韋朝晗，丁梓蕎，張曉瓊，雍土瑩，甘璐，楊祥良

(1.華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，武漢 430074；2.國(guó)家納米藥物工程技術(shù)研究中心，武漢 430074)

腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophages，TAMs)占實(shí)體腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞的約50%，是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分[1-3]。組織固有巨噬細(xì)胞、血液中循環(huán)的單核細(xì)胞(monocytes)和單核型骨髓來(lái)源抑制性細(xì)胞(monocytes myeloid derived suppressor cells，M-MDSCs)進(jìn)入腫瘤組織，并在腫瘤微環(huán)境的誘導(dǎo)下分化成TAMs[4]。按照其功能和表型可分為兩大類(lèi)，即經(jīng)典活化型巨噬細(xì)胞(M1型)和替代活化型巨噬細(xì)胞(M2型)[5-6]。M1型TAMs具有強(qiáng)的抗原呈遞，吞噬腫瘤細(xì)胞，分泌促炎細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-12(IL-12)，釋放活性氧和一氧化氮等能力，發(fā)揮抗腫瘤作用[1-4]。M2型TAMs則通過(guò)釋放轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和IL-10等，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、耐藥、免疫逃逸和血管新生，發(fā)揮促腫瘤作用[1-4]。目前針對(duì)TAMs的治療主要有抑制TAMs招募、清除TAMs、逆極化TAMs及增強(qiáng)TAMs吞噬能力等方式[7-8]。但是，如何將發(fā)揮這些作用的效應(yīng)分子高效靶向遞送至TAMs，減少脫靶帶來(lái)的正常細(xì)胞和機(jī)體損傷，仍然是一個(gè)很大的挑戰(zhàn)。納米藥物是將藥物包封于納米尺度的微粒中，通過(guò)修飾、優(yōu)化，可以調(diào)節(jié)藥物釋放速度、增加特異性靶向、改變藥物在體內(nèi)的分布、提高藥物生物利用度等[9-12]。因此，利用納米藥物靶向調(diào)控TAMs，減輕不良反應(yīng)，提高腫瘤治療效果，是一個(gè)理想的技術(shù)手段[13-18]。筆者在本文對(duì)納米藥物靶向TAMs的策略進(jìn)行綜述。

1 抑制TAMs招募

負(fù)載CCR2 siRNA的納米粒通過(guò)靶向清除Ly6Chigh單核細(xì)胞，抑制TAMs招募，降低腫瘤體積[19](*P<0.05)。

2 靶向清除TAMs

靶向血液或骨髓中的單核細(xì)胞雖然能夠抑制巨噬細(xì)胞的招募，但是也會(huì)對(duì)機(jī)體正常單核細(xì)胞的功能產(chǎn)生影響，導(dǎo)致毒副作用，影響腫瘤治療效果[7]。因此，阻斷巨噬細(xì)胞活性最徹底的方法是清除腫瘤組織內(nèi)巨噬細(xì)胞。

研究發(fā)現(xiàn)，雙膦酸鹽，如唑來(lái)膦酸或氯磷酸鹽對(duì)巨噬細(xì)胞具有特異毒性，但是雙膦酸鹽在體內(nèi)半衰期較短，較難達(dá)到對(duì)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)的濃度[23]。因此使用納米藥物載體技術(shù)，通過(guò)脂質(zhì)體負(fù)載雙膦酸鹽，將其遞送至腫瘤組織誘導(dǎo)M2型TAMs凋亡，可引起新生血管受損，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移，發(fā)揮較好的抗腫瘤效果[24]。TIAN等[25]合成了一種聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)修飾的可用于單光子斷層掃描成像(single-photon-emission computed tomography，SPECT)和腫瘤同位素放療(radioisotope therapy，RIT)的雙膦酸鈣納米顆粒(CaBP-PEG)。荷瘤小鼠尾靜脈給藥后，經(jīng)SPECT觀察發(fā)現(xiàn)CaBP(99mTc)-PEG納米粒在腫瘤部位高度富集。由于雙膦酸鹽對(duì)M2型TAMs的清除，能夠抑制腫瘤血管新生，使腫瘤血管正?；?，增強(qiáng)腫瘤組織滲透性，改善腫瘤乏氧微環(huán)境，進(jìn)一步改善CaBP(32P)-PEG納米粒的放療效果，顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)(圖2A)。

