丁勻喬，楊波*，彭海生，蔣蕾，張文遠(yuǎn)

(1.哈爾濱商業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150028；2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)大慶校區(qū)，黑龍江 大慶 163319)

失眠(insomnia)是一種神經(jīng)性的睡眠障礙類(lèi)疾病，也是一種心理疾病[1]。中醫(yī)上通常將失眠稱(chēng)為“不寐”，臨床表現(xiàn)主要是難以入睡、醒后不易入睡、睡時(shí)易醒、徹夜難寐、多夢(mèng)等[2]。長(zhǎng)期失眠會(huì)造成精神不振、食欲減退、記憶力下降等，對(duì)人們的工作生活具有嚴(yán)重影響。若不及時(shí)治愈，會(huì)誘發(fā)焦慮不安、抑郁、恐懼急躁等精神紊亂等癥狀，對(duì)胃腸道、神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、認(rèn)知功能也具有嚴(yán)重影響，且會(huì)增加心血管類(lèi)疾病及神經(jīng)性疾病的發(fā)病率[3]。西醫(yī)在治療失眠上常用苯二氮卓類(lèi)、巴比妥類(lèi)等鎮(zhèn)靜催眠藥，雖有明顯療效，但長(zhǎng)期服用會(huì)產(chǎn)生耐受性、依賴(lài)性、停藥反跳等不良反應(yīng)[4]。中藥主要是以清熱去火、養(yǎng)心安神、滋陰補(bǔ)陽(yáng)來(lái)治療失眠且無(wú)不良反應(yīng)、安全有效，故以中藥治療失眠成為一大趨勢(shì)。

失眠的發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，至今尚未有明確闡述。酸棗仁為鼠李科植物酸棗[ZiziphusjujubaMill.var.spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou]的干燥成熟種子。甘、酸，平，歸肝、膽、心經(jīng)?？芍委熓呓箲]，達(dá)到養(yǎng)心安神、保護(hù)心臟的作用，酸棗仁中的總皂苷可抑制中樞神經(jīng)興奮，起到明顯鎮(zhèn)靜催眠的作用[5]。當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸[Angelicasinensis(Oliv.)Diels]的干燥根。甘、辛，溫。歸肝、心、脾經(jīng)。當(dāng)歸中的揮發(fā)油、有機(jī)酸、黃酮類(lèi)等具有抗炎平喘、抗抑郁、強(qiáng)腎保肝、補(bǔ)氣血等功效[6]。二者聯(lián)用可起到補(bǔ)氣養(yǎng)血、養(yǎng)心安神等作用。由于中藥成分多、作用靶點(diǎn)多，傳統(tǒng)的藥理學(xué)方法難以闡明中藥治療疾病的復(fù)雜機(jī)理[7]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)作為一種近年來(lái)興起的新技術(shù)，通過(guò)其大量的數(shù)據(jù)分析及多種數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，可更為整體的探究藥物與疾病之間的關(guān)系，預(yù)測(cè)其作用機(jī)制[8]，且符合中醫(yī)理論，通過(guò)建立藥物、靶點(diǎn)、途徑和疾病的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)來(lái)揭示藥物的治療機(jī)理。因此，許多研究人員利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)來(lái)探索中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)，預(yù)測(cè)中藥的作用機(jī)理，同時(shí)運(yùn)用分子對(duì)接模擬分子和蛋白質(zhì)之間的幾何結(jié)構(gòu)和相互作用來(lái)探索分子在目標(biāo)蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)的行為[9]，大大節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

有相關(guān)學(xué)者通過(guò)大量數(shù)據(jù)挖掘并分析總結(jié)發(fā)現(xiàn)，酸棗仁、當(dāng)歸單味用藥頻次較高，而“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)使用頻次也較高，且具有良好的支持度與置信度[10]。目前尚無(wú)文章僅對(duì)“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)進(jìn)行研究，故本文通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接技術(shù)，構(gòu)建成分-靶點(diǎn)及PPI網(wǎng)絡(luò)圖，對(duì)其潛在靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測(cè)并深入探討該藥對(duì)治療失眠的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 “酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)活性成分及靶點(diǎn)的收集 在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)TCMSP(https://tcmspw.com/)中分別以“酸棗仁”“當(dāng)歸”為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索。以口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%且類(lèi)藥性(drug-likeness,DL)≥0.18為篩選條件進(jìn)行篩選并匯總，得到藥對(duì)的有效活性成分及相應(yīng)靶點(diǎn)。在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.uniprot.org/)中，選定已檢索的物種為人類(lèi)(Human)的基因下載，將有效活性成分的靶點(diǎn)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的基因名。

