zhì)合成與脂質(zhì)氧化長(zhǎng)期不平衡時(shí)，脂質(zhì)長(zhǎng)期累積導(dǎo)致脂質(zhì)變性甚至脂毒性[15]。免疫系統(tǒng)是NAFLD進(jìn)展的主要驅(qū)動(dòng)因素之一，肝臟的免疫微環(huán)境遭到破壞[14]。在患有NAFLD的小鼠模型中，由于亞油酸積累引起脂質(zhì)代謝失調(diào)，導(dǎo)致CD4+T淋巴細(xì)胞死亡，從而改變了肝臟內(nèi)的免疫系統(tǒng)平衡并促進(jìn)肝損傷[16]。NAFLD的肝臟脂肪變性導(dǎo)致釋放到肝臟中的游離脂肪酸顯著增加，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，引起肝細(xì)胞損傷并激活肝巨噬細(xì)胞。Th17細(xì)胞在NAFLD發(fā)病機(jī)制中起到關(guān)鍵作用[17]，Th17細(xì)胞數(shù)與非酒精性脂肪性肝炎（NASH）發(fā)病呈正相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，益生菌能夠明顯緩解小鼠的NAFLD癥狀，降低肝臟中甘油三酯的含量，緩解脂肪變性[18]。白及寡糖由甘露糖和葡萄糖組成，代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，白及寡糖可顯著調(diào)節(jié)高脂飲食（HFD）喂養(yǎng)小鼠的脂肪酸、花生四烯酸和其他相關(guān)代謝物的肝臟代謝，同時(shí)減少肝臟組織中的脂質(zhì)積累和纖維化，表明白及寡糖具有作為功能性食品治療NAFLD的巨大潛力[19]。

NAFLD是世界上最常見的慢性肝病，并可能演變?yōu)镹ASH。NASH存在炎癥變化和肝細(xì)胞損傷，代表了一種更嚴(yán)重的疾病。除了脂質(zhì)介導(dǎo)的應(yīng)激和肝細(xì)胞死亡，NASH期間的肝臟環(huán)境也會(huì)導(dǎo)致患者和小鼠模型的氧化應(yīng)激[20-21]。炎癥在上述過(guò)程中的重要作用表明，富含免疫細(xì)胞的肝臟環(huán)境可調(diào)節(jié)NASH的發(fā)作和嚴(yán)重程度。肝臟免疫細(xì)胞庫(kù)在NASH期間被重塑，并參與促進(jìn)肝損傷和肝纖維化不受控制的炎癥環(huán)境，進(jìn)一步加重疾病的程度。傳統(tǒng)的CD4+Th細(xì)胞與特定DC子集和細(xì)胞因子環(huán)境的相互作用決定細(xì)胞極化為不同的Th細(xì)胞[22-23]。

在NASH小鼠模型中，缺乏Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IFN-γ的小鼠可顯著防止肝損傷和肝纖維化[24]。IFN-γ誘導(dǎo)的趨化因子CXCL10也參與了NASH發(fā)病機(jī)制，CXCL10缺失或抗體介導(dǎo)的CXCL10可中和限制小鼠脂肪變性、肝損傷和纖維化[25]；CXCR3缺乏同時(shí)也影響了小鼠NASH發(fā)病機(jī)制[26]。因此，CXCL10-CXCR3信號(hào)減弱可以部分解釋IFN-γ缺乏對(duì)NASH的影響。

Th17細(xì)胞具有加劇病原體引起炎癥性疾病的功能[27]。有研究發(fā)現(xiàn)，采用黃芩湯干預(yù)的NASH大鼠血脂、肝功能和炎性因子水平均得到改善，肝組織的脂肪變性和炎性浸潤(rùn)亦得到改善，表明黃芩湯對(duì)NASH大鼠具有明確的治療作用[28]。牛初乳對(duì)多種慢性感染均具有治療作用，如口服超免疫初乳制劑可以緩解與NASH相關(guān)的慢性炎癥、肝損傷以及胰島素抵抗[29]。

2.2 CD4+T細(xì)胞亞群與慢性丙型肝炎

慢性丙型肝炎（CHC）是一種進(jìn)行性疾病，可導(dǎo)致肝硬化或肝細(xì)胞癌[30]。丙型肝炎病毒（HCV）感染與脂質(zhì)代謝異常存在非常強(qiáng)的相關(guān)性，HCV感染中的脂代謝異常是丙型肝炎致病機(jī)制之一。肝臟微環(huán)境極其復(fù)雜，具有大量的免疫細(xì)胞群，可在病毒消除方面發(fā)揮核心作用[31]。在HCV感染的過(guò)程中，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）是控制HCV感染的重要效應(yīng)因子，通過(guò)釋放細(xì)胞毒性顆粒和表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞死亡受體的配體，參與感染細(xì)胞的清除。Th細(xì)胞通過(guò)增強(qiáng)CTL反應(yīng)和抗原特異性B淋巴細(xì)胞作為適應(yīng)性免疫反應(yīng)的中樞調(diào)節(jié)細(xì)胞，改變了病毒功能，同時(shí)還降低了增殖活性。此外，體外研究表明，Th細(xì)胞的分化階段不確定，是對(duì)微環(huán)境變化的靈活反應(yīng)[32]。免疫反應(yīng)具有雙重作用，可評(píng)價(jià)CHC中病毒和肝臟免疫微環(huán)境間潛在的相互作用。臨床研究表明，茵陳蒿湯加減在改善濕熱蘊(yùn)結(jié)型病毒性肝炎方面卓有成效[33]。在茵陳蒿湯的基礎(chǔ)上加茯苓、豬苓、柴胡及虎杖等藥物制得加味利膽退黃湯，在治療慢性丙型肝炎方面效果顯著，且不良反應(yīng)較少[34]。

3 結(jié)論

在肝臟微環(huán)境的綜合研究中，考慮肝臟內(nèi)細(xì)胞因子和淋巴細(xì)胞群體之間的相互作用非常重要。免疫與肝臟疾病間的聯(lián)系愈發(fā)緊密，肝臟受到不同損傷時(shí)，其微環(huán)境中免疫細(xì)胞的種類與數(shù)量不盡相同。目前，利用肝臟微環(huán)境中免疫細(xì)胞作為治療手段尚不常見，關(guān)于利用肝臟微環(huán)境中免疫細(xì)胞的變化治療肝臟疾病仍待更深入的研究。