利用TAMs(類(lèi)似于M2型)高表達(dá)甘露糖受體的特點(diǎn)，在脂質(zhì)體、聚乳酸-羥基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA]納米粒等納米載體表面修飾甘露糖，提高對(duì)TAMs的特異性靶向。NIU等[26-28]在甘露糖化的PLGA納米粒表面修飾pH敏感的PEG，特異性提高M(jìn)2型TAMs對(duì)納米粒的攝取，高效遞送多柔比星至TAMs，清除TAMs，發(fā)揮抗腫瘤作用。其他的蛋白、多肽等也用于TAMs的靶向性修飾。如QIAN等[29]針對(duì)TAMs高表達(dá)清道夫受體(scavenger receptor B type 1，SR-B1)的特點(diǎn)，構(gòu)建由SR-B1靶向肽和M2巨噬細(xì)胞結(jié)合肽(M2-macrophages targeted peptide，M2pep)構(gòu)成的雙重靶向納米顆粒，負(fù)載CSF1R siRNA(M2NP-siCD115)，實(shí)現(xiàn)以M2型TAMs的CSF-1R為靶標(biāo)的免疫治療策略。該雙重靶向納米顆粒對(duì)M2型TAMs的親和力顯著高于脾臟、肝臟和肺中的巨噬細(xì)胞，可有效降低小鼠黑色素瘤M2型TAMs比例，抑制腫瘤生長(zhǎng)，延長(zhǎng)小鼠生存期。在特異性清除M2型TAMs的同時(shí)，該納米顆粒能有效抑制腫瘤微環(huán)境中免疫抑制因子IL-10和TGF-β產(chǎn)生，上調(diào)免疫刺激因子IL-12和IFN-γ表達(dá)，并增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞在腫瘤組織的浸潤(rùn)和激活，重塑腫瘤免疫微環(huán)境，為分子靶向腫瘤免疫治療提供一種潛在的臨床應(yīng)用策略[29](圖2B)。

WANG等[30]設(shè)計(jì)了一種血紅蛋白-聚(ε-己內(nèi)酯)[ hemoglobin-poly(epsilon-caprolactone)，Hb-PCL]共軛自組裝仿生納米紅細(xì)胞系統(tǒng)(nano-RBC)搭載化療藥物多柔比星[V(Hb)@DOX]。V(Hb)@DOX的Hb部分可以與內(nèi)源性血漿觸珠蛋白(haptoglobin，Hp)結(jié)合，并通過(guò)CD163表面受體特異性靶向并殺傷M2型TAMs。此外，Hb釋放的O2能緩解腫瘤乏氧。靶向消除TAMs和緩解乏氧協(xié)同改善腫瘤免疫抑制性微環(huán)境，同時(shí)下調(diào)腫瘤細(xì)胞程序性細(xì)胞死亡配體-1(programmed death ligand-1，PD-L1)表達(dá)，降低免疫抑制細(xì)胞因子IL-10和TGF-β水平，提高免疫刺激因子IFN-γ含量，增強(qiáng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic t lymphocyte，CTL)反應(yīng)，顯著抑制腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，并產(chǎn)生抗腫瘤免疫記憶反應(yīng)(圖2C)。