1.2 失眠靶點(diǎn)的篩選 通過(guò)GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org/)，以“Insomnia”為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，以Relevance score≥0.98為篩選條件，得到與失眠相關(guān)的疾病靶點(diǎn)。

1.3 “酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 建立Excel表格對(duì)中藥、活性成分及靶點(diǎn)進(jìn)行自命名，導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件，構(gòu)建“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，并對(duì)其進(jìn)行分析。

1.4 靶點(diǎn)蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 將最終得到的“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)靶點(diǎn)與失眠靶點(diǎn)導(dǎo)入韋恩圖繪制軟件Draw Venn Diagiam(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/)生成韋恩圖，得到“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)與疾病的交集靶點(diǎn)。將交集靶點(diǎn)上傳至String數(shù)據(jù)庫(kù)(https://string-db.org/)，設(shè)定條件為“Homo sapiens”，參數(shù)設(shè)定為>0.4，得到蛋白質(zhì)互作(PPI)網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 GO功能富集與KEGG通路分析 利用R studio 1.4.1106軟件對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體(gene ontology,GO)富集分析和京都基因與基因組百科全書(shū)(Kyoto Encyclopedia of Genes and Gnomes,KEGG)功能富集分析?；虮倔w富集分析包括生物過(guò)程(biological process,BP)、分子功能(cellular component,CC)、細(xì)胞組成(molecular functinn,MF)。以P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。取富集數(shù)量排名前十的生物學(xué)過(guò)程及二十條通路進(jìn)行繪圖。并結(jié)合國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)篩選與失眠相關(guān)的通路進(jìn)行分析。

1.6 分子對(duì)接 選取PPI網(wǎng)絡(luò)圖中degree值排名前五的靶點(diǎn)，通過(guò)RCSB PDB(http://www.rcsb.org/)數(shù)據(jù)庫(kù)下載對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)蛋白，保存為PDB格式。在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中下載“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)活性成分的結(jié)構(gòu)，保存為mol2格式。通過(guò)Autodock軟件對(duì)靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行去除水分子并加氫處理，將受體與配體進(jìn)行分子對(duì)接，記錄對(duì)接的分?jǐn)?shù)進(jìn)行評(píng)估，一般認(rèn)為得分>4.25為有一定的結(jié)合活性，得分>5為結(jié)合活性較強(qiáng)，≥7為結(jié)合能力極強(qiáng)[11]。在PyMOL軟件中對(duì)得分最高的成分靶點(diǎn)對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化。

2 結(jié)果

2.1 “酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)活性成分及靶點(diǎn)的篩選結(jié)果 通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選得到酸棗仁、當(dāng)歸中的活性成分共158個(gè)，其中酸棗仁33個(gè)，當(dāng)歸125個(gè)，經(jīng)過(guò)OB≥30%且DL≥0.18為條件篩選后，得到活性成分11個(gè)，其中酸棗仁9個(gè)，當(dāng)歸2個(gè)，無(wú)相同成分。靶點(diǎn)共88個(gè)，其中酸棗仁40個(gè)，當(dāng)歸48個(gè)，刪除重復(fù)靶點(diǎn)，最終“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)活性成分的靶點(diǎn)共50個(gè)。11個(gè)活性成分基本信息見(jiàn)表1。

表1 “酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)活性成分基本信息

2.2 失眠相關(guān)靶點(diǎn)的收集 通過(guò)檢索GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取失眠相關(guān)靶點(diǎn)共2 563個(gè)，經(jīng)過(guò)Relevance score≥0.98為條件篩選后得到相關(guān)靶點(diǎn)1 348個(gè)。

2.3 “酸棗仁-當(dāng)歸”-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖 將TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)中篩選得到的2味中藥、9個(gè)活性成分與50個(gè)相應(yīng)靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件繪圖，得到藥對(duì)-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，其中2個(gè)成分未參與繪制(見(jiàn)圖1)。圖中可見(jiàn)節(jié)點(diǎn)共61個(gè)，邊線(xiàn)共97條。其中黃色代表中藥名稱(chēng)，粉色代表酸棗仁活性成分，紫色代表當(dāng)歸活性成分，藍(lán)色代表靶點(diǎn)基因。連接度超過(guò)10的有4個(gè)活性成分，β-谷甾醇連接度最高，能與34個(gè)靶點(diǎn)相互作用，其次為烏藥堿，與21個(gè)靶點(diǎn)相互作用，豆甾醇與14個(gè)靶點(diǎn)相互作用，齊墩果堿與11個(gè)靶點(diǎn)相互作用。β-谷甾醇、豆甾醇來(lái)源于當(dāng)歸，烏藥堿、齊墩果堿來(lái)源于酸棗仁。

