葉裕香

（福建省寧德市動物疫病預防控制中心，福建 寧德 352100）

豬偽狂犬?。≒orcine pseudorabies）是一種急性、高度接觸性傳染病，我國將其列為二類動物疫病。該病由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引發(fā)，各階段豬群均可感染：新生仔豬主要侵害神經(jīng)系統(tǒng)以及消化系統(tǒng)；妊娠母豬主要引起流產(chǎn)、死胎，公豬主要引起繁殖障礙；妊娠母豬及公豬均會出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)臨診癥狀。豬偽狂犬病屬于免疫抑制性疾病，感染后的豬不僅長期帶毒、排毒，還易并發(fā)感染其他疾病，嚴重危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，是當前養(yǎng)豬行業(yè)的重大疫病之一。

為了解寧德地區(qū)規(guī)?；i場豬偽狂犬病感染情況，本文對2019～2021年寧德地區(qū)部分規(guī)?；i場開展豬偽狂犬病流行病學調(diào)查，采集樣品如下：規(guī)模場血清樣品及環(huán)境拭子樣品各3240（頭）份，屠宰場組織樣品1080份、全血樣品1350份、環(huán)境拭子樣品1620份；分別對以上樣品進行血清學、病原學檢測。之后，對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計、分析，得到我市豬偽狂犬病流行規(guī)律，為我市豬場防制豬偽狂犬病及主管部門制定科學防控措施提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源（1）血清學樣品 采集對象為寧德市9個縣（市、區(qū)）的27個規(guī)模養(yǎng)殖場，平均每個養(yǎng)殖場采集血清樣品、環(huán)境拭子樣品各20份，2019～2021年共采集6次，合計采集血清樣品、環(huán)境拭子樣品3240（頭）份。

（2）病原學樣品 采集對象為寧德市9個縣（市、區(qū)）的9個定點屠宰場：每個屠宰場采集組織樣品、全血樣品及環(huán)境拭子樣品20～30份，2019～2021年共采集6次，合計采集組織樣品1080份、全血樣品1350份、環(huán)境拭子樣品1620份。

1.1.2 主要試劑PRV（gB）及PRV（gE）抗體ELISA檢測試劑盒購自愛德士生物科技有限公司，PRV熒光PCR檢測試劑盒購自北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司，其他化學試劑、耗材和藥品主要購自生工生物工程(上海)股份有限公司。

1.1.3 主要設備 高速臺式冷凍離心機、Brand可調(diào)微量移液器、Tecan infinite F50酶標儀、電熱恒溫培養(yǎng)箱、QIAGEN TissueLyserⅡ、SW-CJ凈化工作臺、奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀、Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR Systems。

1.2 方 法

1.2.1 PRV（gB）及PRV（gE）抗體ELISA檢測 按照愛德士生物科技有限公司試劑盒使用說明書所提供的方法進行檢測和結(jié)果判斷。

1.2.2 PRV病原檢測

1.2.2.1 核酸提取 使用奧盛Auto-Pure32A核酸提取儀，結(jié)合試劑盒使用說明書，自動提取RNA。

1.2.2.2 病毒擴增 使用北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司PRV熒光PCR檢測試劑盒進行擴增，按照試劑盒使用說明書進行操作及結(jié)果判斷。

2 結(jié)果

本次流行病學調(diào)查，主要是對2019～2021年寧德地區(qū)部分規(guī)?；i場、屠宰場所采集的血清、組織、環(huán)境拭子等樣品采用ELISA方法和熒光定量PCR方法分別進行抗體和病原檢測，檢測結(jié)果如下。

2.1 規(guī)模養(yǎng)殖場監(jiān)測情況

2019～2021年共檢測規(guī)模養(yǎng)殖場162個（次）：檢測豬血清樣品3240頭份，檢得豬偽狂犬病gB抗體平均個體陽性率83.86%，gE抗體平均個體陽性率7.93%，檢出gE抗體陽性場群82個（次），gE抗體場群陽性率為50.62%；檢測豬場環(huán)境拭子樣品3240份，檢出陽性樣品108份，檢出陽性場群60個（次），平均個體陽性率和場群陽性率分別為3.33%和37.04%。（見表1和表2）。

表1 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病血清學調(diào)查統(tǒng)計表

表2 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病病原學調(diào)查統(tǒng)計表

2.2 屠宰場點監(jiān)測情況

2019～2021年共檢測屠宰場點54個（次）：檢測組織樣品1080份，檢出陽性樣品23份，陽性場點22個（次），平均個體陽性率和場點陽性率分別為2.13%和40.74%；檢測全血樣品1350份，檢出陽性樣品14份，陽性場點14個（次），平均個體陽性率和場點陽性率分別為1.04%和25.93%；檢測環(huán)境拭子樣品1620份，檢出陽性樣品63份，陽性場點52個（次），平均個體陽性率和場點陽性率分別為3.89%和96.30%（見表3）。

表3 2019～2021年屠宰場點豬偽狂犬病病原學調(diào)查統(tǒng)計表

3 分析

3.1 規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病血清學調(diào)查

經(jīng)觀察可知，2019～2021年寧德地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場豬偽狂犬病血清樣品gB抗體陽性率均在80%以上，2020年較2019年陽性率明顯上升，但2021年有所回落，呈現(xiàn)出先升后降的趨勢。gE抗體個體陽性率均在10%以內(nèi)，2020年較2019年陽性率有所下降，但2021年則又上升至8.52%；gE抗體場陽性率均在50%左右，與個體陽性率相似，也呈現(xiàn)出先降后升趨勢，2021年場陽性率甚至超過2019年（見圖1）。