除了靶向遞送小分子藥物、多肽、siRNA外，使用納米藥物介導(dǎo)的光動(dòng)力學(xué)也能達(dá)到TAMs清除的目的。BEN-NUN等[31]開(kāi)發(fā)了小分子淬滅活性探針(quenched activity-based probes，qABPs)負(fù)載光敏劑(YBN14)，在光刺激下使TAMs受到氧化應(yīng)激而損傷，在乳腺癌小鼠模型中發(fā)揮良好的抗腫瘤活性。另外，有研究者將近紅外酞菁染料IRDye700偶聯(lián)至抗CD206抗體上(IRD-aCD206)，在對(duì)索拉非尼耐藥的4T1乳腺癌模型中顯示出良好的抗腫瘤活性和抑制肺轉(zhuǎn)移能力[32](圖2D)。

A.CaBP-PEG 納米粒靶向腫瘤組織，用于腫瘤 SPECT成像，且能清除TAMs，改善腫瘤微環(huán)境，增強(qiáng)放療效果[25]；B.M2NP-siCD115 靶向清除M2型TAMs，激活CD8+ T細(xì)胞，抑制腫瘤生長(zhǎng)[29]；C.V(Hb)@DOX殺傷M2型TAMs[30]；D.YBN14通過(guò)光動(dòng)力學(xué)清除TAMs[31](*P<0.05；***P<0.001)。

3 逆極化TAMs

TAMs主要表現(xiàn)為促腫瘤的M2型，將其逆極化成M1型將有助于恢復(fù)巨噬細(xì)胞防御功能，有效殺傷腫瘤細(xì)胞。在TAMs中引入促M(fèi)1型極化的細(xì)胞因子、小分子藥物等，或者阻斷TAMs中M2型極化的通路，都是將M2型TAMs逆極化成M1型TAMs的有效途徑。IFN-γ是導(dǎo)致M1型巨噬細(xì)胞極化的典型刺激物之一。將IFN-γ腹腔注射至患有卵巢癌的女性體內(nèi)，能夠避免系統(tǒng)性巨噬細(xì)胞激活，增強(qiáng)臨床免疫反應(yīng)[33]。其他臨床批準(zhǔn)的方法如對(duì)晚期胰腺癌患者使用激動(dòng)劑抗體CD40，或?qū)Χ嘈湍z質(zhì)母細(xì)胞瘤患者使用BLZ945(一種高選擇性CSF-1R小分子抑制劑)，都能夠引發(fā)TAMs逆極化，顯著延長(zhǎng)患者生存期[34-35]。除此之外，microRNA、siRNA，Toll樣受體(Toll-like receptors，TLRs)激動(dòng)劑，胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶(phosphatidylinositol kinase，PI3K)、布魯頓酪氨酸蛋白激酶(Bruton tyrosine kinase，BTK)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白6(signal transducer and activator of transcription 6，STAT6)通路抑制劑，富含組氨酸的糖蛋白(histidine-rich glycoprotein，HRG)，納米氧化鐵等都能夠誘導(dǎo)TAMs逆極化[36-37]。

為達(dá)到更好的逆極化效果，使用納米藥物靶向逆極化M2型TAMs已經(jīng)成為目前的研究熱點(diǎn)之一?？紤]到TAMs上甘露糖受體高表達(dá)，ORTEGA等[38]設(shè)計(jì)了一種甘露糖修飾的負(fù)載IκBα siRNA的聚合物納米粒，有效靶向M2型TAMs并激活NF-κB通路，實(shí)現(xiàn)TAMs逆極化，表現(xiàn)出良好的抗腫瘤效果。類(lèi)似的研究，HUANG等[39]設(shè)計(jì)了由pH敏感的PEG-組胺修飾的海藻酸鹽、陽(yáng)離子白芨多糖及TLR7配體miRNA let-7b構(gòu)成的聚合物納米粒(let-7b&vector)，尾靜脈注射至荷瘤小鼠體內(nèi)能夠?qū)崿F(xiàn)長(zhǎng)循環(huán)，避免被其他組織中的巨噬細(xì)胞吞噬。而在到達(dá)弱酸性腫瘤微環(huán)境后，pH敏感的PEG-組胺解聚，暴露出修飾的白芨多糖，與M2型TAMs上的甘露糖受體結(jié)合，能特異性靶向并逆極化M2型TAMs至具有抗腫瘤活性的M1型，減緩小鼠4T1腫瘤生長(zhǎng)(圖3A)。另外，HUANG等[40]還設(shè)計(jì)半乳糖化的陽(yáng)離子葡聚糖納米復(fù)合物，靶向M2型TAMs半乳糖型凝集素受體，將CpG、抗IL-10和抗IL-10R寡聚核苷酸傳遞至M2型TAMs，同樣也達(dá)到逆轉(zhuǎn)M2型TAMs極性、誘導(dǎo)TAMs抗腫瘤活性的目的。另外，GAO等[41]合成負(fù)載miR155的納米凝膠，在其表面包裹紅細(xì)胞膜并修飾M2pep，合成類(lèi)似于病毒的核酸納米凝膠，能夠靶向并重編程小鼠腦膠質(zhì)瘤M2型TAMs，重塑腫瘤免疫微環(huán)境，有效抑制腫瘤生長(zhǎng)。