圖1 “酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)-活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

2.4 靶點(diǎn)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建與篩選 將“2.1”項(xiàng)下得到的50個(gè)活性成分靶點(diǎn)與“2.2”項(xiàng)下得到的1 348個(gè)疾病靶點(diǎn)導(dǎo)入韋恩圖繪制軟件Draw Venn Diagiam，得到韋恩圖(見(jiàn)圖2)。從圖中可得交集靶點(diǎn)20個(gè)。將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中生成PPI網(wǎng)絡(luò)圖(見(jiàn)圖3)。圖中可得交集靶點(diǎn)蛋白節(jié)點(diǎn)20個(gè)，相互作用邊線(xiàn)76條，平均節(jié)點(diǎn)度為7.6，PPI富集P值為1.0×10-16,其中degree≥10的節(jié)點(diǎn)有6個(gè)，分別為乙酰膽堿酯酶(ACHE)、鈉依賴(lài)性血清素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SLC6A4)、胺氧化酶[含黃素]A(MAOA)、鈉依賴(lài)性多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(SLC6A3)、α-2A腎上腺素能受體(ADRA2A)、胺氧化酶[含黃素]B(MAOB)?？烧J(rèn)為這6個(gè)靶點(diǎn)蛋白在PPI中互作明顯，為酸棗仁-當(dāng)歸藥對(duì)治療失眠的核心靶點(diǎn)。

圖2 “酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)靶點(diǎn)與失眠相關(guān)靶點(diǎn)韋恩圖

圖3 潛在靶點(diǎn)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 GO功能富集與KEGG通路分析 通過(guò)R Studio軟件對(duì)20個(gè)交集靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行GO功能富集和KEGG通路分析。得到GO條目503個(gè)(P<0.05)，其中生物過(guò)程(BP)396個(gè)，分子功能(CC)54個(gè)，細(xì)胞組成(MF)53個(gè)。分別選取富集基因數(shù)排名前十的條目繪圖(見(jiàn)圖4)。得到KEGG通路共33條(P<0.05)，根據(jù)富集基因數(shù)大小，選取前20條通路繪制氣泡圖(見(jiàn)圖5)，圖中圓點(diǎn)代表富集靶點(diǎn)數(shù)量，顏色越紅，P值越小，可信度高。

圖4 GO功能富集柱狀圖

圖5 前20條KEGG通路氣泡圖

經(jīng)分析得，GO富集中生物過(guò)程主要包括G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路、腺苷酸環(huán)化酶激活腎上腺素能受體信號(hào)通路、腎上腺素能受體信號(hào)通路等；分子功能主要包括突觸前膜、突觸后膜、膜茷等；細(xì)胞組成主要包括G蛋白偶聯(lián)胺受體活性、兒茶酚胺結(jié)合、神經(jīng)遞質(zhì)受體的活動(dòng)等。KEGG通路分析與文獻(xiàn)調(diào)查得，涉及失眠的重要通路有神經(jīng)活性配體受體相互作用、5-羥色胺能突觸、多巴胺能突觸、膽堿能突觸、cAMP信號(hào)通路等。

2.6 分子對(duì)接結(jié)果分析 通過(guò)Autodock軟件將酸棗當(dāng)歸藥對(duì)的活性成分丁子香萜、β-谷甾醇、豆甾醇、美洲茶酸、烏藥堿、胡蘿卜甾醇、酸棗仁皂苷、植物甾醇、酸棗仁環(huán)肽、獐牙菜素、齊墩果堿與PPI網(wǎng)絡(luò)圖中得到的核心靶點(diǎn)SLC6A3、ADRA2A、ACHE、SLC6A4、MAOA、MAOB進(jìn)行分子對(duì)接(對(duì)接結(jié)果評(píng)分表見(jiàn)2)。發(fā)現(xiàn)丁子香萜、烏藥堿、酸棗仁皂苷、β-谷甾醇、豆甾醇、胡蘿卜甾醇與6個(gè)核心靶點(diǎn)結(jié)合能力強(qiáng)。其中丁子香萜-MAOB、烏藥堿-SLC6A4的結(jié)合能均<-9 kJ·mol-1。丁子香萜-MAOB結(jié)合能力最強(qiáng)，通過(guò)PyMOL軟件對(duì)其對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化(見(jiàn)圖6)。