圖1 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病血清學陽性率

3.2 規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病病原學調(diào)查

經(jīng)觀察可知，2019～2021年寧德地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場豬偽狂犬病環(huán)境拭子樣品個體陽性率在2%～4%，較平穩(wěn)，上下起伏波動不大；2019年場陽性率為35.19%，2020年有些許下降，降至33.33%，但2021年又急劇上升。病原學個體陽性率及場陽性率都呈現(xiàn)出先升后降的趨勢，且2021年二者都超過2019年（見圖2）。

圖2 2019～2021年規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病病原學陽性率

3.3 屠宰場點豬偽狂犬病病原學調(diào)查

經(jīng)分析，2019～2021年寧德地區(qū)屠宰場點豬偽狂犬病病原學陽性率見圖3～4。可知，不論是個體陽性率還是場陽性率，都表現(xiàn)出相同的流行趨勢，即：組織樣品與環(huán)境拭子樣品的流行趨勢都表現(xiàn)為先降低后升高，而全血樣品的流行趨勢則表現(xiàn)為逐年升高。

圖3 2019～2021年屠宰場點豬偽狂犬病病原學個體陽性率

同時，通過觀察可以發(fā)現(xiàn)，屠宰場點樣品的個體陽性率整體處于較低水平：環(huán)境拭子個體陽性率為3%～5%、組織樣品個體陽性率為1%～3%、全血樣品個體陽性率則在2%以內(nèi)。而屠宰場點樣品的場陽性率整體處于較高水平：環(huán)境拭子場陽性率最高，均在80%以上，其中2019年、2021年的環(huán)境拭子場陽性率均達100%；組織樣品場陽性率次之，為25%～50%；全血樣品場陽性率相對最低，為15%～40%。

圖4 2019～2021年屠宰場點豬偽狂犬病病原學場陽性率

4 討論

上述部分規(guī)?；B(yǎng)殖場豬偽狂犬病gB抗體檢測結(jié)果表明，寧德市大部分規(guī)模養(yǎng)殖場都有免疫豬偽狂犬病疫苗，且免疫效果較好，豬群抗體水平整體較高，豬能夠獲得較好的免疫保護，避免了因該病而引發(fā)大規(guī)模疫情的可能。gE抗體檢測結(jié)果表明，在寧德市養(yǎng)殖場當中普遍存在偽狂犬病野毒感染現(xiàn)象，雖然個體陽性率均在10%以下，相對較低，但場陽性率卻達50%左右；病原學檢測結(jié)果進一步驗證了偽狂犬病病毒在寧德市規(guī)模養(yǎng)殖場中普遍存在的現(xiàn)狀。

根據(jù)2017～2019年寧德地區(qū)豬偽狂犬病流行情況調(diào)查，結(jié)合此次調(diào)查結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)gB抗體陽性率于2017～2020年，一直高于80%，且呈現(xiàn)逐年升高趨勢，但2021年則出現(xiàn)下降的現(xiàn)象；而gE抗體陽性率則正好相反，2017～2020年逐年降低，但2021年則升高。之所以出現(xiàn)上述現(xiàn)象，原因如下：（1）寧德市于2016年開始大力開展豬偽狂犬病凈化宣傳、推廣及試點示范工作，經(jīng)過幾年推廣，豬偽狂犬病gB抗體陽性率升高、gE抗體陽性率降低，成效顯著；（2）2018年8月非洲豬瘟傳入我國后，寧德市各養(yǎng)殖場主生物安全意識有所提高，生物安全措施到位，進一步鞏固了所取得的成效；（3）自2021年初起，生豬價格持續(xù)走低，到2021年6月，豬價開始跌破成本線，而大豆、玉米等卻因動蕩的國際局勢、價格飆升，價格使得養(yǎng)殖場主入不敷出，或多或少的降低了生物安全意識，進而出現(xiàn)安全漏洞，最終導致2021年gB抗體陽性率降低、gE抗體陽性率升高。

屠宰場點豬偽狂犬病病原學檢測結(jié)果表明，寧德市屠宰場點帶豬偽狂犬病毒的形勢極其嚴峻；特別是環(huán)境拭子樣品的場陽性率，最高者可達100%，這需要各從業(yè)者及相關(guān)人員引起高度重視。屠宰場點環(huán)境拭子樣品的陽性率之所以居高不下，主要原有：（1）由于豬偽狂犬病作為二類動物疫病，其傳染性、危害性與非洲豬瘟、口蹄疫等重大動物疫病相比要弱很多，屠宰場點工作人員對其認知度要少很多、重視程度也自然不夠，使得該病在屠宰場點檢出率較高。（2）經(jīng)過對各屠宰場點實地調(diào)研可知，部分場點存在待宰間豬壓欄隔夜、屠宰間消洗不徹底及衛(wèi)生死角多等現(xiàn)象，這自然使得所采樣品的陽性檢出率極高。

本流行病學調(diào)查報告通過對寧德市部分規(guī)模養(yǎng)殖場的血清、環(huán)境拭子及屠宰場的組織、全血、環(huán)境拭子等樣品進行檢測，再對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計、分析，得到寧德市2019～2021年的流行現(xiàn)狀，并對結(jié)果加以討論，為寧德市豬偽狂犬病的防制提供了依據(jù)。同時，養(yǎng)殖場主等從業(yè)者可以根據(jù)以上豬偽狂犬病的抗原、抗體消長規(guī)律制定或調(diào)整相應的免疫程序，以保障豬健康，進而保持豬場持續(xù)盈利。