細(xì)胞微顆粒(cellular microparticle，MPs)是細(xì)胞對(duì)各種內(nèi)源性或外源性刺激的反應(yīng)所釋放的囊泡，直徑為100～1000 nm。由于其具有細(xì)胞間信息交流能力，以及優(yōu)越的循環(huán)穩(wěn)定性、高生物相容性、低免疫原性和毒性而具有作為藥物傳遞系統(tǒng)的潛力[42-44]。筆者所在課題組利用甘露糖修飾的巨噬細(xì)胞來(lái)源微顆粒(Man-MPs)負(fù)載二甲雙胍(Met@Man-MPs)，有效地靶向M2型TAMs并將其逆極化為M1型。逆極化后的TAMs通過(guò)增加腫瘤組織中CD8+T細(xì)胞的招募，減少M(fèi)DSC和Treg的免疫抑制浸潤(rùn)，重塑腫瘤免疫微環(huán)境。更重要的是，Man-MPs的膠原降解能力有助于CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)到腫瘤內(nèi)部，且可增強(qiáng)PD-1抗體的腫瘤富集和滲透。Met@Man-MPs的這些特點(diǎn)顯著增強(qiáng)PD-1抗體治療效果，且形成長(zhǎng)期免疫記憶抑制腫瘤復(fù)發(fā)[45](圖3B)。

TLRs能夠誘導(dǎo)抗原呈遞細(xì)胞(antigen-presenting cells，APC)介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，但使用TLRs激活劑直接治療腫瘤會(huì)導(dǎo)致自身免疫疾病[46]。RODELL等[47]將TLR7/8激動(dòng)劑R848和β-環(huán)糊精共價(jià)交聯(lián)形成具有巨噬細(xì)胞高親和力和高載藥量的環(huán)糊精納米顆粒(CDNP-R848)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，CDNP-R848在不同腫瘤模型中均能夠?qū)崿F(xiàn)有效的M2型TAMs靶向遞送，改變TAMs表型，增強(qiáng)PD-1抗體的抗腫瘤效果，且能形成特異性腫瘤免疫記憶(圖3C)。KIM等[48]將TLR7/8激動(dòng)劑R848包裹在納米乳劑中，該載藥納米乳劑在凍干、復(fù)溶后依舊能夠維持良好的生化特性和藥物活性。通過(guò)和腫瘤抗原聯(lián)合原位給藥，該納米載體能夠引起固有免疫細(xì)胞的招募和激活，T細(xì)胞浸潤(rùn)，TAMs的逆極化，抑制原位腫瘤和再接種腫瘤的生長(zhǎng)，顯著延長(zhǎng)小鼠生存期，而且同樣有助于增強(qiáng)抗PD-1抗體和抗PD-L1抗體的免疫反應(yīng)。