表2 分子對(duì)接評(píng)分結(jié)果

圖6 丁子香萜與MAOB對(duì)接結(jié)果圖

3 討論

失眠在人群中極為普遍，在過(guò)去的幾年中，通過(guò)替代療法改善患者的生理精神狀態(tài)，提高患者的睡眠質(zhì)量的方法愈發(fā)流行。通過(guò)對(duì)中藥主要成分進(jìn)行分析，研究其藥理作用的方法越來(lái)越受到研究者的關(guān)注。將酸棗作為良藥用于治療失眠在中國(guó)已有兩千余年的歷史，酸棗仁作為中國(guó)傳統(tǒng)中藥之一，已鑒定出150多種化合物，包括萜類(lèi)化合物，生物堿，類(lèi)黃酮等，具有多種藥理作用如鎮(zhèn)靜、催眠、抗炎和抗氧化等。水迷宮和跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)表明，酸棗仁還具有改善失眠大鼠學(xué)習(xí)和記憶能力的作用[12]。當(dāng)歸是一種傳統(tǒng)的藥用和食用植物，長(zhǎng)期以來(lái)被用于補(bǔ)血、減輕疼痛、潤(rùn)滑腸道并治療女性月經(jīng)不調(diào)和閉經(jīng)。近年來(lái)有文獻(xiàn)表明其在治療失眠方面也有一定的作用[13]?！八釛椚?當(dāng)歸”藥對(duì)有著非常有效的鎮(zhèn)靜催眠作用，但治療失眠的具體機(jī)制尚不清楚，這限制了該藥進(jìn)一步的臨床應(yīng)用，本文通過(guò)借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選潛在靶點(diǎn)，并通過(guò)分子對(duì)接的方法對(duì)可能的機(jī)制進(jìn)行初步探討。

在本研究中，通過(guò)研究網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)進(jìn)行靶標(biāo)預(yù)測(cè)，建立PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，GO和KEGG富集分析和分子對(duì)接驗(yàn)證，討論了“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)治療失眠的可能機(jī)制。在篩選的“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)的有效成分中，植物甾醇具有神經(jīng)調(diào)節(jié)作用，能夠抑制乙酰膽堿酯酶活性[14]，β-谷甾醇已證明具有鎮(zhèn)靜、強(qiáng)心的作用，可以維持神經(jīng)傳導(dǎo)、鎮(zhèn)靜神經(jīng)，平復(fù)情緒，改善睡眠不實(shí)。有資料表明[15]，酸棗仁中的總皂苷可明顯阻斷小鼠中樞神經(jīng)興奮，促使小鼠睡眠及提高其睡眠質(zhì)量，并對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)、受體、失眠參數(shù)等也都具有調(diào)節(jié)作用，通過(guò)改善睡眠同時(shí)也達(dá)到抗抑郁、焦慮等作用，是酸棗仁產(chǎn)生鎮(zhèn)靜催眠作用最主要的成分[16]。張妍等[17]通過(guò)搖籃試驗(yàn)比較了酸棗仁皂苷和地西泮的鎮(zhèn)靜作用，指出酸棗仁皂苷的鎮(zhèn)靜作用比地西泮更穩(wěn)定，更持久。Zhang等[18]研究得到酸棗仁皂苷對(duì)谷氨酸介導(dǎo)的海馬興奮性信號(hào)通路具有抑制作用，并且可能通過(guò)其抗鈣調(diào)蛋白發(fā)揮作用。生物堿類(lèi)不僅有鎮(zhèn)靜催眠的作用，還可通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能、影響炎癥細(xì)胞因子和單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)起到抗抑郁作用[19]。但烏藥堿、齊墩果堿相關(guān)研究較少，尚不能說(shuō)明具有鎮(zhèn)靜催眠作用，有待進(jìn)一步探索。