另一個(gè)有意思的例子是納米氧化鐵。納米氧化鐵是一種超順磁性氧化鐵(ultrafine superparamagnetic iron oxide，USPIO)納米顆粒。ZANGANEH等[49]使用經(jīng)美國(guó)食品藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)用于治療缺鐵性貧血的ferumoxytol氧化鐵納米粒注射到小鼠體內(nèi)，有效抑制早期乳腺癌的生長(zhǎng)和肝轉(zhuǎn)移，還可用作肝臟、脾臟、淋巴等器官的磁共振成像增強(qiáng)劑[50](圖3D)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示了其作用機(jī)制：ferumoxytol作用于M2型TAMs，上調(diào)Th1免疫反應(yīng)相關(guān)的mRNA，使其向M1型逆極化。而逆極化后的M1型巨噬細(xì)胞能夠產(chǎn)生各種炎癥因子和活性氧，激活腫瘤細(xì)胞caspase-3活性，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡，發(fā)揮抑制腫瘤生長(zhǎng)和預(yù)防肝轉(zhuǎn)移的良好效果[50]。除ferumoxytol外，其他納米鐵劑也能發(fā)揮逆極化TAMs，殺傷腫瘤細(xì)胞的作用[51-53]。如LI等[54]使用負(fù)載透明質(zhì)酸修飾的超順磁性氧化鐵(hyaluronic acid-decorated superparamagnetic iron oxide nanoparticles，HIONs)的巨噬細(xì)胞作為載藥系統(tǒng)。發(fā)現(xiàn)其表現(xiàn)出更強(qiáng)的腫瘤靶向性、更高效的活性氧和抗腫瘤細(xì)胞因子的釋放能力，對(duì)腫瘤細(xì)胞展現(xiàn)出更強(qiáng)的殺傷能力，并通過(guò)類(lèi)似于旁分泌途徑誘導(dǎo)腫瘤中M2型TAMs逆極化，改善腫瘤免疫抑制性微環(huán)境，發(fā)揮良好的腫瘤抑制效果(圖3E)。

let-7b&vector(A)[39]、Met@Man-MPs(B)[45]、CDNP-R848(C)[47]、ferumoxytol 氧化鐵納米粒(D)[49]、負(fù)載HIONs的巨噬細(xì)胞(E)[54]和Dic@M2pep-Fe-MOF(F)[57]誘導(dǎo) M2 型 TAMs 逆極化至 M1 型，改善腫瘤免疫抑制性微環(huán)境，抑制腫瘤生長(zhǎng)。

除此之外，針對(duì)M2型TAMs鐵外排能力強(qiáng)導(dǎo)致鐵納米載藥系統(tǒng)逆極化M2型TAMs受限而影響抑瘤效果的問(wèn)題[55-56]，筆者所在課題組設(shè)計(jì)M2靶向肽修飾的鐵基金屬有機(jī)框架材料負(fù)載鐵外排抑制劑雙氯芬酸鈉(Dic@M2pep-Fe-MOF)用于腫瘤的免疫治療[57]。Dic@M2pep-Fe-MOF可有效靶向M2型TAMs，上調(diào)鐵調(diào)素hepcidin，抑制轉(zhuǎn)鐵蛋白ferroportin表達(dá)，增加胞內(nèi)鐵滯留，抑制鐵外排，促進(jìn)M2型TAMs逆極化成M1型，激活CD8+T細(xì)胞抗腫瘤免疫反應(yīng)，顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，延長(zhǎng)小鼠生存期；且形成長(zhǎng)期抗腫瘤免疫記憶，抑制腫瘤復(fù)發(fā)(圖3F)。

4 增強(qiáng)TAMs吞噬能力

巨噬細(xì)胞可吞噬腫瘤細(xì)胞，一方面直接清除腫瘤細(xì)胞，另一方面將捕獲的腫瘤細(xì)胞抗原進(jìn)行加工，呈遞給T細(xì)胞，啟動(dòng)抗腫瘤免疫反應(yīng)[58]。然而腫瘤細(xì)胞過(guò)表達(dá)CD47，與巨噬細(xì)胞上的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(signal regulatory protein α，SIRPα)結(jié)合，傳遞“別吃我”的信號(hào)，避免被巨噬細(xì)胞吞噬，實(shí)現(xiàn)免疫逃逸[59]。因此靶向阻斷CD47-SIRPα信號(hào)有利于恢復(fù)巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別和吞噬，誘發(fā)抗腫瘤免疫反應(yīng)。NIE等[60]將pH敏感鍵修飾至CD47抗體和SIRPα抗體上，再通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)將抗體與M1型巨噬細(xì)胞來(lái)源外泌體結(jié)合(M1 Exo-Ab)，其在腫瘤弱酸性條件下，釋放CD47抗體和SIRPα抗體阻斷CD47-SIRPα信號(hào)通路，同時(shí)M1 Exo促進(jìn)TAMs逆極化成M1型，增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬和清除(圖4A)。類(lèi)似地，CHEN等[61]構(gòu)建ROS敏感的負(fù)載PD-1抗體和CD47抗體白蛋白納米粒(aPD1@aCD47 complex)，在腫瘤組織ROS刺激下，釋放PD-1抗體以激活T細(xì)胞，釋放CD47抗體促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬和抗原提呈，啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫反應(yīng)，有效抑制小鼠B16-F10腫瘤的生長(zhǎng)(圖4B)。ZHANG等[62]合成同時(shí)負(fù)載CD47抗體和促細(xì)胞吞噬的鈣網(wǎng)蛋白(calreticulin，CALR)的納米材料(SNPACALR&aCD47)，在抑制CD47-SIRPα“別吃我”信號(hào)通路的同時(shí)，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(low-density lipoprotein receptor-related protein 1，LRP-1)和CALR結(jié)合后傳遞的“吃我”信號(hào)，提高巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤的吞噬能力(圖4C)。

M1 Exo-Ab(A)[60]、aPD1@aCD47 complex(B)[61]、SNPACALR&aCD47(C)[62]阻斷腫瘤細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的 CD47-SIRPα 信號(hào)通路，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤的吞噬，提高抗腫瘤效果。

M1 Exo-Ab (A)[60]，aPD1@aCD47 complex (B)[61]and SNPACALR&aCD47 (C)[62]disrupt CD47-SIRPα signaling pathway between tumor cells and TAMs，improve macrophage-mediated phagocytosis of tumor and antitumor effects.

Fig.4 Nanomedicines enhance macrophage phagocytosis of TAMs by targeted blocking of CD47-SIRPα signaling pathway

5 TAMs作為納米藥物的載體和藥物“倉(cāng)庫(kù)”

作為體內(nèi)重要的固有免疫細(xì)胞，巨噬細(xì)胞能夠識(shí)別炎性病變部位，是理想的靶向傳遞抗腫瘤藥物的天然載體[63]。AN等[64]使用硫醇化PEG(HS-PEG)修飾金納米粒(Au nanoparticles，AuNPs)，再將AuNPs負(fù)載至RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞中(anionic-AuNRs@RAW)。該巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的納米載藥系統(tǒng)可穿透腫瘤組織，進(jìn)入核心乏氧區(qū)域，提供高質(zhì)量的腫瘤光聲成像，增強(qiáng)腫瘤光熱治療(圖5A)。CAO等[65]在巨噬細(xì)胞表面修飾豆莢蛋白敏感的蜂毒肽legM和細(xì)胞毒性藥物DM4，制備基于巨噬細(xì)胞的給藥系統(tǒng)(legM-DM4-macrophage based delivery system，LD-MDS)。LD-MDS利用轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞高表達(dá)豆莢蛋白和巨噬細(xì)胞對(duì)轉(zhuǎn)移腫瘤的靶向性，高效靶向至肺部腫瘤轉(zhuǎn)移病灶，在豆莢蛋白作用下巨噬細(xì)胞形成負(fù)載DM4的類(lèi)似于外泌體的納米微囊泡(DM4-loaded exosome-like nanovesicles，DENs)，有效將藥物遞送至微小轉(zhuǎn)移灶，實(shí)現(xiàn)在腫瘤肺轉(zhuǎn)移病灶智能定點(diǎn)釋藥，抑制乳腺癌肺轉(zhuǎn)移(圖5B)。