在失眠疾病靶點(diǎn)與活性成分靶點(diǎn)相交的韋恩圖中，我們得到了20個(gè)交集靶點(diǎn)，通過(guò)PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)我們得到了與失眠相關(guān)聯(lián)了6個(gè)核心靶標(biāo)，分別為乙酰膽堿酯酶(ACHE)、鈉依賴(lài)性血清素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SLC6A4)、胺氧化酶[含黃素]A(MAOA)、鈉依賴(lài)性多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(SLC6A3)、α-2A腎上腺素能受體(ADRA2A)、胺氧化酶[含黃素]B(MAOB)，這其中的大多數(shù)靶標(biāo)與鎮(zhèn)靜催眠關(guān)系密切。其中，ACHE是一種絲氨酸蛋白酶，可將神經(jīng)遞質(zhì)、乙酰膽堿水解為乙酸鹽和膽堿，從而終止神經(jīng)傳遞。Leung等[20]指出海馬體中乙酰膽堿酯酶的喪失，證實(shí)了中隔的病變，表明海馬中膽堿能傳入物質(zhì)的消耗在誘導(dǎo)和出現(xiàn)過(guò)程中均增加了對(duì)揮發(fā)性和可注射全身麻醉劑的催眠，固定和鎮(zhèn)痛作用。SLC6A4為血清素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，通過(guò)調(diào)節(jié)血清素能信號(hào)影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，通常負(fù)責(zé)5-羥色胺(5-HT)再攝取，5-HT信號(hào)傳導(dǎo)中斷就會(huì)導(dǎo)致抑郁癥，Lam等[21]認(rèn)為SLC6A4的DNA甲基化與晚期抑郁癥之間的基因型相關(guān)聯(lián)。目前有很多抗抑郁藥具有鎮(zhèn)靜安定作用，如氟西汀、舍曲林。因此我們推斷SLC6A4可能具有鎮(zhèn)靜作用從而治療失眠。ADRA2A屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族成員，介導(dǎo)低血壓、鎮(zhèn)靜催眠、麻醉等多種生理效應(yīng)[22]，ADRA2A的基因多態(tài)性可以通過(guò)促進(jìn)miR-34a與ADRA2A的結(jié)合從而影響患者的睡眠質(zhì)量[23]。

KEGG富集結(jié)果表明，“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)治療失眠可能與神經(jīng)活性配體-受體相互作用，鈣信號(hào)通路，5-HT能通路，多巴胺能突觸，心肌細(xì)胞的腎上腺素能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，膽堿能突觸等通路有關(guān)。據(jù)調(diào)查[24]，神經(jīng)活性配體-受體相互作用為首選治療通路，促進(jìn)覺(jué)醒/抑制睡眠的物質(zhì)(如：兒茶酚胺)和促進(jìn)睡眠/抑制覺(jué)醒的物質(zhì)(如：5-HT、褪黑素)等皆由此通路發(fā)揮作用；研究表明，下丘腦中5-HT和多巴胺為調(diào)節(jié)睡眠-覺(jué)醒的重要神經(jīng)遞質(zhì)[25]，5-HT又名血清素，腦內(nèi)5-HT水平的降低，不僅會(huì)導(dǎo)致失眠、焦慮、抑郁等疾病，還會(huì)影響其他神經(jīng)遞質(zhì)活動(dòng)。GO富集結(jié)果表明，調(diào)節(jié)突觸后膜電位的神經(jīng)遞質(zhì)受體活性、腎上腺素能受體結(jié)合、突觸膜的整體成分、G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路起到了重要的作用。綜上，我們得出了“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)治療失眠的可能機(jī)制。我們推測(cè)，“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)可能通過(guò)MAOB、ACHE、SLC6A4、ADRA2A等靶標(biāo)通過(guò)調(diào)控G蛋白偶聯(lián)受體、膽堿能突觸、多巴胺能突觸、鈣信號(hào)通路，5-HT能信號(hào)通路來(lái)起到多信號(hào)通路共同影響其治療失眠的作用，多信號(hào)通路和多靶標(biāo)的共同作用體現(xiàn)了中藥治療疾病過(guò)程中作用復(fù)雜，綜合調(diào)理的特點(diǎn)。

本文旨在通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接等方法進(jìn)行靶標(biāo)預(yù)測(cè)和初步探討“酸棗仁-當(dāng)歸”藥對(duì)治療失眠的幾種潛在機(jī)制，體現(xiàn)了中藥通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多途徑治療疾病的特點(diǎn)，并未對(duì)具體的信號(hào)通路進(jìn)行進(jìn)一步深入的探索，通路的具體調(diào)控過(guò)程有待實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步驗(yàn)證。