另外，由于巨噬細(xì)胞極強(qiáng)的吞噬能力，納米材料在TAMs的富集遠(yuǎn)高于腫瘤細(xì)胞。MILLER等[66]制備了裝載熒光分子和四價(jià)Pt前藥的PLGA-PEG高分子納米粒。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該納米粒被TAMs大量攝取，導(dǎo)致納米藥物在腫瘤組織高度富集。同時(shí)，TAMs吞噬納米載體后，能夠再將其傳遞至周?chē)哪[瘤細(xì)胞，提高納米藥物在腫瘤部位的蓄積和深部穿透(圖5C)。ZHAO等[67]的研究結(jié)果表明，經(jīng)化療藥物治療后，腫瘤部位TAMs浸潤(rùn)增加。TAMs的增加引起石墨烯納米粒在腫瘤部位的蓄積量增加，增強(qiáng)了基于石墨烯納米粒的光動(dòng)力學(xué)治療效果，有效抑制腫瘤生長(zhǎng)。

A.Anionic-AuNRs@RAW 有效靶向至腫瘤組織乏氧區(qū)域，用于腫瘤光聲成像和光熱治療[64]；B.LD-MDS 可有效靶向至腫瘤肺部轉(zhuǎn)移病灶，并形成DENs，抑制腫瘤肺轉(zhuǎn)移[65]；C.TAMs作為載有 Pt 前藥 PLGA-PEG 高分子納米粒的“倉(cāng)庫(kù)”，向臨近腫瘤細(xì)胞持續(xù)釋放藥物[66]。

6 問(wèn)題與展望

采用納米藥物靶向TAMs的腫瘤免疫治療策略，吸引了科研人員的廣泛關(guān)注，得到迅猛而深入的研究和發(fā)展，是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)之一[13，68]。盡管靶向TAMs取得了一定的研究進(jìn)展，但是仍然存在許多問(wèn)題和挑戰(zhàn)。靶向TAMs主要利用的是巨噬細(xì)胞強(qiáng)吞噬能力介導(dǎo)的被動(dòng)靶向和配體-受體相互作用介導(dǎo)的主動(dòng)靶向。被動(dòng)靶向會(huì)引起其他組織中的巨噬細(xì)胞非特異性吞噬納米藥物，導(dǎo)致毒副作用[69]。而主動(dòng)靶向主要依賴(lài)于TAMs高表達(dá)的一些特異性受體。但事實(shí)上，這些所謂的“特異性”受體并非只在巨噬細(xì)胞表達(dá)，例如DCs上也表達(dá)甘露糖受體[39]，腫瘤細(xì)胞上也有葉酸受體表達(dá)[16]。而且，TAMs并不是單純的M1或者M(jìn)2型，會(huì)表現(xiàn)出復(fù)雜的功能和基因表達(dá)[70]。因此，實(shí)現(xiàn)TAMs的特異性靶向和調(diào)控，仍然是一個(gè)艱巨的挑戰(zhàn)。

納米藥物通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞招募、殺傷TAMs、逆極化TAMs等途徑發(fā)揮抗腫瘤效果，但是其作用速度相對(duì)遲緩，作用效果相對(duì)有限[4]。因此，將TAMs納米靶向治療和其他的治療手段如免疫抑制劑、熱療、放療和化療等相結(jié)合，協(xié)同作用下將會(huì)取得更加顯著的效果，將會(huì)具有更加廣闊的應(yīng)用前景。